實(shí)驗(yàn)室生物安全(NEW)

1、生物技術(shù)大實(shí)驗(yàn)生物技術(shù)大實(shí)驗(yàn)孫孫 林林 講師講師 揚(yáng)州大學(xué)生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院揚(yáng)州大學(xué)生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院實(shí)驗(yàn)室生物安全實(shí)驗(yàn)室生物安全(Laboratory biosafety)一、實(shí)驗(yàn)室概念一、實(shí)驗(yàn)室概念實(shí)驗(yàn)室是人類認(rèn)識(shí)自然、改造自然，利用自然界中與人類生產(chǎn)生活相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室是人類認(rèn)識(shí)自然、改造自然，利用自然界中與人類生產(chǎn)生活相關(guān)的物理、化學(xué)、生物、輻射等各種因素，經(jīng)特殊實(shí)驗(yàn)技術(shù)，按照科學(xué)的規(guī)律物理、化學(xué)、生物、輻射等各種因素，經(jīng)特殊實(shí)驗(yàn)技術(shù)，按照科學(xué)的規(guī)律進(jìn)行研究（實(shí)驗(yàn)）活動(dòng)的場(chǎng)所。進(jìn)行研究（實(shí)驗(yàn)）活動(dòng)的場(chǎng)所。特點(diǎn)：特點(diǎn)： 1、多專業(yè)、多部門、多專業(yè)、多部門 2、接觸的有毒有害物質(zhì)繁多、接觸的有

2、毒有害物質(zhì)繁多 3、對(duì)實(shí)驗(yàn)人員產(chǎn)生各種危害、對(duì)實(shí)驗(yàn)人員產(chǎn)生各種危害 4、專業(yè)性強(qiáng)，管理難度大、專業(yè)性強(qiáng)，管理難度大 實(shí)驗(yàn)室安全管理應(yīng)根據(jù)各種實(shí)驗(yàn)室的專業(yè)特點(diǎn)及接觸的有害實(shí)驗(yàn)室安全管理應(yīng)根據(jù)各種實(shí)驗(yàn)室的專業(yè)特點(diǎn)及接觸的有害因子進(jìn)行分類管理，采取不同的安全防護(hù)措施，但其防火、因子進(jìn)行分類管理，采取不同的安全防護(hù)措施，但其防火、防盜、防水及消防工作是一個(gè)共性的任務(wù)，生物安全實(shí)驗(yàn)室防盜、防水及消防工作是一個(gè)共性的任務(wù)，生物安全實(shí)驗(yàn)室的安全防護(hù)主要有：的安全防護(hù)主要有： 生物安全防護(hù)生物安全防護(hù) 化學(xué)物品安全防護(hù)化學(xué)物品安全防護(hù) 放射（輻射）安全防護(hù)放射（輻射）安全防護(hù) 動(dòng)物安全防護(hù)等動(dòng)物安全防護(hù)等二、

3、實(shí)驗(yàn)室安全管理范圍二、實(shí)驗(yàn)室安全管理范圍三、實(shí)驗(yàn)室生物安全的核心三、實(shí)驗(yàn)室生物安全的核心管理管理1 1、生物安全、生物安全管理是關(guān)鍵管理是關(guān)鍵n如果缺乏健全和行之有效的管理體系，無(wú)論多么高級(jí)如果缺乏健全和行之有效的管理體系，無(wú)論多么高級(jí)的實(shí)驗(yàn)室硬件設(shè)施，都難以發(fā)揮其安全作用，也無(wú)法的實(shí)驗(yàn)室硬件設(shè)施，都難以發(fā)揮其安全作用，也無(wú)法確保生物安全。確保生物安全。n與發(fā)達(dá)國(guó)家的差距主要表現(xiàn)在：人員素質(zhì)（社會(huì)責(zé)任與發(fā)達(dá)國(guó)家的差距主要表現(xiàn)在：人員素質(zhì)（社會(huì)責(zé)任心與自覺(jué)性）和管理制度的剛性（國(guó)外專家認(rèn)為中國(guó)心與自覺(jué)性）和管理制度的剛性（國(guó)外專家認(rèn)為中國(guó)大部分大部分BSL-3實(shí)驗(yàn)室硬件比較好）實(shí)驗(yàn)室硬件比較好）

4、 n據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，國(guó)內(nèi)外絕大多數(shù)生物安全實(shí)驗(yàn)據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，國(guó)內(nèi)外絕大多數(shù)生物安全實(shí)驗(yàn)室的感染事件和遺漏事故都是由管理不善而導(dǎo)室的感染事件和遺漏事故都是由管理不善而導(dǎo)致的，國(guó)內(nèi)更是如此。致的，國(guó)內(nèi)更是如此。中國(guó)中國(guó)CDC實(shí)驗(yàn)人員感染非典病毒事故實(shí)驗(yàn)人員感染非典病毒事故 2004年年4月中國(guó)月中國(guó)CDC病毒所腹瀉病毒室兩名研究生在做病病毒所腹瀉病毒室兩名研究生在做病毒實(shí)驗(yàn)時(shí)感染毒實(shí)驗(yàn)時(shí)感染SARS病毒。（后患者又引發(fā)北京與安徽各病毒。（后患者又引發(fā)北京與安徽各1人感染）人感染） 事故調(diào)查：事故調(diào)查： 事故起因系該所實(shí)驗(yàn)人員多次違規(guī)將未完全滅活的事故起因系該所實(shí)驗(yàn)人員多次違規(guī)將未完全滅活的SARS病

5、毒從病毒從P3實(shí)驗(yàn)室?guī)С鲋疗胀▽?shí)驗(yàn)室操作而引起（時(shí)間與實(shí)驗(yàn)室?guī)С鲋疗胀▽?shí)驗(yàn)室操作而引起（時(shí)間與患者發(fā)病相吻合）。患者發(fā)病相吻合）。東北農(nóng)業(yè)大學(xué)布魯氏菌病感染事件。東北農(nóng)業(yè)大學(xué)布魯氏菌病感染事件。2 2、事故頻發(fā)的背后是、事故頻發(fā)的背后是“海恩法則海恩法則” n關(guān)于飛行安全的關(guān)于飛行安全的“海恩法則海恩法則”n一起重大的飛行安全事故背后一起重大的飛行安全事故背后有有29個(gè)事故征兆個(gè)事故征兆n每個(gè)征兆背后每個(gè)征兆背后有有 300個(gè)事故苗頭個(gè)事故苗頭n每個(gè)苗頭背后還有每個(gè)苗頭背后還有1000個(gè)事故隱患個(gè)事故隱患n幾乎所有的災(zāi)難都是多個(gè)漏洞的疊加。只要認(rèn)真落實(shí)已有幾乎所有的災(zāi)難都是多個(gè)漏洞的疊加。只要

6、認(rèn)真落實(shí)已有的規(guī)則、規(guī)定，的規(guī)則、規(guī)定，很多事故完全可以避免很多事故完全可以避免3、實(shí)驗(yàn)室感染必然性和可控性、實(shí)驗(yàn)室感染必然性和可控性n必然性必然性: 客觀存在，無(wú)法避免客觀存在，無(wú)法避免n可控性可控性: 只要重視，認(rèn)真對(duì)待是可以控制的只要重視，認(rèn)真對(duì)待是可以控制的五、生物安全實(shí)驗(yàn)室五、生物安全實(shí)驗(yàn)室n生物安全實(shí)驗(yàn)室實(shí)質(zhì)實(shí)質(zhì)是指生物安全實(shí)驗(yàn)室實(shí)質(zhì)實(shí)質(zhì)是指: 通過(guò)規(guī)范的通過(guò)規(guī)范的實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建造、實(shí)驗(yàn)設(shè)備的配置、個(gè)人防護(hù)裝備造、實(shí)驗(yàn)設(shè)備的配置、個(gè)人防護(hù)裝備的使用（硬件）嚴(yán)格的使用（硬件）嚴(yán)格遵從遵從標(biāo)準(zhǔn)化的操作程序標(biāo)準(zhǔn)化的操作程序和和管理規(guī)程管理規(guī)程等（軟件）。等（軟件）。n確保操作生

7、物危險(xiǎn)因子的確保操作生物危險(xiǎn)因子的工作人員工作人員不受實(shí)驗(yàn)對(duì)象的傷害，不受實(shí)驗(yàn)對(duì)象的傷害，確保確保周圍環(huán)境周圍環(huán)境不受其污染，確保不受其污染，確保實(shí)驗(yàn)因子實(shí)驗(yàn)因子保持原有本性所保持原有本性所采取綜合措施的實(shí)驗(yàn)室。采取綜合措施的實(shí)驗(yàn)室。 生物安全防護(hù)三原則（三要素）生物安全防護(hù)三原則（三要素）實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)的內(nèi)容包括：實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)的內(nèi)容包括：1. 安全設(shè)備、個(gè)體防護(hù)裝置和措施（一級(jí)防護(hù)）安全設(shè)備、個(gè)體防護(hù)裝置和措施（一級(jí)防護(hù)）2. 實(shí)驗(yàn)室的特殊設(shè)計(jì)和建設(shè)要求（二級(jí)防護(hù)）實(shí)驗(yàn)室的特殊設(shè)計(jì)和建設(shè)要求（二級(jí)防護(hù)）3. 嚴(yán)格的管理制度和標(biāo)準(zhǔn)化的操作程序和規(guī)程等方面嚴(yán)格的管理制度和標(biāo)準(zhǔn)化的操作程

8、序和規(guī)程等方面采取綜合措施來(lái)達(dá)到：采取綜合措施來(lái)達(dá)到： 確保實(shí)驗(yàn)室工作人員不受實(shí)驗(yàn)對(duì)象侵染，確保周圍確保實(shí)驗(yàn)室工作人員不受實(shí)驗(yàn)對(duì)象侵染，確保周圍環(huán)境不受其污染的目的環(huán)境不受其污染的目的 。危險(xiǎn)級(jí)別危險(xiǎn)級(jí)別個(gè)體危險(xiǎn)度個(gè)體危險(xiǎn)度群體危險(xiǎn)度群體危險(xiǎn)度實(shí)驗(yàn)室分級(jí)實(shí)驗(yàn)室分級(jí)例如例如1低低低低Level 1大腸桿菌大腸桿菌2中等中等限制性限制性Level 2 大腸大腸O157，鏈球菌，鏈球菌 & 沙門菌屬沙門菌屬，腺病毒，腺病毒，A, B & C型肝炎，流感，型肝炎，流感，麻疹麻疹3高高低低Level 3 結(jié)核分枝桿菌，漢塔病毒，結(jié)核分枝桿菌，漢塔病毒，HIV，黃熱病病毒黃熱病病毒4高高高高Level 4

9、 由拉沙病毒，由拉沙病毒，Ebola virus，馬爾堡，馬爾堡病毒病毒不可能導(dǎo)致健康的人和動(dòng)物感染很少導(dǎo)致病人和動(dòng)物感染可能導(dǎo)致嚴(yán)重疾病很可能導(dǎo)致非常嚴(yán)重的疾病常規(guī)病原體常規(guī)病原體Level 1Level 1 n基本的實(shí)驗(yàn)室基本的實(shí)驗(yàn)室n不需要特殊設(shè)置不需要特殊設(shè)置n不需要生物安全柜不需要生物安全柜適用于實(shí)驗(yàn)對(duì)象已知對(duì)健康成年人無(wú)致病作用，對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員和環(huán)境的潛在危害很小。如用于教學(xué)的普通微生物實(shí)驗(yàn)室等。典型的一級(jí)生物安全水平實(shí)驗(yàn)室（典型的一級(jí)生物安全水平實(shí)驗(yàn)室（CUH2A ，Princeton ，NJ ，USA ）Level 2 n具有具有2級(jí)實(shí)驗(yàn)室相應(yīng)的臨床的、診斷的、研級(jí)實(shí)驗(yàn)室相應(yīng)

10、的臨床的、診斷的、研究的和教學(xué)的設(shè)備究的和教學(xué)的設(shè)備n容易產(chǎn)生氣溶膠或者飛濺時(shí)需要容易產(chǎn)生氣溶膠或者飛濺時(shí)需要 I級(jí)或級(jí)或II級(jí)級(jí)的生物安全柜的生物安全柜 n需要有對(duì)突發(fā)事件的應(yīng)急處理預(yù)案需要有對(duì)突發(fā)事件的應(yīng)急處理預(yù)案n需要進(jìn)入規(guī)定需要進(jìn)入規(guī)定n適用于實(shí)驗(yàn)對(duì)象對(duì)人和環(huán)境具有中等潛在適用于實(shí)驗(yàn)對(duì)象對(duì)人和環(huán)境具有中等潛在危害危害* * 有效的疫苗或抗生素治療有效有效的疫苗或抗生素治療有效典型的二級(jí)生物安全水平實(shí)驗(yàn)室（典型的二級(jí)生物安全水平實(shí)驗(yàn)室（CUH2A ，Princeton ，NJ ，USA ）。）。在生物安全柜中進(jìn)行可能發(fā)生氣溶膠的操作程序。門保持關(guān)閉并貼上適當(dāng)?shù)奈ｋU(xiǎn)在生物安全柜中進(jìn)行可能發(fā)

11、生氣溶膠的操作程序。門保持關(guān)閉并貼上適當(dāng)?shù)奈ｋU(xiǎn)標(biāo)志。潛在被污染的廢棄物同普通廢棄物隔開(kāi)。標(biāo)志。潛在被污染的廢棄物同普通廢棄物隔開(kāi)。n專門的設(shè)計(jì)和建筑專門的設(shè)計(jì)和建筑最主要是個(gè)體防護(hù)最主要是個(gè)體防護(hù)其次是保護(hù)環(huán)境其次是保護(hù)環(huán)境n所有的工作人員在進(jìn)入實(shí)所有的工作人員在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行操作前均需經(jīng)過(guò)驗(yàn)室進(jìn)行操作前均需經(jīng)過(guò)嚴(yán)格培訓(xùn)包括嚴(yán)格培訓(xùn)包括個(gè)人防護(hù)裝個(gè)人防護(hù)裝備備，設(shè)備，垃圾處理，設(shè)備，垃圾處理Level 3 適用于實(shí)驗(yàn)對(duì)象是通過(guò)呼吸途徑適用于實(shí)驗(yàn)對(duì)象是通過(guò)呼吸途徑使人感染導(dǎo)致重的甚至是致死性使人感染導(dǎo)致重的甚至是致死性疾病的感染性材料。疾病的感染性材料。結(jié)核桿菌結(jié)核桿菌圣路易腦炎病毒圣路易腦炎病

12、毒伯納特考克斯體伯納特考克斯體漢坦病毒等漢坦病毒等典型的三級(jí)生物安全水平實(shí)驗(yàn)室（典型的三級(jí)生物安全水平實(shí)驗(yàn)室（CUH2A ，Princeton ，NJ ，USA ）。）。實(shí)驗(yàn)室與公共通道分開(kāi)并通過(guò)緩沖間（雙門入口或二級(jí)生物安全水平的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室）或氣實(shí)驗(yàn)室與公共通道分開(kāi)并通過(guò)緩沖間（雙門入口或二級(jí)生物安全水平的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室）或氣鎖室進(jìn)入。處理廢棄物前，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)先進(jìn)行高壓滅菌以清除污染。應(yīng)有非手控的水槽。鎖室進(jìn)入。處理廢棄物前，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)先進(jìn)行高壓滅菌以清除污染。應(yīng)有非手控的水槽。形成向內(nèi)氣流而且涉及感染性材料的全部工作應(yīng)在生物安全柜中進(jìn)行。形成向內(nèi)氣流而且涉及感染性材料的全部工作應(yīng)在生物安全柜中

13、進(jìn)行。n實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對(duì)人體規(guī)程、安全設(shè)備適用于對(duì)人體具有高度的危險(xiǎn)性，通過(guò)氣溶具有高度的危險(xiǎn)性，通過(guò)氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明，膠途徑傳播或傳播途徑不明，目前尚無(wú)有效的疫苗或治療方目前尚無(wú)有效的疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素。與法的致病微生物及其毒素。與上述情況類似的不明微生物，上述情況類似的不明微生物，也必須在四級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)也必須在四級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。驗(yàn)室中進(jìn)行。Level 4 六、實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染的原因六、實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染的原因 實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染的原因主要有誤食，皮膚實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染的原因主要有誤食，皮膚切割，針刺，動(dòng)

14、物抓、咬，氣溶膠吸入等。切割，針刺，動(dòng)物抓、咬，氣溶膠吸入等。正確操作和使用各種儀器和設(shè)備，對(duì)正確操作和使用各種儀器和設(shè)備，對(duì)于各種可能的危害應(yīng)非常熟悉。于各種可能的危害應(yīng)非常熟悉。掌握各種感染性物質(zhì)操作的一般準(zhǔn)則掌握各種感染性物質(zhì)操作的一般準(zhǔn)則和技術(shù)要點(diǎn)。和技術(shù)要點(diǎn)。BSL-1人員防護(hù)人員防護(hù)1) 在實(shí)驗(yàn)室操作感染性材料時(shí)，任何時(shí)候都必須戴口罩和防護(hù)鏡、穿著工作服，在實(shí)驗(yàn)室操作感染性材料時(shí)，任何時(shí)候都必須戴口罩和防護(hù)鏡、穿著工作服，穿防護(hù)鞋襪，不得裸露腿部和腳趾，必要時(shí)穿連體衣。穿防護(hù)鞋襪，不得裸露腿部和腳趾，必要時(shí)穿連體衣。2) 在進(jìn)行可能直接或意外接觸到血液、體液以及其他具有潛在感染性的

15、材料或在進(jìn)行可能直接或意外接觸到血液、體液以及其他具有潛在感染性的材料或感染性動(dòng)物的操作時(shí)，應(yīng)戴上合適的手套。手套用完后，應(yīng)先消毒再摘除，感染性動(dòng)物的操作時(shí)，應(yīng)戴上合適的手套。手套用完后，應(yīng)先消毒再摘除，隨后必須洗手。隨后必須洗手。3) 在處理完感染性實(shí)驗(yàn)材料和動(dòng)物后，以及在離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域前，都必須在處理完感染性實(shí)驗(yàn)材料和動(dòng)物后，以及在離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域前，都必須洗手。洗手。4) 為了防止眼睛或面部受到灑濺物、碰撞物或人工紫外線輻射的傷害，必須戴為了防止眼睛或面部受到灑濺物、碰撞物或人工紫外線輻射的傷害，必須戴安全眼鏡，必要時(shí)戴面罩安全眼鏡，必要時(shí)戴面罩(面具面具)或其他防護(hù)裝備?；蚱渌?/p>

16、護(hù)裝備。5) 嚴(yán)禁穿著實(shí)驗(yàn)室防護(hù)裝備離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)禁穿著實(shí)驗(yàn)室防護(hù)裝備離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室(如去餐廳、咖啡廳、辦公室、圖書(shū)館、如去餐廳、咖啡廳、辦公室、圖書(shū)館、員工休息室和衛(wèi)生間員工休息室和衛(wèi)生間)，更不能把防護(hù)器械帶回家。，更不能把防護(hù)器械帶回家。6) 禁止在實(shí)驗(yàn)室的準(zhǔn)備間和操作間里進(jìn)食、飲水、吸煙、化妝、處理隱形眼鏡禁止在實(shí)驗(yàn)室的準(zhǔn)備間和操作間里進(jìn)食、飲水、吸煙、化妝、處理隱形眼鏡和儲(chǔ)存食品和飲料。和儲(chǔ)存食品和飲料。7) 在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)用過(guò)的防護(hù)服要先消毒后清洗，不得和日常服裝放在同一柜子內(nèi)。在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)用過(guò)的防護(hù)服要先消毒后清洗，不得和日常服裝放在同一柜子內(nèi)。Contamination of Hands

17、and EnvironmentFirst cleaning, then disinfection (if appropriate)控制感染控制感染最簡(jiǎn)單，最有效，最方便，最經(jīng)濟(jì)方法最簡(jiǎn)單，最有效，最方便，最經(jīng)濟(jì)方法 標(biāo)準(zhǔn)洗手方法標(biāo)準(zhǔn)洗手方法 正確洗手的方法正確洗手的方法 n正確洗手方法包含下列五個(gè)步驟：正確洗手方法包含下列五個(gè)步驟： 1、濕、濕 ：在水龍頭下把手淋濕，包含手腕、手掌和手指均要充分淋濕。：在水龍頭下把手淋濕，包含手腕、手掌和手指均要充分淋濕。 2、搓：雙手擦上肥皂，搓洗雙手之手心、手背、手指、指尖、指甲及手腕最少要洗、搓：雙手擦上肥皂，搓洗雙手之手心、手背、手指、指尖、指甲及手腕

18、最少要洗20秒。秒。 3、沖：用清水將雙手徹底沖洗乾凈。、沖：用清水將雙手徹底沖洗乾凈。 4、捧：因?yàn)橄词智伴_(kāi)水龍頭時(shí)，手實(shí)際上已污染了水龍頭，故捧水將水龍頭沖洗乾凈，或用擦、捧：因?yàn)橄词智伴_(kāi)水龍頭時(shí)，手實(shí)際上已污染了水龍頭，故捧水將水龍頭沖洗乾凈，或用擦 手紙包著水龍頭關(guān)閉水龍頭。手紙包著水龍頭關(guān)閉水龍頭。 5、擦：以擦手紙將雙手擦乾。、擦：以擦手紙將雙手擦乾。 n洗手的注意事項(xiàng)：洗手的注意事項(xiàng)： 1、最好使用溫水：攝氏、最好使用溫水：攝氏38-42度的溫水比冷水較有清潔效果。度的溫水比冷水較有清潔效果。 2、去除手部首飾：如手上戴了戒指，會(huì)使局部形成一個(gè)藏污納垢的特區(qū)，難以完全洗凈。、去除手部首飾：如手上戴了戒指，會(huì)使局部形成一個(gè)藏污納垢的特區(qū)，難以完全洗凈。 3、要使用肥皂：效果比單獨(dú)用水洗要好得多。、要使用肥皂：效果比單獨(dú)用水洗要好得多。 4、時(shí)間、時(shí)間30秒：全部的洗手時(shí)間至少約需秒：全部的洗手時(shí)間至少約需30秒，才能達(dá)到有效的清潔。秒，才能達(dá)到有效的清潔。 5、沖洗乾凈：在整個(gè)沖洗過(guò)程中，雙手須保持比較向下的姿勢(shì)，以避免水逆流回未洗的手肘部、沖洗乾凈：在整個(gè)沖洗過(guò)程中，雙手須保持比較向下的姿勢(shì)，以避免水逆流回未洗的手肘部位。位。 6、使用擦手紙：最好不要使用毛巾，因毛巾容易潛藏病菌，易將洗凈的雙手沾染病菌。擦手紙、使用擦手紙：最好不要使用毛巾，