高考生物一輪課時(shí)跟蹤檢測(cè)37《微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用》（含詳解）

1、課時(shí)跟蹤檢測(cè)（三十七） 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用一、基礎(chǔ)題點(diǎn)練1下列有關(guān)微生物培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是()A測(cè)定土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)目，常用稀釋涂布平板法進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)B在對(duì)微生物進(jìn)行培養(yǎng)前，需要對(duì)微生物和培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌C酵母菌發(fā)酵過(guò)程產(chǎn)生的酒精，對(duì)其他微生物生長(zhǎng)有一定的抑制作用D分離能分解尿素的細(xì)菌，要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源解析：選B在對(duì)微生物進(jìn)行培養(yǎng)前，需要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，不能對(duì)所培養(yǎng)的微生物進(jìn)行滅菌。2做“微生物的分離與培養(yǎng)”實(shí)驗(yàn)時(shí)，下列敘述正確的是()A高壓滅菌加熱結(jié)束時(shí)，打開(kāi)放氣閥使壓力表指針回到零后，開(kāi)啟鍋蓋B倒平板時(shí)，應(yīng)將打開(kāi)的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)

2、火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落D用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí)，應(yīng)標(biāo)記在皿底上解析：選D在高壓滅菌的操作過(guò)程中，加熱結(jié)束后應(yīng)讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降，待壓力表的指針指到零時(shí)，打開(kāi)放氣閥，旋松螺栓，打開(kāi)蓋子。倒平板時(shí)，用左手將培養(yǎng)皿打開(kāi)一條稍大于瓶口的縫隙，而不是完全取下放到一邊。接種環(huán)經(jīng)火焰灼燒滅菌后應(yīng)在火焰旁冷卻后，再用其挑取菌落。在微生物的培養(yǎng)中，一般將培養(yǎng)皿倒置，在皿底上用記號(hào)筆做標(biāo)記。3下列關(guān)于統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目方法的敘述，錯(cuò)誤的是()A采用平板計(jì)數(shù)法獲得的菌落數(shù)往往少于實(shí)際的菌落數(shù)B當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，一個(gè)活菌會(huì)形成一個(gè)菌落C為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般采用密度較大的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)D在某一濃度下涂布三

3、個(gè)平板，若三個(gè)平板統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)差別不大，則應(yīng)以它們的平均值作為統(tǒng)計(jì)結(jié)果解析：選C當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)活菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，因此統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少。一般選擇菌落數(shù)在30300的平板計(jì)數(shù)，密度過(guò)大會(huì)使計(jì)數(shù)結(jié)果偏小，影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。至少涂布3個(gè)平板，作為重復(fù)組，取其平均值計(jì)數(shù)能增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力和準(zhǔn)確性。4.在涂布有大腸桿菌的培養(yǎng)基上進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)，在a、b、c處分別貼浸有不同抗生素(濃度相同)的無(wú)菌濾紙片，d處濾紙片浸有無(wú)菌水。培養(yǎng)后的結(jié)果如圖所示。以下判斷錯(cuò)誤的是()Aa處抑菌效果小于b處Bb處的濾紙片沒(méi)有瀝干Cc處抗生素?zé)o效Dd為對(duì)照解析：選A培養(yǎng)皿中不同濾紙片四周

4、透明圈的大小不同，透明圈越大，說(shuō)明浸有的抗生素抑菌效果越好。a處的透明圈大于b處；b處不是圓形的透明圈，可能是濾紙片沒(méi)有瀝干，抗生素流出濾紙片；c處無(wú)透明圈，說(shuō)明c處抗生素對(duì)大腸桿菌無(wú)效；d為空白對(duì)照。5(2016江蘇高考)漆酶屬于木質(zhì)素降解酶類，在環(huán)境修復(fù)、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域有著廣泛用途。如圖是分離、純化和保存漆酶菌株的過(guò)程，相關(guān)敘述正確的是(多選)()A生活污水中含有大量微生物，是分離產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品B篩選培養(yǎng)基中需要加入漆酶的底物，通過(guò)菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落C在涂布平板上長(zhǎng)出的菌落，再通過(guò)劃線進(jìn)一步純化D斜面培養(yǎng)基中含有大量營(yíng)養(yǎng)物，可在常溫下長(zhǎng)期保存菌株解析：選BC生活污水中含木質(zhì)素的

5、物質(zhì)相對(duì)較少，產(chǎn)漆酶菌株也較少，不宜作為分離產(chǎn)漆酶菌株的樣品；產(chǎn)漆酶菌株可降解木質(zhì)素，在篩選培養(yǎng)基中加入木質(zhì)素可篩選產(chǎn)漆酶的菌株，篩選時(shí)可通過(guò)菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落；在涂布平板上生長(zhǎng)的菌落可能還有其他雜菌，可再通過(guò)平板劃線法進(jìn)一步純化；對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法，即在20 的冷凍箱中保存。二、高考題型練6回答與微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)有關(guān)的問(wèn)題：(1)在制備固體培養(yǎng)基時(shí)需加入的常用凝固劑是_。若培養(yǎng)基需調(diào)節(jié)pH，則應(yīng)在滅菌之_(填“前”或“后”)調(diào)節(jié)。(2)為防止外來(lái)雜菌入侵，對(duì)_等可采用干熱滅菌法進(jìn)行滅菌。(3)右圖為平板劃線法接種后的示意圖。在劃線接種的整個(gè)操作過(guò)程中，對(duì)接種

6、環(huán)至少需進(jìn)行_次灼燒滅菌。接種后蓋上皿蓋，將平板_放入恒溫箱中培養(yǎng)，這樣放置的目的是_。(4)用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)目時(shí)，每隔一個(gè)“時(shí)間間隔”統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，最后選取_作為結(jié)果，這樣可以防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而遺漏菌落的數(shù)目。解析：(1)制備固體培養(yǎng)基通常加入的凝固劑是瓊脂。培養(yǎng)基若在滅菌后調(diào)pH，可造成污染，故培養(yǎng)基調(diào)pH應(yīng)在滅菌前進(jìn)行。(2)滅菌的方法通常有高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌和灼燒滅菌三種。采用干熱滅菌的通常有玻璃器皿和金屬用具。(3)平板劃線接種過(guò)程中需在接種前、每次劃線后對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌。圖中共接種5個(gè)區(qū)域，故接種環(huán)至少需要進(jìn)行6次灼燒滅菌處理。微生物培養(yǎng)過(guò)程中，易產(chǎn)生冷凝水

7、，為防止水珠滴在培養(yǎng)基表面造成污染，培養(yǎng)時(shí)需將平板倒置。(4)用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)目時(shí)，要以菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄為最終結(jié)果，這樣可以防止因遺漏而導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)結(jié)果偏小。答案：(1)瓊脂前(2)玻璃器皿和金屬用具(3)6倒置避免培養(yǎng)基被污染和防止培養(yǎng)基水分過(guò)快揮發(fā)(4)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄7(郴州質(zhì)檢)分解尿素的微生物廣泛存在于農(nóng)田等土壤中，某生物實(shí)驗(yàn)小組嘗試對(duì)分解尿素的微生物進(jìn)行分離與計(jì)數(shù)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)分解尿素的微生物能產(chǎn)生_酶；配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)以_作為唯一氮源。(2)培養(yǎng)基中添加_作為指示劑，培養(yǎng)后，培養(yǎng)基pH會(huì)_(填“升高”或“降低”)，可使指示劑變紅色。(3)對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌的

8、最適方法是_。(4)該小組在接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先培養(yǎng)一段時(shí)間，這樣做的目的是_；然后將1 mL樣液稀釋10 000倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別涂布0.1 mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板的菌落數(shù)分別為39、42和45。據(jù)此可得出每毫升樣液中分解尿素的微生物活菌數(shù)為_(kāi)個(gè)。解析：(1)分解尿素的微生物能產(chǎn)生脲酶；配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)以尿素作為唯一氮源。(2)在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合成的脲酶分解尿素可產(chǎn)生氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的pH升高，進(jìn)而使酚紅指示劑變紅。(3)對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌的最適方法是過(guò)濾法。(4)在接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先培養(yǎng)一段時(shí)間，其目的是檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅

9、菌是否合格。每毫升樣液中分解尿素的微生物活菌數(shù)(CV)M(394245)30.110 0004.2106(個(gè))答案：(1)脲尿素(2)酚紅升高(3)過(guò)濾法(4)檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格4.21068(桂林調(diào)研)有機(jī)磷農(nóng)藥是用于防治植物病蟲(chóng)害的含磷有機(jī)化合物，廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，有時(shí)會(huì)造成瓜果蔬菜等食品農(nóng)藥殘留超標(biāo)，不少品種對(duì)人、畜的毒性很強(qiáng)，人誤食后如不及時(shí)醫(yī)治就會(huì)危及生命，某班同學(xué)欲從土壤中分離高效降解有機(jī)磷農(nóng)藥的微生物。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)為了獲得能降解有機(jī)磷農(nóng)藥的微生物菌種，可在被有機(jī)磷農(nóng)藥污染的土壤中取樣，并在含有碳源、氮源及_等的選擇培養(yǎng)基上添加_進(jìn)行選擇培養(yǎng)。(2)將獲得的3

10、種待選微生物菌種甲、乙、丙分別接種在1 L含20 mg有機(jī)磷農(nóng)藥的相同培養(yǎng)液中培養(yǎng)(培養(yǎng)液中其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)充裕、條件適宜)，觀察實(shí)驗(yàn)開(kāi)始到微生物停止生長(zhǎng)所用的時(shí)間，甲、乙、丙分別為32小時(shí)、45小時(shí)、16小時(shí)，則應(yīng)選擇微生物_(填“甲”“乙”或“丙”)作為菌種進(jìn)行后續(xù)培養(yǎng)，理由是_。(3)制備固體培養(yǎng)基的基本步驟是計(jì)算_溶化分裝加棉塞包扎_倒平板。(4)若要測(cè)定培養(yǎng)液中選定菌種的菌體數(shù)，既可在顯微鏡下用_直接計(jì)數(shù)，也可選用_法統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)目。解析：(1)微生物生長(zhǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)一般包括水、無(wú)機(jī)鹽、碳源和氮源。因篩選能降解有機(jī)磷農(nóng)藥的微生物，故培養(yǎng)基中需添加適量的有機(jī)磷農(nóng)藥。(2)從觀察實(shí)驗(yàn)開(kāi)始到微生

11、物停止生長(zhǎng)，丙所用時(shí)間最短，說(shuō)明其對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥的降解能力較甲、乙強(qiáng)。(3)制備固體培養(yǎng)基的基本步驟是計(jì)算稱量溶化分裝加棉塞包扎高壓蒸汽滅菌倒平板。(4)菌體數(shù)測(cè)定可通過(guò)顯微鏡利用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)，也可以利用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)量。答案：(1)水和無(wú)機(jī)鹽有機(jī)磷農(nóng)藥(2)丙微生物丙分解有機(jī)磷農(nóng)藥的能力比甲、乙強(qiáng)(3)稱量高壓蒸汽滅菌(4)血細(xì)胞計(jì)數(shù)板稀釋涂布平板9(河南六市聯(lián)考)微生物強(qiáng)化采油(MEOR)是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油黏度的原理，通過(guò)向油井中注入含微生物的水來(lái)提高采油率的新技術(shù)。以下是人們篩選、純化和擴(kuò)大培養(yǎng)該類微生物的實(shí)驗(yàn)操作。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1

12、)土壤是微生物的大本營(yíng)，該類微生物應(yīng)取自_的土壤。(2)為篩選和純化該類微生物，從功能上分，應(yīng)選用_培養(yǎng)基。常用的接種方法是_和_。(3)接種后，應(yīng)密封培養(yǎng)的原因是_，培養(yǎng)一段時(shí)間后在培養(yǎng)基上形成降油圈，此時(shí)選取_就可獲得高效菌株。(4)擴(kuò)大培養(yǎng)過(guò)程中需要對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)。取0.2 mL樣品，用固體培養(yǎng)基對(duì)其培養(yǎng)，最后統(tǒng)計(jì)三個(gè)平板，菌落數(shù)分別是200、180、220。則樣品中微生物的數(shù)量為_(kāi)個(gè)/mL。該統(tǒng)計(jì)結(jié)果_(填“低于”或“高于”)實(shí)際值。解析：(1)在長(zhǎng)期被石油污染的土壤中生存下來(lái)的微生物，能降解石油，所以取樣時(shí)應(yīng)從含石油多的土壤中采集。(2)從功能上分，應(yīng)選用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選和

13、純化該類微生物；常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。(3)該類微生物是厭氧微生物，接種后應(yīng)密封培養(yǎng)；培養(yǎng)一段時(shí)間后在培養(yǎng)基上可形成降油圈，降油圈越大，說(shuō)明該處的微生物降解石油的能力越強(qiáng)，所以應(yīng)選擇降油圈大的菌落進(jìn)行培養(yǎng)以獲得高效菌株。(4)計(jì)算微生物的數(shù)量應(yīng)取三個(gè)平板的平均值，即(200180220)30.21 000(個(gè)/mL)，該結(jié)果會(huì)低于實(shí)際值，因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)菌落連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是單個(gè)菌落數(shù)。答案：(1)長(zhǎng)期被石油污染(含石油多的)(2)選擇平板劃線法稀釋涂布平板法(3)該類微生物是厭氧型的降油圈大的菌落(4)1 000低于10欲從腐乳中分離篩選出產(chǎn)蛋白酶活力高的毛

14、霉菌株，設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)流程：回答下列問(wèn)題：(1)毛霉屬于_(填“真核”或“原核”)生物。在腐乳制作中，主要利用毛霉等微生物產(chǎn)生的_酶將豆腐中的蛋白質(zhì)和脂肪分解為小分子物質(zhì)。(2)步驟進(jìn)行涂布前，需將孢子懸浮液進(jìn)行梯度稀釋，進(jìn)行梯度稀釋的目的是_。若進(jìn)行10倍稀釋，一般吸取1 mL懸浮液注入_中，混勻。(3)孟加拉紅培養(yǎng)基常用于分離霉菌及酵母菌，在孟加拉紅培養(yǎng)基中加入氯霉素可以抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)。從功能上看，孟加拉紅培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(4)毛霉產(chǎn)生的酶能將酪蛋白分解而產(chǎn)生透明圈，在酪蛋白培養(yǎng)基中篩選到三個(gè)單菌落甲、乙、丙，其菌落直徑分別為3.2 cm、2.8 cm、2.9 cm，其菌落與透明圈一起

15、的直徑分別為3.7 cm、3.5 cm、3.3 cm。應(yīng)選擇菌落_作為產(chǎn)蛋白酶活力高的毛霉候選菌。解析：(1)毛霉屬于真核生物。在腐乳制作中，主要利用毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶和脂肪酶將豆腐中的蛋白質(zhì)和脂肪分解為小分子物質(zhì)。(2)將孢子懸浮液進(jìn)行梯度稀釋的目的是增加懸浮液的稀釋度，涂布培養(yǎng)能分離到單菌落。若進(jìn)行10倍稀釋，一般吸取1 mL懸浮液注入9 mL無(wú)菌水中，混勻。(3)孟加拉紅培養(yǎng)基常用于分離霉菌及酵母菌，據(jù)此可知：從功能上看，孟加拉紅培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(4)毛霉產(chǎn)生的酶能將酪蛋白分解而產(chǎn)生透明圈，透明圈與菌落直徑的比值反映了毛霉菌株產(chǎn)蛋白酶活力的能力，因此應(yīng)挑選透明圈與菌落直徑比值

16、最大的菌體，即應(yīng)選擇菌落乙作為產(chǎn)蛋白酶活力高的毛霉候選菌。答案：(1)真核蛋白酶和脂肪(2)增加懸浮液的稀釋度，涂布培養(yǎng)能分離到單菌落9 mL無(wú)菌水(3)選擇(4)乙11(2017長(zhǎng)春二模)下面是篩選抗鏈霉素大腸桿菌的實(shí)驗(yàn)步驟及相關(guān)圖解。實(shí)驗(yàn)步驟：把大量對(duì)鏈霉素敏感的大腸桿菌接種在不含鏈霉素的培養(yǎng)基1的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。待其長(zhǎng)出密集的小菌落后，用影印法接種到不含鏈霉素的培養(yǎng)基2上，隨即再影印到含有鏈霉素的培養(yǎng)基3上，進(jìn)行培養(yǎng)。在培養(yǎng)基3上出現(xiàn)了個(gè)別抗鏈霉素的菌落，將其挑選出。請(qǐng)回答：(1)配制培養(yǎng)基時(shí)除了滿足基本的營(yíng)養(yǎng)條件外，還需滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、_、_的要求。(2)從功能上看，含有

17、鏈霉素的培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。若在培養(yǎng)基中加入伊紅和美藍(lán)，則培養(yǎng)皿中長(zhǎng)出的菌落顏色為_(kāi)。由圖可知，1號(hào)培養(yǎng)基接種的方法為_(kāi)。(3)對(duì)2和3進(jìn)行比較，在2上找到與3上相應(yīng)的菌落，挑取其中一個(gè)菌落接種到_(填“含鏈霉素”或“不含鏈霉素”)的培養(yǎng)基上，如果有較多的菌落出現(xiàn)，則說(shuō)明該抗性基因突變發(fā)生在該菌接觸鏈霉素之_(填“前”或“后”)。(4)3中的菌落比1、2中的菌落少很多，這說(shuō)明了基因突變具有_的特點(diǎn)。解析：(1)配制培養(yǎng)基時(shí)在提供幾種基本營(yíng)養(yǎng)條件的基礎(chǔ)上，還需滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。(2)鏈霉素是抗生素，對(duì)大腸桿菌具有選擇作用。在伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基上，大腸桿菌菌落顏色為黑

18、色。由題圖可知，1號(hào)培養(yǎng)基接種的方法為稀釋涂布平板法。(3)培養(yǎng)基2和培養(yǎng)基3上相同的菌落，是具有相同性狀的大腸桿菌形成的，在培養(yǎng)基2上找到與3上相應(yīng)的菌落，挑取其中一個(gè)菌落接種到含鏈霉素的培養(yǎng)基上，若出現(xiàn)較多的菌落，則說(shuō)明該抗性基因突變發(fā)生在該菌接觸鏈霉素之前。(4)抗鏈霉素性狀是大腸桿菌基因突變后獲得的性狀，3號(hào)培養(yǎng)皿中的菌落比1號(hào)、2號(hào)中的菌落少很多，說(shuō)明了基因突變頻率很低。答案：(1)pH氧氣(2)選擇黑色稀釋涂布平板法(3)含鏈霉素前(4)頻率低(低頻性)12(2017惠州模擬)日前微博傳言手機(jī)細(xì)菌比馬桶按鈕多。如圖，央視和北京衛(wèi)視通過(guò)實(shí)驗(yàn)展示調(diào)查結(jié)果?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問(wèn)題：(1)該實(shí)驗(yàn)需制備培養(yǎng)基，培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、_。(2)據(jù)圖，兩電視臺(tái)均采用_法接種，該方法需要_(多選)。A接種環(huán) B酒精燈C移液管D涂布器E無(wú)菌水(3)通過(guò)觀察菌落的_，可知手機(jī)屏幕和馬桶按鈕都存在多種微生物。兩電視臺(tái)實(shí)驗(yàn)操作均正確且完全一致，但報(bào)道結(jié)果截然不同，你認(rèn)為原因是：_。(4)按圖操作取樣面積，實(shí)驗(yàn)員測(cè)定某手機(jī)屏幕的細(xì)菌數(shù)量，將10 mL菌懸液進(jìn)行梯度稀釋，分別取0.1 mL稀釋倍數(shù)為102的樣品液接種到三個(gè)培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時(shí)間后，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)分別為48、50、52，則該手機(jī)屏幕的細(xì)菌數(shù)為_(kāi)個(gè)/cm2。該實(shí)驗(yàn)對(duì)照組該如何設(shè)置_。解析：(1)微生物培養(yǎng)基的成分一般包括