甲狀腺免疫組化課件

1、甲狀腺免疫組化 -甲狀腺免疫組化的意義甲狀腺腫瘤是頸部最常見腫瘤之一，占頸部腫瘤的50。近年來，甲狀腺癌的發(fā)病率在全球范圍內(nèi)有所上升，尤其在沿海地區(qū)。由于正常人群中可捫及的甲狀腺結(jié)節(jié)可達4，B超普查可達67，而僅惡性或出現(xiàn)癥狀的大結(jié)節(jié)需要手術(shù)，因此在大量良性結(jié)節(jié)中篩選出惡性腫瘤，就顯得尤為重要。雖然診療技術(shù)的進步，甲狀腺腫塊檢出及手術(shù)明顯增多，但細針穿刺細胞學(xué)檢查仍被認為是目前術(shù)前診斷中經(jīng)濟而準確性最高的細胞病理學(xué)檢查。甲狀腺病變臨床病理診斷中經(jīng)典型乳頭狀癌由于有乳頭狀結(jié)構(gòu)及細胞核特征、沙礫體等特征診斷較為容易，而濾泡型乳頭狀癌由于缺乏乳頭結(jié)構(gòu)，往往標(biāo)準難以掌握而造成過診2；濾泡性癌的診斷更依

2、賴于包膜及血管侵犯，由于FNA（甲狀腺活檢）內(nèi)在的缺陷，包膜及血管侵犯常常受限于取材不易看到而漏診，并且對甲狀腺濾泡樣病變即濾泡性腺瘤、濾泡性癌、濾泡型乳頭狀癌及增生結(jié)節(jié)間的鑒別仍較為困難，而它們約占所有FNA標(biāo)本的10301,3。因此極需要尋找一些輔助手段協(xié)助臨床病理診斷。人們試圖尋找有惡性甲狀腺腫瘤相關(guān)，可以協(xié)助診斷的腫瘤標(biāo)記物，其中包括Galectin-3,TPO,CK19,CD57等。 -Gal3是半乳糖苷結(jié)合蛋白，參與許多生理、病理發(fā)生過程，包括細胞生長、細胞黏附、炎癥反應(yīng)、免疫調(diào)節(jié)、腫瘤轉(zhuǎn)移以及細胞凋亡等作用，較多認為正常甲狀腺及結(jié)節(jié)性甲狀腺腫、腺瘤等良性病變中不表達Gal-34，

3、而乳頭狀癌幾乎所有均為Gal3陽性。 Bartolazzi等回顧性研究1009例甲狀腺標(biāo)本和前瞻性分析226例FNA標(biāo)本，94.2（293/311）的惡性腫瘤表達Gal3，乳頭狀癌中達97.0（195/201）， 92.5（37/40）微小進展性濾泡狀癌中陽性表達，而在結(jié)節(jié)性甲狀腺中及甲狀腺炎中無一例陽性表達5。但濾泡性癌各家報道不一 。亦有人認為Gal-3是濾泡性癌尤其是微小浸潤性癌的一個重要的識別標(biāo)記6。 -甲狀腺過氧化物酶(TPO)是甲狀腺激素合成過程中的重要物質(zhì)。TPO在碘氧化、酪氨酸碘化以及碘化酪氨酸偶聯(lián)至甲狀腺蛋白上形成四碘甲狀腺原氨酸(T4)和三碘甲狀腺原氨酸(T3)的合成中起重

4、要的催化作用。許多研究認為在良性甲狀腺結(jié)節(jié)中，TPO陽性率為80 以上，而惡性結(jié)節(jié)陽性率不足207。 -CK19是一種相對分子質(zhì)量低的角蛋白，可用于甲狀腺鑒別診斷。Miettinen等8 認為CK19可區(qū)別乳頭狀癌和乳頭狀增生，CK19在經(jīng)典型乳頭狀癌呈強、中等陽性；在乳頭狀增生時，其乳頭對CK19的表達明顯弱于經(jīng)典型乳頭狀癌，為陰性、弱陽性。兩者之間的不表達，說明CK19可作為這兩種病變的一種鑒別指標(biāo)。Baloch等9 其認為對濾泡型乳頭狀癌和其他濾泡性病變亦有區(qū)別作用。CK19在濾泡性乳頭狀痛中主要為中一強陽性，而在濾泡性癌中主要為陰性或弱陽性，CK19在這兩種病變中表達的差異性，說明CK

5、19對這兩類病變有鑒別診斷價值。 -CD57是存在于細胞膜上或(和)細胞漿中的一種糖蛋白，也稱為鞘磷脂相關(guān)糖蛋白(Myelineassociatedglycoprotein，MAG)。CD57在鞘磷脂蛋白中含量很少，人類CD57的分子量約為110KD左右。編碼的多肽由626個氨基酸組成，且含有9個潛在的糖結(jié)合位點。CD57的生物學(xué)功能尚不清楚，可能是在胚胎發(fā)育過程中多能上皮細胞表達的一種抗原決定簇，起著粘附分子的作用，促進細胞間或細胞與基質(zhì)間的相互作用。研究表明，來源于神經(jīng)外胚層組織的腫瘤、神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤、類癌、前列腺癌及皮膚汗腺癌均表達CD57，而肝臟、乳腺、膀胱、橫紋肌等結(jié)締組織均不表達C

6、D57。有研究認為CD57有助于鑒別分化性甲狀腺癌與甲狀腺良性疾病，Khan等分析274例甲狀腺標(biāo)本，CD57在95的甲狀腺癌中陽性表達，濾泡狀腺瘤中27，膠質(zhì)結(jié)節(jié)中1010。Chandan等11對50例FNA標(biāo)本研究發(fā)現(xiàn)CD57對乳頭狀癌的敏感性達91，特異性達100，陽性預(yù)測率100。 -Galectin-3、CK19和MC（間皮瘤相關(guān)性抗原）蛋白在甲狀腺乳頭狀癌和濾泡癌中強表達,在良性病變中不表達或弱表達,其表達差異具有顯著性意義(P0.01).結(jié)論 Galectin-3、CK19和MC蛋白是甲狀腺癌較好的標(biāo)記物,對提高甲狀腺癌診斷準確性及甲狀腺良、惡性病變的鑒別診斷均具有重要意義.3種

7、抗體聯(lián)合應(yīng)用效果更好. -甲狀腺球蛋白(Tg)是一種分子量為660ku的糖蛋白，具有較高的組織特異性，90%以上濾泡上皮源性癌呈陽性表達，但陽性程度有所不同。降鈣素(CT)是甲狀腺C細胞合成的內(nèi)分泌激素，主要在甲狀腺髓樣癌以及C細胞增生性病變的診斷中呈陽性表達。Tg和CT這兩種免疫組化試劑價格不貴，操作方法容易掌握，影響因素不多，陽性率高表達，廣泛適合運用于常規(guī)活檢診斷工作中，對于甲狀腺乳頭狀癌與甲狀腺髓樣癌的診斷及鑒別診斷有重要價值 -CD31血管內(nèi)皮標(biāo)志，這里陽性表示看見血管內(nèi)浸潤。D240 淋巴管內(nèi)皮標(biāo)志，判斷有無淋巴管增生和淋巴管內(nèi)浸潤。CD34 原始間質(zhì)細胞起源標(biāo)志，可用于標(biāo)記非內(nèi)皮性血管和部分腫瘤。Ki67屬于低增殖 TG用于標(biāo)記甲狀