三細(xì)菌的革蘭氏染色及芽孢染色法-課件

1、1細(xì)菌的革蘭氏染色法 2知識回顧1.什么是微生物？2.細(xì)菌簡單染色及其操作步驟？細(xì)菌的革蘭氏染色法 3引導(dǎo)探索細(xì)菌的革蘭氏染色法 41. 革蘭氏染色的基本原理2.革蘭氏染色所需要的材料和器材3.革蘭氏染色的操作方法及步驟4.革蘭氏染色結(jié)果分析5. 小結(jié)學(xué)習(xí)內(nèi)容細(xì)菌的革蘭氏染色法 51.能夠說出革蘭氏染色的基本原理。2.能夠描述出革蘭氏染色法的操作步驟及注意事項。3. 能夠熟練規(guī)范的對細(xì)菌進行革蘭氏染色。通過本節(jié)課學(xué)習(xí)，學(xué)生能夠達(dá)到以下目標(biāo)：學(xué)習(xí)目標(biāo)細(xì)菌的革蘭氏染色法 6 1.革蘭氏染色法 革蘭氏染色法是1884年由丹麥病理學(xué)家C.Gram所創(chuàng)立的。細(xì)菌先經(jīng)堿性染料結(jié)晶紫染色，而經(jīng)碘液媒染后，用

2、酒精脫色，復(fù)染后可將所有的細(xì)菌區(qū)分為革蘭氏陽性菌（G+）和革蘭氏陰性菌（G-）兩大類，是細(xì)菌學(xué)上最常用的鑒別染色法。染色的基本原理細(xì)菌的革蘭氏染色法 初染媒染脫色復(fù)染72.革蘭氏陽性和陰性菌細(xì)胞壁成分比較染色的基本原理細(xì)菌的革蘭氏染色法 肽聚糖81.材料 培養(yǎng)12-16h枯草桿菌（Bacillus subtilis） 培養(yǎng)16h大腸桿菌（Escherichia coli）2.染色液和試劑 草酸銨結(jié)晶紫、碘液、95%乙醇、蕃紅、二甲苯、香柏油3.器材 載玻片、接種環(huán)、酒精燈、廢液缸、洗瓶、擦鏡紙、顯微鏡等需要的材料及器材細(xì)菌的革蘭氏染色法 9涂片干燥固定初染水洗媒染水洗脫色水洗 復(fù)染水洗干燥觀察

3、實驗步驟細(xì)菌的革蘭氏染色法 10實驗方法及步驟-涂片、干燥、固定菌懸液涂片干燥滴加無菌水固定取菌苔涂片 固定的目的： 1.使細(xì)胞質(zhì)凝固，以固定細(xì)胞形態(tài)； 2.并使菌體牢固地附著在載玻片上。細(xì)菌的革蘭氏染色法 11革蘭氏染色步驟-染色碘液媒染1min脫色2030s草酸銨結(jié)晶紫染色1-2min媒染目的是提高染料和菌體細(xì)胞的結(jié)合程度，在細(xì)胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物脫色后使革蘭氏陰性菌變?yōu)闊o色 細(xì)菌的革蘭氏染色法 12蕃紅復(fù)染 12min復(fù)染的目的是使被脫色的細(xì)胞染上不同于初染液的顏色，而未被脫色的細(xì)胞仍然保持初染的顏色，從而將細(xì)胞區(qū)分成G+和G-兩大類群革蘭氏染色步驟-復(fù)染細(xì)菌的革蘭氏

4、染色法 13紫色革蘭陽性菌 紅色革蘭陰性菌革蘭染色結(jié)果細(xì)菌的革蘭氏染色法 14思考討論：細(xì)菌革蘭氏染色的意義？ 1.鑒別細(xì)菌 2.選擇藥物 3.與致病性有關(guān)151.本實驗獲得成功的關(guān)鍵？ 1）革蘭氏染色成敗的關(guān)鍵是酒精脫色。 如脫色過度，會染成陰性菌；如脫色時間過短，染成假陽性菌。 2）在涂片時不可過厚，否則在染色脫色時，都不易均勻。 3）固定時烘烤要適度，太輕會沖走細(xì)菌，過度會破壞細(xì)菌形態(tài)。 4）在鏡檢時，以分散開的菌體的革蘭氏染色反應(yīng)為準(zhǔn)。 5）選用幼齡的細(xì)菌。2.革蘭氏染色會迅速將細(xì)菌分為革蘭氏陽性和陰性，是很重要的染色方法。小結(jié)細(xì)菌的革蘭氏染色法 16課堂檢測1.細(xì)菌革蘭氏染色的步驟包括：涂片、_ 、 _ 、 _ 、 _ 、 _ 、 _ 和鏡檢。2.革蘭氏陽性菌呈 _ 色，革蘭氏陰性菌呈紅色。3.細(xì)菌染色多采用 _ 染料4.革蘭氏染色的關(guān)鍵步驟是（） A 脫色B 媒染C 復(fù)染D 固定5.當(dāng)對未知菌進行革