液相色譜日常維-PPT課件

1、 日常分析的注意點(diǎn)1：液相系統(tǒng)維護(hù)流程圖吸濾頭單向閥柱塞密封圈線路過濾器手動(dòng)進(jìn)樣器檢測(cè)器日常維護(hù)材料：不銹鋼燒結(jié)，孔徑10um故障：堵塞表現(xiàn)：管路中不斷有氣泡生成措施：用520的稀硝酸，超聲波清洗， 再用蒸餾水清洗注意點(diǎn)：吸濾頭拆下時(shí)不必將塑料管剪斷吸濾頭日常維護(hù)單向閥LC-10ATvp泵：串聯(lián) 式往復(fù)泵LC-10ADvp泵：并聯(lián)式 往復(fù)泵日常維護(hù)單向閥結(jié)構(gòu)拋光面透明塑料墊片寶石球吸液沖程排液沖程出口單向閥進(jìn)口單向閥泵頭流動(dòng)相單向閥原理吸液沖程排液沖程出口單向閥進(jìn)口單向閥泵頭日常維護(hù)故障1：寶石球粘附于墊片表現(xiàn)：泵無法吸液或排液，流路不通措施：1）用針筒抽出口單向閥以產(chǎn)生負(fù)壓， 使寶石球與墊片

2、分開 2）拆下單向閥，放入異丙醇或水中， 用超聲波清洗單向閥日常維護(hù)故障2：寶石球或塑料墊片受污導(dǎo)致密封不好表現(xiàn)：系統(tǒng)壓力波動(dòng)大措施：拆下單向閥，放入異丙醇或水中，用超 聲波清洗單向閥日常維護(hù)故障：密封圈磨損而導(dǎo)致 密封不良現(xiàn)象：系統(tǒng)壓力波動(dòng)大或 漏夜措施：更換密封圈注意點(diǎn)： 更換密封圈 拆卸泵頭前，柱塞桿 復(fù)位 （PSET）柱塞密封圈流動(dòng)相泵頭清洗管路柱塞桿密封圈日常維護(hù)故障：堵塞現(xiàn)象：系統(tǒng)壓力波動(dòng)大或壓 力偏高措施：5稀硝酸，超聲波清 洗判斷依據(jù)：關(guān)閉排液閥，斷開出口管路，設(shè)定流速1mL/min，如壓力3kgf/cm2，則可能堵塞。線路過濾器排液閥壓力傳感器線路過濾器流動(dòng)相日常維護(hù)紫外檢測(cè)

3、器參比池樣品池光線光電倍增管日常維護(hù)故障：樣品池受污表現(xiàn)：樣品池和參比池能量相差較大檢查方法：設(shè)定250nm波長，通甲醇或水，查看SMPL EN和 REF EN，如兩者相差較大，則樣品池受污。措施：用針筒注入異丙醇，清洗樣品池；如污染嚴(yán)重， 拆開樣品池，將透鏡等放入異丙醇中超聲波清洗。紫外檢測(cè)器日常維護(hù)更換氘燈（紫外檢測(cè)器） 判斷氘燈能量： 設(shè)定220nm波長，檢查參比池能量，如 能量低于800，需更換氘燈。 操作注意點(diǎn)： 不要用手直接接觸氘燈表面2：手動(dòng)進(jìn)樣器的樣品注入日常維護(hù)操作注意點(diǎn)：1）插針應(yīng)插到底2）進(jìn)樣應(yīng)使用液相色譜專用平頭進(jìn)樣針3）清洗應(yīng)使用專用針口清洗器手動(dòng)進(jìn)樣器定子轉(zhuǎn)子塑料箍

4、彈簧不銹鋼套3：有機(jī)溶劑的優(yōu)與劣什么時(shí)候需要“HPLC”級(jí)有機(jī)溶劑1. 等濃度洗脫法的微量分析 用光譜進(jìn)行判斷 2. 梯度洗脫法分析3.1 等濃度洗脫法的微量分析優(yōu)級(jí) 噪聲噪聲目的成分目的成分HPLC級(jí) 優(yōu)級(jí)HPLC級(jí)測(cè)試波長上的噪聲水平與流動(dòng)相的吸光度成正比乙腈3.2 梯度洗脫法分析 需要“HPLC”級(jí)有機(jī)溶劑理由：即使沒有注入被測(cè)樣品，因流動(dòng)相的不純物質(zhì)，造成出峰。梯度洗脫法的注意點(diǎn)1.流動(dòng)相使用HPLC級(jí)有機(jī)溶劑。2.查看空白實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)。3.遵守分析周期。 （最初的分析數(shù)據(jù)不采用）4: 談?wù)劸彌_液4: 談?wù)劸彌_液選擇緩沖液的步驟 1 .確定最佳分離狀態(tài)時(shí)的流動(dòng)相pH 2 .選擇具有與流動(dòng)

5、相的pH相近的pKa 的緩沖液 （即使?jié)舛认∫簿哂休^強(qiáng)能力的緩沖液） 3 .確認(rèn)檢測(cè)波長下緩沖液是否有大的吸收 （在波長210nm附近進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，不能用醋酸和 檸檬酸的緩沖液）代表性弱酸的pKa pK1 pK2 pK3 醋酸 4.87 檸檬酸 3.13 4.76 6.40 磷酸 2.16 7.2 1 12.325: 關(guān)于脫氣脫氣的目的 1. 防止由氣泡的產(chǎn)生引起的故障 2. 防止由溶解（在液體中的）氣體量 的變動(dòng)引起的檢測(cè)不穩(wěn)定程度 1）示差折射率檢測(cè)器 *使折射率變化 2）UV檢測(cè)器（200nm以下） *溶解氧氣有吸收 3）熒光檢測(cè)器 *溶解氧氣有消光作用脫氣的方法1. 吸氣器法 *可以抑制

6、制做流動(dòng)相時(shí)產(chǎn)生的氣泡 *只是暫時(shí)的脫氣法 *不能解決因溶解氣體造成的問題2. He清除法3. 使用氟樹脂膜的減壓脫氣法He清除法調(diào)壓閥排氣閥往送液泵流動(dòng)相過濾器使用氟樹脂膜的減壓脫氣法氟樹脂膜真空室往送液泵真空泵控制器流動(dòng)相6: 予處理柱和防護(hù)柱予處理柱和防護(hù)柱的位置予處理柱防護(hù)柱泵進(jìn)樣器分析柱予處理柱的作用用于免除流動(dòng)相的影響 例如 1. 在離子色譜分析中，免除多價(jià)離子的不 良影響。 2. 在梯度洗脫分析中，使鬼峰后移，不影 響目的成分的分析。 3. 防止硅膠載體的溶解。 （使用堿性或含有胺的流動(dòng)相時(shí)）防護(hù)柱的作用代替分析柱捕集樣品中的雜質(zhì)，容易更換，降低成本。7: 關(guān)于ODS柱補(bǔ)修峰的變形根部變寬有肩或分叉峰產(chǎn)生有肩或分叉的原因1. 柱子劣化 （進(jìn)口處