免疫學基本理論和基本技能

1、免疫學基本理論和基本技能強化訓練要點目錄：1、 前言2、 免疫學基本理論要點3、 免疫學基本技能要點一、前言微生物學是一門理論性和實踐性很強的學科，該課程的教學歷來十分重視基本理論和基本技能方面，但是由于教材和課時以及實驗室等多方面條件的限制，學生在掌握基本理論和基本技能方面還略有不足。針對以上不足，該學科教學的發(fā)展需要為學生提供簡練輔助教材和為學生提供開放實驗室以滿足學生的學習需要。為此特編寫此輔助教材。（要求重點掌握的內(nèi)容用黑體字）二、免疫學基本理論要點免疫學的主要內(nèi)容：共10章，重點在1（抗原）、3(免疫球蛋白)、7（免疫應答）章1、 免疫概念以及免疫系統(tǒng)的功能免疫：指機體免疫系統(tǒng)識別自

2、身與異己抗原，并通過免疫應答排除抗原性異物，以維持機體生理平衡的功能。免疫系統(tǒng)功能：免疫防御（排斥外來抗原性異物）、免疫自穩(wěn)（清除衰老、損傷的細胞）、免疫監(jiān)視（清除突變的細胞）免疫系統(tǒng)功能異常情況：超敏反應、免疫缺陷、自身免疫病、腫瘤、持續(xù)的病毒感染2、 抗原、抗原的基本特性抗原：是指能與TCR/BCR或抗體結(jié)合，具有啟動免疫應答潛能的物質(zhì)。（是指能刺激機體產(chǎn)生免疫應答，并與免疫應答產(chǎn)物特異性結(jié)合的物質(zhì)。）（是指能刺激免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗體或形成致敏淋巴細胞，并能與相應抗體或致敏淋巴細胞發(fā)生特異性結(jié)合的物質(zhì)）(名詞解釋和理解)（建議采用更易理解的黑體字解釋）抗原的基本特性：1、免疫原性2、抗原性相關

3、概念有：半抗原、完全抗原、蛋白質(zhì)載體3、 抗原的異物性和特異性異物性：（胚胎期未與免疫活性細胞接觸過的物質(zhì)）特異性：是指抗原誘導免疫應答的特異性以及與貿(mào)易與應答產(chǎn)物結(jié)合發(fā)生反應的專一性抗原表位（抗原決定基）：抗原分子中決定抗原特異性的特殊化學基團。是與TCR/BCR及抗體結(jié)合的基本單位。4、決定抗原免疫原性的條件：（1）異物性（2）抗原分子的理化特性（3）宿主方面的因素（遺傳因素 ；年齡、性別與健康狀態(tài)）（4）抗原進入機體的方式的影響（劑量、途徑、 次數(shù)、佐劑）5、抗原的種類 （不同研究角度有不同的分類方法）與佐劑根據(jù)產(chǎn)生抗體是否需Th細胞輔助分：TD-Ag（胸腺依賴抗原）TI-Ag（胸腺非依

4、賴抗原）P12根據(jù)抗原與機體的親緣關系分：異嗜性抗原：是指一類與種屬無關的存在于不同生物之間的共同抗原。（臨床診斷的應用、與自身免疫病的關系）異種抗原 （病原微生物及其產(chǎn)物、動物免疫血清）同種異型抗原 （同一種屬不同個體之間所存在的抗原，如HLA、血型抗原）自身抗原（免疫隔離部位抗原的釋放、改變或修飾的自身組織細胞）獨特型抗原：TCR、BCR或Ig的V區(qū)具有抗原特異性所形成的自身抗原，在同一個體內(nèi)引起免疫應答，在免疫網(wǎng)絡調(diào)節(jié)中起重要作用。根據(jù)抗原是否在抗原提呈細胞內(nèi)合成分為：內(nèi)源性抗原：與MHC-類分子結(jié)合成復合物，被CD8+T細胞識別外源性抗原：與MHC-類分子結(jié)合成復合物，被CD4+T細胞

5、識別超抗原：是一類由細菌外毒素和逆轉(zhuǎn)錄病毒蛋白構成的抗原性物質(zhì)，該類抗原能與多數(shù)T細胞結(jié)合并為T細胞活化提供信號，極微量抗原可活化多克隆T細胞，產(chǎn)生極強的刺激效果，故稱為超抗原。佐劑：當其與抗原一起注射或預先注入機體時，可增強機體對抗原的免疫應答或改變免疫應答類型的非特異性免疫增強劑。6、免疫系統(tǒng)的組成及其相關概念免疫系統(tǒng)的組成：免疫組織和器官、免疫細胞、免疫分子中樞免疫器官：骨髓、胸腺（免疫細胞發(fā)生、分化、成熟的場所）（免疫應答場所）外周免疫器官：淋巴結(jié)、脾、粘膜相關的淋巴組織（免疫細胞定居增殖的場所、免疫應答的場所）免疫細胞：造血干細胞、淋巴細胞、抗原提呈細胞、其它免疫相關細胞NK細胞（自

6、然殺傷細胞）抗原提呈細胞（APC）：指具有提取、消化、加工與提呈抗原功能的一群細胞。P29巨噬細胞的主要功能：1、吞噬和殺傷作用 2、遞呈抗原作用 3、免疫調(diào)節(jié)4、免疫病理作用7、白細胞分化抗原、CD、粘附分子白細胞分化抗原：是指血細胞在分化成為不同譜系、分化的不同階段以及細胞活化過程中，出現(xiàn)或消失的細胞表面標記分子。CD：分化群的意思。將單克隆抗體檢測鑒定的白細胞分化抗原稱為CD抗原或CD分子。CD4：是T細胞TCR/CD3識別抗原的輔助受體、與抗原提呈細胞表達的MHC類分子結(jié)合、參與信號轉(zhuǎn)導。CD8：輔助受體與靶細胞表達的MHC類分子結(jié)合、參與信號轉(zhuǎn)導。粘附分子：是眾多介導細胞之間或細胞與

7、細胞外基質(zhì)之間相互接觸的結(jié)合分子的統(tǒng)稱。8、T細胞亞群及功能CD4+T細胞：TH(輔助性T細胞)、TD（遲發(fā)型超敏反應性T細胞）CD8+T細胞：TS（抑制性T細胞）、TC（細胞毒性T細胞）9、免疫球蛋白的基本結(jié)構：基本結(jié)構：4條肽鏈組成的單體（由2條相同的重鏈和2條相同的輕鏈，以二硫健連接呈Y字形）包括：重鏈和輕鏈、V區(qū)和C區(qū)、功能區(qū)、鉸鏈區(qū)重鏈：由50-550個氨基酸殘基組成，據(jù)重鏈的不同可分為5種類型的Ig輕鏈：約214個氨基酸殘基組成，據(jù)輕鏈的不同可分為2型V區(qū)：結(jié)合抗原C區(qū)：結(jié)合細胞、激活補體等多種生物學效應功能區(qū)：由110個氨基酸殘基組成的球形區(qū)域，有多個不同的功能區(qū)（VH、CH、V

8、L、CL）鉸鏈區(qū)：富含脯氨酸，易導致構型變化10、免疫球蛋白的功能（Ig的生物學作用）：（1）特異性結(jié)合抗原 （2）激活補體 （3）結(jié)合細胞（通過各類細胞表面的Fc受體發(fā)揮調(diào)理作用、ADCC、介導型超敏反應）ADCC：抗體依賴性細胞介導的細胞毒作用。是指表達Fc受體的細胞通過識別抗體的Fc段直接殺傷抗體包圍的靶細胞。 (4) 穿過胎盤和粘膜11、各類免疫球蛋白的特性與功能IgG：單體、血清主要抗體（抗菌、抗毒素）成分、血清含量最高、半衰期最長、唯一能通過胎盤的抗體、可和SPA結(jié)合（協(xié)同凝集反應），用于免疫學檢測IgM：五聚體、分子量最大、合成最早、是早期感染的重要指標、激活補體能力最強、是類風

9、濕因子、抗菌、抗病毒抗體IgA：單體（血清型）、二聚體（分泌型）（sIgA）、粘膜局部免疫的主要抗體、IgD：mIgD是B淋巴細胞成熟的標志IgE：親細胞抗體、引起型超敏反應、抗寄生蟲感染12、單克隆抗體：由雜交瘤細胞產(chǎn)生的高度均一的，只針對一個抗原決定基的抗體。13、補體：是存在于人和脊椎動物血清與組織液中的一組與免疫有關的具有酶活性的蛋白質(zhì)。14、補體系統(tǒng)的組成：補體的固有成分、補體調(diào)節(jié)蛋白、補體受體15、補體活化的經(jīng)典途徑：激活物：免疫復合物（抗原-抗體復合物）激活過程：識別階段、活化階段、攻膜階段16、補體活化的旁路途徑：激活物：內(nèi)毒素、酵母多糖、凝聚的IgA和IgG等17、補體的生物

10、學作用：（1）細胞溶解( 2)調(diào)理作用 (3)炎癥反應 （4）清除免疫復合物 18、細胞因子的種類：（簡要介紹概念）白細胞介素 、干擾素、 腫瘤壞死因子、 集落刺激因子、 生長因子 、趨化性因子19、MHC：主要組織相容性復合體，是指一組緊密連鎖的基因群，其功能與控制免疫應答和移植排斥有關。P5820、HLA:人類白細胞抗原，是人的MHC的表達產(chǎn)物。HLA1功能：識別和提呈內(nèi)源性抗原肽，與CD8結(jié)合，對CTL識別靶細胞起限制作用。HLA2功能：識別和提呈外源性抗原肽，與CD4結(jié)合，對Th細胞的識別起限制作用。21、MHC多態(tài)性的基本概念：多個等位基因，群體有多種組合。22、單元型：指染色體上M

11、HC不同座位等位基因的特定組合（單元型遺傳）23、MHC的生物學功能：（1）作為抗原提呈分子參與適應性免疫應答（MHC限制性的解釋（2）作為調(diào)節(jié)分子參與固有免疫應答。24、免疫應答：是機體免疫活性細胞接受抗原刺激后，被活化、增殖、分化并產(chǎn)生免疫效應的生理過程。25、免疫應答的類型：非特異性免疫應答，特異性免疫應答特異性免疫應答按效應機制分為：B細胞介導：體液免疫T細胞介導：細胞免疫26、免疫應答過程的三個階段：抗原識別階段（感應階段）、淋巴細胞活化、增殖、分化階段（反應階段）、效應階段 27、T細胞活化信號：第一信號（抗原識別信號）、第二信號（協(xié)同刺激信號）28、T細胞介導的細胞免疫（效應T細

12、胞的作用）：TDTH：（Th1）分泌多種淋巴因子細胞因子，引起以單個核細胞浸潤為主的炎癥反應。CTL：以細胞裂解或誘導細胞凋亡的方式直接破壞靶細胞。29、體液免疫應答的一般規(guī)律：一、初次應答：機體初次接受抗原刺激后，特異性抗體的產(chǎn)生有如下規(guī)律：（1）需經(jīng)過一段潛伏期才產(chǎn)生抗體。（此期的長短取決于抗原性質(zhì)、抗原入侵途徑、機體狀態(tài)等因素。）（2）一般先出現(xiàn)IgM類抗體，后出現(xiàn)IgG類抗體。產(chǎn)生的抗體量較低，持續(xù)的時間較短。二、二次應答（回憶應答）：初次應答產(chǎn)生抗體一定時間后，機體接受相同抗原的再次刺激，少量抗原即可誘發(fā)免疫功能較強的二次應答?？贵w產(chǎn)生規(guī)律如下：（1）潛伏期短。（2）IgG類為主的抗

13、體迅速大量產(chǎn)生，持續(xù)時間長。（3）抗體的親和力高，且較均一。30、免疫耐受：是機體接觸某一抗原后所呈現(xiàn)的特異性無應答狀態(tài)。P79超敏反應：是指機體再次接受相同抗原刺激時發(fā)生的一種以生理功能紊亂或組織細胞損害為主的病理性免疫應答。31、型超敏反應的發(fā)生機制：P89-9032、超敏反應的類型、常見病例：33、了解抗原抗體反應的原理、凝集反應的原理、玻片凝集、試管凝集的主要用途34、單向瓊脂擴散試驗、雙向瓊脂擴散試驗的主要用途、ELISA概念35、人工主動免疫（生物制品、用途、作用特點）滅活疫苗減毒活疫苗類毒素36、人工被動免疫抗毒素人免疫球蛋白制劑37、新型疫苗的發(fā)展：亞單位疫苗（提?。?、結(jié)合疫苗

14、（化學連接）、合成肽疫苗、基因工程疫苗、重組抗原疫苗：體外產(chǎn)抗原重組載體疫苗：體內(nèi)產(chǎn)抗原（病毒、疫苗株）、DNA疫苗：轉(zhuǎn)染宿主細胞，體內(nèi)產(chǎn)抗原、轉(zhuǎn)基因植物疫苗三、免疫學基本技能要點1、 大、小吞噬細胞功能測定（了解測定方法和繪圖）2、 T淋巴細胞轉(zhuǎn)化試驗和E花環(huán)形成試驗（了解試驗方法和繪圖以及應用意義）3、 玻片凝集試驗和試管凝集試驗（掌握操作方法和試驗結(jié)果判定及其應用意）4、雙向瓊脂擴散試驗和單向瓊脂擴散試驗（掌握操作方法和試驗結(jié)果判定及其應用意義）5、免疫標記技術（熟悉ELISA的操作方法和應用意義）6、唾液溶菌酶試驗（掌握操作方法和試驗結(jié)果判定）7、掌握抗原抗體凝集反應的原理以及反應所需

15、的條件8、掌握抗原抗體沉淀反應的原理以及反應所需的條件9、了解免疫血清的制備過程微生物學基本理論和基本技能強化訓練要點二、微生物學基本理論要點1、微生物學概論：要點包括：微生物的定義、分類、作用、微生物學的研究內(nèi)容、發(fā)展史微生物：是一群形體微小、結(jié)構簡單、肉眼不能直接觀察到，需借助顯微鏡才能看見的一群微小生物。微生物的分類：從細胞水平可將微生物分為三大類（1） 非細胞型微生物（病毒、類病毒等）（2） 原核細胞型微生物（細菌、放線菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體等）（3） 真核細胞型微生物（真菌、單細胞藻類、原蟲等）微生物的作用：（與人類的關系）有益方面：參與物質(zhì)循環(huán)、工業(yè)、農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)等

16、方面的應用、正常菌群對人體的保護有害方面：物質(zhì)的腐敗、病原微生物的危害微生物學：是研究微生物的形態(tài)結(jié)構、生理、遺傳變異，以及微生物的進化、分類和與人類、動植物、自然界之間的關系的一門科學。微生物學發(fā)展簡史：顯微鏡的發(fā)明、巴斯德、郭霍等科學家對微生物學發(fā)展的貢獻、現(xiàn)代微生物學發(fā)展的重要領域2、細菌的定義：細菌：是一類單細胞并以二分裂方式進行繁殖的原核細胞型微生物。3、細菌的形態(tài)結(jié)構與分類：要點包括：細菌的大小、細菌的基本形態(tài)、細菌的不規(guī)則形態(tài)、細菌的基本結(jié)構、細菌的特殊結(jié)構、細菌的分類細菌的大?。阂晕⒚诪闇y量單位，觀察細菌通常使用放大1000倍的顯微鏡油鏡鏡頭。細菌的基本形態(tài)：三大類：球菌、桿菌

17、、螺形菌細菌的不規(guī)則形態(tài)：細菌的形態(tài)受溫度、pH值、培養(yǎng)基、藥物等因素的影響，可出現(xiàn)不規(guī)則形態(tài)。觀察細菌的典型形態(tài)通常選用對數(shù)期的菌體。細菌的基本結(jié)構：細胞壁、細胞膜、細胞質(zhì)、核質(zhì) 了解各基本結(jié)構的主要功能，了解革蘭陽性細菌和革蘭陰性細菌細胞壁的主要區(qū)別，了解細菌細胞壁的主要化學成分肽聚糖的結(jié)構。細菌的特殊結(jié)構：莢膜、鞭毛、菌毛、芽孢 了解各特殊結(jié)構的主要功能、鑒定意義、與致病性的關系。如莢膜的抗吞噬作用、鞭毛的運動功能、菌毛的粘附作用、是否能殺滅芽孢可作為判斷滅菌是否徹底的判斷標準。細菌的分類：了解細菌分類的依據(jù)，種、型、株的概念、命名4、細菌的營養(yǎng)與生長繁殖：要點包括：細菌的營養(yǎng)物質(zhì)組成、

18、細菌生長繁殖所需的基本條件、細菌培養(yǎng)方法、細菌生長曲線規(guī)律細菌的營養(yǎng)物質(zhì)組成：水、碳源、氮源、無機鹽、生長因子 了解這些營養(yǎng)物質(zhì)對培養(yǎng)細菌的意義細菌生長繁殖所需的基本條件：充足的營養(yǎng)物質(zhì)、合適的pH值、合適的溫度、合適的氣體條件細菌培養(yǎng)方法：了解培養(yǎng)基配制原則、培養(yǎng)基的用途和種類、平板、斜面、菌落等概念細菌生長曲線規(guī)律：細菌生長曲線體現(xiàn)細菌群體生長的規(guī)律。將一定量的細菌接種到新的培養(yǎng)基中，以細菌數(shù)的對數(shù)為縱坐標、以培養(yǎng)時間為橫坐標繪得一條S形狀的曲線叫細菌生長曲線。根據(jù)細菌生長曲線課將細菌的批培養(yǎng)分為以下4個時期：遲緩期：是細菌適應新環(huán)境的時期，代謝活躍但細胞不分裂。制劑等的滅菌應選擇在此期進

19、行。對數(shù)期：是細菌快速生長的時期，代謝活躍、細胞數(shù)目呈對數(shù)增長、細胞形態(tài)和性狀典型。此期的菌體適合用于研究，如觀察細菌形態(tài)、藥物敏感試驗應選擇此期的菌體。穩(wěn)定期：是細菌積累大量代謝產(chǎn)物的時期，活菌數(shù)大致穩(wěn)定，發(fā)酵工業(yè)通常以加糖、補料等方式延長此期以獲得較高的發(fā)酵產(chǎn)量。衰亡期：是細菌死亡、菌體變形、自溶的時期，此期的菌體一般不適合研究或發(fā)酵生產(chǎn)。5、細菌的代謝：要點包括：細菌的酶、產(chǎn)能方式、代謝過程、代謝產(chǎn)物、代謝調(diào)控細菌的酶：組成酶、誘導酶 了解誘導酶的應用意義產(chǎn)能方式：有氧呼吸、發(fā)酵、無氧呼吸代謝過程：結(jié)合生物化學加以學習代謝產(chǎn)物：分解代謝產(chǎn)物、合成代謝產(chǎn)物，了解分解代謝產(chǎn)物的鑒定意義，熟悉

20、一些常見的細菌生化反應代謝調(diào)控：是微生物學研究中非常重要和具有很強實用性的知識，但理論課教材多數(shù)在此方面知識較為缺乏和零散，考慮到受課時限制和不加重學生負擔，不在此作書面陳述。6、細菌的分布：要點包括：細菌在自然界的分布、在人體的分布細菌在自然界的分布：土壤（細菌的大本營）、水（大腸菌群數(shù)的檢測意義）、空氣（空氣的凈化意義）細菌在人體的分布：正常菌群的意義7、細菌的感染與致病性：要點包括：細菌的感染類型、細菌的毒力細菌的感染類型：隱性感染、潛伏感染、顯性感染、帶菌狀態(tài)細菌的毒力：細菌的毒力構成：侵襲力、毒素 細菌內(nèi)毒素和外毒素性質(zhì)的比較8、細菌的檢查方法：要點包括：革蘭染色的方法及其應用意義、

21、病原菌的檢驗程序革蘭染色的方法及其應用意義：方法：結(jié)晶紫初染（1分鐘）-碘液煤染（1分鐘）-95%乙醇脫色（適度）-沙黃復染（1分鐘） 應用意義：有鑒別細菌的作用、有指導臨床用藥的作用。病原菌的檢驗程序：標本采集-直接鏡檢-分離培養(yǎng)-純培養(yǎng)-生物學性狀觀察、細菌生化反應、血清學鑒定、動物試驗、藥物敏感試驗等9、消毒滅菌：要點包括：消毒、滅菌概念、巴氏消毒法、高壓蒸汽滅菌法、紫外線的殺菌作用、消毒劑消毒：用理化因素殺死物體中的病原微生物，以防止病原微生物的感染和傳播。滅菌：用理化因素殺死物體中所有的微生物，包括細菌的芽孢。巴氏消毒法：是一種對酒類、飲料等進行的低溫消毒方法，有利保持食品的風味。聯(lián)

22、系高溫瞬時法體會高溫快速滅菌的原理。高壓蒸汽滅菌法：掌握其操作要點（保持蒸汽流暢、排冷空氣、零磅開蓋）、一般的滅菌條件、理解濕熱滅菌的優(yōu)點。紫外線的殺菌作用：紫外線的殺菌作用特點（用于空氣、物體表面的消毒）；主要的殺菌機理（破壞核酸）；光復活（使用紫外線殺菌要避免可見光的光復活的修復作用）消毒劑：了解化學消毒劑的主要種類、殺菌機制及其使用10、質(zhì)粒：要點包括：質(zhì)粒的概念、質(zhì)粒的特性、常見的質(zhì)粒類型質(zhì)粒：細菌染色體外的遺傳物質(zhì)。（決定一些次要性狀，可轉(zhuǎn)移或消除）質(zhì)粒的基本特性：小的環(huán)狀DNA分子、自主復制、決定一些次要性狀、可消除或轉(zhuǎn)移、相容性和不相容性常見的質(zhì)粒類型：了解F質(zhì)粒、R質(zhì)粒等11、

23、轉(zhuǎn)座因子：要點包括：概念、三種類型、意義12、噬菌體：要點包括：噬菌體概念、溫和噬菌體和毒性噬菌體的概念、前噬菌體、溶原性細菌、噬菌體感染的特異性、噬菌體的應用意義噬菌體：感染微生物細胞的病毒。毒性噬菌體：生活史中只有一個溶菌周期的噬菌體。溫和噬菌體：生活史中有溶菌周期和溶原周期的噬菌體。前噬菌體：整合在細菌染色體上的噬菌體基因組。溶原性細菌：帶有前噬菌體的細菌。噬菌體感染的特異性是噬菌體分型的依據(jù) 。噬菌體的應用意義：了解13、基因突變的規(guī)律：自發(fā)性、不對應性、可誘發(fā)性、獨立性、可遺傳性、可逆性 （性狀回復而不是基因結(jié)構的恢復）14、DNA損傷的修復：4種修復機制及其意義15、營養(yǎng)缺陷型概念

24、及其意義16、微生物基因轉(zhuǎn)移和重組的方式：轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導、接合、噬菌體轉(zhuǎn)變轉(zhuǎn)化：受體菌吸收供體菌游離的DNA片段，并整合入受體菌基因組中，從而獲得供體菌部分遺傳性狀的過程。轉(zhuǎn)導：以噬菌體為媒介，將供體菌的部分遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移至受體菌，使受體菌獲得部分供體菌的遺傳性狀。17、葡萄球菌：要點包括：是常見的化膿性球菌、革蘭陽性球菌、據(jù)產(chǎn)色素情況分三類葡萄球菌（金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌）、SPA可用于協(xié)同凝集試驗、耐藥菌較為多見（如MRSA）致病性葡萄球菌的鑒定要點（金黃色、透明溶血環(huán)、血漿凝固酶試驗陽性、發(fā)酵甘露醇）18、鏈球菌：要點包括：據(jù)溶血現(xiàn)象分三類鏈球菌（甲型鏈球菌、乙型鏈球菌、丙

25、型鏈球菌）、據(jù)抗原結(jié)構分A-V共20群，致病株大多是A群、抗鏈球菌溶素O試驗輔助診斷鏈球菌感染（如風濕熱）、鏈球菌感染易引起超敏反應性疾?。ㄈ缂毙阅I小球腎炎）19、肺炎鏈球菌：膽汁溶菌試驗陽性、菊糖發(fā)酵試驗陽性（據(jù)此區(qū)別于甲型鏈球菌）20、奈瑟菌屬：革蘭陰性雙球菌，致病菌主要有腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、培養(yǎng)常采用巧克力平板21、腸道桿菌：要點包括：大腸埃希菌、志賀菌屬、沙門菌屬大腸埃希菌：俗稱大腸桿菌，是腸道的正常菌群、是環(huán)境衛(wèi)生和食品衛(wèi)生學的檢測指標、是科研上最受到重視的一種細菌。生物學特性：革蘭陰性桿菌、兼性厭氧菌、易培養(yǎng)、代謝活躍、乳糖發(fā)酵試驗陽性（產(chǎn)酸產(chǎn)氣）（可區(qū)別于痢疾桿菌、傷寒桿菌

26、，有鑒定意義）、IMViC試驗：+-。了解致病的血清型（5種）。志賀菌屬：俗稱痢疾桿菌，是細菌性痢疾的病原菌沙門菌屬：沙門菌感染的三種類型：腸熱癥（傷寒）、食物中毒（胃腸炎）、敗血癥。腸熱癥的二次菌血癥（理解病原菌的感染情況）。肥達試驗：血清學試驗（試管凝集法）用沙門菌抗原檢測患者血清中的特異性抗體 ，以輔助診斷疾病。肥達試驗結(jié)果的解釋有助理解血清學診斷的一般原理。22、弧菌屬：霍亂弧菌（霍亂）、副溶血性弧菌 （海產(chǎn)品食物中毒）23、厭氧芽孢梭菌：破傷風梭菌（破傷風）、產(chǎn)氣莢膜梭菌（氣性壞疽、食物中毒等）、肉毒梭菌（食物中毒）24、分枝桿菌屬：結(jié)核分枝桿菌、麻風分枝桿菌結(jié)核分枝桿菌：結(jié)核病的病

27、原菌、抗酸性細菌、生長緩慢、羅氏培養(yǎng)基、油菌免疫、結(jié)核菌素試驗的應用意義、聯(lián)合用藥25、人畜共患病病原菌：布魯菌屬（動物流產(chǎn)、波浪熱）、鼠疫耶氏菌、炭疽芽孢桿菌（炭疽?。?6、放線菌感染的特征：硫磺樣顆粒、瘺管27、支原體：支原體概念、肺炎支原體、溶脲脲原體（泌尿生殖系統(tǒng)感染）28、立克次體：概念、流行性斑疹傷寒、地方性斑疹傷寒、恙蟲病。外斐反應的診斷意義29、衣原體：概念、獨特的發(fā)育周期、和性病的關系30、螺旋體：概念、鉤端螺旋體(鉤體病)、梅毒螺旋體（梅毒）31、真菌的形態(tài)結(jié)構：霉菌、酵母的概念；菌絲的三種類型（營養(yǎng)菌絲、氣生菌絲、生殖菌絲）32、真菌的培養(yǎng)：沙保培養(yǎng)基、2228培養(yǎng)溫度3

28、3、真菌的菌落類型：酵母型、類酵母型、霉菌型（菌落）34、真菌的繁殖方式：孢子繁殖、菌絲斷裂繁殖35、病原性真菌：皮膚癬菌（嗜角質(zhì)蛋白特性）、白色假絲酵母菌（最常見的條件致病性真菌）、新型隱球菌（深部感染） 36、病毒的概念（非細胞型微生物）和主要特點（極小、結(jié)構簡單、細胞內(nèi)寄生）37、病毒的基本結(jié)構：核衣殼38、病毒的對稱類型：螺旋對稱型、20面體對稱型、復合對稱型39、病毒的增殖過程：（復制周期）吸附、穿入、脫殼、生物合成、裝配與釋放40、干擾現(xiàn)象：兩種病毒感染同一細胞時，可發(fā)生一種病毒抑制另一種病毒增殖的現(xiàn)象稱為干擾現(xiàn)象。41、干擾素的抗病毒作用機制：干擾素抗病毒蛋白抑制病毒復制42、病

29、毒的致病機理：對細胞的作用、對免疫的作用43、病毒培養(yǎng)的三種方法：細胞培養(yǎng)、雞胚培養(yǎng)、動物接種44、流行性感冒病毒：流感病毒變異和流感流行的關系（抗原漂移、抗原轉(zhuǎn)換）45、麻疹病毒:急性呼吸道傳染病、易感人群：6個月-五歲、飛沫傳播、臨床癥狀：發(fā)熱、上呼吸道炎、結(jié)膜炎、口腔粘膜斑（koplic斑）、全身斑丘疹為特征。46、副流感病毒（輕型流感樣癥狀）、腮腺炎病毒（腮腺炎）、呼吸道合胞病毒（嬰幼兒細支氣管炎、嬰幼兒肺炎）、風疹病毒（風疹、新生兒先天性畸形）、腺病毒（流行性角膜結(jié)膜炎）、鼻病毒（50%以上普通感冒）、冠狀病毒（10-30%普通感冒）、呼腸病毒（輕度上呼吸道感染）47、腸道病毒：脊髓

30、灰質(zhì)炎病毒、柯薩奇病毒、?？刹《?、新腸道病毒（主要經(jīng)糞口途徑傳播）48、乙型肝炎病毒（HBV）：（3. 5億無癥狀攜帶者，我國10%）49、乙型肝炎患者主要的血清標志物有哪些，并說明其在乙型肝炎診斷中的意義：HbsAg：已感染乙肝病毒HbeAg：乙肝病毒復制的標志，強感染性指標抗-HBc：乙肝病毒復制的標志抗-Hbe：恢復的標志，病毒停止復制，傳染性減弱抗-HBs：已感染過乙肝病毒，或接種疫苗后獲得免疫力 50、HIV的致病機理：HIV通過損害CD4+T淋巴細胞以及影響其它免疫細胞功能導致免疫功能缺陷，在此基礎上發(fā)生各種機會性感染及淋巴系統(tǒng)的腫瘤。51、朊粒(Prion)：傳染性蛋白因子、在人

31、和動物中引起以海綿狀腦?。═SE）為特征的致死性的中樞神經(jīng)系統(tǒng)的慢性退化性疾患。如搔癢病、瘋牛病、庫魯病、克-雅病、新克雅病52、抗生素概念：抗生素是生物在其生命活動過程中產(chǎn)生的（以及用化學、生物化學方法衍生的），能在低微濃度下有選擇性抑制或影響它種生物功能的有機化合物。53、 研究開發(fā)新抗生素的工作步驟：土壤微生物的分離、篩選、早期鑒別、分離精制、臨床前試驗研究、臨床試驗54、抗生素發(fā)酵的一般流程：孢子制備、種子制備、發(fā)酵55、次級代謝產(chǎn)物的特點：（1）對微生物自身的生長、繁殖無顯著功能（2）與初級代謝緊密相連（3）在一定條件下能大量合成56、抗生素生物合成的調(diào)節(jié)與控制要點：（1）受產(chǎn)生菌生

32、長速率的調(diào)節(jié)（2）受分解代謝物調(diào)節(jié)（3）需要合適的初級代謝基礎57、 抗生素的主要作用機制：抑制細胞壁的合成、影響細胞膜的功能、干擾蛋白質(zhì)的合成、抑制核酸的合成、干擾細胞的能量代謝58、 抗藥性產(chǎn)生的遺傳學機制：（1）自發(fā)突變加藥物選擇（2）抗藥性基因的轉(zhuǎn)移59、 抗藥性產(chǎn)生的生物化學機制：（1、）產(chǎn)生鈍化酶（2）藥物作用靶位改變（3）細胞對藥物的透性改變60、抗藥性的控制措施：（1）合理用藥（2）新藥開發(fā)（3）抗藥機制研究61、抗生素效價的微生物學測定法：管碟法（二劑量法）:計算公式、影響因素62、微生物在其他藥物生產(chǎn)中的應用：維生素C二步發(fā)酵法、氨基酸發(fā)酵的代謝調(diào)控、酶及酶抑制劑的生產(chǎn)意義

33、、甾體轉(zhuǎn)化的意義、微生態(tài)制劑等63、藥物生產(chǎn)中的微生物來源：空氣、水、人體、土壤、原料和包裝、廠房和制藥設備64、GMP：藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范65、防止微生物污染藥物的措施：（1）加強藥品生產(chǎn)管理（2）進行微生物學檢驗(3)使用合適的防腐劑66、測定藥物MIC、MBC的方法：（1）連續(xù)稀釋法（2）瓊脂擴散法67、常用的活菌計數(shù)法：（1）平板計數(shù)法（2）濾膜過濾法68、體外抗菌試驗的影響因素：（1）試驗菌（2）培養(yǎng)基（3）抗菌藥物（4）對照試驗69、藥物制劑的微生物學檢查：無菌檢查、細菌總數(shù)和霉菌總數(shù)檢查、控制菌檢查等三、微生物學基本技能要點1、顯微鏡油境鏡頭的使用要點：（1）低倍鏡對光（2）聚

34、光器上調(diào)（3）將油鏡頭降至最低（4）用粗調(diào)緩緩上調(diào)鏡頭至有物像一閃（5）用微調(diào)調(diào)至物象清晰2、革蘭染色方法和應用意義：染色方法：結(jié)晶紫初染1分鐘后細流水沖洗-碘液媒染1分鐘后細流水沖洗-95%酒精脫色（滴加酒精1-2次、脫色時間15-30秒）-沙黃復染1分鐘后細流水沖洗，甩干。應用意義：（1）細菌分類鑒定方面的意義：根據(jù)染色結(jié)果可將細菌分成革蘭陽性細菌和革蘭陰性細菌兩大類。（2）指導臨床用藥方面的意義：革蘭陽性細菌和革蘭陰性細菌對藥物的敏感性不同。3、標本片的制作過程：涂片（在玻片上將細菌標本均勻涂布成1平方厘米的薄層）-干燥（做到涂片上水跡完全消失）- 固定（緩緩通過火焰3次）-染色（采用相

35、應染色方法）4、觀察細菌典型形態(tài)的方法：根據(jù)對細菌的不規(guī)則形態(tài)及其影響因素的理解，選擇對數(shù)生長期的菌體進行觀察。這樣當拿到細菌標本后，通常一方面直接鏡檢，另一方面將標本中的細菌培養(yǎng)至對數(shù)生長狀態(tài)后再鏡檢。5、細菌接種的無菌操作技術：接種環(huán)的握持方法、燒灼接種環(huán)的方法、試管的握持方法、火焰保護下接種的注意事項6、培養(yǎng)基制備過程：稱量-溶解-過濾-調(diào)節(jié)酸堿度-分裝-高壓蒸汽滅菌7、細菌的接種培養(yǎng)方法及其主要用途：（1）平板劃線的方法：分區(qū)劃線法。主要用于分離細菌（2）斜面接種法：由下至上涂布。主要用于菌種的擴大培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)。（3）液體接種法：將粘有菌接種環(huán)在培養(yǎng)基內(nèi)的試管壁研磨，以使細菌均勻分布

36、于培養(yǎng)基。主要用于觀察細菌生長現(xiàn)象等研究。（4）半固體穿刺接種法：將粘有細菌的接種針穿刺與培養(yǎng)基中。主要用于觀察細菌有無動力。8、細菌生長現(xiàn)象的觀察：平板劃線（觀察及描述菌落的形態(tài)）、斜面接種（觀察細菌的菌苔）、液體接種（觀察均勻混濁生長現(xiàn)象、菌膜生長現(xiàn)象）、半固體接種（觀察細菌有無動力）9、細菌的生化反應（糖發(fā)酵、IMViC、硫化氫、尿素酶）的原理、方法以及結(jié)果判斷（理解其在細菌鑒定方面的意義） 10、高壓滅菌鍋滅菌方法的操作要點：蒸汽要流暢、排盡冷空氣、零磅開蓋11、紫外線滅菌的機理和特點：滅菌機理：主要是破壞細菌的核酸。作用特點：穿透力低，主要用于物體表面以及無菌室空氣的消毒。12、鏈霉

37、菌菌落觀察：菌落特點：小、致密、表面干躁、灰色孢子13、酵母菌菌落觀察：菌落特點：大、厚、表面濕潤、乳白色14、乙肝病毒表面抗原檢測（ELISA）：包被抗體-加待檢血清-加酶標抗體-加底物-比色法判斷結(jié)果15、病毒培養(yǎng)的3種方法：細胞培養(yǎng)、雞胚培養(yǎng)、動物接種16、藥物體外抗菌試驗：紙片擴散法（藥物敏感試驗）：（1）菌種：金黃色葡萄球菌、大腸桿菌3712-16小時普通肉湯瓊脂斜面培養(yǎng)物（2）培養(yǎng)基：MH（肉湯）、MHA（肉湯瓊脂）（3）方法：斜面培養(yǎng)物-接種MH-過夜（細菌處于對數(shù)生長期）-涂布于MHA-加抗生素濾紙片-37培養(yǎng)24小時-測量抑菌圈直徑-對照表15-1判斷藥敏試驗結(jié)果17、抗生素

38、效價二劑量測定法計算公式： (UH+UL)-(SH+SL) H lg=- * lg- (SH+UH)-(SL+UL) L18、細菌總數(shù)測定方法：試液稀釋-取兩個合適稀釋度試液1ml-平板-加15ml培養(yǎng)基-搖均-平板倒置37培養(yǎng)48小時-計數(shù)菌落-報告結(jié)果19、霉菌總數(shù)測定、無菌檢查、熱原質(zhì)檢查微生物學與免疫學1、病毒的致病機理：1、對宿主細胞的作用；2、對宿主的免疫病理損傷。190頁2、病毒培養(yǎng)的三種方法：細胞培養(yǎng)、雞胚培養(yǎng)、動物接種 194頁 3、最常用的培養(yǎng)病毒方法是：細胞培養(yǎng)194頁4、核酶：是一類具有雙重特異性的RNA分子，一是能識別特異的靶RNA 序列，二是具有酶活性，連續(xù)特異性切

39、割降解靶RNA。200頁5、真菌的概念：是一大類具有細胞壁，不含葉綠素、無根、莖、葉分化的真核細胞型微生物。202頁6、培養(yǎng)真菌常用的培養(yǎng)基：沙保培養(yǎng)基7、真菌的菌落類型：酵母型、類酵母型、霉菌型（菌落）205頁8、真菌的應用：酵母菌：啤酒、酒精發(fā)酵生產(chǎn)，單細胞蛋白、核苷酸、氨基酸等制造；毛霉菌屬：污染、分解蛋白質(zhì)，豆腐乳釀造；曲霉菌屬：糖化、分解蛋白質(zhì)、發(fā)酵、污染、條件致病、毒素；青霉菌屬：青霉素發(fā)酵、污染；根霉：糖化菌種 206頁9、最常見的條件致病性真菌是：白色假絲酵母 211頁10、正常菌群：在正常人體表以及與外界相通的腔道中分布的一定種類和數(shù)量的微生物。220頁11、正常菌群的生理功

40、能：拮抗病原微生物、營養(yǎng)作用、抗衰老作用、抗腫瘤作用、促進免疫作用 220頁12、滅菌: 利用理化因素殺死物體或介質(zhì)中所有微生物的方法。225頁13、消毒：利用理化因素殺死物體或介質(zhì)中的病原微生物的方法。225頁14、培養(yǎng)基的滅菌常用：高壓蒸汽滅菌法 227頁15、發(fā)酵工業(yè)中，常需要單獨滅菌的營養(yǎng)成分是：糖（見課件）16、紫外線的特點和殺菌機制：殺菌作用與波長有關 、 可損壞細菌的DNA結(jié)構、260-266nm殺菌作用最強、穿透力弱、適用于空氣和物體表面的消毒 229頁17、生物安全防護最好的實驗室是：BSL-4級實驗室 235頁18、生物安全 （bio-safety）：避免危險生物因子對實驗

41、人員暴露，向?qū)嶒炇彝鈹U散并導致危害的綜合措施。235頁19、質(zhì)粒：細菌染色體外的遺傳物質(zhì)。240頁20、噬菌體：感染細菌的病毒。240頁21、細菌基因轉(zhuǎn)移與重組的方式：轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導、接合、溶原性轉(zhuǎn)換 244頁22、轉(zhuǎn)化：受體菌直接獲取供體菌游離的DNA片斷，從而獲得供體菌部分遺傳性狀的過程。244頁23、轉(zhuǎn)導：以噬菌體為媒介，將供體菌的遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移入受體菌，通過交換重組而使受體菌獲得供體菌的部分遺傳性狀。245頁24、細菌的變異：H-O變異、S-R變異、毒力變異、耐藥變異等 248頁25、誘變育種工作的三個環(huán)節(jié)包括：突變的誘發(fā)-突變株的篩選-突變基因的表達 262頁26、理性化篩選（ration

42、al screening）：是運用遺傳學、生物化學的原理，根據(jù)產(chǎn)物已知的或可能的生物合成途徑、代謝調(diào)控機制和產(chǎn)物分子結(jié)構來進行設計和采用一些篩選方法，以打破微生物原有的代謝調(diào)控機制，獲得能大量形成發(fā)酵產(chǎn)物的高產(chǎn)突變株。263頁27、次級代謝產(chǎn)物概念：是指那些由微生物合成的，但對微生物自身的生長、繁殖無明顯影響的各種代謝物。次級代謝產(chǎn)物的形成是一種代謝調(diào)控方式。264頁、354頁28、次級代謝產(chǎn)物的生物合成特點：（1）受產(chǎn)生菌生長速率的調(diào)節(jié)（2）受分解代謝物調(diào)節(jié)（葡萄糖效應）（3）需要合適的初級代謝基礎（4）受代謝調(diào)控不嚴格（可大量產(chǎn)生、多組分）264頁、354頁29、“葡萄糖效應”的概念及應用

43、意義。葡萄糖效應：葡萄糖效應是一種碳源分解代謝物調(diào)節(jié)，是指能夠被優(yōu)先或迅速利用的碳源（葡萄糖）及其分解代謝物對其他多種代謝酶的調(diào)節(jié)作用。調(diào)解作用包括分解代謝物阻抑和分解代謝物抑制。該作用的強弱程度和該碳源（葡萄糖）的分解代謝速率有關。（見課件）通俗地說：葡萄糖效應是指抗生素發(fā)酵過程中葡萄糖被迅速分解利用時，會產(chǎn)生對抗生素發(fā)酵的抑制作用。（見課件）應用意義：因此抗生素發(fā)酵過程中現(xiàn)采用葡萄糖流加工藝來避免葡萄糖效應。30、常用的菌種保藏方法 271頁（一）斜面保藏法（二）液體石蠟保藏法（三）固體曲保藏法（四）砂土管保藏法（五 冷凍干燥法 六）液氮超低溫保藏法31、菌種保藏原理：人工創(chuàng)造條件使菌體的

44、代謝活動處于休眠狀態(tài)。如低溫、干燥、隔絕空氣或氧氣、缺乏營養(yǎng)物質(zhì)等，以降低菌種的代謝活動，減少菌種變異，達到長期保存的目的。271頁32、工業(yè)菌種容易發(fā)生生產(chǎn)性能衰退的最重要的原因是：減產(chǎn)的負突變幾率大 、菌種是由多個微生物個體組成 、高產(chǎn)菌株生長速率低于低產(chǎn)菌株 、菌種保藏方法不妥 、菌種傳代次數(shù)過多 273頁33、防止菌種衰退的措施：274頁盡量減少傳代次數(shù)；用單核細胞傳代；優(yōu)化菌種的培養(yǎng)條件；選擇合適的菌種保藏方法。工業(yè)菌種的特性：生長相對慢34、菌種的復壯方法：一般有如下三種方法。1.分離純化法 ，2.淘汰法 ，3.宿主體內(nèi)復壯法 274頁35、葡萄球菌：要點包括：是常見的化膿性球菌、

45、革蘭陽性球菌、據(jù)產(chǎn)色素情況分三類葡萄球菌（金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌）、SPA可用于協(xié)同凝集試驗、耐藥菌較為多見（如MRSA）致病性葡萄球菌的鑒定要點（金黃色、透明溶血環(huán)、血漿凝固酶試驗陽性、發(fā)酵甘露醇）278頁36、鏈球菌：要點包括：據(jù)溶血現(xiàn)象分三類鏈球菌（甲型鏈球菌、乙型鏈球菌、丙型鏈球菌）、據(jù)抗原結(jié)構分A-V共20群，致病株大多是A群、抗鏈球菌溶素O試驗輔助診斷鏈球菌感染（如風濕熱）、鏈球菌感染易引起超敏反應性疾病（如急性腎小球腎炎）281頁37、腸道桿菌：要點包括：大腸埃希菌、志賀菌屬、沙門菌屬大腸埃希菌：俗稱大腸桿菌，是腸道的正常菌群、是環(huán)境衛(wèi)生和食品衛(wèi)生學的檢測指標、是科研上最受到重視的一種細菌。生物學特性：革蘭陰性桿菌、兼性厭氧菌、易培養(yǎng)、代謝活躍、乳糖發(fā)酵試驗陽性（產(chǎn)酸產(chǎn)氣）（可區(qū)別于痢疾桿菌、傷寒桿菌，有鑒定意義）、IMViC試驗：+-。了解致病的血清型（5種）。志賀菌屬：俗稱痢疾桿菌，是細菌性痢疾