質(zhì)譜分析法--定性與定量

1、北京市海淀區(qū)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所北京市海淀區(qū)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所國(guó)家食品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗(yàn)中心國(guó)家食品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗(yàn)中心2011年年06月月23日日質(zhì)譜分析方法質(zhì)譜分析方法定性與定量定性與定量 The birth of VenusLC and MS: A Match Made in HeavenJames Jorgenson，University of North Carolina59th， ASMS，June 5，Denver，USA The Arnolfini Wedding阿爾諾菲尼的婚禮 揚(yáng).凡.艾克 1434 主要內(nèi)容主要內(nèi)容一、質(zhì)譜基礎(chǔ)及相關(guān)術(shù)語(yǔ)一、質(zhì)譜基礎(chǔ)及相關(guān)術(shù)語(yǔ)二、定性（確證）方

2、法二、定性（確證）方法三、定量方法三、定量方法 真空系統(tǒng)真空系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)檢測(cè)器檢測(cè)器數(shù)據(jù)系統(tǒng)數(shù)據(jù)系統(tǒng)質(zhì)量分析器質(zhì)量分析器離子源離子源大氣壓大氣壓質(zhì)譜儀的基本結(jié)構(gòu)質(zhì)譜儀的基本結(jié)構(gòu)GCLCICCEEI、CIESIAPCI、APPIMALDIDART-四級(jí)桿四級(jí)桿離子阱離子阱飛行時(shí)間飛行時(shí)間磁質(zhì)譜磁質(zhì)譜FT-ICR一、質(zhì)譜基礎(chǔ)及相關(guān)術(shù)語(yǔ)一、質(zhì)譜基礎(chǔ)及相關(guān)術(shù)語(yǔ) 各種離子化方法的使用范圍各種離子化方法的使用范圍 選擇的依據(jù)選擇的依據(jù)揮發(fā)性揮發(fā)性 熱穩(wěn)定性熱穩(wěn)定性 極性極性 Analyte PolarityESI or MALDIAPCI/APPIGC/MS 質(zhì)量范圍質(zhì)量范圍質(zhì)譜儀所能測(cè)定的離子質(zhì)

3、荷比的范圍質(zhì)譜儀所能測(cè)定的離子質(zhì)荷比的范圍不同儀器不同儀器不同應(yīng)用不同應(yīng)用質(zhì)譜儀主要性能指標(biāo)質(zhì)譜儀主要性能指標(biāo) 掃描速度掃描速度 分辨率分辨率色譜峰的數(shù)據(jù)點(diǎn)數(shù)目和峰寬、掃描時(shí)間有關(guān)色譜峰的數(shù)據(jù)點(diǎn)數(shù)目和峰寬、掃描時(shí)間有關(guān) 質(zhì)譜儀主要性能指標(biāo)質(zhì)譜儀主要性能指標(biāo)0.0020.0040.0060.0080.00100.003.904.004.104.204.304.404.500.0020.0040.0060.0080.00100.003.904.004.104.204.304.404.500.0020.0040.0060.0080.00100.003.904.004.104.204.304.404.

4、50 質(zhì)譜儀主要性能指標(biāo)質(zhì)譜儀主要性能指標(biāo) 磁質(zhì)譜的分辨率定義最為嚴(yán)格：對(duì)兩個(gè)相等強(qiáng)度磁質(zhì)譜的分辨率定義最為嚴(yán)格：對(duì)兩個(gè)相等強(qiáng)度的相鄰峰，當(dāng)兩峰間的峰谷不大于其峰高的相鄰峰，當(dāng)兩峰間的峰谷不大于其峰高10%時(shí)，則時(shí)，則認(rèn)為兩峰已經(jīng)分開(kāi)，其分辨率：認(rèn)為兩峰已經(jīng)分開(kāi)，其分辨率： mmmmmR1121磁質(zhì)譜中，磁質(zhì)譜中，R不隨不隨m/z變化，在測(cè)定小分子時(shí)有優(yōu)勢(shì)變化，在測(cè)定小分子時(shí)有優(yōu)勢(shì)eg. R=5000，500與與500.1 5000與與5001 分辨率分辨率 有機(jī)質(zhì)譜僅要求有機(jī)質(zhì)譜僅要求50峰谷峰谷剛剛分開(kāi)就算分開(kāi)（這時(shí)剛剛分開(kāi)就算分開(kāi)（這時(shí)稱為有機(jī)質(zhì)譜的單位質(zhì)量稱為有機(jī)質(zhì)譜的單位質(zhì)量分辨）分

5、辨） 簡(jiǎn)化為用單峰法表示，即簡(jiǎn)化為用單峰法表示，即測(cè)定一個(gè)峰半峰高處的全測(cè)定一個(gè)峰半峰高處的全峰寬峰寬Full width half Maximum（簡(jiǎn)寫為（簡(jiǎn)寫為FWHM） 分分 辨辨 率率eg. FWHM=0.25m/z=100，R=400m/z=1000，R=4000 分分 辨辨 率率25009949.270061.289949.27MMR例如：要區(qū)分以下離子，分辨率要達(dá)到例如：要區(qū)分以下離子，分辨率要達(dá)到 CO+27.9949 N2+28.0061 ArCl+ 74.9312 As+74.921678009216.749312.749216.74MMR atto摩爾級(jí)的靈敏度；摩爾級(jí)的

6、靈敏度； 優(yōu)于優(yōu)于2 ppm的的MS質(zhì)量準(zhǔn)確度質(zhì)量準(zhǔn)確度 優(yōu)于優(yōu)于5 ppm的的MS/MS質(zhì)量準(zhǔn)確度質(zhì)量準(zhǔn)確度 線性動(dòng)態(tài)范圍可以達(dá)到五個(gè)數(shù)量級(jí)線性動(dòng)態(tài)范圍可以達(dá)到五個(gè)數(shù)量級(jí) ； 質(zhì)量分辨率至質(zhì)量分辨率至20,000 高速數(shù)據(jù)采集能力（每秒獲得高速數(shù)據(jù)采集能力（每秒獲得10張張MS/MS譜圖），更好地兼容超快譜圖），更好地兼容超快速液相色譜速液相色譜 寬質(zhì)量范圍：寬質(zhì)量范圍：m/z范圍從范圍從2520,000 u 舉例：舉例： 質(zhì)譜峰類型質(zhì)譜峰類型 分子離子分子離子 必須是化合物譜圖中質(zhì)量最高的離子必須是化合物譜圖中質(zhì)量最高的離子 必須是奇電子離子、符合氮規(guī)則必須是奇電子離子、符合氮規(guī)則 必須能

7、通過(guò)丟失合理的中性離子，產(chǎn)生譜圖中高質(zhì)量區(qū)的重要離子必須能通過(guò)丟失合理的中性離子，產(chǎn)生譜圖中高質(zhì)量區(qū)的重要離子 準(zhǔn)分子離子準(zhǔn)分子離子 碎片離子碎片離子 同位素離子同位素離子 由于天然同位素的存在，因此在質(zhì)譜圖上由于天然同位素的存在，因此在質(zhì)譜圖上出現(xiàn)出現(xiàn)M+1，M+2等峰，由等峰，由這些同位素所形成的峰稱之為同位素峰這些同位素所形成的峰稱之為同位素峰一、質(zhì)譜基礎(chǔ)及相關(guān)術(shù)語(yǔ)一、質(zhì)譜基礎(chǔ)及相關(guān)術(shù)語(yǔ) 術(shù)語(yǔ)術(shù)語(yǔ) 1-Cl2-Cl 1-Br2-Br 3-Br4-Br Beynon 表表 例如：例如： M=150化合物化合物 M+1 M+2 化合物化合物 M+1 M+2C6H14NOCl 8.15 0.4

8、9 C7H11N4 9.25 0.38C6H14O4 6.86 1.0 C8H6 O3 8.36 0.95C7H2O4 7.75 1.06 C8H8NO2 9.23 0.78C7H4NO3 8.13 1.06 C8H11N2O 9.61 0.61C7H6N2O2 8.50 0.72 C8H12N3 9.98 0.45C7H8N3O 8.88 0.55 C9H10O2 9.96 0.84 二、定性（確證）方法二、定性（確證）方法 質(zhì)譜法只有在與色譜分離在線或脫機(jī)聯(lián)用時(shí)才能作為質(zhì)譜法只有在與色譜分離在線或脫機(jī)聯(lián)用時(shí)才能作為確證方法確證方法 在分析儀器上的進(jìn)樣順序是：空白溶劑、陰性控制樣在分析儀器上

9、的進(jìn)樣順序是：空白溶劑、陰性控制樣品、要確證的樣品、陽(yáng)性控制樣品再進(jìn)樣，最后是陰品、要確證的樣品、陽(yáng)性控制樣品再進(jìn)樣，最后是陰性控制樣品性控制樣品 1. 基本原則基本原則 保留時(shí)間保留時(shí)間 實(shí)驗(yàn)室條件下分析物的最小可接受保留時(shí)間，實(shí)驗(yàn)室條件下分析物的最小可接受保留時(shí)間， 2t0 氣相色譜（氣相色譜（GC）或液相色譜（）或液相色譜（LC）時(shí)，半峰寬應(yīng)在原來(lái)峰）時(shí)，半峰寬應(yīng)在原來(lái)峰寬的寬的90-110%以內(nèi)，保留時(shí)間的變化應(yīng)在以內(nèi)，保留時(shí)間的變化應(yīng)在5%以內(nèi)以內(nèi)二、定性（確證）方法二、定性（確證）方法 2. 色譜分離色譜分離 保留時(shí)間保留時(shí)間 測(cè)試部分中分析物的保留時(shí)間（或相對(duì)保留時(shí)測(cè)試部分中分析

10、物的保留時(shí)間（或相對(duì)保留時(shí)間），應(yīng)在一個(gè)特定的保留時(shí)間窗口范圍內(nèi)與校正標(biāo)間），應(yīng)在一個(gè)特定的保留時(shí)間窗口范圍內(nèi)與校正標(biāo)準(zhǔn)的保留時(shí)間相符。保留時(shí)間窗口與該色譜系統(tǒng)的分準(zhǔn)的保留時(shí)間相符。保留時(shí)間窗口與該色譜系統(tǒng)的分辨能力相當(dāng)。分析物和內(nèi)標(biāo)的保留時(shí)間之比，應(yīng)與校辨能力相當(dāng)。分析物和內(nèi)標(biāo)的保留時(shí)間之比，應(yīng)與校正溶液的相對(duì)保留時(shí)間一致，正溶液的相對(duì)保留時(shí)間一致，GC 偏差為偏差為0.5%，LC 偏差為偏差為2.5% 二、定性（確證）方法二、定性（確證）方法 2. 色譜分離色譜分離 GBT 16631-2008 高效液相色譜法通則：同樣條件下重復(fù)試驗(yàn)高效液相色譜法通則：同樣條件下重復(fù)試驗(yàn)的保留數(shù)據(jù)的分散性

11、，的保留數(shù)據(jù)的分散性，RSD3% JJG705-2002 液相色譜儀檢定規(guī)程：定性測(cè)量重復(fù)性（液相色譜儀檢定規(guī)程：定性測(cè)量重復(fù)性（6次測(cè)次測(cè)量）量）RSD1.5% JJF（閩）（閩）10322010 液相色譜液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀校準(zhǔn)規(guī)范：定性質(zhì)譜聯(lián)用儀校準(zhǔn)規(guī)范：定性重復(fù)性重復(fù)性 RSD2% JY/T 0211996 分析型氣相色譜方法通則：整機(jī)重復(fù)性分析型氣相色譜方法通則：整機(jī)重復(fù)性 保留保留時(shí)間時(shí)間RSD5二、定性（確證）方法二、定性（確證）方法 關(guān)于保留時(shí)間的討論關(guān)于保留時(shí)間的討論 GB/T 22260-2008 飼料中甲基睪丸酮的測(cè)定飼料中甲基睪丸酮的測(cè)定 高效液高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法相

12、色譜串聯(lián)質(zhì)譜法 試樣保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)品的相對(duì)偏差不大于試樣保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)品的相對(duì)偏差不大于15% GB/T 22147-2008 飼料中沙丁胺醇、萊克多巴胺和飼料中沙丁胺醇、萊克多巴胺和鹽酸克侖特羅的測(cè)定鹽酸克侖特羅的測(cè)定 液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法 樣品與標(biāo)準(zhǔn)品保留時(shí)間的相對(duì)偏差不大于樣品與標(biāo)準(zhǔn)品保留時(shí)間的相對(duì)偏差不大于0.5%二、定性（確證）方法二、定性（確證）方法 關(guān)于保留時(shí)間的討論關(guān)于保留時(shí)間的討論 全掃描全掃描 scan 選擇離子監(jiān)測(cè)選擇離子監(jiān)測(cè) SIM MS-MSn技術(shù)，如多反應(yīng)監(jiān)測(cè)技術(shù)，如多反應(yīng)監(jiān)測(cè) MRM二、定性（確證）方法二、定性（確證）方法 3. 質(zhì)譜檢測(cè)質(zhì)譜檢測(cè)

13、全掃描全掃描 scan 用記錄全掃描質(zhì)譜圖進(jìn)行質(zhì)譜測(cè)定時(shí)，在標(biāo)準(zhǔn)品參用記錄全掃描質(zhì)譜圖進(jìn)行質(zhì)譜測(cè)定時(shí)，在標(biāo)準(zhǔn)品參考圖譜中所有相對(duì)豐度考圖譜中所有相對(duì)豐度10%（分子離子、分子離子的特（分子離子、分子離子的特征加成物、特征碎片離子、同位素離子等）的特征離子征加成物、特征碎片離子、同位素離子等）的特征離子都必須檢測(cè)都必須檢測(cè) 選擇離子監(jiān)測(cè)選擇離子監(jiān)測(cè) SIM 用碎片離子色譜圖進(jìn)行質(zhì)譜測(cè)定時(shí)，分子離子最好用碎片離子色譜圖進(jìn)行質(zhì)譜測(cè)定時(shí)，分子離子最好是一個(gè)選擇的檢測(cè)離子。選擇的檢測(cè)離子并不一定要源是一個(gè)選擇的檢測(cè)離子。選擇的檢測(cè)離子并不一定要源于分子的同一部分。每個(gè)檢測(cè)離子的信噪比應(yīng)于分子的同一部分。

14、每個(gè)檢測(cè)離子的信噪比應(yīng)31二、定性（確證）方法二、定性（確證）方法 3. 質(zhì)譜檢測(cè)質(zhì)譜檢測(cè) 相對(duì)豐度（相對(duì)豐度（%基峰）基峰）EI-GC-MS（相對(duì)）（相對(duì)）CI-GC-MS、GC-MSn、LC-MS、LC-MSn（相對(duì)）（相對(duì)） 50%10%20% 20% to 50%15%25% 10% to 20%20%30% 10%50%50%相對(duì)離子豐度最大容許偏差相對(duì)離子豐度最大容許偏差二、定性（確證）方法二、定性（確證）方法 二、定性（確證）方法二、定性（確證）方法 2002/657/EC規(guī)定：規(guī)定： 要確證指令要確證指令 96/23/EC 附錄附錄I-A 組所列的物質(zhì)，最少需要組所列的物質(zhì)，最

15、少需要4 個(gè)識(shí)別個(gè)識(shí)別點(diǎn)點(diǎn)，包括具有促合成作用和其他未允許的化合物，如二苯乙烯類，包括具有促合成作用和其他未允許的化合物，如二苯乙烯類化合物及其衍生物、鹽、酯等、抗甲狀腺劑、甾醇、化合物及其衍生物、鹽、酯等、抗甲狀腺劑、甾醇、 二羥基苯甲二羥基苯甲酸內(nèi)酯如玉米赤霉醇、酸內(nèi)酯如玉米赤霉醇、-受體激動(dòng)劑等受體激動(dòng)劑等 要確證指令要確證指令 96/23/EC附錄附錄I-B 組所列的物質(zhì)，最少需要組所列的物質(zhì)，最少需要3 個(gè)識(shí)別個(gè)識(shí)別點(diǎn)點(diǎn)，包括獸藥和污染物，獸藥如抗菌藥、驅(qū)蟲藥、抗球蟲藥、氨，包括獸藥和污染物，獸藥如抗菌藥、驅(qū)蟲藥、抗球蟲藥、氨基甲酸酯類、擬除蟲菊酯類、鎮(zhèn)靜藥、非甾體抗炎藥等；其他環(huán)基

16、甲酸酯類、擬除蟲菊酯類、鎮(zhèn)靜藥、非甾體抗炎藥等；其他環(huán)境污染物如有機(jī)氯、有機(jī)磷、真菌毒素、染料等境污染物如有機(jī)氯、有機(jī)磷、真菌毒素、染料等 MS技術(shù)技術(shù)每種離子的識(shí)別點(diǎn)數(shù)每種離子的識(shí)別點(diǎn)數(shù)低分辨質(zhì)譜（低分辨質(zhì)譜（LR）1.0LR-MSn母離子母離子1.0LR-MSn子離子子離子1.5高分辨質(zhì)譜（高分辨質(zhì)譜（HR）2.0HR-MSn母離子母離子2.0HR-MSn子離子子離子2.5質(zhì)量碎片類型和識(shí)別點(diǎn)的關(guān)系質(zhì)量碎片類型和識(shí)別點(diǎn)的關(guān)系 每個(gè)離子計(jì)算一次每個(gè)離子計(jì)算一次 EI-GC-MS、CI-GC-MS作為不同的技術(shù)計(jì)算作為不同的技術(shù)計(jì)算 用不同反應(yīng)得到的衍生物，可增加識(shí)別點(diǎn)數(shù)用不同反應(yīng)得到的衍生物

17、，可增加識(shí)別點(diǎn)數(shù) 包括二級(jí)離子和多級(jí)離子包括二級(jí)離子和多級(jí)離子 可最多結(jié)合三種不同的技術(shù)確定最小識(shí)別點(diǎn)數(shù)可最多結(jié)合三種不同的技術(shù)確定最小識(shí)別點(diǎn)數(shù)二、定性（確證）方法二、定性（確證）方法 m/z + 202122m/z- 17979.9ESI-ESI+甜蜜素甜蜜素SN/T 1948-2007 進(jìn)出口食品中環(huán)己基氨進(jìn)出口食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉的檢測(cè)方法基磺酸鈉的檢測(cè)方法 應(yīng)研究樣品基質(zhì)和檢測(cè)器應(yīng)研究樣品基質(zhì)和檢測(cè)器性能引起的圖譜改變性能引起的圖譜改變 OHHNOHHN化合物保留時(shí)間（min）定性離子對(duì)定量離子對(duì)Fragmentor（V）CE（V）麻黃堿6.9166/148166/148801016

18、6/13320偽麻黃堿8.0166/148166/1488010166/13320 外標(biāo)法外標(biāo)法 內(nèi)標(biāo)法內(nèi)標(biāo)法 標(biāo)準(zhǔn)加入法標(biāo)準(zhǔn)加入法 基質(zhì)效應(yīng)基質(zhì)效應(yīng)三、定量方法三、定量方法 三、定量方法三、定量方法 1. 外標(biāo)法外標(biāo)法 單點(diǎn)校正法單點(diǎn)校正法 外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法 三、定量方法三、定量方法 單點(diǎn)校正法實(shí)際上是利用原點(diǎn)作為標(biāo)準(zhǔn)曲線上的另單點(diǎn)校正法實(shí)際上是利用原點(diǎn)作為標(biāo)準(zhǔn)曲線上的另一個(gè)點(diǎn)，當(dāng)方法存在系統(tǒng)誤差時(shí)（即標(biāo)準(zhǔn)工作曲線不一個(gè)點(diǎn)，當(dāng)方法存在系統(tǒng)誤差時(shí)（即標(biāo)準(zhǔn)工作曲線不通過(guò)原點(diǎn)），單點(diǎn)校正法的誤差較大通過(guò)原點(diǎn)），單點(diǎn)校正法的誤差較大 單點(diǎn)校正法單點(diǎn)校正法 三、定量方法三、定量方法以純?nèi)軇?/p>

19、配制標(biāo)準(zhǔn)工作溶液以純?nèi)軇┡渲茦?biāo)準(zhǔn)工作溶液 GB/T 21317-2007 動(dòng)物源性食品中四環(huán)素類獸藥殘留量檢測(cè)動(dòng)物源性食品中四環(huán)素類獸藥殘留量檢測(cè)方法方法 “根據(jù)樣液中被測(cè)四環(huán)素類獸藥殘留的含量情況，選定根據(jù)樣液中被測(cè)四環(huán)素類獸藥殘留的含量情況，選定峰高相近的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液峰高相近的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液”，“對(duì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和樣液等體對(duì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和樣液等體積參插進(jìn)樣測(cè)定積參插進(jìn)樣測(cè)定” GB/T 22147-2008 飼料中沙丁胺醇、萊克多巴胺和鹽酸克侖飼料中沙丁胺醇、萊克多巴胺和鹽酸克侖特羅的測(cè)定特羅的測(cè)定 “采用采用M+1的準(zhǔn)分子離子的色譜峰面積做單點(diǎn)校正定量的準(zhǔn)分子離子的色譜峰面積做單點(diǎn)校正定量”

20、單點(diǎn)校正法單點(diǎn)校正法 三、定量方法三、定量方法以空白樣品提取液配制標(biāo)準(zhǔn)工作溶液以空白樣品提取液配制標(biāo)準(zhǔn)工作溶液 GB/T 21320-2007 動(dòng)物源食品中阿維菌素類藥物殘留量動(dòng)物源食品中阿維菌素類藥物殘留量的測(cè)定的測(cè)定 液相色譜液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法串聯(lián)質(zhì)譜法 “分別取適量試樣溶液和相近濃度的基質(zhì)添加標(biāo)準(zhǔn)工作分別取適量試樣溶液和相近濃度的基質(zhì)添加標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，做單點(diǎn)校正溶液，做單點(diǎn)校正”，“對(duì)標(biāo)準(zhǔn)工作液和樣品溶液等對(duì)標(biāo)準(zhǔn)工作液和樣品溶液等體積參插進(jìn)樣進(jìn)行測(cè)定體積參插進(jìn)樣進(jìn)行測(cè)定”單點(diǎn)校正法單點(diǎn)校正法 三、定量方法三、定量方法 以純?nèi)軇┡渲茦?biāo)準(zhǔn)工作溶液以純?nèi)軇┡渲茦?biāo)準(zhǔn)工作溶液 GB/T 2226

21、0-2008 飼料中甲基睪丸酮的測(cè)定飼料中甲基睪丸酮的測(cè)定 高效液相高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法色譜串聯(lián)質(zhì)譜法 GB/T 22955-2008 河豚魚、鰻魚和烤鰻中苯并咪唑類河豚魚、鰻魚和烤鰻中苯并咪唑類藥物殘留量的測(cè)定藥物殘留量的測(cè)定 液相色譜液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法串聯(lián)質(zhì)譜法 GB/T 21324-2007 食用動(dòng)物肌肉和肝臟中苯并咪唑類食用動(dòng)物肌肉和肝臟中苯并咪唑類藥物殘留量檢測(cè)方法藥物殘留量檢測(cè)方法外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法 三、定量方法三、定量方法以空白樣品提取液配制標(biāo)準(zhǔn)工作溶液以空白樣品提取液配制標(biāo)準(zhǔn)工作溶液 GB/T 23409-2009 蜂王漿中土霉素、四環(huán)素、金霉素、強(qiáng)力霉素蜂王漿中

22、土霉素、四環(huán)素、金霉素、強(qiáng)力霉素殘留量的測(cè)定殘留量的測(cè)定 液相色譜液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜/質(zhì)譜法質(zhì)譜法 GB/T 23408-2009 蜂蜜中大環(huán)內(nèi)酯類藥物殘留量測(cè)定蜂蜜中大環(huán)內(nèi)酯類藥物殘留量測(cè)定 液相色譜液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜/質(zhì)譜法質(zhì)譜法 GB/T 22986-2008 牛奶和奶粉中氫化潑尼松殘留量的測(cè)定牛奶和奶粉中氫化潑尼松殘留量的測(cè)定 液相色液相色譜譜-串聯(lián)質(zhì)譜法串聯(lián)質(zhì)譜法 GB/T 22978-2008 牛奶和奶粉中地塞米松殘留量的測(cè)定牛奶和奶粉中地塞米松殘留量的測(cè)定 液相色譜液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法串聯(lián)質(zhì)譜法外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法 三、定量方法三、定量方法 空白樣品加入系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作

23、液，提取后得到系列空白樣品加入系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液，提取后得到系列基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液 GB/T 21312-2007 動(dòng)物源性食品中動(dòng)物源性食品中14種喹諾酮藥物殘留檢測(cè)種喹諾酮藥物殘留檢測(cè)方法方法 液相色譜液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜/質(zhì)譜法質(zhì)譜法 GB/T 22969-2008 奶粉和牛奶中鏈霉素、雙氫鏈霉素和卡那奶粉和牛奶中鏈霉素、雙氫鏈霉素和卡那霉素殘留量的測(cè)定霉素殘留量的測(cè)定 液相色譜液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法串聯(lián)質(zhì)譜法 GB/T 水果、蔬菜中啶蟲脒殘留量的測(cè)定水果、蔬菜中啶蟲脒殘留量的測(cè)定 液相色譜液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜串聯(lián)質(zhì)譜法法 GB/T 21313-2007 動(dòng)物源性食品中動(dòng)物源性食品

24、中-受體激動(dòng)劑殘留檢測(cè)方法受體激動(dòng)劑殘留檢測(cè)方法 液相色譜液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜/質(zhì)譜法質(zhì)譜法外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法 a: 以純?nèi)軇┡渲茦?biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)定的峰面積以純?nèi)軇┡渲茦?biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)定的峰面積Aab: 以空白樣品的提取液配制標(biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)定的峰面積以空白樣品的提取液配制標(biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)定的峰面積Abc: 在空白樣品加入標(biāo)準(zhǔn)溶液，提取后得到基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)在空白樣品加入標(biāo)準(zhǔn)溶液，提取后得到基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)定的峰面積定的峰面積Ac絕對(duì)回收率絕對(duì)回收率 Ac/Aa，包含提取效率和基質(zhì)效應(yīng)，包含提取效率和基質(zhì)效應(yīng)提取回收率提取回收率 Ac/Ab，不包含基質(zhì)效應(yīng)，不包含基質(zhì)效應(yīng)絕對(duì)回收率絕對(duì)回收率 = 提取

25、回收率提取回收率*絕對(duì)基質(zhì)效應(yīng)絕對(duì)基質(zhì)效應(yīng)GB/T 27404-2008 實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測(cè)食品理化檢測(cè)“如果檢測(cè)結(jié)果用回收率進(jìn)行校準(zhǔn)，應(yīng)在原始記錄的結(jié)果中如果檢測(cè)結(jié)果用回收率進(jìn)行校準(zhǔn)，應(yīng)在原始記錄的結(jié)果中明確說(shuō)明并描述校準(zhǔn)公式明確說(shuō)明并描述校準(zhǔn)公式”三、定量方法三、定量方法 三、定量方法三、定量方法 2. 內(nèi)標(biāo)法內(nèi)標(biāo)法 單點(diǎn)校正法單點(diǎn)校正法 內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法 三、定量方法三、定量方法 2. 內(nèi)標(biāo)法內(nèi)標(biāo)法內(nèi)標(biāo)物要滿足以下要求：內(nèi)標(biāo)物要滿足以下要求： （a）試樣中不含有該物質(zhì)；試樣中不含有該物質(zhì)；（b）與被測(cè)組分性質(zhì)比較接近；與被測(cè)組分性質(zhì)比較接近；（

26、c）不與試樣發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；不與試樣發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；（d）出峰位置應(yīng)位于被測(cè)組分附近。出峰位置應(yīng)位于被測(cè)組分附近。 內(nèi)標(biāo)法計(jì)算式內(nèi)標(biāo)法計(jì)算式 準(zhǔn)確稱取一定量的試樣準(zhǔn)確稱取一定量的試樣m，加入一定量?jī)?nèi)標(biāo)物加入一定量?jī)?nèi)標(biāo)物ms，試樣中待測(cè)物的含量試樣中待測(cè)物的含量wi為：為：ssssssAfAfmm;AfAfmmiiiiii 100100100sssssiis AfAfmmmAfAfmmmwiiii 內(nèi)標(biāo)法特點(diǎn)內(nèi)標(biāo)法特點(diǎn)(a) 內(nèi)標(biāo)法的準(zhǔn)確性較高，操作條件和進(jìn)樣量的稍許變動(dòng)對(duì)內(nèi)標(biāo)法的準(zhǔn)確性較高，操作條件和進(jìn)樣量的稍許變動(dòng)對(duì)定量結(jié)果的影響不大定量結(jié)果的影響不大(b) 內(nèi)標(biāo)物和被測(cè)組分處在同一基體中，因此

27、可以消除基體內(nèi)標(biāo)物和被測(cè)組分處在同一基體中，因此可以消除基體帶來(lái)的干擾帶來(lái)的干擾 (c) 若將內(nèi)標(biāo)法中的試樣取樣量和內(nèi)標(biāo)物加入量固定，則：若將內(nèi)標(biāo)法中的試樣取樣量和內(nèi)標(biāo)物加入量固定，則：常數(shù)sAAwii內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法 內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量方法內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量方法 配制系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別加入等量的內(nèi)標(biāo)物配制系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別加入等量的內(nèi)標(biāo)物, ,混合后進(jìn)行色譜混合后進(jìn)行色譜分析。以待測(cè)組分的濃度為橫坐標(biāo)，待測(cè)組分與內(nèi)標(biāo)物峰面積分析。以待測(cè)組分的濃度為橫坐標(biāo)，待測(cè)組分與內(nèi)標(biāo)物峰面積（或峰高）的比率為縱坐標(biāo)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線（或線性方程）（或峰高）的比率為縱坐標(biāo)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線（或線性方程） 在分析

28、未知樣品時(shí)，分別加入與繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)等量的內(nèi)標(biāo)在分析未知樣品時(shí)，分別加入與繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)等量的內(nèi)標(biāo)物，用樣品與內(nèi)標(biāo)物峰面積（或峰高）的比值，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查物，用樣品與內(nèi)標(biāo)物峰面積（或峰高）的比值，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出被測(cè)組分的濃度或用線形方程計(jì)算出被測(cè)組分的濃度或用線形方程計(jì)算 三、定量方法三、定量方法內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法以純?nèi)軇┡渲葡盗袠?biāo)準(zhǔn)工作溶液以純?nèi)軇┡渲葡盗袠?biāo)準(zhǔn)工作溶液 GB/T 23406-2009 腸衣中硝基咪唑類藥物及其代謝物殘留腸衣中硝基咪唑類藥物及其代謝物殘留量的測(cè)定量的測(cè)定 液相色譜液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜/質(zhì)譜法質(zhì)譜法 GB/T 23407-2009 蜂王漿中硝基咪唑類藥物

29、及其代謝物殘蜂王漿中硝基咪唑類藥物及其代謝物殘留量的測(cè)定留量的測(cè)定 液相色譜液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜/質(zhì)譜法質(zhì)譜法 GB/T 23411-2009 蜂王漿中蜂王漿中17種喹諾酮類藥物殘留量的測(cè)定種喹諾酮類藥物殘留量的測(cè)定 液相色譜液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜/質(zhì)譜法質(zhì)譜法 GB/T 23412-2009 蜂蜜中蜂蜜中19種喹諾酮類藥物殘留量的測(cè)定方種喹諾酮類藥物殘留量的測(cè)定方法法 液相色譜液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜/質(zhì)譜法質(zhì)譜法 三、定量方法三、定量方法 內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法以空白樣品的提取液配制系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液以空白樣品的提取液配制系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液 GB/T 22992-2008 牛奶和奶粉中玉米赤霉醇、玉

30、米赤霉酮、牛奶和奶粉中玉米赤霉醇、玉米赤霉酮、己烯雌酚、己烷雌酚、雙烯雌酚殘留量的測(cè)定己烯雌酚、己烷雌酚、雙烯雌酚殘留量的測(cè)定 液相色譜液相色譜-串串聯(lián)質(zhì)譜法聯(lián)質(zhì)譜法 GB/T 22959-2008 河豚魚、鰻魚和烤鰻中氯霉素、甲砜霉河豚魚、鰻魚和烤鰻中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考?xì)埩袅康臏y(cè)定素和氟苯尼考?xì)埩袅康臏y(cè)定 液相色譜液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法串聯(lián)質(zhì)譜法 GB/T 20756-2006 可食動(dòng)物肌肉、肝臟和水產(chǎn)品中氯霉素、可食動(dòng)物肌肉、肝臟和水產(chǎn)品中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考?xì)埩袅康臏y(cè)定甲砜霉素和氟苯尼考?xì)埩袅康臏y(cè)定 液相色譜液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法串聯(lián)質(zhì)譜法 三、定量方法三、定量方法內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線

31、法內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法 空白樣品加入系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液，提取后得到空白樣品加入系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液，提取后得到基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液 GB/T 21311-2007 動(dòng)物源性食品中硝基呋喃類藥物代謝物殘留動(dòng)物源性食品中硝基呋喃類藥物代謝物殘留量檢測(cè)方法量檢測(cè)方法 高效液相色譜高效液相色譜 串聯(lián)質(zhì)譜法串聯(lián)質(zhì)譜法 GB/T 21310-2007 動(dòng)物源性食品中甲狀腺拮抗劑殘留量檢測(cè)方動(dòng)物源性食品中甲狀腺拮抗劑殘留量檢測(cè)方法法 高效液相色譜高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法串聯(lián)質(zhì)譜法 沙丁胺醇沙丁胺醇-D36.10克倫特羅克倫特羅-D915.6沙丁胺醇沙丁胺醇6.16塞曼特羅塞曼特羅7.01特布他林特布他林

32、6.24塞布特羅塞布特羅11.07萊克多巴胺萊克多巴胺14.65克倫特羅克倫特羅15.66溴代克倫特羅溴代克倫特羅16.52溴布特羅溴布特羅17.47苯氧丙酚胺苯氧丙酚胺18.72馬布特羅馬布特羅18.77馬賁特羅馬賁特羅23.11內(nèi)標(biāo)的選擇內(nèi)標(biāo)的選擇 GB/T 22286-2008保留時(shí)間保留時(shí)間 minSN/T 1924-2007 三、定量方法三、定量方法3. 標(biāo)準(zhǔn)加入法標(biāo)準(zhǔn)加入法先測(cè)定出未知樣品的大概值，然后根先測(cè)定出未知樣品的大概值，然后根據(jù)這個(gè)測(cè)定值去設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)加入法據(jù)這個(gè)測(cè)定值去設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)加入法標(biāo)準(zhǔn)加入法中第一點(diǎn)加入標(biāo)準(zhǔn)溶液為標(biāo)準(zhǔn)加入法中第一點(diǎn)加入標(biāo)準(zhǔn)溶液為“0”，第二點(diǎn)加入的量約與待

33、測(cè)組分，第二點(diǎn)加入的量約與待測(cè)組分的含量大致相等，共的含量大致相等，共35個(gè)點(diǎn)，以加入個(gè)點(diǎn)，以加入的標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，峰面積的標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制工作曲線為縱坐標(biāo)繪制工作曲線工作曲線在橫坐標(biāo)延長(zhǎng)線上的交點(diǎn)到工作曲線在橫坐標(biāo)延長(zhǎng)線上的交點(diǎn)到坐標(biāo)原點(diǎn)的距離即為樣品中待測(cè)組分坐標(biāo)原點(diǎn)的距離即為樣品中待測(cè)組分的濃度的濃度 三、定量方法三、定量方法3. 標(biāo)準(zhǔn)加入法標(biāo)準(zhǔn)加入法 標(biāo)準(zhǔn)加入法可以看作是內(nèi)標(biāo)法和外標(biāo)法的結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)加入法可以看作是內(nèi)標(biāo)法和外標(biāo)法的結(jié)合 由于待測(cè)組分以及加入的標(biāo)準(zhǔn)溶液處在相同的樣品由于待測(cè)組分以及加入的標(biāo)準(zhǔn)溶液處在相同的樣品基體中，因此，這種方法可以消除基質(zhì)

34、干擾基體中，因此，這種方法可以消除基質(zhì)干擾 但是，由于對(duì)每一個(gè)樣品都要配制三個(gè)以上的、含但是，由于對(duì)每一個(gè)樣品都要配制三個(gè)以上的、含樣品溶液和標(biāo)準(zhǔn)溶液的混合溶液，因此，這種方法樣品溶液和標(biāo)準(zhǔn)溶液的混合溶液，因此，這種方法不適于大批樣品的分析不適于大批樣品的分析 前提前提 具有線性關(guān)系，并且標(biāo)準(zhǔn)曲線通過(guò)坐標(biāo)原點(diǎn)具有線性關(guān)系，并且標(biāo)準(zhǔn)曲線通過(guò)坐標(biāo)原點(diǎn) 盡可能減小系統(tǒng)誤差盡可能減小系統(tǒng)誤差 試樣的基質(zhì)效應(yīng)不得隨被測(cè)組分含量對(duì)干擾組分含量試樣的基質(zhì)效應(yīng)不得隨被測(cè)組分含量對(duì)干擾組分含量比值改變而改變比值改變而改變 必須扣除背景和空白值必須扣除背景和空白值3. 標(biāo)準(zhǔn)加入法標(biāo)準(zhǔn)加入法三、定量方法三、定量方法

35、 三、定量方法三、定量方法概念概念產(chǎn)生機(jī)制產(chǎn)生機(jī)制來(lái)源來(lái)源如何評(píng)價(jià)如何評(píng)價(jià)如何消除如何消除4. 基質(zhì)效應(yīng)基質(zhì)效應(yīng) 三、定量方法三、定量方法 基質(zhì)效應(yīng)是指在樣品測(cè)試過(guò)程中，由于待測(cè)物以外的其基質(zhì)效應(yīng)是指在樣品測(cè)試過(guò)程中，由于待測(cè)物以外的其他物質(zhì)的存在，直接或間接影響待測(cè)物響應(yīng)的現(xiàn)象他物質(zhì)的存在，直接或間接影響待測(cè)物響應(yīng)的現(xiàn)象 由于質(zhì)譜檢測(cè)的高選擇性，基質(zhì)效應(yīng)的影響在色譜圖上由于質(zhì)譜檢測(cè)的高選擇性，基質(zhì)效應(yīng)的影響在色譜圖上往往觀察不到，即空白基質(zhì)色譜圖表現(xiàn)為一條直線，但往往觀察不到，即空白基質(zhì)色譜圖表現(xiàn)為一條直線，但這些共流出組分會(huì)改變待測(cè)物的離子化效率，引起對(duì)待這些共流出組分會(huì)改變待測(cè)物的離子化效率，引起對(duì)待測(cè)物檢測(cè)信號(hào)的抑制或提高測(cè)物檢測(cè)信號(hào)的抑制或提高4. 基質(zhì)效應(yīng)基質(zhì)效應(yīng) 三、定量方法三、定量方法 待測(cè)物與基質(zhì)成待測(cè)物與基質(zhì)成分的電荷競(jìng)爭(zhēng)分的電荷競(jìng)爭(zhēng) 形成氣態(tài)離子的形成氣態(tài)離子的競(jìng)爭(zhēng)競(jìng)爭(zhēng) 改變表面張力，改變表面張力，形成大液滴，不形成大液滴