基因檢測基因分型指導臨床個體化用藥修訂稿

1、基因檢測基因分型指導臨床個體化用藥PERSONAL RESUMEWEIHUA system office room【W(wǎng)EIHUA 16H-WEIHUA WEIHUA8Q8-基因分型檢測指導個體化用藥據(jù)聯(lián)合國世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計，全球死亡患者中三分之一是死于不合理用藥，而 非死于自然疾病本身。我國衛(wèi)生部藥品不良反應監(jiān)測中心的數(shù)據(jù)為：住院病人中， 每年約有萬人死于藥品不良反應；家庭用藥不良反應需要住院治療的病人則多達 250萬人。人們對藥物毒副作用不重視是藥物不良反應的重要原因。處方中的劑量多是 常規(guī)劑量，對患者來說未必準確，沒考慮個人代謝耐受因素，長期過量用藥，很可 能導致慢性藥物中毒?；蚪M的多態(tài)

2、性是導致藥物反應多態(tài)性的重要因素。實際上，每個人有自己特 有的藥物代謝基因，決定著藥物的代謝和耐受劑量，只有根據(jù)自己的耐受劑量服 藥，才是最合理的安全劑量。進行藥物代謝相關基因型檢測，合理調整用藥劑量， 使長期用藥更安全，毒副作用更小，效果更好。藥物基因組學正是從已知基因對藥物效應的影響，確定藥物作用的靶點，研究 從表型到基因型的藥物反應個體多樣性。從基因水平研究證明和闡述藥物療效以及 藥物作用的靶位、作用模式和毒副作用。揭示藥物反應多態(tài)性這些差異的遺傳特 征，鑒別基因序列中的差異，并以藥物效應及安全性為目標，研究各種基因突變與 藥效及安全性之間的關系。通過對藥物療效與安全性的遺傳體質評估，減

3、少藥物毒 副作用及耐藥現(xiàn)象發(fā)生，實現(xiàn)“個性化用藥”的目標。我們第四軍醫(yī)大學藥學系藥物基因組教研室經(jīng)過研究，已開發(fā)了結核病用藥指 導的基因檢測，乙肝治療藥物拉米夫定、抗凝劑藥物華法林以及鉑類、5-氟尿嘧 啶、巰基嘌吟類等腫瘤化療藥物的用藥指導基因檢測項目，倡導基于基因分型的個 體化合理用藥。同時還開發(fā)了人乳頭瘤病毒篩查與宮頸癌預警項目。1.結核病用藥指導的基因檢測：近年來，結核分枝桿菌耐藥現(xiàn)象日趨嚴重，大大削弱了抗結核藥物的療效。目 前結核菌的耐藥性問題已成為結核病疫情上升和難以控制的一個重要原因。研究表 明，結核分枝桿菌基因中基因突變所引起的耐藥性是結核分枝桿菌產(chǎn)生耐藥的主要 方式。多數(shù)導致結

4、核分枝桿菌耐藥的基因突變機理比較明確，異煙肼、利福平、乙 胺丁醇是一線抗結核藥物。katG基因的點突變與異煙肼耐藥性密切相關，katG基 因的突變或缺失可以使酶分子活性降低或失活，異煙肼不能被轉化為活性形式，從 而導致結核分枝桿菌對異煙肼的高水平耐藥。利福平及其它福霉素衍生物在結核分 枝桿菌內(nèi)的作用靶位為rpoB基因編碼的RNA多聚酶6亞單位，可抑制轉錄過程， 從而導致細菌死亡。編碼阿拉伯糖基轉移酶的基因(embC Z4/B)的變異是結核分 枝桿菌耐受乙胺丁醇的原因。文獻報道，檢測出rpoB526, rpo531, embB306和 katG315等密碼子突變情況，就能預測90%利福平、乙胺丁

5、醇和75%的異煙肼耐藥 菌株。因此通過Pyrosequencing技術分析katG、rpoB、embB基因是否變異，可以 監(jiān)測到大多數(shù)的結核分枝桿菌耐藥菌株，從而指導臨床用藥。檢測方案方法：焦磷酸測序(Pyrosequeencing )樣本：痰液、外周血、腦脊液等。收費：500元2.乙肝病毒耐藥突變檢測拉米夫定是治療慢性乙肝的首選藥物之一，但長期使用容易產(chǎn)生耐藥突變，且 逐年升高（第1、2、3、4年分別為14%、38、49%和66%），從而導致病毒載量 和谷丙轉氨酶反彈。拉米夫定耐藥主要由于乙肝病毒（HBV）聚合酶基因的酪氨酸- 甲硫氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸（YMDD）基序發(fā)生變異，一旦出現(xiàn)Y

6、MDD變異，繼續(xù) 使用拉米夫定治療將沒有意義。在拉米夫定治療過程中監(jiān)測YMDD變異，對疾病 的明確診斷、臨床轉歸、用藥選擇和預后分析具有重要的參考價值。我國是慢性乙肝重負擔國家，有效治療慢性乙肝在我國具有重要意義。目前批 準用于治療慢性乙肝的藥物有拉米夫定、干擾素、PEG干擾素、阿的福韋、恩替 卡韋等，后4種藥物都可以有效治療拉米夫定耐藥的慢性乙肝患者。因此，長期 治療和耐藥突變監(jiān)測是成功治療乙肝的關鍵。一旦在拉米夫定治療過程中檢測到 YMDD變異，可以提示臨床醫(yī)生及時考慮換用其他藥物治療或采取聯(lián)合治療。耐藥突變檢測費用相對于藥費并不高，而定期進行耐藥突變檢測，卻可以避免 由于耐藥造成浪費，也

7、為臨床進行更有效地治療提供及時信息保證。檢測方案首次治療前進行一次HBV DNA定量和耐藥突變檢測；治療過程中每三個月進行一次HBV DNA定量和耐藥突變檢測。標本采集和保存抽取病人靜脈血，置于滅菌的一次性試管中自然凝固（不可用肝素抗凝），或 3000-4000rpm離心20min ,吸取分離出的血清送檢。收費：500元基因分型指導臨床warfarin （華法林）用藥檢測的意義：warfarin作為一種口服抗凝劑，其治療窗很窄，特定劑量下人 群的反應差異至少相差10倍，從而導致劑量不夠達不到防血栓效果，劑量過大又 引起出血的危險。美國FDA已經(jīng)規(guī)定對服用warfarin的患者應進行基因分型檢

8、測，我國尚未明確規(guī)定。在國內(nèi)應盡快開展類似的基因分型檢測以指導warfarin 的合理用藥。臨床檢測適應癥 ：warfarin （華法林）是常用的口服抗凝血藥，主要用于治療 和預防血栓形成性疾病，包括心肌梗死、缺血性中風、靜脈血栓以及心瓣膜置換 術、房室纖顫后。臨床上常用于二尖瓣、三尖瓣及主動脈瓣置換術后的患者。樣本收集方法：患者血液標本。VKORC1基因分型檢測方法：采用高通量快速準確的TaqMan PCR方法進行。 檢測成本：探針20元，血液基因組DNA提取5元，PCR反應試劑10元，其它15 元總共50元。收費：150元鉑耐藥性檢測腫瘤細胞對鉑耐藥性的產(chǎn)生常使化療難以奏效并最終導致化療失

9、敗。ERCC1、XRCC1、xpd基因多態(tài)性能影響DNA修復途徑，影響患者對鉑耐藥性。 適應癥：擬用或應用鉑類化療藥的患者 標本：抗凝血、新鮮組織成本：200元收費:500元5-氟尿嘧啶用藥指導的基因檢測5 一氟尿嘧啶(5 FU)作為一種抗代謝藥物，已廣泛應用于各種實體腫瘤的治 療。但是，由于腫瘤及個體異質性的影響，仍有部分患者對該藥不敏感或出現(xiàn)嚴重 致死性毒性反應。DPD是5-FU代謝的限速酶，DPD缺乏會導致5-FU用藥后的嚴重毒性,DPYD基因的多態(tài)性與5-FU的毒副作用有關。MTHFR是葉酸代謝過程中的關鍵 酶，MTHFR基因型的改變還可以影響葉酸的濃度及其在細胞內(nèi)的分布而改變腫瘤 細

10、胞的生長以及對化療的敏感性，削弱5 一 FU的抗腫瘤作用。DPYD、MTHFR 基因型檢測對指導腫瘤的化療、預測以5 一 FU為基礎的化療方案的療效和毒性具 有較高的臨床價值。適應癥：擬用或應用氟尿嘧啶類化療藥的腫瘤患者 標本：抗凝血、新鮮組織 成本：200元 收費:500元硫基嘌呤類藥物用藥指導的基因檢測硫嘌吟類藥物廣泛應用于白血病治療和器官移植后抑制免疫排斥反應。但由于 較嚴重的毒副反應限制了其臨床用藥，許多大醫(yī)院紛紛采用其他價格遠遠高于巰基 嘌吟類的免疫抑制劑和抗腫瘤藥物，大幅度增加醫(yī)療費用和患者負擔。然而，絕大 部分患者可耐受該類藥物治療。TPMT在巰基嘌吟、硫唑嘌吟等藥物的代謝中起 著重要作用。編碼TPMT的基因多態(tài)性對巰基嘌吟的代謝有嚴重的影響。采用 TPMT基因型檢測對患者進行遺傳學分類，預測臨床反應并指導用藥，這將在保證安 全的前提下減輕患者負擔和減少醫(yī)療費用，具有重要的社會和經(jīng)濟效益。適應癥：擬用或應用硫嘌吟