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1、宮頸癌檢查技術(shù)操作陰道宮頸分泌物的檢查(一)陰道/宮頸分泌物檢查方法及部位檢查方法 取材部位及方法 檢查目的 陰道分泌物濕片鏡檢 陰道側(cè)壁上1/3 檢查有無(wú)滴蟲(chóng)、假菌絲或芽生孢子、線索細(xì)胞及清潔度 陰道分泌物涂片革蘭染色鏡檢 陰道側(cè)壁上1/3 線索細(xì)胞、加德納菌、厭氧菌、假菌絲或芽生孢子、乳桿菌等 宮頸分泌物涂片革蘭染色鏡檢 1-2cm,稍用力轉(zhuǎn)動(dòng),停留10-30秒后取出 中性粒細(xì)胞、淋病奈瑟菌 /宮頸分泌物檢查方法及部位(二)陰道分泌物檢查1.胺試驗(yàn)原理細(xì)菌性陰道病時(shí),正常菌群乳酸桿菌減少或消失,而陰道加德納菌、厭氧菌及人型支原體等微生物過(guò)度生長(zhǎng),導(dǎo)致乳酸桿菌產(chǎn)生的乙酸濃度降低,而厭氧菌的代
2、謝產(chǎn)物胺類(lèi)如腐胺、尸胺和三甲胺增多,使陰道分泌物PH值增高。在分泌物中滴加10KOH可導(dǎo)致游離氨釋放,產(chǎn)生典型的魚(yú)腥樣氣味,該試驗(yàn)被稱(chēng)為胺試驗(yàn)。標(biāo)本采集 插入窺器,暴露陰道和宮頸后,觀察分泌的色澤,用拭子從陰道側(cè)壁上中1/3處取分泌物。方法和結(jié)果.PH值測(cè)定 使用PH范圍在的精密PH試紙。用拭子取出陰道分泌物后,直接與PH試紙接觸讀PH值。也可在窺器從陰道取出后,將PH試紙直接接觸其下葉凹窩處分泌物讀PH值。.胺試驗(yàn) 取少量陰道分泌物置于載玻片上,加一滴10%KOH,聞到氨味或魚(yú)腥樣氣味即為胺試驗(yàn)陽(yáng)性。臨床意義 正常成人陰道分泌物呈酸性,PH值為左右。在細(xì)菌性陰道病時(shí)PH值通常4.5。PH值測(cè)
3、定的敏感性較高(92%-97%),但特異性低。陰道分泌物污染了月經(jīng)血、宮頸粘液及患者有滴蟲(chóng)感染時(shí),其PH值亦可增高。2.陰道分泌物濕片鏡檢標(biāo)本采集 插入窺器,暴露陰道和宮頸后,觀察分泌物的色澤,用滅菌拭子從陰道側(cè)壁上1/3處取分泌物。方法與結(jié)果 在載玻片上加1滴或2滴生理鹽水,將陰道分泌物與生理鹽水混合成懸液,加蓋玻片后,在顯微鏡下檢查。.將陰道分泌物加生理鹽水作涂片,用高位鏡檢查,主要依靠上皮細(xì)胞、桿菌與球菌的比例、白細(xì)胞的數(shù)量劃分清潔度。陰道分泌物清潔度分級(jí)清潔度 桿菌 球菌 上皮細(xì)胞 白細(xì)胞 臨床意義 +0-5/HPF 正常 +5-15/HPF 大致正?;蚣?xì)菌性陰道病 +15-30/HP
4、F 提示炎癥 +30/HPF 多見(jiàn)于嚴(yán)重的陰道炎和/宮頸炎盆腔炎 .在低倍鏡(10X10)下檢查,尋找呈典型晃動(dòng)運(yùn)動(dòng)的毛滴蟲(chóng)。.在高倍鏡(10X40)下檢查,觀察假絲酵母菌(孢子和假菌絲)和毛滴蟲(chóng),以及線索細(xì)胞。線索細(xì)胞為陰道上皮細(xì)胞表面吸附或聚集許多球桿菌,使細(xì)胞呈顆粒狀外觀,細(xì)胞邊緣模糊不清呈鋸齒狀。注:將標(biāo)本溶于1滴生理鹽水,并加入1滴10%KOH溶液,更容易識(shí)別假絲酵母菌,因?yàn)镵OH能將其它細(xì)胞溶解。白色念珠菌臨床意義.陰道分泌物清潔度分級(jí)的臨床意義.濕片檢查見(jiàn)到活動(dòng)滴蟲(chóng),可診斷滴蟲(chóng)性陰道炎,但其敏感性?xún)H38%-82%,尤其是對(duì)無(wú)癥狀的滴蟲(chóng)感染者診斷率較低。.濕片中觀察到假菌絲或芽生孢
5、子支持假絲酵母菌性陰道病的診斷,10%KOH濕片檢查的敏感性85%。.一般認(rèn)為當(dāng)線索細(xì)胞占全部上皮細(xì)胞的20%以上時(shí)為線索細(xì)胞陽(yáng)性。根據(jù)線索細(xì)胞能準(zhǔn)確診斷85%-95%的細(xì)菌性陰道。.卵巢功能不足、雌激素減低,陰道上皮增生較差時(shí)可見(jiàn)到陰道桿菌減少,易感染。當(dāng)清潔度為-度時(shí)??赏瑫r(shí)發(fā)現(xiàn)病原微生物,提示存在感染引起的陰道炎和/或?qū)m頸炎、盆腔炎。3.陰道分泌物涂片革蘭染色鏡檢標(biāo)本采集 插入窺器,暴露陰道和宮頸后,觀察分泌物的外觀,用棉拭子從陰道側(cè)壁上1/3處取分泌物。陰道分泌物標(biāo)本采集前24小時(shí)內(nèi)禁止性交、盆浴、陰道灌洗及局部用藥等,以免影響檢查結(jié)果。分泌物經(jīng)固定與革蘭染色后,置于鏡下觀察。結(jié)果判斷
6、 在油鏡(10X100)下檢查涂片,觀察陰道菌群的情況及有無(wú)線索細(xì)胞。正常陰道菌群以乳酸桿菌占優(yōu)勢(shì),可能有少量的球菌和棒狀桿菌。乳酸桿菌為在的革蘭陽(yáng)性桿菌,末端鈍圓或平齊,呈單根、鏈狀排列。細(xì)菌性陰道病時(shí)乳酸桿菌減少或消失,而其它細(xì)菌增多,呈混合菌群。陰道加德納菌為革蘭染色不定性球桿菌,厭氧包括動(dòng)彎桿菌、普氏桿菌或陽(yáng)性球菌。臨床意義 革蘭染色鏡檢觀察細(xì)菌的染色性、形態(tài)和排列,觀察假絲酵母菌孢子和假菌絲。革蘭染色鏡檢觀察陰道分泌物中線索細(xì)胞的敏感性和特異性高于濕片法,分別為89%和93%。(三)宮頸分泌物涂片革蘭染色鏡檢標(biāo)本采集 插入窺器,暴露陰道和宮頸,如果宮頸口外面的分泌物較多,先用滅菌拭子
7、清除過(guò)多的分泌物。將女用取材拭子插入宮頸管內(nèi)1-2cm,稍用力轉(zhuǎn)動(dòng),停留10-30秒后取出。分泌物經(jīng)固定與革蘭染色后,置于顯微鏡下觀察。結(jié)果判斷 在油鏡下(10X100)檢查涂片。注意觀察細(xì)胞類(lèi)型(如上皮細(xì)胞、中性粒細(xì)胞),病原體的染色特性(革蘭陽(yáng)性或陰性)、形狀(球狀或桿狀)、排列及位置(細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞外)等。在中性粒細(xì)胞內(nèi)見(jiàn)到形態(tài)典型的革蘭陰性雙球菌則支持淋菌性宮頸炎的診斷。臨床意義.宮頸分泌物涂片革蘭染色鏡檢多形核白細(xì)胞數(shù)15/HPF,或油鏡下可見(jiàn)每視野多形核白細(xì)胞10個(gè)提示有宮頸感染,為診斷黏液膿性宮頸炎的指標(biāo)之一。.革蘭染色診斷宮頸淋球菌感染與培養(yǎng)的符合率50%-70%,確診需做淋病奈
8、瑟菌培養(yǎng)。(四)淋病奈瑟菌培養(yǎng)標(biāo)本采集 插入窺器,暴露陰道和宮頸,如果宮頸口外面的分泌物較多,先用無(wú)菌棉拭清除過(guò)多的分泌物。將女用取材拭子插入宮頸管內(nèi)1-2cm,稍用力轉(zhuǎn)動(dòng),停留10-30秒后取出。男性尿道分泌物標(biāo)本采集:生理鹽水清洗尿道口,男用拭子插入尿道口1-2cm,停留10余秒鐘,輕輕旋轉(zhuǎn)采集標(biāo)本。結(jié)果判斷 標(biāo)本培養(yǎng)24-48小時(shí)后觀察結(jié)果,48小時(shí)仍無(wú)菌生長(zhǎng)時(shí),可作出淋病奈瑟菌培養(yǎng)陰性的報(bào)告。對(duì)選擇性培養(yǎng)基上分離的可疑菌落應(yīng)作初步鑒定和確證性鑒定。菌落特征,革蘭染色和氧化酶試驗(yàn)是初步鑒定淋球菌的三個(gè)主要指標(biāo)。確證性鑒定是在初步鑒定的基礎(chǔ)上利用生化反應(yīng)將細(xì)菌鑒定到種。 菌落特征:生長(zhǎng)24小時(shí)淋病奈瑟菌菌落直徑大約為0.5-1mm,呈圓形、灰白色、濕潤(rùn)、光滑、半透明呈露滴樣凸起菌落。 氧化酶試驗(yàn):試劑為1%鹽酸四甲基對(duì)苯二胺或1鹽酸二甲基對(duì)苯二胺溶液。在10-15秒內(nèi)出現(xiàn)深紫紅色(二甲基對(duì)苯二胺)或深紫色(四甲基對(duì)苯二胺)即為陽(yáng)性反應(yīng)。淋病奈瑟菌氧化酶試驗(yàn)為陽(yáng)性,但氧化酶反應(yīng)并非特異性試驗(yàn)。所有奈瑟菌屬細(xì)菌及許多其它細(xì)菌亦呈陽(yáng)性。如氧化酶陰性,一般可排除淋病奈瑟菌。革蘭染色 取單個(gè)可疑菌落制備涂片作革蘭染色鏡檢。24小時(shí)的新鮮菌落可見(jiàn)到呈典型腎形的革蘭陰性雙球菌(約占25%),其余呈單個(gè)、四聯(lián)或八疊形。臨床意義 淋病奈瑟菌培養(yǎng)是診斷淋病的“金標(biāo)準(zhǔn)”,對(duì)女性淋病的確認(rèn)應(yīng)
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