第十二章-細(xì)菌與免疫疫苗課件

1、細(xì)菌與免疫吳震州感染結(jié)局xdiseasenodiseaserecovery獲得性 免疫xre-infection感染infection天然免疫no disease再染顯性感染隱性感染感染與免疫之間的平衡關(guān)系與疾病感染ID50=感染半數(shù)劑量免疫力Disease =- 毒力 / 宿主抵抗力-毒力 / 宿主抵抗力感染灶的范圍 x 毒力免疫力微生物的結(jié)構(gòu)與免疫應(yīng)答- 內(nèi)部抗原- 外部抗原- 與致病性的關(guān)系（進(jìn)入途徑、感染部位、靶細(xì)胞/組織）- 寄生的部位：細(xì)胞外；兼性細(xì)胞內(nèi)；專(zhuān)性細(xì)胞內(nèi)寄生- 誘導(dǎo)產(chǎn)生免疫應(yīng)答的類(lèi)型抗微生物感染免疫- 天然免疫- 特異性免疫 細(xì)胞免疫應(yīng)答/體液免疫應(yīng)答 保護(hù)性免疫應(yīng)答免

2、疫損傷 （超敏反應(yīng)、自身免疫應(yīng)答）Immunity to Bacteria 抗菌免疫1. 基本原則1)抗菌免疫機(jī)制與細(xì)菌表面結(jié)構(gòu)相關(guān)mediate the contact of the cell with its environment-cell wall and membrane （細(xì)胞壁和細(xì)胞膜）including LPS-flagella-fimbriae-capsules(鞭毛)(菌毛)(莢膜)Bacteria cell surface structure 細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)targets of immune system 免疫系統(tǒng)作用的靶標(biāo)cell wall of mycobacteria

3、 extremely resistant結(jié)核桿菌細(xì)胞壁的抵抗力強(qiáng)capsule resistant to phagocytosis細(xì)菌莢膜抗吞噬cell wall components adjuvant properties佐劑活性(LPS, capsule, arabinoglactan/glycolipids )不同微生物具有不同的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)-gram positive（G+）-gram negetive （G-）-Mycobacteria(分支桿菌/結(jié)核桿菌)-Spriochaetes（螺旋體）不同的細(xì)菌- 細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)不同- 致病性不同- 免疫力不同G+G-分枝桿菌螺旋體細(xì)菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)細(xì)

4、胞表面結(jié)構(gòu)與免疫力革蘭陰性菌的脂質(zhì)外膜 （G-）-細(xì)胞壁成分- 補(bǔ)體-裂解-NK -殺傷- 陽(yáng)離子蛋白肽聚糖-細(xì)胞壁成分- 溶菌酶鞭毛和菌毛- 抗體菌細(xì)胞- 吞噬細(xì)胞2) 抗菌免疫機(jī)制與細(xì)菌致病性相關(guān)細(xì)菌的致病性 產(chǎn)生毒素,但不具侵襲力toxin (Corynebacterium diphtheriae,Vibrio Cholerae)免疫力： Neutralization antibody/中和抗體 Anti-adhesion Ab/抗黏附抗體 具有侵襲力,但不產(chǎn)生毒素酶類(lèi)：spread factor (tissue-degrading enzymes)免疫力：殺傷菌細(xì)胞 大多數(shù)細(xì)菌既產(chǎn)生毒

5、素也具侵襲力Adhesion/黏附toxin產(chǎn)生毒素entryMultiplication繁殖Adhesionmultiplication 繁殖 Toxin 產(chǎn)生毒素3) 免疫機(jī)制與細(xì)菌賴(lài)于環(huán)境的生存能力相關(guān) 胞外菌 兼性胞內(nèi)寄生菌- not depend on intracellular environment for survival 專(zhuān)性胞內(nèi)寄生菌- depend absolutely on intracellular environment for survival-Bacteria prefer non-phagocytic cells as host cells, includin

6、g epithelial and endothelial cells胞外菌感染性疾病 (1)胞外菌疾病致病機(jī)制金黃色葡萄球菌Skin and soft tissue infections lung abscesstoxic shock syndrome food poisonin gToxin-induced acute inflammation cell death from pore-forming toxins Superantigen-induced cytokine production skin necrosis, shock, diarrhea化膿性鏈球菌(Group A)Pha

7、ryngitisSkin infections: impetigo e.g. erysipelas, cellulitisScarlet FeverToxin-induced acute inflammation Streptolysin O damage of cell membranesAnti-phagocytic actions of capsule polysaccharides肺炎鏈球菌PneumoniaCell wall constituent-induced acute inflammation meningitisToxin (pneumolysin, similar to

8、streptolysin奈瑟氏腦膜炎球菌MeningitisPotent endotoxin causing acute inflammation and systemic diseaseEscherichia coli埃希氏大腸桿菌Urinary tract infections gastroenteritisseptic shockToxins acts on intestinal epithelium Increased chloride and water secretion Endotoxin (LPS) stimulates cytokine synthesis胞外菌感染性疾病 (

9、2)胞外菌疾病致病機(jī)制Vibrio cholerae霍亂弧菌腹瀉Cholera toxin -ADP ribosylates G protein subunit leads to increased cAMP in intestinal epithelial cells, results in chloride secretion and water lossClostridium tetani 破傷風(fēng)桿菌破傷風(fēng)Tetanus toxin binds to motor endplateat neuromuscular junction causes irreversible muscle co

10、ntractionCorynebacteriu m diphtheriae 白喉?xiàng)U菌白喉Diphtheria toxin ADP ribosylates elongation factor 2 Inhibits protein synthesis兼性胞內(nèi)寄生菌專(zhuān)性胞內(nèi)寄生菌Rickettsia prowazekii Rickettsia rickettsii Rickettsia typhi Rickettsia tsutsugamushi Coxiella burnetii Chlamydia trachomatis Chlamydia psittaci Chlamydia pneumoni

11、ae立克次體 、衣原體等Mycobacterium tuberculosis Mycobacterium leprae Salmonella enterica Brucella speciesLegionella pneumophila Listeria monocytogenes Francisella tularensis結(jié)核桿菌、麻風(fēng)桿菌 傷寒桿菌、布氏菌 軍團(tuán)菌、李斯特菌等兼性胞內(nèi)寄生菌所致疾病病原疾病感染的靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的寄居位置進(jìn)入門(mén)戶(hù)結(jié)核分枝桿菌TuberculosisMacrophagePhagosomeLung麻風(fēng)分枝桿菌LeprosyMacrophage Schwann ce

12、lls numerous other host cellsPhagolysosome (?)Nasopharyngeal mucosa傷寒沙門(mén)菌Typhoid feverMacrophagesPhagosomeGut布氏菌BrucellosisMacrophagesPhagolysosomeMucosa軍團(tuán)菌Legionnaires diseaseMacrophagesPhagosomeLung李斯曼菌ListeriosisMacrophages, hepatocytesCytosolGut吐絲菌TularaemiaMacrophagesPhagosomeSkin, mucosa, lung專(zhuān)

13、性胞內(nèi)寄生菌所致疾病病原疾病感染的靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的位置入侵部位立克次體rickettsiiRocky Mountain Spotted FeverEndothelial cells smooth muscle cellCytosolBlood vessel (tick bite)prowazekiiEndemic typhusEndothelial cellsCytosolBroken skin, mucosatyphiTyphusEndothelial cellsCytosolBlood vessel (flea bite) tsutsugamushiScrub typhusEndotheli

14、al cellsCytosolBlood vessel (mite bite)Coxiella burnetiiQ-feverMacrophages, lungLate phagosomeLungparenchyma cells衣原體trachomatisUrogenital infectionEpithelial cells trachomaPhagosomeEye, urogenital mucosaconjunctivitislymphogranuloma venerumpsittaciPsittacosisMacrophagesPhagosomeLunglung parenchyma

15、cellspneumoniaePneumoniaLung parenchyma cellsPhagosomeLungheart diseasevascular endothelial cells眼 呼吸道皮膚 消化道生殖道4) 人體解剖結(jié)構(gòu)與免疫- 無(wú)/有菌狀態(tài)的差異- 免疫因子/細(xì)胞的差異- 免疫應(yīng)答的特點(diǎn)/差異2. 人體抗菌免疫的第一道防線(xiàn)一般因素Mechanical and chemical barriers 屏障系統(tǒng)Intact skin and mucosaEpithelial cilia/ 上皮細(xì)胞纖毛Body fluid stomach acid, tearsLow pH (sk

16、in, vagina, etc.)Fever 發(fā)熱37 CAge 年齡Infant vs. early adulthood vs. late adulthoodNutritional status 營(yíng)養(yǎng)狀況Hormones 激素 Hepatitis is exacerbated by pregnancyGenetic factors 遺傳因子Host species resistance 宿主種屬的抗性Commensal bacteria 共生菌colicins,occupy ecological nicheNon-pathogenic “probiotic” organism （益生菌）la

17、ctobacilliLPS Binding Protein /LPS結(jié)合蛋白 (LBP) 60-kDa血清糖蛋白具有與LPS 高親和力 由肝細(xì)胞合成的急性期蛋白 正常血清量 1 10 ug/ml 急性期血清含量 300 ug/ml 對(duì)少量的LPS或革蘭陰性菌快速反應(yīng) LPS, IL-1, IL-6 and TNF調(diào)控肝細(xì)胞的LBP表達(dá)肝功能不全-不能及時(shí)合成LBP清除LPS細(xì)胞識(shí)別LPS 的機(jī)制3. 人體抗菌免疫的第二道防線(xiàn) 識(shí)別細(xì)菌保守的“共有”成分Innate Immunity/天然免疫 provide the second line of defense against pathogen

18、snot pathogen-specific and do not improve with repeated exposures to antigen (no memory/無(wú) 記憶)同一微生物每次感染后的免疫應(yīng)答強(qiáng)度均相似Lack diversity generated by recombination （無(wú) 多樣性）免疫分子的基因不會(huì)出現(xiàn)重組天然免疫缺陷小鼠T、B細(xì)胞 缺損小鼠天然免疫 正常小鼠微生物存活數(shù)量天然免疫保護(hù)機(jī)制C-reactive protein Mannose-binding lectinPolyanions Lipoprotein Lipoteichoic acid L

19、ipopolysaccharide激活補(bǔ)體C3a, C5a吞噬細(xì)胞, 組織細(xì)胞chemokineFormyl peptideMuramyl peptides peptidoglycan巨噬細(xì)胞bacteriaIL-12 TNFcytokines中性粒細(xì)胞IFN-gNK 細(xì)胞細(xì)胞壁的成分總結(jié): 抗菌天然免疫補(bǔ)體的激活Chemotaxis C3a, C5a,Opsonization C3b etc, lytic complex C5-9趨化因子triggered by PAMPs , chemokine, C3a, C5a ect巨噬細(xì)胞釋放的細(xì)胞因子TNF, IL-1, and chemokin

20、e: MCP-1, MIP-1aNK cell釋放的細(xì)胞因子IFN-g佐劑效應(yīng)Selection for-appropriate Lyc-mediated response-inappropriate responsesudden and massive cytokines release-休克綜合癥特異性免疫抗體 抗胞外菌的作用 中和調(diào)理 裂解中和調(diào)理裂解抗黏附抗體 阻斷細(xì)菌定居抗菌的獲得性免疫特異性抗體發(fā)揮相應(yīng)的保護(hù)作用細(xì)菌毒素 抗體中和作用 細(xì)菌產(chǎn)生的破壞組織的胞外酶 抗體阻斷作用 鞭毛- 干擾細(xì)菌的移動(dòng)細(xì)菌黏附- 局部粘膜IgA 抑制細(xì)菌黏附抗原-抗體激活補(bǔ)體菌細(xì)胞裂解、調(diào)理作用 抗體

21、的調(diào)理作用 IgG1 and IgG3 Fc 受體位于吞噬細(xì)胞增強(qiáng)其吞噬能力抗胞外菌免疫 炎性因子 趨化因子 召集免疫細(xì)胞至感染灶 吞噬細(xì)胞 補(bǔ)體 抗體細(xì)菌的胞內(nèi)感染CD4 T cells 控制結(jié)核感染Immunity to the intracellular bacteria involves a DTH response-激活的巨噬細(xì)胞包裹感染灶-結(jié)核 球 tubercle.巨噬細(xì)胞釋放的酶導(dǎo)致肺組織損傷胞內(nèi)寄生菌感染的特征1.T細(xì)胞是控制胞內(nèi)寄生菌感染主要免疫因素；2.胞內(nèi)寄生菌對(duì)宿主細(xì)胞幾乎無(wú)/或無(wú)直接的毒性作 用；但感染伴隨遲發(fā)型超敏反應(yīng)3.胞內(nèi)寄生菌感染的病理與免疫損傷有關(guān)，而胞外

22、菌 往往產(chǎn)生毒素直接造成組織損傷；4.胞內(nèi)寄生菌能與宿主長(zhǎng)期共存，導(dǎo)致慢性感染；而 胞外菌引起急性感染胞內(nèi)寄生菌可隱藏在幾乎無(wú)抗微生物潛能的細(xì)胞內(nèi)T細(xì)胞發(fā)揮作用T 殺傷細(xì)胞殺傷感染的靶細(xì)胞抗胞內(nèi)寄生菌的三步驟早期中期晚期IFN-gammaT殺傷細(xì)胞對(duì)感染靶細(xì)胞 作用機(jī)制抗胞內(nèi)寄生菌的天然免疫和獲得性免疫活 菌 數(shù)感染清除感染控制活菌數(shù)活菌數(shù)感染后天數(shù)細(xì)胞因子的抗細(xì)菌感染作用細(xì)胞因子抗菌免疫的作用產(chǎn)生的細(xì)胞在看細(xì)菌感染中的作用ChemokinesLikelyEpithelial cell, endothelial cell, macrophageLeukocyte recruitment and

23、 activationIL-1Important role provenMacrophageLeukocyte recruitment and stimulationIL-6Essential role provenMacrophage, T cellLeukocyte recruitment T-cell differentiationTNF-aEssential role provenMacrophage mast cellLeukocyte recruitmentNK-cell activation granuloma formation IFN-g, costimulationIFN-

24、gEssential role provenNK cellTh 1 cellMacrophage activation, granulomaIL-12Important role provenMacrophageTh 1-cell, NK-cell stimulationIL-18Likely, not provenMacrophageTh 1-cell stimulationIL-4ExacerbationNK T cell, Th2 cell basophil (?), Eosinophil (?)Th 1-cell inhibitionIL-10ExacerbationMacrophag

25、eMacrophage inhibitionTGF-bExacerbation likely, not provenMacrophageMacrophage inhibition腸道細(xì)菌和腫瘤細(xì)菌與疫苗吳震州一、概述二、滅活疫苗三、減毒活疫苗四、亞單位疫苗五、活載體疫苗六、核酸疫苗七、治療性疫苗細(xì)菌疫苗 1、疫苗的概念 人工免疫：有計(jì)劃、有目的地給人體接種抗原，或輸入抗體或免疫細(xì)胞，使機(jī)體獲得某種特異性抵抗力，從而達(dá)到預(yù)防或治療某種疾病的目的。 人工主動(dòng)免疫 人工被動(dòng)免疫輸入物質(zhì) 抗原（疫苗） 抗體或致敏淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)時(shí)間 慢（14周） 快（立刻發(fā)揮作用）維持時(shí)間 長(zhǎng)（數(shù)月數(shù)年） 短（23周）用

26、 途 主要用于預(yù)防 治療或應(yīng)急預(yù)防人工主動(dòng)免疫和人工被動(dòng)免疫的比較疫苗：用于人工主動(dòng)免疫的生物制品。2、理想疫苗的標(biāo)準(zhǔn) 安全：無(wú)致病性和接種后異常反應(yīng) 有效：可誘導(dǎo)產(chǎn)生可靠的保護(hù)性免疫 實(shí)用：易于接種、保存和運(yùn)輸，價(jià)廉3、疫苗的發(fā)展歷史 古典疫苗時(shí)期：牛痘苗、狂犬病疫苗 培養(yǎng)疫苗時(shí)期：脊髓灰質(zhì)炎疫苗、卡介苗 基因工程疫苗時(shí)期：乙型肝炎基因工程疫苗 滅活疫苗（inactivated vaccine）：又稱(chēng)死疫苗，是用化學(xué)或物理的方法，將具有感染性的完整的病原微生物殺死，使其失去傳染性而保留抗原性而成。 二、滅活疫苗 百日咳、乙型腦炎、流行性腦脊髓膜炎、狂犬病、傷寒、鉤體病、甲型肝炎、鼠疫、流感、

27、脊髓灰質(zhì)炎（salk）等疫苗。 缺點(diǎn)：免疫力維持時(shí)間短，需要多次重復(fù)接種；主要誘發(fā)體液免疫，不能產(chǎn)生細(xì)胞免疫或黏膜免疫應(yīng)答；接種劑量較大，不良反應(yīng)；需要嚴(yán)格滅活。 二、滅活疫苗 優(yōu)點(diǎn)：易于制備；免疫原性穩(wěn)定性高；儲(chǔ)存及運(yùn)輸方便；易于制備多價(jià)疫苗；疫苗安全性高。三、減毒活疫苗 減毒活疫苗（live-attenuated vaccine）：用人工誘變或從自然界篩選出的毒力高度降低或無(wú)毒的活的病原微生物制成的疫苗?？赡M自然發(fā)生隱性感染，誘發(fā)理想的免疫應(yīng)答而又不產(chǎn)生臨床癥狀。 結(jié)核病、脊髓灰質(zhì)炎（Sabin）、麻疹、乙型腦炎、甲型肝炎、風(fēng)疹疫苗、腮腺炎等疫苗。 優(yōu)點(diǎn)：能誘發(fā)全面、穩(wěn)定、持久的體液、細(xì)

28、胞和粘膜免疫應(yīng)答；一般只須接種一次；可采用口服、噴鼻或氣霧途徑免疫。 缺點(diǎn)：有效期短和熱穩(wěn)定性差，運(yùn)輸、保存條件要求較高；回復(fù)突變危險(xiǎn)；使用范圍相對(duì)窄。 三、減毒活疫苗 基因缺失活疫苗（gene deleted live vaccine）：采用分子生物學(xué)技術(shù)，去除與毒力或毒力相關(guān)基因片段，使病原微生物毒力減低或喪失。用缺失突變毒株制成的疫苗。三、減毒活疫苗 與自然突變株（多為點(diǎn)突變毒株）相比，基因缺失活疫苗具有突變性狀明確、穩(wěn)定、不易發(fā)生毒力返祖的優(yōu)點(diǎn)。 對(duì)于某些抗原性弱、易發(fā)生免疫逃避的病原體，常規(guī)疫苗往往難以獲得有效的免疫應(yīng)答及保護(hù)性。四、亞單位疫苗 一些免疫保護(hù)機(jī)制不清，可能誘導(dǎo)免疫病理

29、反應(yīng)，有潛在致腫瘤作用的病毒，以及不易培養(yǎng)的病原體，則難以用傳統(tǒng)方法生產(chǎn)疫苗。 亞單位疫苗（subunit vaccine）：不含病原體核酸，選用能誘發(fā)宿主產(chǎn)生中和抗體的微生物蛋白或表面抗原而制成的疫苗。 白喉類(lèi)毒素、破傷風(fēng)類(lèi)毒素 流感嗜血桿菌莢膜多糖、腦膜炎球菌莢膜多糖 流感病毒血凝素和神經(jīng)氨酸酶 乙型肝炎HBsAg（基因工程疫苗） 乳腺癌Her2疫苗定義 優(yōu)點(diǎn)：除去了病原體中與誘發(fā)保護(hù)性免疫無(wú)關(guān)或有害成分，只保留有效的免疫原成分，因而免疫作用明顯增強(qiáng)而穩(wěn)定，可靠性提高，對(duì)機(jī)體引起的不良反應(yīng)小。 缺點(diǎn)：需要選用佐劑；不能誘發(fā)細(xì)胞免疫和黏膜免疫。 四、亞單位疫苗 將病原體中能誘導(dǎo)保護(hù)性免疫應(yīng)答

30、的目的抗原編碼基因克隆后，插入適當(dāng)?shù)脑嘶蛘婧吮磉_(dá)載體質(zhì)粒； 再將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌、酵母菌或哺乳動(dòng)物細(xì)胞中高效表達(dá)目的基因； 分離、提取、純化目的蛋白而制成。 基因重組亞單位疫苗 (genetic engineering subunit vaccine)基因工程疫苗發(fā)展的重點(diǎn) 不能或難以培養(yǎng)的病原體； 有潛在致癌性或免疫病理作用的病原體； 傳統(tǒng)疫苗效果差或不良反應(yīng)大的病原體； 能簡(jiǎn)化免疫程序、降低成本的多價(jià)疫苗。四、亞單位疫苗 活載體疫苗（live vector vaccine）：又稱(chēng)重組載體疫苗（recombinant vector vaccine），是將有效的目的抗原的編碼基因?qū)牖钶d體（

31、無(wú)或弱毒的細(xì)菌或病毒株）中，構(gòu)建重組菌株；目的基因可隨重組菌株在宿主體內(nèi)的增殖而大量表達(dá)，從而誘發(fā)相應(yīng)的免疫保護(hù)作用。 五、活載體疫苗載體：腺病毒、牛痘病毒、金絲雀痘病毒、傷寒沙門(mén)菌減毒株、卡介苗、乳桿菌、乳球菌、雙歧桿菌等。病原體：乙型肝炎病毒、狂犬病病毒、痢疾桿菌等。五、活載體疫苗 1990年，Wolff等首次發(fā)現(xiàn)，給小鼠肌肉注射裸露質(zhì)粒DNA后，質(zhì)粒攜帶的基因可被肌細(xì)胞攝取并在其中表達(dá)，還可誘生特異性免疫應(yīng)答。 六、核酸疫苗 核酸疫苗（nucleotide vaccine）：又稱(chēng)DNA疫苗（DNA vaccine），是將一種或多種目的抗原的編碼基因克隆到真核質(zhì)粒表達(dá)載體上；再將重組質(zhì)粒直

32、接注入到體內(nèi)，在宿主細(xì)胞內(nèi)表達(dá)目的蛋白，誘發(fā)特異性免疫應(yīng)答。 六、核酸疫苗目前進(jìn)入臨床試驗(yàn)的核酸疫苗有HIV DNA疫苗和瘧疾 DNA疫苗。六、核酸疫苗 由于核酸疫苗具有構(gòu)建容易、生產(chǎn)方便、表達(dá)穩(wěn)定及可誘發(fā)全面的免疫應(yīng)答等特點(diǎn)，在抗感染、抗腫瘤免疫及疾病的預(yù)防等方面具有廣闊的應(yīng)用前景，被譽(yù)為疫苗的“第三次革命”。 六、核酸疫苗 局部注射的核酸（重組質(zhì)粒DNA）被周?chē)募?xì)胞（如黏膜上皮細(xì)胞、抗原提呈細(xì)胞）攝取后，進(jìn)入核內(nèi)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄，并在胞質(zhì)中翻譯成目的蛋白。1、免疫機(jī)制 目的蛋白被蛋白酶復(fù)合體降解成含有表位的抗原肽，可作為： “內(nèi)源性抗原”：與MHC類(lèi)分子結(jié)合，誘發(fā)CTL介導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答。 “外

33、源性抗原”：與MHC類(lèi)分子結(jié)合，誘發(fā)偏向Th1型免疫應(yīng)答。 目的蛋白亦可通過(guò)細(xì)胞分泌或細(xì)胞破裂的方式進(jìn)入組織間，以天然折疊形式激活B淋巴細(xì)胞而產(chǎn)生抗體。四、核酸疫苗 DNA疫苗接種后，體內(nèi)僅表達(dá)pgng水平的外源蛋白，但能誘發(fā)強(qiáng)而持久的細(xì)胞免疫和體液免疫應(yīng)答。 如何解釋這一現(xiàn)象呢？ 四、核酸疫苗 目的基因（含載體質(zhì)粒）含有CpG基序的回文序列，能激活較強(qiáng)的CTL效應(yīng)，并能激活巨噬細(xì)胞與NK細(xì)胞，因此，CpG回文序列被稱(chēng)為免疫刺激DNA序列。 CpG基序與IL-2、TNF-、IFN-的基因結(jié)構(gòu)相似而產(chǎn)生協(xié)同作用。 六、核酸疫苗目的基因的選擇：側(cè)重于免疫原性，即所表達(dá)的目的蛋白刺激機(jī)體免疫應(yīng)答的能力。目的蛋白中是否具有受MHC分子限制的T細(xì)胞抗原表位，是保證核酸免疫有效的先決條件。 核酸疫苗所選擇的目的基因應(yīng)盡量避免有害基因成分，特別是病毒或腫瘤的核酸免疫。載體的選擇：構(gòu)建DNA疫苗的質(zhì)粒通常是非復(fù)制型的真核表達(dá)質(zhì)粒，能高水平地表達(dá)目的基因。 重組質(zhì)粒可分為兩個(gè)部分： 轉(zhuǎn)錄部分：由啟動(dòng)子、插入的目的抗原cDNA和poly A終止子組成，指導(dǎo)目的