(動(dòng)物傳染病學(xué))豬偽狂犬病課件

1、(動(dòng)物傳染病學(xué)）豬偽狂犬病由偽狂犬病毒引起的家畜和多種野生動(dòng)物的急性傳染病。豬是其貯存宿主和傳染源。新生仔豬表現(xiàn)神經(jīng)癥狀，還可侵害消化系統(tǒng)。成年豬常為隱性感染。妊娠母豬感染后可引起流產(chǎn)、死胎及呼吸系統(tǒng)癥狀，無(wú)奇癢。公豬表現(xiàn)為繁殖障礙和呼吸系統(tǒng)癥狀。1.概述牛、羊、貓、犬、許多野生動(dòng)物、肉食動(dòng)物及野生嚙齒類(lèi)等動(dòng)物發(fā)病后通常具有發(fā)熱、奇癢及腦脊髓炎等典型癥狀，均為致死性感染，但呈散發(fā)形式。人對(duì)偽狂犬病毒無(wú)易感性。2. 歷史偽狂犬病在全世界廣泛分布。早在1813年美國(guó)就有學(xué)者描述該病。直到1902年匈牙利微生物學(xué)家Aladar Aujeszky才第一次較為詳細(xì)的描述了該病，提出由一種病毒引起，并將其

2、與狂犬病區(qū)分開(kāi)來(lái)。故本病也稱(chēng)為Aujeszky氏病。二十世紀(jì)前半葉以來(lái)，偽狂犬病已成為東歐及巴爾干半島如匈牙利、前捷克斯洛伐克、保加利亞、前南斯拉夫等國(guó)家養(yǎng)豬業(yè)的重要疾病。大多數(shù)西歐國(guó)家和美國(guó)，1960年以前從豬群和牛群中分離到偽狂犬病病毒，對(duì)豬的感染極溫和，對(duì)養(yǎng)豬業(yè)的經(jīng)濟(jì)損失不大。六七十年代，毒力增強(qiáng)的毒株，導(dǎo)致暴發(fā)的次數(shù)顯著增加，各年齡的豬均可發(fā)病。偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus, PRV）屬于皰疹病毒科,-皰疹病毒亞科,豬皰疹病毒I型。基因組為線(xiàn)狀雙股DNA。3.病原學(xué)帶囊膜的完整病毒粒子呈圓形，直徑為150180nm，無(wú)囊膜的核衣殼呈二十面體對(duì)稱(chēng)，直徑約105110

3、nm。囊膜表面有呈放射狀排列的纖突。偽狂犬病病毒粒子形態(tài)偽狂犬病毒與其它皰疹病毒類(lèi)似，呈圓形或橢圓形，直徑約180nm左右。 偽狂犬病毒粒子結(jié)構(gòu)模式圖 感染豬在發(fā)熱期，其鼻液、唾液、奶、陰道等分泌物以及血液、實(shí)質(zhì)器官中都含有病毒。PRV只有一種血清型，但不同毒株在毒力和生物學(xué)特征方面存在著差異。PRV具有泛嗜性特點(diǎn)，在多種組織細(xì)胞培養(yǎng)物可以增殖，并能產(chǎn)生核內(nèi)包涵體。PRV毒力由多種基因控制，其中TK基因是最主要的毒力基因。糖蛋白gE，gC，gD等也參與病毒的感染。4.流行病學(xué)傳染源：病豬、帶毒豬以及帶毒鼠類(lèi)為重要傳染源?？赏ㄟ^(guò)流產(chǎn)胎兒、陰道分泌物和胎盤(pán)傳染。野毒感染豬、弱毒疫苗免疫豬都會(huì)導(dǎo)致潛

4、伏感染。在特定條件的刺激或環(huán)境壓力下如販運(yùn)、分娩等，可導(dǎo)致潛伏狀態(tài)的病毒復(fù)活、擴(kuò)散。傳播途徑：水平傳播：健康豬與病豬、帶毒豬直接接觸可感染。亦可經(jīng)消化道，皮膚傷口傳染。配種時(shí)可傳染?？山?jīng)空氣傳播，但具體傳播距離尚不清楚。垂直傳播：妊娠母豬感染后通過(guò)胎盤(pán)傳給胎兒致胎兒死亡；此外，仔豬可通過(guò)吸吮急性感染期母豬的乳汁而感染。易感動(dòng)物：豬是貯存宿主，其它動(dòng)物如牛、羊、犬、貓、家兔、小白鼠、水貂、狐等多種家畜和野生動(dòng)物也可感染。在豬呈暴發(fā)流行，但豬的易感性與日齡有關(guān)，癥狀也有不同的特點(diǎn)。其中以哺乳仔豬最易感，且死亡率極高，成年豬多隱性感染，可長(zhǎng)期排毒。流行季節(jié)：具有一定季節(jié)性，多發(fā)生在寒冷季節(jié)，但其它季

5、節(jié)也有發(fā)生。仔豬新生仔豬：病情最重，癥狀最明顯，多以中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生障礙為主征。大量死亡，15日齡以?xún)?nèi)仔豬病死率為100%。表現(xiàn)高熱、食欲廢絕、呼吸困難、嘔吐腹瀉、抑郁震顫，共濟(jì)失調(diào)，抽搐，劃水，昏迷以至衰竭死亡。34周齡仔豬：主要臨診癥狀同上，病程略長(zhǎng)，多便秘，病死率可達(dá)4060%。斷奶仔豬：主要表現(xiàn)為神經(jīng)癥狀，震顫，共濟(jì)失調(diào)，拉稀，嘔吐等。發(fā)病率2040%，死亡率1020%。5.臨床癥狀潛伏期一般為3-6天。感染豬的臨床癥狀隨著年齡不同和感染毒株的毒力不同有很大的差異。豬偽狂犬?。汉筌|麻痹，有間歇性肌肉痙攣，臥地不起，不能運(yùn)動(dòng)豬偽狂犬病：癲癇樣發(fā)作，病豬肌肉痙攣，倒地呈現(xiàn)游泳狀姿勢(shì)。豬偽狂

6、犬?。鹤胸i神經(jīng)癥狀。豬偽狂犬?。鹤胸i表現(xiàn)神經(jīng)癥狀，四肢呈劃水狀。豬偽狂犬?。翰∝i神經(jīng)緊張，眼發(fā)直。豬偽狂犬病：仔豬神經(jīng)癥狀，頂撞墻壁。豬偽狂犬病：仔豬的瘙癢。病豬皮膚感覺(jué)異常、瘙癢，用后蹄蹬扒發(fā)癢的部位。豬偽狂犬?。鹤胸i圓圈運(yùn)動(dòng)。豬偽狂犬病：新生仔豬大量死亡。某大型養(yǎng)豬場(chǎng)發(fā)生豬偽狂犬病，大批乳豬相繼死亡。1日齡 3日齡 豬偽狂犬?。盒律胸i死亡。豬偽狂犬?。翰∝i橫臥于地，作“劃船”動(dòng)作。豬偽狂犬病：病豬呈抽搐癥狀，角弓反張?；钾i眼部明顯水腫，頭部皮膚常有斑疹和結(jié)痂。成年豬2月齡以上豬，臨診癥狀輕微或隱性感染，表現(xiàn)一過(guò)性發(fā)熱，咳嗽，便秘，有的病豬嘔吐，多在34d恢復(fù)。如出現(xiàn)體溫繼續(xù)升高，病豬又出

7、現(xiàn)神經(jīng)癥狀，震顫、共濟(jì)失調(diào)，頭向上抬，背拱起，倒地后四肢痙攣，間歇性發(fā)作。偶爾也可引起死亡。 豬偽狂犬?。翰∝i精神萎靡，背毛粗糙，生長(zhǎng)不良及消瘦，嚴(yán)重者有明顯呼吸癥狀。種豬妊娠母豬：咳嗽，發(fā)熱，精神不振，常發(fā)生流產(chǎn)，產(chǎn)木乃伊胎、死胎和弱仔，以產(chǎn)死胎為主。流產(chǎn)、死產(chǎn)的胎兒大小相差不顯著，無(wú)畸形胎，死產(chǎn)胎兒有不同程度的軟化，甚至娩出的胎兒全部木乃伊化。寒冷季節(jié)即冬末初春多發(fā)。種母豬：屢配不孕、返情率高達(dá)90%。公豬：睪丸腫脹、萎縮，種用性能降低或喪失。豬偽狂犬病：在分娩預(yù)定期前產(chǎn)出的死胎（左）和木乃伊胎（右）木乃伊胎，母豬超過(guò)分娩期后產(chǎn)出的胎兒全部為黑褐色的木乃伊胎。豬偽狂犬?。核捞ズ湍灸艘撂?。豬

8、偽狂犬病：死胎和木乃伊胎。豬偽狂犬?。核捞ズ湍灸艘撂?。豬偽狂犬病：死胎和木乃伊胎。垂直感染的新生乳豬全身震顫，肌肉痙攣，運(yùn)動(dòng)障礙。6.病理變化一般無(wú)特征性病變，有時(shí)可見(jiàn)以下病變：腦膜明顯充血、出血和水腫，腦脊液增多。肝和脾均有散在白色壞死點(diǎn)。腎臟有針尖狀出血點(diǎn)。肺水腫、有小葉性間質(zhì)性肺炎。胃黏膜有卡他性炎癥、胃底黏膜出血。豬偽狂犬病：腦實(shí)質(zhì)出現(xiàn)針尖大小出血點(diǎn)。豬偽狂犬?。翰∝i軟腦膜充血，腦溝內(nèi)積有出血性水腫液。腦膜水腫，病豬的腦膜血管擴(kuò)張充血、瘀血和水腫，腦脊液增多豬偽狂犬?。翰∝i腦出血。豬偽狂犬?。罕馓殷w化膿，牙齦出血，糜爛。豬偽狂犬?。褐夭∝i扁桃體及咽喉頭明顯壞死。扁桃體壞死，內(nèi)有壞死灶，

9、舌根及咽喉黏膜被覆厚層黃白色假膜。豬偽狂犬?。焊螇乃溃鲅?、腫大，肝被膜下有大量針尖大灰白色壞死灶豬偽狂犬病：肝臟散在白色壞死灶。豬偽狂犬?。浩⑴K散在壞死結(jié)節(jié)。豬偽狂犬?。耗I出血和壞死，腎淤血、腫脹，被膜下有大量點(diǎn)狀出血和灰白色壞死灶。豬偽狂犬?。耗I臟散在出血斑。豬偽狂犬?。耗I上腺可見(jiàn)散在的壞死點(diǎn)。豬偽狂犬?。悍吸c(diǎn)狀、片狀出血。豬偽狂犬?。盒∧c出血、瘀血，呈紅褐色，表面散發(fā)灰白色壞死灶。組織學(xué)變化主要見(jiàn)中樞神經(jīng)系統(tǒng)呈現(xiàn)彌漫性非化膿性腦膜炎，有明顯血管套和膠質(zhì)細(xì)胞壞死。腦神經(jīng)細(xì)胞、鼻咽黏膜、脾和淋巴結(jié)內(nèi)有核內(nèi)嗜酸性包涵體。有壞死灶的扁桃體中，隱窩上皮細(xì)胞核內(nèi)常有大量嗜酸性核內(nèi)包涵體。組織學(xué)病變大

10、腦的核內(nèi)包涵體，大腦的神經(jīng)細(xì)胞中有不規(guī)則的嗜酸性核內(nèi)包含體（HEx400）扁桃體內(nèi)的核內(nèi)包含體（HEx400）偽狂犬病的包涵體一般為無(wú)定形、均質(zhì)的凝塊，不規(guī)則而輕度嗜酸性，以明暈或泡狀暈與核膜分離。注意觀(guān)察鑒別！7.診斷病毒分離鑒定：豬、牛、兔、犬、貓、猴、駒和雪貂的腎細(xì)胞。牛的睪丸細(xì)胞。雞胚成纖維細(xì)胞。豬的PK-15、IBRS-2細(xì)胞，猴的Vero細(xì)胞。倉(cāng)鼠的BHK-21細(xì)胞。根據(jù)病豬的發(fā)病特點(diǎn)，臨床癥狀和病理變化，特別是廣泛性非化膿性腦炎及嗜酸性包涵體的檢出而作出初步診斷。確診需要借助于實(shí)驗(yàn)室檢查。動(dòng)物接種：病料直接接種家兔、小鼠作診斷。注射部位皮膚發(fā)生奇癢，局部脫毛，破損出血，發(fā)炎。血清

11、學(xué)診斷：通過(guò)酶聯(lián)免吸附試驗(yàn)、乳膠凝集試驗(yàn)、血清中和試驗(yàn)或瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)判定感染狀態(tài)。病原學(xué)診斷：熒光抗體檢查和PCR。豬偽狂犬病病毒接種家兔后表現(xiàn)奇癢癥狀。豬偽狂犬病病毒接種小鼠后表現(xiàn)神經(jīng)癥狀。偽狂犬病乳膠凝集試驗(yàn)（LAT） 上圖：偽狂犬病LAT診斷試劑盒下圖：LAT檢測(cè)豬偽狂犬病血清抗體 陽(yáng)性反應(yīng) 陰性反應(yīng)全病毒抗原致敏乳膠gG蛋白致敏乳膠gG基因缺失疫苗免疫血清全病毒疫苗免疫血清偽狂犬病陰性血清偽狂犬病gG-LAT乳膠凝集試驗(yàn)鑒別診斷方法偽狂犬病gE鑒別酶聯(lián)免疫診斷試劑盒偽狂犬病gG鑒別酶聯(lián)免疫診斷試劑盒A：正常RK細(xì)胞（兔腎細(xì)胞）；B：PRV在RK細(xì)胞上形成病變血清中和試驗(yàn)（SNT） 熒光

12、抗體檢測(cè)扁桃體隱窩上皮冰凍切片呈現(xiàn)偽狂犬病病毒陽(yáng)性。免疫sABC陽(yáng)性病毒抗原位于神經(jīng)細(xì)胞，免疫sABC呈暗棕黃色強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)（免疫sABC x400） 1 2 3 4 5 6 7 8 920001000 1.Takara DL-2000 Marker； 2. 扁桃體； 3. 胸腺； 4. 頸部淋巴結(jié)；5. 腹股溝淋巴結(jié)6. 大腦； 7. 小腦；8. 嗅球；9. 脊髓100250偽狂犬病的PCR診斷方法偽狂犬病病毒不同毒株感染動(dòng)物家兔接種野毒后表現(xiàn)奇癢，死亡。家兔接種gG缺失株后表現(xiàn)搔癢，但不死亡。家兔接種gE缺失株后不表現(xiàn)搔癢，也不死亡。犬接種gE單缺失株后死亡。天然弱毒株Bartha株對(duì)犬安全

13、。野毒自然感染與疫苗免疫動(dòng)物的鑒別診斷隨著偽狂犬病基因缺失疫苗的應(yīng)用，在臨床上已能區(qū)分疫苗免疫動(dòng)物與野毒感染動(dòng)物。偽狂犬病的鑒別診斷是在使用偽狂犬病的基因標(biāo)志疫苗的前提下應(yīng)用的一種診斷方法。偽狂犬病TK-/gE-（或TK-/gG-）基因缺失弱毒疫苗 偽狂犬病gE（或gG）乳膠凝集試驗(yàn)鑒別診斷方法偽狂犬病gE（或gG）ELISA鑒別診斷方法偽狂犬病病毒的糖蛋白偽狂犬病病毒已發(fā)現(xiàn)11種糖蛋白：gB、gC、gD、gE、gG、gH、gI、gK、gL、gM和gN，除gG分泌到細(xì)胞外，其它均定位于囊膜上。gC、gE、gG、gI和gM的缺失不影響病毒在體外復(fù)制，為病毒復(fù)制非必需基因。gE基因決定著病毒的毒力

14、，影響病毒的神經(jīng)嗜性?；騡G 和gE在偽狂犬病病毒PrV基因組中的位置偽狂犬病的基因缺失疫苗是在TK基因（主要毒力基因）缺失的基礎(chǔ)上，將病毒的非必需糖蛋白基因（gE或gG）進(jìn)行缺失，得到的突變株就不能產(chǎn)生被缺失的糖蛋白，但又不影響病毒在細(xì)胞上的增殖與免疫原性。將這種基因缺失疫苗注射動(dòng)物后，機(jī)體不能產(chǎn)生抗缺失蛋白的抗體。但野毒感染的機(jī)體仍可以產(chǎn)生該蛋白的抗體。因此，可通過(guò)血清學(xué)方法將自然感染野毒的血清學(xué)陽(yáng)性豬與注苗豬區(qū)分開(kāi)來(lái)。 全病毒抗原致敏乳膠gG蛋白致敏乳膠gG基因缺失疫苗免疫血清全病毒疫苗免疫血清偽狂犬病陰性血清偽狂犬病gG-LAT乳膠凝集試驗(yàn)鑒別診斷方法偽狂犬病gE鑒別酶聯(lián)免疫診斷試劑

15、盒偽狂犬病gG鑒別酶聯(lián)免疫診斷試劑盒引起神經(jīng)癥狀狂犬病偽狂犬病乙型腦炎傳染性腦脊髓炎李氏桿菌病水腫病鏈球菌病豬丹毒弓形蟲(chóng)。引起繁殖障礙細(xì)小病毒感染乙型腦炎偽狂犬病藍(lán)耳病豬瘟鏈球菌病布魯菌病附紅細(xì)胞體。鑒別診斷豬偽狂犬病從致病本質(zhì)上來(lái)說(shuō)屬于繁殖障礙性疾病從臨床表現(xiàn)看又呈現(xiàn)明顯的神經(jīng)癥狀因此，本病應(yīng)注意與能引起豬神經(jīng)癥狀和繁殖障礙的疾病加以區(qū)別。8.防制免疫預(yù)防：基因缺失疫苗免疫程序：仔豬、乳豬及育肥豬：首免日齡根據(jù)母源抗體水平而定，可1日齡滴鼻免疫或斷奶時(shí)免疫或7080日齡免疫，一個(gè)月后加強(qiáng)免疫一次。種豬：根據(jù)當(dāng)?shù)匾咔楹蛯?shí)際情況每年免疫24次。 偽狂犬病TK-/gE-基因缺失弱毒疫苗 偽狂犬病T

16、K-/gG-基因缺失弱毒疫苗滅活疫苗免疫程序：種豬：第1次注射后，間隔46周后加強(qiáng)免疫1次。以后每6個(gè)月注射1次，產(chǎn)前1個(gè)月加強(qiáng)免疫1次。留作種用的斷奶仔豬：斷奶時(shí)注射1次，間隔46周后加強(qiáng)免疫1次，以后按種豬免疫程序進(jìn)行。育肥用斷奶仔豬：斷奶時(shí)注射1次，直到出欄。綜合防制措施： 嚴(yán)格控制犬、貓、鳥(niǎo)、鼠類(lèi)和其它禽類(lèi)進(jìn)入豬場(chǎng)，嚴(yán)格控制人員來(lái)往，消毒措施及血清學(xué)監(jiān)測(cè)。偽狂犬病根除計(jì)劃： 偽狂犬病的根除計(jì)劃是通過(guò)使用基因缺失疫苗與相應(yīng)的鑒別診斷來(lái)進(jìn)行的，通過(guò)逐步隔離和淘汰自然感染的野毒血清學(xué)陽(yáng)性豬，建立和擴(kuò)大健康豬群，從而達(dá)到根除偽狂犬病的目的。目前已宣布根除了偽狂犬病的國(guó)家有英國(guó)、丹麥、芬蘭、瑞典、捷克共和國(guó)和斯洛文尼亞等，美國(guó)、德國(guó)、法國(guó)、意大利、阿根廷等國(guó)亦正在實(shí)施偽狂犬病