藥物分析-巴比妥類藥物

1、 巴比妥類藥物是環(huán)狀酰脲類的鎮(zhèn)靜催眠藥，巴比妥類藥物是環(huán)狀酰脲類的鎮(zhèn)靜催眠藥，我們知道巴比妥類藥物劑量由小到大，中樞我們知道巴比妥類藥物劑量由小到大，中樞抑制作用相繼表現(xiàn)為鎮(zhèn)靜、催眠、抗驚厥和抑制作用相繼表現(xiàn)為鎮(zhèn)靜、催眠、抗驚厥和麻醉作用，其中苯巴比妥還具有抗癲癇的作麻醉作用，其中苯巴比妥還具有抗癲癇的作用用。結(jié)構(gòu)剖析理化特征鑒別試驗雜質(zhì)檢查含量測定練習(xí)與思考返回主目錄基本要求 基本要求 一、掌握我國藥典中巴比妥類藥物的一、掌握我國藥典中巴比妥類藥物的鑒別和含量測定的基本原理與方法。鑒別和含量測定的基本原理與方法。 二、熟悉國外藥典本類藥物鑒別和含二、熟悉國外藥典本類藥物鑒別和含量測定的基本原

2、理與方法。量測定的基本原理與方法。 三、了解本類藥物的體內(nèi)分析方法。三、了解本類藥物的體內(nèi)分析方法。返 回一、結(jié)構(gòu)特征與典型藥物一、結(jié)構(gòu)特征與典型藥物n 巴比妥類藥物是巴比妥酸的衍巴比妥類藥物是巴比妥酸的衍生物，結(jié)構(gòu)通式如下生物，結(jié)構(gòu)通式如下CCCONONC OR1R2R3543216HH5,55,5取代的巴比妥類藥物取代的巴比妥類藥物5,55,5取代的硫代巴比妥類藥物取代的硫代巴比妥類藥物1,5,51,5,5取代的巴比妥類藥物取代的巴比妥類藥物本類藥物的結(jié)構(gòu)可大致分為兩個部分：本類藥物的結(jié)構(gòu)可大致分為兩個部分：1. 1. 環(huán)狀丙二酰脲環(huán)狀丙二酰脲、1,31,3二酰亞胺基團(tuán)二酰亞胺基團(tuán)決定巴比

3、妥類藥物的特性決定巴比妥類藥物的特性2. 2. 取代基部分取代基部分區(qū)別各種巴比妥類藥物區(qū)別各種巴比妥類藥物CCCONONC OH5C2H5C2HH巴比妥CCCONONC OH5C2HH苯巴比妥CCCONONC ONaCH2CHCH2CHCH3C3H7H司可巴比妥鈉CCCONONC ONaC2H5CHCH2CH2CH3CH3H異戊巴比妥鈉NHNOOOHC2H5CH3CH2CH2CHCH3戊巴比妥戊巴比妥返 回NNOOHSNaC2H5CH3CH2CH2CHCH3硫噴妥鈉硫噴妥鈉二、理化特征二、理化特征 1. 1. 性狀性狀 巴比妥類藥物通常為白色結(jié)晶或者巴比妥類藥物通常為白色結(jié)晶或者為結(jié)晶性粉末

4、，具有一定的熔點。為結(jié)晶性粉末，具有一定的熔點。在空在空氣中未定，加熱都能升華。氣中未定，加熱都能升華。一般微溶或一般微溶或極微溶于水，易溶于乙醇；其鈉鹽易溶極微溶于水，易溶于乙醇；其鈉鹽易溶于水，難溶于有機(jī)溶劑。于水，難溶于有機(jī)溶劑。 2. 2. 弱酸性弱酸性 巴比妥類藥物的母核環(huán)狀結(jié)構(gòu)中含有巴比妥類藥物的母核環(huán)狀結(jié)構(gòu)中含有1 1，3-3-二酰亞胺基團(tuán)，能使其分子發(fā)生酮二酰亞胺基團(tuán)，能使其分子發(fā)生酮式式- -烯醇式互變異構(gòu)，在水溶液中發(fā)生二烯醇式互變異構(gòu)，在水溶液中發(fā)生二級電離，其反應(yīng)式為：級電離，其反應(yīng)式為： OR2R1HOONHNOR2R1HONNOR2R1HOONNOR2R1HOONN

5、OH+H-H-H+ pK1 = 8 pK2 = 12 由于本類藥物具有由于本類藥物具有弱酸性弱酸性（pKpKa a 值值為為7.37.38.48.4）故可與強(qiáng)堿反應(yīng)生成）故可與強(qiáng)堿反應(yīng)生成水溶性的鹽類，一般為鈉鹽。成鹽水溶性的鹽類，一般為鈉鹽。成鹽反應(yīng)為：反應(yīng)為：CO NHCNCOOHR1R2+ NaOHCO NHCNCOONaR1R2+ H2O 由弱酸與強(qiáng)堿形成的巴比妥鈉鹽，其水由弱酸與強(qiáng)堿形成的巴比妥鈉鹽，其水溶液呈堿性，加酸酸化后，則析出結(jié)晶溶液呈堿性，加酸酸化后，則析出結(jié)晶性的游離巴比妥類藥物，可用有機(jī)溶劑性的游離巴比妥類藥物，可用有機(jī)溶劑將其提取出來。上述這些性質(zhì)可用于巴將其提取出來

6、。上述這些性質(zhì)可用于巴比妥類藥物的分離、鑒別、檢查和含量比妥類藥物的分離、鑒別、檢查和含量測定。測定。 3. 3. 水解反應(yīng)水解反應(yīng) 巴比妥類藥物及其鈉鹽的六元環(huán)狀巴比妥類藥物及其鈉鹽的六元環(huán)狀結(jié)構(gòu)比較穩(wěn)定，遇酸、氧化劑、還原劑結(jié)構(gòu)比較穩(wěn)定，遇酸、氧化劑、還原劑時，一般情況下不會破裂，但與堿共沸時，一般情況下不會破裂，但與堿共沸時則水解開環(huán)，并產(chǎn)生時則水解開環(huán)，并產(chǎn)生氨氣氨氣。n(1)(1)巴比妥類藥物的水解巴比妥類藥物的水解 主要是酰亞胺基團(tuán)的性質(zhì)，與堿溶主要是酰亞胺基團(tuán)的性質(zhì)，與堿溶液共沸就可以水解生成氨氣，生成的氨液共沸就可以水解生成氨氣，生成的氨氣可使紅色石蕊試紙變藍(lán)。反應(yīng)式如下：氣可

7、使紅色石蕊試紙變藍(lán)。反應(yīng)式如下：CONHCNCOOHR1R2+ 5NaOH+ 2Na2CO3COONaR1R2+2NH3 JP(14)JP(14)采用這一反應(yīng)鑒別異戊巴比妥和巴比妥。采用這一反應(yīng)鑒別異戊巴比妥和巴比妥。 ( (2)2)巴比妥類藥物鈉鹽的水解巴比妥類藥物鈉鹽的水解 本類藥物鈉鹽的水溶性比較大，在本類藥物鈉鹽的水溶性比較大，在吸濕的情況下也能水解。水解的速度與吸濕的情況下也能水解。水解的速度與溫度和溫度和pHpH值有關(guān)。室溫值有關(guān)。室溫和和pH10pH10以下以下時水時水解較慢，解較慢，pH11pH11以上以上隨著堿度的增加水解隨著堿度的增加水解速度也隨之加快。速度也隨之加快。OR

8、2R1HONNONaR2R1R2R1CCOONaCONHCONH2CHCOONa + 2NH3H2OH2O 4. 4. 與重金屬反應(yīng)與重金屬反應(yīng) (1)(1)與與AgAg+ +的反應(yīng)的反應(yīng)可溶性的可溶性的白色白色CONHCNCOCR1R2ONa+ AgNO3+ Na2CO3CONCNCOCR1R2ONaAg+NaHCO3NaNO3+NaNO3+CONCNCOCR1R2OAgAgAgNO3+CONCNCOCR1R2ONaAg(2)(2)與與CuCu2+2+的反應(yīng)的反應(yīng)巴比妥類藥物巴比妥類藥物 + + 銅吡啶試液銅吡啶試液吡啶吡啶紫色或紫紫色或紫色沉淀色沉淀硫噴妥鈉硫噴妥鈉 + + 銅吡啶試液銅吡

9、啶試液吡啶吡啶綠色綠色CR1R2COCONHNHCO水吡啶CR1R2COCONNHC OH部分離子化CR1R2COCONNHCO-+H+N+CuSO42NNCu2+SO42-CR1R2COCONNHC O-2+NNCu2+CR1R2COCONNHCOCR1R2COCONNHCOCuNN (3)(3)與與CoCo2+2+的反應(yīng)的反應(yīng) 這一反應(yīng)的現(xiàn)象與銅鹽反應(yīng)的現(xiàn)象相這一反應(yīng)的現(xiàn)象與銅鹽反應(yīng)的現(xiàn)象相似，均生成紫堇色配位化合物。本反應(yīng)要似，均生成紫堇色配位化合物。本反應(yīng)要求在求在無水的條件下進(jìn)行無水的條件下進(jìn)行，所用試劑均應(yīng)不，所用試劑均應(yīng)不含水分，以使反應(yīng)靈敏，而且形成的有色含水分，以使反應(yīng)靈敏，

10、而且形成的有色產(chǎn)物也比較穩(wěn)定，常用無水乙醇或甲醇產(chǎn)物也比較穩(wěn)定，常用無水乙醇或甲醇；鈷鹽為醋酸鈷、硝酸鈷或氧化鈷；堿以有鈷鹽為醋酸鈷、硝酸鈷或氧化鈷；堿以有機(jī)堿為好，一般采用機(jī)堿為好，一般采用異丙胺異丙胺。CO NHCONHCOR1R22+Co2+4(CH3)2CHNH2+CoR2R1CONHCONCOR2R1NCONHCOCONHCH(CH3)2NHCH(CH3)2(CH3)2CHN+H32(4)(4)與與HgHg2+2+的反應(yīng)的反應(yīng)NHNOOHR1R2OOR2R1HOONNOR2R1ONN+ Hg(NO3)2-HNO3HgNO3HgNO3HgNO3NNOR1R2O+ NH3 + H2OHg

11、OHNNOR1R2OOHOHO NH4-+ HNO3白色白色 5. 5. 與香草醛的反應(yīng)與香草醛的反應(yīng) 巴比妥類藥物分子結(jié)構(gòu)中丙二酰脲巴比妥類藥物分子結(jié)構(gòu)中丙二酰脲基團(tuán)中氫比較活潑，可與香草醛在濃硫基團(tuán)中氫比較活潑，可與香草醛在濃硫酸存在下發(fā)生縮合反應(yīng)，生成棕紅色產(chǎn)酸存在下發(fā)生縮合反應(yīng)，生成棕紅色產(chǎn)物。物。BPBP（20002000）戊巴比妥采用此反應(yīng)進(jìn)）戊巴比妥采用此反應(yīng)進(jìn)行鑒別。行鑒別。 加乙醇后，其反應(yīng)產(chǎn)物可轉(zhuǎn)變?yōu)榧右掖己螅浞磻?yīng)產(chǎn)物可轉(zhuǎn)變?yōu)镹HNCH3(CH2)2CHH5C2CH3OOOOOOCH3H5C2CH3(CH2)2CHNNCHOCH3OHCHO+H2OHHHNNOOOCH3C

12、H(CH2)2CH3C2H5OCH3OH棕紅色棕紅色OOCH3H5C2CH3(CH2)2CHNNCHNNOOCH3CH(CH2)2CH3C2H5OH HOOHOCH3 6. 6. 紫外吸收光譜特征紫外吸收光譜特征 主要特點主要特點：隨著電離級數(shù)的不同，巴比：隨著電離級數(shù)的不同，巴比妥類藥物的紫外光譜會發(fā)生顯著的變化。妥類藥物的紫外光譜會發(fā)生顯著的變化。也就是說，溶液也就是說，溶液pHpH值的不同以及取代基值的不同以及取代基的不同會對紫外光譜產(chǎn)生影響。的不同會對紫外光譜產(chǎn)生影響。A. H2SO4溶液溶液（0.05mol/L）B. pH9.9緩沖液緩沖液C. NaOH溶液溶液（0.1mol/L）巴

13、比妥類藥物的紫外吸收光譜巴比妥類藥物的紫外吸收光譜n 在在酸性溶液酸性溶液中，中，5 5，5-5-二取代和二取代和1 1，5 5，5 5三取三取代巴比妥類藥物代巴比妥類藥物不電離不電離，無明顯的紫外吸收峰；，無明顯的紫外吸收峰；在在pH10pH10的堿性溶液中，發(fā)生一級電離，形成共的堿性溶液中，發(fā)生一級電離，形成共軛體系結(jié)構(gòu)，在軛體系結(jié)構(gòu)，在240240nmnm處出現(xiàn)最大吸收峰；在處出現(xiàn)最大吸收峰；在pH13pH13的強(qiáng)堿性溶液中，的強(qiáng)堿性溶液中，5 5，5-5-二取代巴比妥類藥二取代巴比妥類藥物發(fā)生二級電離，引起共軛體系延長，導(dǎo)致吸物發(fā)生二級電離，引起共軛體系延長，導(dǎo)致吸收峰向紅移至收峰向紅

14、移至255255nmnm；1 1，5 5，5-5-三取代巴比妥類三取代巴比妥類藥物藥物，因，因1 1位取代基的存在，故不發(fā)生二級電離，位取代基的存在，故不發(fā)生二級電離，最大吸收峰仍位于最大吸收峰仍位于240240nmnm。硫噴妥的紫外吸收光譜硫噴妥的紫外吸收光譜HCl HCl 溶液溶液 (0.1(0.1mol/L)mol/L) - NaOHNaOH 溶液溶液 (0.1(0.1mol/L)mol/L) 硫代巴比妥類藥物硫代巴比妥類藥物的紫外吸收光譜則不同，的紫外吸收光譜則不同，在酸性或堿性溶液中均有較明顯的紫外吸收在酸性或堿性溶液中均有較明顯的紫外吸收。在鹽酸溶液（在鹽酸溶液（0.1mol/L0

15、.1mol/L）中，兩個吸收峰分）中，兩個吸收峰分別在別在287nm287nm和和238nm238nm；在氫氧化鈉溶液；在氫氧化鈉溶液（0.1mol/L0.1mol/L）中，兩個吸收峰分別移至）中，兩個吸收峰分別移至304nm304nm和和255nm255nm。另外，在。另外，在pH13pH13的強(qiáng)堿性溶液的強(qiáng)堿性溶液中，硫代巴比妥類藥物在中，硫代巴比妥類藥物在255nm255nm處的吸收峰處的吸收峰消失，只存在消失，只存在304nm304nm處的吸收峰。處的吸收峰。 7. 7. 色譜行為特征（主要用于鑒別）色譜行為特征（主要用于鑒別） （1 1）TLC: TLC: 在硅膠在硅膠6060F F

16、254254上點樣，氯仿上點樣，氯仿- -丙酮丙酮（4:14:1）為展開劑，顯色，在紫色背景上可觀察）為展開劑，顯色，在紫色背景上可觀察到白色的斑點。一般采用對照品（或標(biāo)準(zhǔn)品）到白色的斑點。一般采用對照品（或標(biāo)準(zhǔn)品）比較法，要求供試品斑點的比較法，要求供試品斑點的R Rf f值應(yīng)與對照品斑值應(yīng)與對照品斑點的一致。點的一致。 （2 2）HPLC: HPLC: 與對照品比較保留行為，主要是比與對照品比較保留行為，主要是比較保留時間和相對保留時間。較保留時間和相對保留時間。 8. 8. 顯微結(jié)晶顯微結(jié)晶 巴比妥類藥物可根據(jù)其本身或與某種試劑的反巴比妥類藥物可根據(jù)其本身或與某種試劑的反應(yīng)產(chǎn)物的特殊晶型

17、，進(jìn)行同類或不同類藥物的鑒別。應(yīng)產(chǎn)物的特殊晶型，進(jìn)行同類或不同類藥物的鑒別。此法亦適用于生物樣品中微量巴比妥類藥物的檢驗。此法亦適用于生物樣品中微量巴比妥類藥物的檢驗。 （1 1）藥物本身的晶形藥物本身的晶形 取藥物或從酸性溶液中，用取藥物或從酸性溶液中，用有機(jī)溶劑提取、經(jīng)酸化、提取、純化后，即生成相有機(jī)溶劑提取、經(jīng)酸化、提取、純化后，即生成相應(yīng)巴比妥類藥物的特殊結(jié)晶。在顯微鏡下觀察結(jié)晶應(yīng)巴比妥類藥物的特殊結(jié)晶。在顯微鏡下觀察結(jié)晶形狀：巴比妥為長方形；苯巴比妥在開始時呈球形，形狀：巴比妥為長方形；苯巴比妥在開始時呈球形，然后變成花瓣狀的結(jié)晶。見課本然后變成花瓣狀的結(jié)晶。見課本P101P101。

18、 （2 2）反應(yīng)產(chǎn)物的晶形反應(yīng)產(chǎn)物的晶形 鑒于某些巴比妥類藥鑒于某些巴比妥類藥物可與重金屬離子反應(yīng)，生成具有特殊晶形的物可與重金屬離子反應(yīng)，生成具有特殊晶形的沉淀。因此，可利用此特性進(jìn)行鑒別。例如，沉淀。因此，可利用此特性進(jìn)行鑒別。例如，巴比妥可與硫酸銅巴比妥可與硫酸銅- -吡啶試液進(jìn)行反應(yīng)，生成吡啶試液進(jìn)行反應(yīng)，生成十字形紫色結(jié)晶，如課本十字形紫色結(jié)晶，如課本P101P101圖圖5-45-4所示；苯所示；苯巴比妥反應(yīng)后，則形成淺紫色細(xì)小不規(guī)則的或巴比妥反應(yīng)后，則形成淺紫色細(xì)小不規(guī)則的或類似菱形的結(jié)晶；其他巴比妥類藥物不能形成類似菱形的結(jié)晶；其他巴比妥類藥物不能形成結(jié)晶，可利用這一特性來區(qū)分之

19、。結(jié)晶，可利用這一特性來區(qū)分之。返 回三、鑒別試驗三、鑒別試驗 1. 1. 丙二酰脲鑒別反應(yīng)丙二酰脲鑒別反應(yīng) 這一鑒別試驗已經(jīng)收載在中國藥典這一鑒別試驗已經(jīng)收載在中國藥典附錄中的附錄中的“一般鑒別試驗一般鑒別試驗”項下。包括項下。包括銀鹽反應(yīng)和銅鹽反應(yīng)，分別生成沉淀和銀鹽反應(yīng)和銅鹽反應(yīng)，分別生成沉淀和呈色，反應(yīng)。呈色，反應(yīng)。 1. 1. 丙二酰脲鑒別反應(yīng)丙二酰脲鑒別反應(yīng) 已經(jīng)收載在中國藥典附錄中的已經(jīng)收載在中國藥典附錄中的“一般鑒一般鑒別試驗別試驗”項下。包括銀鹽反應(yīng)和銅鹽反應(yīng)，項下。包括銀鹽反應(yīng)和銅鹽反應(yīng)，分別生成沉淀和呈色，反應(yīng)的原理前面已經(jīng)分別生成沉淀和呈色，反應(yīng)的原理前面已經(jīng)提到過，在

20、此不再贅述。提到過，在此不再贅述。 2. 2. 測定熔點測定熔點 巴比妥類的鈉鹽酸巴比妥類的鈉鹽酸 游離巴比游離巴比妥類藥物妥類藥物 過濾過濾 洗滌洗滌 干燥干燥 測熔點測熔點 例如：例如： 司可巴比妥鈉的鑒別司可巴比妥鈉的鑒別 取本品取本品1g 1g 溶解溶解 強(qiáng)力強(qiáng)力攪拌攪拌 加水煮沸溶解成澄清溶液加水煮沸溶解成澄清溶液 放冷放冷 過過濾濾 結(jié)晶在結(jié)晶在7070干燥后，熔點約為干燥后，熔點約為9797。 苯巴比妥鈉的鑒別苯巴比妥鈉的鑒別 中國藥典的方法：取本品約中國藥典的方法：取本品約0.5g 0.5g 加水溶解加水溶解 加過量稀鹽酸加過量稀鹽酸 白色結(jié)晶白色結(jié)晶性沉淀性沉淀 過濾過濾 用

21、水洗凈沉淀用水洗凈沉淀 105105干燥，干燥，熔點應(yīng)為熔點應(yīng)為174174178178。 水水稀醋酸稀醋酸 巴比妥的鑒別巴比妥的鑒別 取本品取本品0.5g0.5g，加，加1mol/L1mol/L碳酸鈉溶液碳酸鈉溶液5ml5ml使溶解，加使溶解，加4.5%4.5%（W/VW/V）對硝基氯芐的乙醇溶液）對硝基氯芐的乙醇溶液10ml10ml，在水浴上加熱回流，在水浴上加熱回流30min30min，放置，放置1h1h后，濾過，后，濾過，所得沉淀用乙醇進(jìn)行重結(jié)晶后，在所得沉淀用乙醇進(jìn)行重結(jié)晶后，在100105100105干燥，干燥，測定衍生物的熔點，應(yīng)為測定衍生物的熔點，應(yīng)為150150左右。巴比妥與

22、對硝左右。巴比妥與對硝基氯芐的衍生化反應(yīng)為：基氯芐的衍生化反應(yīng)為：ONHNH5C2OOH5C2H5C2H5C2CH2ClNO2NO2OOCH2HOH+Na2CO3+ NaHCO3 + NaClNN 3.3.利用特殊取代基或元素的鑒別試驗利用特殊取代基或元素的鑒別試驗 （1 1）利用不飽和取代基的鑒別試驗）利用不飽和取代基的鑒別試驗 具有不飽和取代基的巴比妥類藥物，中國藥典收載了司可巴比妥鈉。其分具有不飽和取代基的巴比妥類藥物，中國藥典收載了司可巴比妥鈉。其分子結(jié)構(gòu)中含有烯丙基，可與碘、溴或高錳酸鉀作用，發(fā)生加成或氧化反應(yīng)，子結(jié)構(gòu)中含有烯丙基，可與碘、溴或高錳酸鉀作用，發(fā)生加成或氧化反應(yīng)，而使碘

23、、溴或高錳酸鉀褪色而使碘、溴或高錳酸鉀褪色。 與與碘試液碘試液反應(yīng)反應(yīng)OHONNNaOCH2CH3CH3CH3CH3CH2NaONNOHO + I2II 與與高錳酸鉀高錳酸鉀的反應(yīng)的反應(yīng) 含不飽和取代基的巴比妥含不飽和取代基的巴比妥類藥物，具有還原性，在堿性溶液中與高錳酸鉀類藥物，具有還原性，在堿性溶液中與高錳酸鉀反應(yīng)，使紫色的高錳酸鉀還原成棕色的二氧化錳。反應(yīng)，使紫色的高錳酸鉀還原成棕色的二氧化錳。OHONNNaOCH2CH3CH3CH3CH3CH2NaONNOHO+ 2KMnO4 + 4H2OOH OH3+ 2MnO2 + 2KOH3（2 2）利用芳環(huán)取代基的鑒別試驗）利用芳環(huán)取代基的鑒別

24、試驗 硝化反應(yīng)硝化反應(yīng) 含芳香取代基的巴比妥類藥物，如取含芳香取代基的巴比妥類藥物，如取苯巴比妥或其鈉鹽，與苯巴比妥或其鈉鹽，與硝酸鉀和硫酸硝酸鉀和硫酸共熱，可發(fā)生共熱，可發(fā)生硝化反應(yīng)，生成黃色硝基化合物。硝化反應(yīng)，生成黃色硝基化合物。NHNOHOO+H3CH3C+OOHONHN 2KNO3 + H2SO4K2SO4 + 2H2OO2NNO2黃色黃色 與與硫酸硫酸- -亞硝酸鈉亞硝酸鈉的反應(yīng)的反應(yīng) 苯巴比妥與硫酸苯巴比妥與硫酸- -亞硝酸亞硝酸鈉反應(yīng)生成橙黃色產(chǎn)物，并隨即轉(zhuǎn)變?yōu)殁c反應(yīng)生成橙黃色產(chǎn)物，并隨即轉(zhuǎn)變?yōu)槌燃t色橙紅色。本反。本反應(yīng)確切的原理不清，可能為苯環(huán)上的亞硝基反應(yīng)。此應(yīng)確切的原理不

25、清，可能為苯環(huán)上的亞硝基反應(yīng)。此鑒別試驗為中國藥典收載的方法，可用于區(qū)別苯巴比鑒別試驗為中國藥典收載的方法，可用于區(qū)別苯巴比妥和其他不含苯環(huán)取代基的巴比妥類藥物。妥和其他不含苯環(huán)取代基的巴比妥類藥物。 與與甲醛甲醛- -硫酸硫酸的反應(yīng)的反應(yīng) 苯巴比妥與甲醛苯巴比妥與甲醛- -硫酸反應(yīng)，硫酸反應(yīng)，生成生成玫瑰紅色玫瑰紅色產(chǎn)物。此鑒別方法也為中國藥典收載，產(chǎn)物。此鑒別方法也為中國藥典收載，可用于區(qū)別苯巴比妥和其他巴比妥類藥物?？捎糜趨^(qū)別苯巴比妥和其他巴比妥類藥物。 （3 3）硫元素的鑒別試驗）硫元素的鑒別試驗 巴比妥類分子結(jié)構(gòu)中含有硫的藥物，如硫噴巴比妥類分子結(jié)構(gòu)中含有硫的藥物，如硫噴妥鈉，可將其

26、硫元素轉(zhuǎn)變?yōu)闊o機(jī)硫離子，而顯妥鈉，可將其硫元素轉(zhuǎn)變?yōu)闊o機(jī)硫離子，而顯硫化物的反應(yīng)。如硫噴妥鈉在氫氧化鈉試液中硫化物的反應(yīng)。如硫噴妥鈉在氫氧化鈉試液中與鉛離子反應(yīng)生成白色沉淀；加熱后，沉淀轉(zhuǎn)與鉛離子反應(yīng)生成白色沉淀；加熱后，沉淀轉(zhuǎn)變成黑色的硫化鉛。此鑒別試驗可用于硫代巴變成黑色的硫化鉛。此鑒別試驗可用于硫代巴比妥類與巴比妥類藥物的區(qū)別比妥類與巴比妥類藥物的區(qū)別。 返 回 四、特殊雜質(zhì)檢查四、特殊雜質(zhì)檢查 特殊雜質(zhì)特殊雜質(zhì)是指在特定藥物的生產(chǎn)和貯存是指在特定藥物的生產(chǎn)和貯存過程中引入的雜質(zhì)。藥物中特殊雜質(zhì)的檢過程中引入的雜質(zhì)。藥物中特殊雜質(zhì)的檢查主要是根據(jù)藥物和雜質(zhì)在物理化學(xué)性質(zhì)查主要是根據(jù)藥物和

27、雜質(zhì)在物理化學(xué)性質(zhì)上的差異來進(jìn)行的。我們分別以苯巴比妥上的差異來進(jìn)行的。我們分別以苯巴比妥和司可巴比妥鈉為例。和司可巴比妥鈉為例。 1. 1. 苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查OHCl ONa ,CH3ONaC=OH2NH2N ) (I)C2H5-C C2H5BrCOOC2H5COOC2H5COOC2H5COOC2H5-CHHCl , C2H5ONaOC2H5OC2H5O=CCOOC2H5COOC2H5-C=C-ONa-CH2COOC2H5C2H5OH,H2SO4CH2CONH2 NHNOHOH3CH3COHONN 水解酯化，縮合酸化 ， 消除乙?；h(huán)合酸析 （1 1）酸度（指示劑

28、法）酸度（指示劑法）NHNOOOHHC6H5 酸度的檢查主要是控制副產(chǎn)物苯基酸度的檢查主要是控制副產(chǎn)物苯基丙二酰脲。苯基丙二酰脲是由于中間丙二酰脲。苯基丙二酰脲是由于中間體（體（）的乙基化反應(yīng)不完全，而與）的乙基化反應(yīng)不完全，而與脲素縮合生成的。因其分子中脲素縮合生成的。因其分子中5 5 位碳位碳原子上的氫受相鄰丙羧基的影響，致原子上的氫受相鄰丙羧基的影響，致使酸性比苯巴比妥強(qiáng)，能使甲基橙指使酸性比苯巴比妥強(qiáng)，能使甲基橙指示劑呈紅色。示劑呈紅色。 （2 2）溶液的澄清度）溶液的澄清度 本項檢查主要是控制苯巴比妥中本項檢查主要是控制苯巴比妥中乙醇不溶乙醇不溶性雜質(zhì)性雜質(zhì)，利用苯巴比妥酸這些雜質(zhì)在

29、乙醇溶，利用苯巴比妥酸這些雜質(zhì)在乙醇溶液中的溶解度比苯巴比妥小的特性進(jìn)行檢查液中的溶解度比苯巴比妥小的特性進(jìn)行檢查。 （3 3）中性或堿性物質(zhì)）中性或堿性物質(zhì) 中性或堿性物質(zhì)是由中間體（中性或堿性物質(zhì)是由中間體（）形成的酰胺、）形成的酰胺、酰脲或分解產(chǎn)物等雜質(zhì)，不溶于氫氧化鈉試液酰脲或分解產(chǎn)物等雜質(zhì)，不溶于氫氧化鈉試液但但溶溶于乙醚；而苯巴比妥具有酸性，溶于氫氧化鈉試液，于乙醚；而苯巴比妥具有酸性，溶于氫氧化鈉試液，故采用提取重量法測定其含量。故采用提取重量法測定其含量。 檢測方法為：取檢測方法為：取本品本品1.0g 1.0g 置分液漏斗中置分液漏斗中 加氫氧化鈉試液加氫氧化鈉試液10ml10

30、ml溶解溶解 加水加水5ml5ml與乙醚與乙醚25ml 25ml 分取醚層分取醚層 用水振搖洗滌用水振搖洗滌3 3次（每次次（每次5ml5ml） 取醚液過濾取醚液過濾 濾濾液于液于105105蒸干，在蒸干，在105105干燥干燥1h1h，遺留殘渣不得過，遺留殘渣不得過3 3mgmg。 2. 2. 司可巴比妥鈉的特殊雜質(zhì)檢查司可巴比妥鈉的特殊雜質(zhì)檢查+HBrNaOCH2 NaOH,C2H5ONa, CH3COCH3CH3CHBrCH2Br,NaOH CH3CH3NNOHOCH3CH3NNOHOHOHOHH +HH2NCONH2,C2H5ONaCOOC2H5COOC2H5H CCH3CH3CH2C

31、H2CH CH3CH2CH2CHCH3,C2H5ONaCOOC2H5COOC2H5CH2 OHONNCH3CH3CH3CH3CH2NaONNOHO縮合環(huán)合丙烯化成鹽 （1 1）溶液的澄清度）溶液的澄清度 此項檢查主要是控制水不溶性雜質(zhì)，巴比妥類此項檢查主要是控制水不溶性雜質(zhì)，巴比妥類藥物的鈉鹽極易溶于水，因此本品的水溶液應(yīng)澄清，藥物的鈉鹽極易溶于水，因此本品的水溶液應(yīng)澄清，否則表明含有水不溶性雜質(zhì)。否則表明含有水不溶性雜質(zhì)。 需注意的是需注意的是，因本品的水溶液易與空氣中的二因本品的水溶液易與空氣中的二氧化碳作用，而析出司可巴比妥，故進(jìn)行該項目檢氧化碳作用，而析出司可巴比妥，故進(jìn)行該項目檢查時

32、，溶解樣品的水應(yīng)新沸放冷以消除水中二氧化查時，溶解樣品的水應(yīng)新沸放冷以消除水中二氧化碳的干擾。碳的干擾。 （2 2）中性或堿性物質(zhì)）中性或堿性物質(zhì) 檢查的雜質(zhì)是合成過程中產(chǎn)生的中性或堿性副產(chǎn)檢查的雜質(zhì)是合成過程中產(chǎn)生的中性或堿性副產(chǎn)物以及司可巴比妥鈉的分解產(chǎn)物，如酰脲（物以及司可巴比妥鈉的分解產(chǎn)物，如酰脲（）、酰）、酰胺（胺（）類化合物。）類化合物。NaOCH2CH3CH3NNOHOCH2=CHCH2CH3CH2CH2CH CONHCONH2COONaH2OCCH3CH2=CHCH2CHCONHCONH2CH3CH2CH2CHCH3CH3CH3CH2CH2CHCH2=CHCH2CHCONH2(

33、)()返 回五、含量測定五、含量測定 銀量法銀量法 溴量法溴量法 巴比妥類藥物的含巴比妥類藥物的含 酸堿滴定法酸堿滴定法 量測定方法量測定方法 紫外分光光度紫外分光光度 提取重量法提取重量法 HPLCHPLC法、法、GCGC法法 （一）（一）銀量法銀量法 基于巴比妥類藥物在合適的堿性溶液中，基于巴比妥類藥物在合適的堿性溶液中，可與銀離子定量成鹽，可采用銀量法測定本可與銀離子定量成鹽，可采用銀量法測定本類藥物及其制劑的含量。如苯巴比妥及其鈉類藥物及其制劑的含量。如苯巴比妥及其鈉鹽、異戊巴比妥及其鈉鹽以及它們的制劑，鹽、異戊巴比妥及其鈉鹽以及它們的制劑，中國藥典均采用銀量法測定其含量。中國藥典均采

34、用銀量法測定其含量。 優(yōu)點優(yōu)點：操作簡便，專屬性較強(qiáng)。：操作簡便，專屬性較強(qiáng)。 缺點缺點：受溫度影響較大；滴定終點以溶液出：受溫度影響較大；滴定終點以溶液出現(xiàn)渾濁為終點指示難以觀察?，F(xiàn)渾濁為終點指示難以觀察。 1.1.原理原理 反應(yīng)摩爾比：反應(yīng)摩爾比：1:11:1 溶劑系統(tǒng)：甲醇溶劑系統(tǒng)：甲醇3 3無水碳酸鈉無水碳酸鈉 終點指示：電位法指示（終點指示：電位法指示（AgAg玻璃電極系統(tǒng)）玻璃電極系統(tǒng)） 自身指示法自身指示法 2.2.測定方法與計算測定方法與計算 例如例如: :異戊巴比妥及其鈉鹽的測定：異戊巴比妥及其鈉鹽的測定： 取本品約取本品約0.20.2g g 加甲醇加甲醇4040mlml使溶

35、解使溶解 新鮮配制的新鮮配制的3%3%無無水碳酸鈉溶液水碳酸鈉溶液1515mlml，照電位法，用硝酸銀滴定液，照電位法，用硝酸銀滴定液（0.10.1mol/Lmol/L）滴定，即得。每）滴定，即得。每1ml1ml硝酸銀滴定液硝酸銀滴定液（0.10.1mol/Lmol/L）相當(dāng)于）相當(dāng)于22.6322.63mgmg的的C C1111H H1818N N2 2O O3 3（或（或24.8324.83mgmg的的C C1111H H1717N N2 2NaONaO3 3）。）。 原料藥：直接滴定法（容量分析法）原料藥：直接滴定法（容量分析法） D%=%100%WTfVD 3. 3. 注意事項注意事項

36、 （1 1）無水碳酸鈉應(yīng)新鮮配制）無水碳酸鈉應(yīng)新鮮配制 （2 2）硝酸銀滴定液應(yīng)新鮮配制）硝酸銀滴定液應(yīng)新鮮配制 （二）（二）溴量法溴量法 凡在凡在5 5位取代基含有不飽和鍵的巴比妥類藥物，位取代基含有不飽和鍵的巴比妥類藥物，其不飽和鍵能與溴定量地發(fā)生加成反應(yīng)，故可采用其不飽和鍵能與溴定量地發(fā)生加成反應(yīng)，故可采用溴量法測定其含量。中國藥典收載的溴量法測定其含量。中國藥典收載的司可巴比妥鈉司可巴比妥鈉采用本法測定。其測定原理可用下列反應(yīng)式表示采用本法測定。其測定原理可用下列反應(yīng)式表示： NaOCH2CH3CH3NNOHOOHONNCH3CH3CH2NaO+ Br2Br Br（定量過量）（定量過量

37、）Br2 + 2KI 2KBr + I2（剩余）（剩余）I2 + 2Na2S2O3 2NaI + Na2S4O6 溴滴定液的配制：溴滴定液的配制： 取溴酸鉀取溴酸鉀3.0g3.0g與溴化鉀與溴化鉀15g15g，加水適量使，加水適量使之溶解成之溶解成1000ml1000ml，搖勻。，搖勻。 反應(yīng)的摩爾比：反應(yīng)的摩爾比：1:21:2 司可巴比妥鈉的測定方法：取本品約司可巴比妥鈉的測定方法：取本品約0.10.1g g 加加水水 1 01 0 m lm l 振 搖 使 溶 解振 搖 使 溶 解 精 密 加 溴 滴 定 液精 密 加 溴 滴 定 液（0.10.1mol/Lmol/L）25ml25ml 鹽

38、酸鹽酸5ml5ml，立即密塞，立即密塞并振搖并振搖1min1min，在暗處靜置，在暗處靜置1515minmin 加加KIKI試液試液1010mlml 搖搖勻勻 用硫代硫酸鈉滴定液（用硫代硫酸鈉滴定液（0.10.1mol/Lmol/L）滴定，）滴定，至近終點時，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消至近終點時，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正失，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每。每1ml1ml溴溴滴 定 液 （滴 定 液 （ 0 .0 . 1 m o l / L1 m o l / L ） 相 當(dāng) 于） 相 當(dāng) 于 1 3 . 0 11 3 . 0 1 m gm g 的的C

39、C1212H H1717N N2 2NaONaO3 3。 原料藥原料藥 剩余滴剩余滴定法定法%100%WTfVVD樣空mlmg01.132molg27.260Lmol1 . 0ncMT 注意事項：注意事項：（1 1）操作中要防止溴和碘的逸失。）操作中要防止溴和碘的逸失。（2 2）平行條件進(jìn)行空白試驗可以減少）平行條件進(jìn)行空白試驗可以減少溴和碘逸失帶來的誤差。溴和碘逸失帶來的誤差。 （三）（三）酸堿滴定法（酸量法）酸堿滴定法（酸量法） 巴比妥類藥物呈弱酸性，可作為一元酸以標(biāo)巴比妥類藥物呈弱酸性，可作為一元酸以標(biāo)準(zhǔn)堿液直接滴定，或在非水溶液中用強(qiáng)堿溶液直準(zhǔn)堿液直接滴定，或在非水溶液中用強(qiáng)堿溶液直接

40、滴定。常用的方法如下：接滴定。常用的方法如下： 1. 1. 在在水乙醇混合溶劑水乙醇混合溶劑中滴定中滴定 基于本類藥物在水中的溶解度較小，滴定時基于本類藥物在水中的溶解度較小，滴定時多在醇溶液或含水的醇溶液中進(jìn)行，這樣可避免多在醇溶液或含水的醇溶液中進(jìn)行，這樣可避免反應(yīng)中產(chǎn)生的弱酸鹽易于水解而影響滴定終點。反應(yīng)中產(chǎn)生的弱酸鹽易于水解而影響滴定終點。常以麝香草酚酞為指示劑，滴定至淡藍(lán)色為終點。常以麝香草酚酞為指示劑，滴定至淡藍(lán)色為終點。 例如例如：異戊巴比妥的含量測定異戊巴比妥的含量測定 取本品約取本品約0.50.5g g，精密稱定，加乙醇，精密稱定，加乙醇2020mlml溶溶解后，加麝香草酚酞

41、指示劑解后，加麝香草酚酞指示劑6 6滴，用氫氧化鈉滴，用氫氧化鈉滴定液（滴定液（0.0.1mol/L1mol/L）滴定，并將滴定結(jié)果用空）滴定，并將滴定結(jié)果用空白試驗校正，即得。每白試驗校正，即得。每1ml1ml氫氧化鈉滴定液氫氧化鈉滴定液（0.0.1mol/L1mol/L）相當(dāng)于）相當(dāng)于22.6322.63mgmg的的C C1111H H1818N N2 2O O3 3。原料藥原料藥 直接滴定法（有空白校正直接滴定法（有空白校正）%100)(%0WfVVTDT T滴定度，每滴定度，每1ml1ml滴定液相當(dāng)于被測組分的滴定液相當(dāng)于被測組分的mgmg數(shù)數(shù) V V滴定時，供試品消耗滴定液的體積（滴

42、定時，供試品消耗滴定液的體積（mlml）V VO O滴定時，空白消耗滴定液的體積（滴定時，空白消耗滴定液的體積（mlml）f f濃度校正因子濃度校正因子 2. 2. 在膠束水溶液中滴定在膠束水溶液中滴定 表面活性劑是一種所謂表面活性劑是一種所謂“兩親兩親”分子，即其分子是分子，即其分子是由親水基團(tuán)和親脂基團(tuán)兩部分組成。當(dāng)表面活性劑在由親水基團(tuán)和親脂基團(tuán)兩部分組成。當(dāng)表面活性劑在水溶液中水溶液中濃度很低時濃度很低時，基本上呈，基本上呈單分子單分子狀態(tài)存在，但狀態(tài)存在，但當(dāng)超過某一濃度時（臨界膠束濃度），多余的表面活當(dāng)超過某一濃度時（臨界膠束濃度），多余的表面活性劑分子在溶液中不再分散，而是聚集成

43、有一定分子性劑分子在溶液中不再分散，而是聚集成有一定分子組成數(shù)的聚集物，稱為膠束或膠團(tuán)。組成數(shù)的聚集物，稱為膠束或膠團(tuán)。 膠束具有增溶作用，水溶液中膠束的存在能使不膠束具有增溶作用，水溶液中膠束的存在能使不溶或微溶于水的有機(jī)化合物的溶解度增加，并顯著改溶或微溶于水的有機(jī)化合物的溶解度增加，并顯著改變?nèi)跛?、弱堿性物質(zhì)的解離，使其酸堿性增強(qiáng)。變?nèi)跛?、弱堿性物質(zhì)的解離，使其酸堿性增強(qiáng)。 本法是在有機(jī)表面活性劑的膠束水溶液中本法是在有機(jī)表面活性劑的膠束水溶液中進(jìn)行滴定，用指示劑或電位法指示終點。常用進(jìn)行滴定，用指示劑或電位法指示終點。常用的有機(jī)表面活性劑有：溴化十六烷基三甲基芐的有機(jī)表面活性劑有：溴化

44、十六烷基三甲基芐銨銨(CTMA)(CTMA)和氯化四癸基二甲基芐銨和氯化四癸基二甲基芐銨(TDBA)(TDBA)。 采用本法測定巴比妥和苯巴比妥的結(jié)果的采用本法測定巴比妥和苯巴比妥的結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)差相對標(biāo)準(zhǔn)差（RSDRSD）均小于）均小于0.3%0.3%，并優(yōu)于在水，并優(yōu)于在水- -乙醇混合溶液中的滴定方法。乙醇混合溶液中的滴定方法。 3. 3. 非水滴定法非水滴定法 巴比妥類藥物在非水溶液中的酸性增強(qiáng)，用巴比妥類藥物在非水溶液中的酸性增強(qiáng)，用堿性標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定時，終點較為明顯，可獲得比堿性標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定時，終點較為明顯，可獲得比較滿意的結(jié)果。測定時常用的有機(jī)溶劑有較滿意的結(jié)果。測定時常用的有機(jī)溶

45、劑有二甲基二甲基甲酰胺甲酰胺、甲醇、氯仿、丙酮、無水乙醇、苯、吡、甲醇、氯仿、丙酮、無水乙醇、苯、吡啶、甲醇啶、甲醇- -苯（苯（1515?8585）、乙醇）、乙醇- -氯仿（氯仿（1 1?1010）等；）等；常用的滴定劑有常用的滴定劑有甲醇鉀甲醇鉀（鈉）的甲醇（或乙醇）（鈉）的甲醇（或乙醇）溶液、氫氧化四丁基銨的氯苯溶液等；常用的指溶液、氫氧化四丁基銨的氯苯溶液等；常用的指示劑為示劑為麝香草酚藍(lán)麝香草酚藍(lán)等，也可用玻璃等，也可用玻璃- -甘汞電極系甘汞電極系統(tǒng)，以電位法指示終點。統(tǒng)，以電位法指示終點。 （四）紫外分光光度法（四）紫外分光光度法 巴比妥類藥物在酸性介質(zhì)中幾乎不電離，無明巴比妥類

46、藥物在酸性介質(zhì)中幾乎不電離，無明顯的紫外吸收。但在堿性介質(zhì)中電離為具有紫外吸顯的紫外吸收。但在堿性介質(zhì)中電離為具有紫外吸收特征的結(jié)構(gòu)，因而可采用紫外分光光度法測定其收特征的結(jié)構(gòu)，因而可采用紫外分光光度法測定其含量。本法靈敏度高，專屬性強(qiáng)，廣泛應(yīng)用于巴比含量。本法靈敏度高，專屬性強(qiáng)，廣泛應(yīng)用于巴比妥類藥物的妥類藥物的原料及其制劑的含量測定原料及其制劑的含量測定，以及固體制，以及固體制劑的溶出度和含量均勻度檢查，也常用于體內(nèi)巴比劑的溶出度和含量均勻度檢查，也常用于體內(nèi)巴比妥類藥物的檢測。妥類藥物的檢測。 1. 1. 直接測定的紫外分光光度法直接測定的紫外分光光度法 本法是將供試品溶解后，根據(jù)溶液本

47、法是將供試品溶解后，根據(jù)溶液的的pHpH，在最大吸收波長在最大吸收波長（maxmax）處，直接測定對照）處，直接測定對照品溶液和供試品溶液的吸收度，再計算藥物品溶液和供試品溶液的吸收度，再計算藥物的含量。中國藥典對注射用硫噴妥鈉的含量的含量。中國藥典對注射用硫噴妥鈉的含量測定采用本法。測定采用本法。 Beer-LambertBeer-Lambert定律定律 A = -A = -T =ElC T =ElC AC AC 單組分定量的方法單組分定量的方法： 1. 1. 吸收系數(shù)法（絕對法）吸收系數(shù)法（絕對法）clEA%1cm1lEAc1%1cm)g/100ml(100)g/ml(1%1cmlEAc

48、2. 2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線法標(biāo)準(zhǔn)曲線法 3. 3. 對照對照法法lcElcEAA對供對供%1cm1%1cm1供對供對CCAA對對供供CAAC 教材中以注射用硫噴妥鈉的含量測定為例：教材中以注射用硫噴妥鈉的含量測定為例： 取裝量差異項下的內(nèi)容物，混合均勻，精密稱取適量取裝量差異項下的內(nèi)容物，混合均勻，精密稱取適量（約相當(dāng)于硫噴妥鈉（約相當(dāng)于硫噴妥鈉0.250.25g g），置），置500500mlml量瓶中，加水稀釋量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，量取此溶液用至刻度，搖勻，量取此溶液用0.4%0.4%氫氧化鈉溶液定量稀釋氫氧化鈉溶液定量稀釋制成每制成每1ml1ml中約含中約含5 5gg的溶液；另取硫噴妥

49、對照品，加的溶液；另取硫噴妥對照品，加0.4%0.4%氫氧化鈉溶液溶解并定量稀釋制成每氫氧化鈉溶液溶解并定量稀釋制成每1 1mlml中約含中約含5 5gg的溶液。照分光光度法，在的溶液。照分光光度法，在304304nmnm波長處測定吸收度，根波長處測定吸收度，根據(jù)每支的平均裝量計算。每據(jù)每支的平均裝量計算。每1mg1mg硫噴妥相當(dāng)于硫噴妥相當(dāng)于1.0911.091mgmg的的C C1111H H1717N N2 2NaSNaS。091. 110)3DCAAmg對對樣硫噴妥鈉（ 2. 2. 提取分離后的紫外分光光度法提取分離后的紫外分光光度法 提取分離的提取分離的主要目的主要目的是消除干擾物質(zhì)對

50、測定的影響。是消除干擾物質(zhì)對測定的影響。根據(jù)根據(jù)巴比妥類藥物具有弱酸性，在氯仿等有機(jī)溶劑中易溶，而其巴比妥類藥物具有弱酸性，在氯仿等有機(jī)溶劑中易溶，而其鈉鹽在水中易溶的特點。測定時取供試液適量，加酸酸化后，鈉鹽在水中易溶的特點。測定時取供試液適量，加酸酸化后，用氯仿提取巴比妥類藥物。氯仿提取液加用氯仿提取巴比妥類藥物。氯仿提取液加pH7.2pH7.27.57.5緩沖溶緩沖溶液，振搖，分離棄去水相緩沖液層。再用液，振搖，分離棄去水相緩沖液層。再用0.450.45mol/Lmol/L氫氧化鈉氫氧化鈉溶液提取氯仿層中的巴比妥類藥物，將堿提取液調(diào)節(jié)至適宜溶液提取氯仿層中的巴比妥類藥物，將堿提取液調(diào)節(jié)至

51、適宜pHpH，然后選，然后選擇相應(yīng)的吸收波長進(jìn)行測定。擇相應(yīng)的吸收波長進(jìn)行測定。 USP USP（2424）對苯巴比妥鈉的含量測定采用本法）對苯巴比妥鈉的含量測定采用本法 樣品樣品 溶解溶解 酸化酸化 氯仿提取氯仿提取 精密量取適量精密量取適量氯仿液氯仿液 蒸氣浴上揮干蒸氣浴上揮干 乙醇、乙醇、pH9.6pH9.6緩沖液緩沖液 供試品溶液（樣品液）供試品溶液（樣品液） 苯巴比妥對照品苯巴比妥對照品 乙醇、乙醇、pH9.6pH9.6緩沖液緩沖液 標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)溶液（對照液）（對照液） 240nm240nm為測定波長為測定波長對樣對苯巴比妥鈉（AACmg095. 15)多組分混合物不經(jīng)分離的定量方法

52、多組分混合物不經(jīng)分離的定量方法 計算分光光度計算分光光度法法n解方程組法解方程組法n雙波長分光光度法雙波長分光光度法n差示分光光度法差示分光光度法n導(dǎo)數(shù)光譜法導(dǎo)數(shù)光譜法n三波長法三波長法 3. 3. 差示紫外分光光度法差示紫外分光光度法（A A法法） 本法是利用巴比妥藥物在不同本法是利用巴比妥藥物在不同pHpH值值溶液中的電離級數(shù)不同，因而產(chǎn)生紫外溶液中的電離級數(shù)不同，因而產(chǎn)生紫外吸收光譜的情況不同，以此為依據(jù)設(shè)計吸收光譜的情況不同，以此為依據(jù)設(shè)計測定方法。該法常用于巴比妥類藥物的測定方法。該法常用于巴比妥類藥物的制劑分析，也可用于體內(nèi)巴比妥類藥物制劑分析，也可用于體內(nèi)巴比妥類藥物的監(jiān)測。的監(jiān)

53、測。 （1 1）測定方法測定方法 取兩份相等的供試溶液，分別制成兩種取兩份相等的供試溶液，分別制成兩種不同的化學(xué)環(huán)境（如在其一中加酸、堿或緩不同的化學(xué)環(huán)境（如在其一中加酸、堿或緩沖液改變?nèi)芤旱臎_液改變?nèi)芤旱膒HpH，或在其一中加能與供試，或在其一中加能與供試品發(fā)生某種化學(xué)反應(yīng)的試劑），然后將兩者品發(fā)生某種化學(xué)反應(yīng)的試劑），然后將兩者分別稀釋至同樣濃度，一份置樣品池中，另分別稀釋至同樣濃度，一份置樣品池中，另一份置參比池中，于適當(dāng)波長處，測其吸收一份置參比池中，于適當(dāng)波長處，測其吸收度的差值（度的差值（ A A值）。值）。 （2 2）必要條件必要條件 a.a.供試品在不同的化學(xué)環(huán)境中以不同的分子

54、供試品在不同的化學(xué)環(huán)境中以不同的分子形式存在，它們的吸收光譜有顯著的差異。形式存在，它們的吸收光譜有顯著的差異。 b.b.干擾物的吸收不受測定時化學(xué)環(huán)境的影響，干擾物的吸收不受測定時化學(xué)環(huán)境的影響，光譜行為不變。光譜行為不變。 （3 3）定量依據(jù)定量依據(jù) 供試品在兩種不同的化學(xué)環(huán)境中分別以供試品在兩種不同的化學(xué)環(huán)境中分別以x x、y y表示，干擾物用表示，干擾物用z z表示表示。clAAAAAAAAAyxyxzyzx)( )()(參比樣品cA 也就是說，也就是說，吸收度差值吸收度差值（ A A）僅與待測組分的濃度有關(guān)，而與干僅與待測組分的濃度有關(guān)，而與干擾組分無關(guān)，即干擾組分的干擾被擾組分無關(guān)

55、，即干擾組分的干擾被消除。消除。 可用對照法或標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量可用對照法或標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量 （4 4）特點特點 保留了通常的分光光度法簡易保留了通常的分光光度法簡易快速、直接讀數(shù)的優(yōu)點，又無需事快速、直接讀數(shù)的優(yōu)點，又無需事先分離，并能消除干擾。先分離，并能消除干擾。 以復(fù)方巴比妥散中苯巴比妥的測定為例：以復(fù)方巴比妥散中苯巴比妥的測定為例： 利用復(fù)方苯巴比妥散中的阿司匹林和水楊酸利用復(fù)方苯巴比妥散中的阿司匹林和水楊酸等成分等成分在在pH5.91pH5.91和和8.048.04條件下的紫外吸收光譜重條件下的紫外吸收光譜重合合，A A=0=0，而苯巴比妥在，而苯巴比妥在240240nmnm波長處，在波

56、長處，在pH5.91pH5.91和和8.048.04條件條件下下A A的值最大。因此的值最大。因此A A大小大小只與苯巴比妥濃度成正比，是該法用于苯巴比妥只與苯巴比妥濃度成正比，是該法用于苯巴比妥的定量依據(jù)。的定量依據(jù)。返 回n思考題思考題n1. 1. 如何根據(jù)巴比妥類藥物的結(jié)構(gòu)特征來選如何根據(jù)巴比妥類藥物的結(jié)構(gòu)特征來選擇分析方法？擇分析方法？n2. 2. 巴比妥類藥物的紫外吸收光譜有何特征？巴比妥類藥物的紫外吸收光譜有何特征？n3. 3. 巴比妥類藥物的含量測定方法及其原理巴比妥類藥物的含量測定方法及其原理是什么是什么？練習(xí)與思考 n練習(xí)題練習(xí)題nAA型題型題 1. 1.苯巴比妥中檢查的特殊

57、雜質(zhì)是苯巴比妥中檢查的特殊雜質(zhì)是 A.A.巴比妥巴比妥 B.B.間氨基酚間氨基酚 C.C.水楊酸水楊酸 D.D.中性或堿性物質(zhì)中性或堿性物質(zhì) E.E.氨基酚氨基酚 2. 2.司可巴比妥鈉司可巴比妥鈉中國藥典中國藥典規(guī)定的含量規(guī)定的含量測定方法為測定方法為 A. A. 中和法中和法 B.B.溴量法溴量法 C.C.碘量法碘量法 D. D. 紫外分光法紫外分光法 E. E. 高錳酸鉀法高錳酸鉀法3. 3. 于于NaNa2 2COCO3 3溶液中溶液中加加AgNOAgNO3 3試液，開始生成白試液，開始生成白色沉淀經(jīng)振搖即溶解，繼續(xù)色沉淀經(jīng)振搖即溶解，繼續(xù)加加AgNOAgNO3 3試液，試液，生成的沉

58、淀則不再溶解，該藥物應(yīng)是生成的沉淀則不再溶解，該藥物應(yīng)是A.A. 鹽酸可待因鹽酸可待因 B.B. 咖啡因咖啡因C. C. 新霉素新霉素 D. D. 維生素維生素C CE. E. 異戊巴比妥異戊巴比妥4. 4. 與與NaNONaNO2 2H H2 2SOSO4 4反應(yīng)生成橙黃至橙紅反應(yīng)生成橙黃至橙紅色產(chǎn)物的藥物是色產(chǎn)物的藥物是A. A. 苯巴比妥苯巴比妥B. B. 司可巴比妥司可巴比妥C. C. 巴比妥巴比妥D. D. 硫噴妥鈉硫噴妥鈉E. E. 硫酸奎寧硫酸奎寧 5. 5. 中國藥典（中國藥典（20002000年版）采用年版）采用AgNOAgNO3 3滴定液滴定液（0.10.1 mol/L m

59、ol/L）滴定法測定苯巴比妥的含）滴定法測定苯巴比妥的含量時，指示終點的方法應(yīng)是量時，指示終點的方法應(yīng)是A. KA. K2 2CrOCrO4 4溶液溶液B. B. 熒光黃指示液熒光黃指示液C. Fe(III)C. Fe(III)鹽指示液鹽指示液D. D. 電位法指示終點法電位法指示終點法E. E. 永停滴定法永停滴定法 6. 6. 銀量法測定苯巴比妥鈉含量時銀量法測定苯巴比妥鈉含量時, ,若用若用自身指示法來判斷終點自身指示法來判斷終點, ,樣品消耗標(biāo)樣品消耗標(biāo)準(zhǔn)溶液的摩爾比應(yīng)為準(zhǔn)溶液的摩爾比應(yīng)為A. 1:2 A. 1:2 B. 2:1B. 2:1C. 1:1C. 1:1D. 1:4D. 1:

60、4E. E. 以上都不對以上都不對7. 7. 下列巴比妥類藥物水溶液中酸性最下列巴比妥類藥物水溶液中酸性最小的藥物是小的藥物是A. A. 苯巴比妥苯巴比妥B. B. 巴比妥巴比妥C. C. 異戊巴比妥異戊巴比妥D. D. 異戊巴比妥鈉異戊巴比妥鈉E. E. 以上都不對以上都不對 8. 8. 用酸量法測定巴比妥類藥物含量時，適用酸量法測定巴比妥類藥物含量時，適用的溶劑為用的溶劑為A. A. 堿性堿性B. B. 水水C. C. 酸水酸水D. D. 醇水醇水E. E. 以上都不對以上都不對9. 9. 司可巴比妥鈉司可巴比妥鈉（分子量為分子量為260.27260.27）采用溴量法采用溴量法測定含量時，