2.2.2動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體ppt課件(PPT 25頁(yè))

1、2.2 動(dòng)物細(xì)胞工程2.2.2 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體1PPT學(xué)習(xí)交流第1頁(yè)，共25頁(yè)。植物細(xì)胞A植物細(xì)胞B去掉細(xì)胞壁原生質(zhì)體A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體融合融合的原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁雜種細(xì)胞脫分化再分化愈傷組織雜種植株溫故知新:植物體細(xì)胞雜交過(guò)程2PPT學(xué)習(xí)交流第2頁(yè)，共25頁(yè)。A細(xì)胞B細(xì)胞人工誘導(dǎo)1、動(dòng)物細(xì)胞融合的概念雜交細(xì)胞 動(dòng)物細(xì)胞融合（也稱(chēng)細(xì)胞雜交）：是指兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞融合形成一個(gè)單核細(xì)胞的過(guò)程。一、動(dòng)物細(xì)胞融合3PPT學(xué)習(xí)交流第3頁(yè)，共25頁(yè)。細(xì)胞膜的流動(dòng)性滅活病毒、PEG、電激等融合后的細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂，形成完整的雜交細(xì)胞誘導(dǎo)的手段？融合后細(xì)胞的類(lèi)型？AB雜種細(xì)胞遺傳物質(zhì)有什么特點(diǎn)？A

2、A、AB、BB(未融合A和B)含兩種生物的遺傳物質(zhì)2、動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程原理:4PPT學(xué)習(xí)交流第4頁(yè)，共25頁(yè)。2、動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程 為什么滅活的病毒能作誘導(dǎo)劑？滅活喪失感染性保留融合活性5PPT學(xué)習(xí)交流第5頁(yè)，共25頁(yè)。3、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的意義和應(yīng)用6PPT學(xué)習(xí)交流第6頁(yè)，共25頁(yè)。比較項(xiàng)目細(xì)胞融合的原理細(xì)胞融合的方法誘導(dǎo)手段用途植物體細(xì)胞雜交細(xì)胞膜的流動(dòng)性和細(xì)胞的全能性纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合離心、電刺激、振動(dòng)、聚乙二醇克服遠(yuǎn)源雜交不親和，獲得雜種植株動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞膜的流動(dòng)性用胰蛋白酶使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合除應(yīng)用植物細(xì)胞雜交手段外，還有滅活病毒獲得雜種細(xì)胞、制備單克

3、隆抗體4、比較動(dòng)、植物細(xì)胞雜交技術(shù)7PPT學(xué)習(xí)交流第7頁(yè)，共25頁(yè)。1、能使動(dòng)物細(xì)胞融合的特有的誘導(dǎo)因子是 （ ）A.離心 B.滅活的病毒 C.電刺激 D.振動(dòng)2、融合后的雜交細(xì)胞的遺傳物質(zhì)有何特點(diǎn)（ ）A.具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞的遺傳信息 B.能無(wú)限增殖 C.可形成新個(gè)體 D.培養(yǎng)過(guò)程會(huì)貼壁3、動(dòng)物細(xì)胞融合的作用中最重要的是（ ）A.克服遠(yuǎn)源雜交不親和 B.制備單克隆抗體 C.培育新物種 D.生產(chǎn)雜種細(xì)胞 BBA8PPT學(xué)習(xí)交流第8頁(yè)，共25頁(yè)。強(qiáng)調(diào)：效應(yīng)B淋巴細(xì)胞是能夠產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞，下文將其簡(jiǎn)稱(chēng)為B淋巴細(xì)胞抗體：能夠與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白。能產(chǎn)生抗體的細(xì)胞是漿細(xì)胞（即效應(yīng)

4、B細(xì)胞）。溫故知新二、單克隆抗體B細(xì)胞效應(yīng)B細(xì)胞記憶B細(xì)胞分化9PPT學(xué)習(xí)交流第9頁(yè)，共25頁(yè)?？贵w的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法抗原 反復(fù)注射動(dòng)物從動(dòng)物的血清中分離抗體該法制備抗體的缺點(diǎn)：產(chǎn)量低、純度低，且抗體的特異性差、靈敏度低。如何解決這個(gè)問(wèn)題呢？單克隆抗體！10PPT學(xué)習(xí)交流第10頁(yè)，共25頁(yè)。讀下面一段資料，找出單克隆抗體的概念 人們發(fā)現(xiàn)，在動(dòng)物發(fā)生免疫反應(yīng)的過(guò)程中，體內(nèi)的B細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬(wàn)種以上的特異性抗體，但是每個(gè)B細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須用單個(gè)B細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖，即克隆。1、單克隆抗體的概念單克隆抗體：?jiǎn)蝹€(gè)B細(xì)胞(漿細(xì)胞)克隆產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單

5、一、特異性強(qiáng)的抗體11PPT學(xué)習(xí)交流第11頁(yè)，共25頁(yè)。提示1：對(duì)B細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)可行嗎？提示2：我們所學(xué)的哪種細(xì)胞是可以無(wú)限增殖的？問(wèn)題：如何大量生產(chǎn)單克隆抗體？請(qǐng)嘗試設(shè)計(jì)一個(gè)方案。2、單克隆抗體的制備12PPT學(xué)習(xí)交流第12頁(yè)，共25頁(yè)。一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體 骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖雜交瘤細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)設(shè)計(jì)方案：動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)單克隆抗體 既能產(chǎn)生特異性抗體， 又能大量增殖的細(xì)胞1975年英國(guó)科學(xué)家米爾斯坦和柯勒的實(shí)驗(yàn)13PPT學(xué)習(xí)交流第13頁(yè)，共25頁(yè)。為什么給小鼠注射特定的抗原蛋白？ 會(huì)有幾種融合方式？ 雜交瘤細(xì)胞是如何篩選出來(lái)的？有何特點(diǎn)？ 是否所有的雜交瘤細(xì)胞都能

6、產(chǎn)生專(zhuān)一性抗體？ 如何大規(guī)模進(jìn)行培養(yǎng)得到大量的單克隆抗體？14PPT學(xué)習(xí)交流第14頁(yè)，共25頁(yè)。BB 、B瘤 、瘤瘤 （B、瘤）（一選）選擇性培養(yǎng)基：只有雜交瘤細(xì)胞才能存活獲得產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B細(xì)胞（二選）：選能產(chǎn)生所需專(zhuān)一抗體的雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞特點(diǎn)：既能產(chǎn)生特異性抗體，又能大量增殖。15PPT學(xué)習(xí)交流第15頁(yè)，共25頁(yè)。單抗制備過(guò)程分哪幾步？請(qǐng)用箭頭把以下代表單克隆抗體制備過(guò)程步驟的圖解的字母按正確順序連接起來(lái)。順序是？ 16PPT學(xué)習(xí)交流第16頁(yè)，共25頁(yè)。3、單克隆抗體的應(yīng)用診斷試劑最廣泛應(yīng)用準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)，靈敏度高，并能大

7、量制備。17PPT學(xué)習(xí)交流第17頁(yè)，共25頁(yè)?！吧飳?dǎo)彈” 單克隆抗體藥物 單抗導(dǎo)向，藥物為彈頭治療疾病和運(yùn)載藥物主要用于治療癌癥治療，單克隆抗體作為載體，運(yùn)載抗癌藥物，形成“生物導(dǎo)彈”，準(zhǔn)確殺傷癌變細(xì)胞。18PPT學(xué)習(xí)交流第18頁(yè)，共25頁(yè)。兩個(gè)過(guò)程動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程單克隆抗體制備過(guò)程三個(gè)“一”一個(gè)誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法 滅活病毒一個(gè)新細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞一個(gè)優(yōu)勢(shì)單克隆抗體特異性 強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)勢(shì)本節(jié)小結(jié)重點(diǎn)19PPT學(xué)習(xí)交流第19頁(yè)，共25頁(yè)。1、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是 （ ） A.經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞 C.經(jīng)過(guò)免疫的

8、T淋巴細(xì)胞 B.不經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞 D.不經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞2、單克隆抗體是由下列哪種細(xì)胞產(chǎn)生的 （ ）A. B淋巴細(xì)胞 BT淋巴細(xì)胞 C骨髓瘤細(xì)胞 D雜交瘤細(xì)胞AD20PPT學(xué)習(xí)交流第20頁(yè)，共25頁(yè)。3、用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體，下列實(shí)驗(yàn)步驟中錯(cuò)誤的是（ ）A將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞B用纖維素酶處理B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞C用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合D篩選雜交細(xì)胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體B21PPT學(xué)習(xí)交流第21頁(yè)，共25頁(yè)。4、(1)若A細(xì)胞是小鼠骨髓瘤細(xì)胞，則B細(xì)胞是取自小鼠體

9、內(nèi)的 細(xì)胞，從小鼠體內(nèi)提取分離該細(xì)胞之前，應(yīng)給小鼠注射_類(lèi)物質(zhì)。（2）d過(guò)程是一個(gè)_過(guò)程，該過(guò)程的進(jìn)行常用_或_的誘導(dǎo)。(3)假設(shè)僅考慮某兩個(gè)細(xì)胞的融合，則可形成 種類(lèi)型的C細(xì)胞，因此需用_培養(yǎng)基篩選出D細(xì)胞用于培養(yǎng)，D細(xì)胞的名稱(chēng)是 ，其特點(diǎn)是_。效應(yīng)B 抗原 細(xì)胞融合 聚乙二醇選擇性 3既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體 雜交瘤細(xì)胞滅活的病毒 22PPT學(xué)習(xí)交流第22頁(yè)，共25頁(yè)。(4)在培養(yǎng)時(shí)通過(guò)_分裂方式大量繁殖。D細(xì)胞體外培養(yǎng)需要注意的條件是（要求答5項(xiàng)）_。（5）單克隆抗體在疾病的診斷、治療和預(yù)防方面，與常規(guī)抗體相比，其特點(diǎn)是_。特異性強(qiáng)、靈敏度高 有絲 無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境；充足的營(yíng)養(yǎng)；適宜的溫度和pH；適宜的氣體環(huán)境 23PPT學(xué)習(xí)交流第23頁(yè)，共25頁(yè)。單抗制備過(guò)程分哪幾步？請(qǐng)用箭頭把以下代表單克隆抗體制備過(guò)程步驟的圖解的字母按正確順序連接起來(lái)。順序是？ 24PPT學(xué)習(xí)交流第24頁(yè)，共25頁(yè)。5、右圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的實(shí)驗(yàn)方案。據(jù)圖回答：（1）該方案能達(dá)到預(yù)