動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體(2)

1、關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體 (2)第一張，PPT共二十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物體細(xì)胞雜交第二張，PPT共二十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月問(wèn)題：什么是動(dòng)物細(xì)胞融合？它相當(dāng)于植物體細(xì)胞雜交過(guò)程的哪一步？它們的過(guò)程、基本原理、誘導(dǎo)融合方法和意義是否相同？ （一）動(dòng)物細(xì)胞融合第三張，PPT共二十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月1、什么是抗體？單克隆抗體的制備回顧2、抗體的分布？抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。主要分布在血清中。第四張，PPT共二十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第五張，PPT共二十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月抗

2、體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法該法制備抗體的特點(diǎn)： 產(chǎn)量低、純度低，且抗體的特異性差、靈敏度低。第六張，PPT共二十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第七張，PPT共二十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 人們發(fā)現(xiàn)，在動(dòng)物發(fā)生免疫反應(yīng)的過(guò)程中，體內(nèi)的B細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬(wàn)種以上的特異性抗體，但是每個(gè)B細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須用單個(gè)B細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖，即克隆。單克隆抗體的概念什么是克??？“克隆”從英文“clone”音譯而來(lái)，是指從一個(gè)共同祖先，通過(guò)無(wú)性繁殖的方法產(chǎn)生出來(lái)的一群遺傳特性相同的DNA分子，細(xì)胞或個(gè)體。第八張，PPT共二十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月實(shí)驗(yàn)?zāi)康?制備單克隆

3、抗體.實(shí)驗(yàn)原理：實(shí)驗(yàn)過(guò)程：1975年英國(guó)科學(xué)家米爾斯坦和柯勒的實(shí)驗(yàn)第九張，PPT共二十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月單克隆抗體的制備 請(qǐng)用箭頭把以下代表單克隆抗體制備過(guò)程步驟的圖解的字母按正確順序連接起來(lái)。順序是？ 第十張，PPT共二十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第十一張，PPT共二十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月單克隆抗體的突出優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高、純度高、產(chǎn)量大容易標(biāo)化生產(chǎn) 克隆單個(gè)雜交瘤細(xì)胞，可制備抗一種抗原決定簇的特異單克隆抗體。 原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞增殖第十二張，PPT共二十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月單克隆抗體的應(yīng)用診斷試劑最廣泛應(yīng)用準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速第十三張，PPT共二十八頁(yè)，

4、創(chuàng)作于2022年6月運(yùn)載藥物 (“生物導(dǎo)彈” 單抗導(dǎo)向，藥物為彈頭)治療疾病第十四張，PPT共二十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性膜的流動(dòng)性、細(xì)胞增殖酶解法去壁小鼠免疫處理、細(xì)胞分散物理法化學(xué)法物理、化學(xué)、生物法原生質(zhì)體的制備融合親本細(xì)胞的準(zhǔn)備原生質(zhì)體的融合與篩選動(dòng)物細(xì)胞融合與兩次篩選雜種細(xì)胞的形成與培養(yǎng)產(chǎn)特定抗體的雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)雜種植株的鑒定單克隆抗體的分離提純單抗有助于疾病的診斷、治療、預(yù)防 獲得具優(yōu)良性狀的雜種植株第十五張，PPT共二十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月1、單克隆抗體制備過(guò)程中使用的骨髓瘤細(xì)胞是一種缺陷型細(xì)胞，在含有次黃嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶的培養(yǎng)基（HA

5、T）中無(wú)法生長(zhǎng)；而小鼠脾細(xì)胞是正常細(xì)胞，在HAT培養(yǎng)基上可正常存活。用聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合后，經(jīng)過(guò)數(shù)代培養(yǎng)，最終可在HAT培養(yǎng)基上存活并能產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞是 （ ）A骨髓瘤細(xì)胞之間形成的融合細(xì)胞 B脾細(xì)胞之間形成的融合細(xì)胞C骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞之間形成的融合細(xì)胞 D脾細(xì)胞第十六張，PPT共二十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2研究單克隆抗體治療癌癥的思路是（ ）A利用單克隆抗體特異性地對(duì)抗癌細(xì)胞B以單克隆抗體作抗癌藥物殺死癌細(xì)胞C抗癌物質(zhì)在克隆細(xì)胞中大量合成D單克隆抗體攜帶抗癌藥物特異性地與癌細(xì)胞結(jié)合3科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融

6、合的是 （ ）A經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞 B不經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞C經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞 D不經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞第十七張，PPT共二十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月5.實(shí)際操作中如何經(jīng)過(guò)兩次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞？ 第十八張，PPT共二十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月有限稀釋法稀釋多次稀釋將培養(yǎng)皿孔內(nèi)的上清液取出，檢測(cè)抗體。常用的方法有：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和免疫熒光測(cè)定。第十九張，PPT共二十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月單克隆抗體與多克隆抗體第二十張，PPT共二十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月提示1：對(duì)一種效應(yīng)B細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)可行嗎？提示2：我們所學(xué)的哪種細(xì)胞是可以無(wú)限增殖的？問(wèn)題：如何大量生產(chǎn)

7、單克隆抗體？單克隆抗體的制備第二十一張，PPT共二十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月注射抗原效應(yīng)B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合多種雜交細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基 篩選1抗原-抗體雜交法克隆化單克隆抗體 篩選21.注射抗原的目的是什么？第二十二張，PPT共二十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月注射抗原效應(yīng)B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合多種雜交細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基 篩選1抗原-抗體雜交法克隆化單克隆抗體 篩選22.誘導(dǎo)細(xì)胞融合的手段有哪些？第二十三張，PPT共二十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月注射抗原效應(yīng)B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合多種雜交細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基 篩選1抗原-抗體雜交法克隆化單克隆抗體 篩選23.若細(xì)胞兩兩融合后，有幾種融合情況？第二十四張，PP

8、T共二十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月4.單克隆抗體制備過(guò)程步驟第二十五張，PPT共二十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月效應(yīng)B細(xì)胞B淋巴細(xì)胞注射抗原骨髓瘤細(xì)胞融合B-B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞瘤-瘤細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基 篩選1多種雜交瘤細(xì)胞符合要求的雜交瘤細(xì)胞抗原-抗體雜交法 篩選2克隆化體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)增殖單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞特點(diǎn)：既可以產(chǎn)生特異性抗體，又可以大量增殖第二十六張，PPT共二十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 人們發(fā)現(xiàn)，在動(dòng)物發(fā)生免疫反應(yīng)的過(guò)程中，體內(nèi)的B細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬(wàn)種以上的特異性抗體，但是每個(gè)B細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須用單個(gè)B細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖，即克隆。單克隆抗體的概念單: 單個(gè)細(xì)胞 克隆: 無(wú)性繁殖單克隆抗體:單個(gè)細(xì)胞克隆產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一特異性強(qiáng)的抗體什么是克?。?/p>