生物堿類藥物的分析

1、 第十章第十章教學(xué)目標(biāo)教學(xué)目標(biāo)（1）掌握各類生物堿藥物的特征鑒別試驗(yàn)（2）掌握各類生物堿藥物的含量測(cè)定方法、原理及結(jié)果判斷（3）了解各類生物堿藥物的結(jié)構(gòu)特征及性質(zhì)生物堿生物堿 生物體內(nèi)含氮有機(jī)化合物的總生物體內(nèi)含氮有機(jī)化合物的總 稱，大都具有特殊而顯稱，大都具有特殊而顯 著的生理活性，治療劑著的生理活性，治療劑 量與中毒劑量較接近量與中毒劑量較接近植物植物動(dòng)物動(dòng)物特點(diǎn)特點(diǎn)1 1含氮堿性化合物含氮堿性化合物2 2沒有共同母核沒有共同母核3 3多數(shù)具有含氮雜環(huán)結(jié)構(gòu)，少數(shù)氮多數(shù)具有含氮雜環(huán)結(jié)構(gòu)，少數(shù)氮在側(cè)鏈上（如麻黃堿）在側(cè)鏈上（如麻黃堿）4. 4. 絕大部分存在于植物體內(nèi)；少數(shù)絕大部分存在于植物體

2、內(nèi)；少數(shù)存在于動(dòng)物體內(nèi)（如蟾蜍堿）存在于動(dòng)物體內(nèi)（如蟾蜍堿）生物堿類生物堿類藥物藥物苯烴胺類托烷類喹啉類異喹啉類吲哚類黃嘌呤類 鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿 硫酸阿托品、氫溴酸山莨菪堿 硫酸奎寧、硫酸奎尼丁 鹽酸嗎啡、磷酸可待因 硝酸士的寧、利血平 咖啡因、茶堿第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與性質(zhì)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、苯烴胺類麻黃堿麻黃堿（l）CCCH3OH NHCH3HH手性手性（二）性質(zhì) 1.堿性 2.旋光性 3.紫外特征吸收 4.氨基醇性質(zhì)CCCH3OH NHCH3HHNCH3OCOCHCH2OH2H2SO4H2O二二 托烷類藥物托烷類藥物 結(jié)構(gòu)特征為莨菪烷衍生物莨菪醇與有機(jī)酸縮合的酯莨菪酸莨菪酸莨菪醇莨菪醇硫

3、酸阿托品硫酸阿托品（一）典型藥物結(jié)構(gòu)（一）典型藥物結(jié)構(gòu)顛茄洋金花莨菪 喹琳類藥物分子結(jié)構(gòu)中含有喹琳類藥物分子結(jié)構(gòu)中含有吡啶與苯稠合而成的喹啉雜環(huán)。吡啶與苯稠合而成的喹啉雜環(huán)。喹啉類藥物的分析本類藥物本類藥物結(jié)構(gòu)特征為苯并吡啶（氮原子在-位）喹啉（喹核堿）（喹核堿）（喹啉環(huán)）（喹啉環(huán)）NCH CH2CNOHCH3OHH2H2SO42H2O硫酸奎寧硫酸奎寧（一）典型藥物結(jié)構(gòu)（一）典型藥物結(jié)構(gòu)硫酸奎尼丁硫酸奎尼丁2NCHCH3ONCHCH2HHOHH2SO42H2O主要化學(xué)性質(zhì)堿 性： 喹核堿喹核堿上的上的N N原子具有堿性，與強(qiáng)酸成鹽原子具有堿性，與強(qiáng)酸成鹽旋 光 性： 硫酸奎寧硫酸奎寧 ( (左

4、旋左旋) )，比旋度為，比旋度為-237-237-244-244 硫酸奎寧丁硫酸奎寧丁( (右旋右旋) )，比旋度為，比旋度為+275+290+275+290 熒光特性：硫酸奎寧在稀硫酸中顯藍(lán)色熒光硫酸奎寧在稀硫酸中顯藍(lán)色熒光 硫酸奎寧丁在稀硫酸中顯藍(lán)色熒光，硫酸奎寧丁在稀硫酸中顯藍(lán)色熒光， 1.6pKb 脂脂環(huán)環(huán)胺胺85. 9pKa 酚酚羥羥基基弱弱酸酸性性（兩性）（兩性）OHOOHHNCH3嗎啡嗎啡四四 異喹啉類：異喹啉類：NONO士的寧士的寧061.pKb 五五 吲哚類：吲哚類：結(jié)構(gòu)特征為苯并吡咯吲哚環(huán)吲哚環(huán)7112.pKb 六六 黃嘌呤類：黃嘌呤類： 結(jié)構(gòu)特征系由嘧啶二酮和咪唑稠合結(jié)構(gòu)

5、特征系由嘧啶二酮和咪唑稠合黃嘌呤黃嘌呤咖啡因 NNNNCH3CH3CH3OOpKb=14.15六六 黃嘌呤類：黃嘌呤類：NNNNCH3CH3OO 茶堿H1、堿性強(qiáng)弱取決于分子中氮、堿性強(qiáng)弱取決于分子中氮 原子上所連接基團(tuán)的原子上所連接基團(tuán)的電效電效 應(yīng)應(yīng)及及立體效應(yīng)立體效應(yīng) 七、生物堿類藥物的通性七、生物堿類藥物的通性 3、可用非水堿量法測(cè)定含量、可用非水堿量法測(cè)定含量2、可與生物堿沉淀劑反應(yīng)、可與生物堿沉淀劑反應(yīng)（一）堿性（一）堿性* 季銨堿季銨堿*N在脂鏈或脂環(huán)上，堿性較強(qiáng)，易與酸成鹽在脂鏈或脂環(huán)上，堿性較強(qiáng)，易與酸成鹽 * N在芳環(huán)上，堿性較弱在芳環(huán)上，堿性較弱 奎寧環(huán)、吲哚環(huán)奎寧環(huán)、吲

6、哚環(huán)芳酰胺芳酰胺 N芳雜環(huán)芳雜環(huán)芳胺芳胺氨氨芳香脂胺芳香脂胺 脂肪胺、脂環(huán)胺脂肪胺、脂環(huán)胺 麻黃堿、阿托品、奎寧麻黃堿、阿托品、奎寧（二）溶解性（二）溶解性游游離離生生物物堿堿難溶于水難溶于水易溶于有機(jī)溶劑易溶于有機(jī)溶劑易溶于水易溶于水不溶于有機(jī)溶劑不溶于有機(jī)溶劑 H生生物物堿堿鹽鹽 OH（三）旋光性（三）旋光性阿托品雖有手性阿托品雖有手性C，但為消旋體，但為消旋體 天然生物堿多為左旋體天然生物堿多為左旋體一般左旋體有生理活性一般左旋體有生理活性 一、一般鑒別反應(yīng)（一）沉淀反應(yīng) H+生物堿 + 生物堿沉淀試劑第二節(jié)第二節(jié) 鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn)常用的生物堿沉淀試劑為：常用的生物堿沉淀試劑為： 1.

7、重金屬鹽類，如重金屬鹽類，如K2HgI4、KBiI4、I2KI、二氯化汞等；、二氯化汞等； 2. 大分子酸類，如磷鉬酸、硅鎢大分子酸類，如磷鉬酸、硅鎢酸等。酸等。（二）顯色反應(yīng) 常用的顯色試劑：濃硫酸、濃硝酸、鉬硫酸、釩硫酸、硒硫酸、甲醛硫酸等（三）熔點(diǎn)測(cè)定法（三）熔點(diǎn)測(cè)定法（四）（四）UV（五）（五）IR（六）色譜法（六）色譜法 1. HPLC 2. TLC（常用）（常用） 硅膠為吸附劑：游離生物堿能順硅膠為吸附劑：游離生物堿能順利遷移，生物堿鹽類吸附太牢，造成利遷移，生物堿鹽類吸附太牢，造成嚴(yán)重拖尾。嚴(yán)重拖尾。 解決方法：解決方法： （1）在展開劑中加少量的堿性試劑，）在展開劑中加少量的堿

8、性試劑，如氨、二乙胺、有機(jī)脂烴胺類；如氨、二乙胺、有機(jī)脂烴胺類； （2）硅膠板用堿處理）硅膠板用堿處理 二、特征鑒別反應(yīng)（一）雙縮脲反應(yīng)（一）雙縮脲反應(yīng) 側(cè)鏈具有氨基醇結(jié)構(gòu)側(cè)鏈具有氨基醇結(jié)構(gòu) 紫紫堇堇色色鹽鹽酸酸偽偽麻麻黃黃堿堿鹽鹽酸酸麻麻黃黃堿堿4CuSO水層水層醚層醚層OH-乙醚乙醚CCCH3OH NHCH3HH麻黃堿麻黃堿（l）CHOHCHNHCH3CH3OHCHCHCH3NHCH3CuOH2銅配位化合物銅配位化合物（二）Vitali反應(yīng) 托烷生物堿托烷生物堿 硫酸阿托品+發(fā)煙HNO3黃色醇制KOH深紫色氫溴酸山莨菪堿（三）綠奎寧反應(yīng) 含氧喹啉衍生物的反應(yīng)含氧喹啉衍生物的反應(yīng) 硫酸奎寧、

9、硫酸奎尼丁硫酸奎寧、硫酸奎尼丁褪色褪色奎尼丁奎尼丁奎寧奎寧或或22ClBrH+翠綠色翠綠色氨水氨水NC H C H2CNOHC H3OHH2H2SO42H2O硫酸奎寧硫酸奎寧（四）紫脲酸胺反應(yīng) 黃嘌啉類生物堿黃嘌啉類生物堿 KClO3+HCl紫色消失KOH氨氣蒸干紫色+咖啡因茶堿咖啡因 NNNNCH3CH3CH3OOpKb=14.15六六 黃嘌呤類：黃嘌呤類：NNNNCH3CH3OO 茶堿H（五） 與芳醛縮合顯色反應(yīng) 吲哚生物堿吲哚生物堿 1. 利血平利血平 + 新制香草醛新制香草醛玫瑰紅色玫瑰紅色紅色綠色二甲氨基苯甲醛對(duì)利血平冰醋酸冰醋酸、硫酸 2. 六六 嗎啡生物堿的特征反應(yīng)嗎啡生物堿的特

10、征反應(yīng)1. 甲醛甲醛-硫酸硫酸反應(yīng)反應(yīng) 含羥基異喹啉類生物堿含羥基異喹啉類生物堿 硫硫酸酸甲甲醛醛鹽鹽酸酸嗎嗎啡啡紫堇色紫堇色2. 與鉬硫酸試液的反應(yīng)與鉬硫酸試液的反應(yīng)鹽酸嗎啡鹽酸嗎啡+鉬硫酸鉬硫酸 紫色紫色藍(lán)色藍(lán)色棕綠色棕綠色OH OO HHNCH3嗎啡嗎啡3. 還原反應(yīng)還原反應(yīng) 嗎啡的弱還原性嗎啡的弱還原性 3FeCl6263Fe(CN)KFe(CN)K普普魯魯士士藍(lán)藍(lán)嗎嗎啡啡嗎啡與磷酸可待因的區(qū)分反應(yīng)嗎啡與磷酸可待因的區(qū)分反應(yīng)例例37 A、雙縮脲反應(yīng)、雙縮脲反應(yīng) B、Marquis反應(yīng)反應(yīng) C、兩者皆是、兩者皆是 D、兩者皆不是、兩者皆不是 3、鹽酸麻黃堿、鹽酸麻黃堿 4、鹽酸嗎啡、鹽酸

11、嗎啡 5、咖啡因、咖啡因 6、硫酸奎尼丁、硫酸奎尼丁ABDD例例1、能夠發(fā)生、能夠發(fā)生Vitali反應(yīng)的藥物是反應(yīng)的藥物是 A、鹽酸嗎啡、鹽酸嗎啡 B、硫酸奎寧、硫酸奎寧 C、磷酸可待因、磷酸可待因 D、鹽酸麻黃堿、鹽酸麻黃堿 E、硫酸阿托品、硫酸阿托品 97：83咖啡因和茶堿的特征鑒別反應(yīng)是A. 雙縮脲反應(yīng)B. Vitali反應(yīng)C. Marquis反應(yīng)D. 紫脲酸銨反應(yīng)E. 綠奎寧反應(yīng) 第三節(jié)第三節(jié) 特殊雜質(zhì)檢查特殊雜質(zhì)檢查 特殊雜質(zhì)檢查主要根據(jù)藥物與雜質(zhì)的理化性質(zhì)差異來進(jìn)行。一、藥物與雜質(zhì)的物理性質(zhì)差異一、藥物與雜質(zhì)的物理性質(zhì)差異（一）溶解性的差異（一）溶解性的差異 利用藥物與雜質(zhì)在溶解性

12、方面的差異進(jìn)行檢利用藥物與雜質(zhì)在溶解性方面的差異進(jìn)行檢查查。硫酸奎寧中三氯甲烷硫酸奎寧中三氯甲烷-乙醇中不溶物的檢查乙醇中不溶物的檢查:三氯甲烷三氯甲烷-乙醇中不溶物為硫酸奎寧制備過乙醇中不溶物為硫酸奎寧制備過程中易引入的無機(jī)鹽及其他生物堿。程中易引入的無機(jī)鹽及其他生物堿。檢查方法：取供試品檢查方法：取供試品2g,溶于三氯甲烷溶于三氯甲烷-無水無水乙醇（乙醇（2:1）混合液中，不溶物經(jīng)）混合液中，不溶物經(jīng)105干燥干燥至恒重，殘?jiān)坏眠^至恒重，殘?jiān)坏眠^2mg（二）旋光性質(zhì)的差異（二）旋光性質(zhì)的差異 硫酸阿托品硫酸阿托品檢查檢查 莨菪堿莨菪堿 取本品，按干燥品計(jì)算，加水制成取本品，按干燥品計(jì)算

13、，加水制成每每 1ml 中含中含 50mg 的溶液，依法測(cè)定的溶液，依法測(cè)定（附錄（附錄 E），旋光度不得過），旋光度不得過 0.40。（三）對(duì)光吸收性質(zhì)的差異（三）對(duì)光吸收性質(zhì)的差異利血平中氧化產(chǎn)物的檢查：利血平中氧化產(chǎn)物的檢查：利血平在光照和有氧存在下均易氧利血平在光照和有氧存在下均易氧化變質(zhì)，氧化產(chǎn)物具有熒光。因此，化變質(zhì)，氧化產(chǎn)物具有熒光。因此，中國(guó)藥典規(guī)定。供試品置紫外中國(guó)藥典規(guī)定。供試品置紫外光燈（光燈（365nm)下檢視，不得顯明顯下檢視，不得顯明顯的熒光。的熒光。二、利用藥物與雜質(zhì)在化學(xué)性利用藥物與雜質(zhì)在化學(xué)性質(zhì)上的差異質(zhì)上的差異（一）酸堿性的差異（一）酸堿性的差異硫酸阿托品硫

14、酸阿托品 檢查方法：取本品檢查方法：取本品0.25g，加鹽酸溶液，加鹽酸溶液（91000）1ml溶解后，用水稀釋成溶解后，用水稀釋成15ml,分取分取5ml,加氨試液加氨試液2ml，振搖，不得立即發(fā)，振搖，不得立即發(fā)生渾濁。生渾濁。（二）（二） 顏色的差異顏色的差異利用待測(cè)雜質(zhì)與化學(xué)試劑特有的顯色利用待測(cè)雜質(zhì)與化學(xué)試劑特有的顯色反應(yīng)進(jìn)行檢查反應(yīng)進(jìn)行檢查1.鹽酸嗎啡中阿撲嗎啡的檢查鹽酸嗎啡中阿撲嗎啡的檢查2.磷酸可待因中嗎啡的檢查磷酸可待因中嗎啡的檢查1.鹽酸嗎啡中阿撲嗎啡的檢查鹽酸嗎啡中阿撲嗎啡的檢查取本品取本品50mg50mg，加水，加水4ml4ml溶解后，溶解后，加碳酸氫鈉加碳酸氫鈉0.1

15、0g0.10g與與0.1mol/L0.1mol/L碘碘溶液溶液1 1滴，加乙醚滴，加乙醚5ml5ml，振搖提取，振搖提取，靜置分層后，乙醚層不得顯紅色，靜置分層后，乙醚層不得顯紅色，水層不得顯綠色。水層不得顯綠色。2.磷酸可待因中嗎啡的檢查磷酸可待因中嗎啡的檢查 取本品取本品0.1g，加鹽酸溶液，加鹽酸溶液(910000)使溶解成使溶解成5ml，加，加NaN02試液試液2ml，放置放置15min，加氨試液，加氨試液3ml，所顯顏，所顯顏色與嗎啡溶液色與嗎啡溶液?jiǎn)岱葐岱?.0mg加加HCl溶溶液液(910000)使溶解成使溶解成100m15ml，用同一方法制成的對(duì)照溶液比較，用同一方法制成的對(duì)照

16、溶液比較，不得更深。不得更深。其限量為？其限量為？三、色譜法三、色譜法（一）薄層色譜法（一）薄層色譜法 自身稀釋對(duì)照法自身稀釋對(duì)照法（二）高效液相色譜法（二）高效液相色譜法吸附或分配性質(zhì)的差異吸附或分配性質(zhì)的差異薄層色譜法薄層色譜法一、非水溶液滴定法（非水堿量法）一、非水溶液滴定法（非水堿量法） 原料藥原料藥（一）原理 水溶液中滴定突躍不明顯，在非水水溶液中滴定突躍不明顯，在非水介質(zhì)中，堿性增強(qiáng)，使滴定順利進(jìn)行介質(zhì)中，堿性增強(qiáng)，使滴定順利進(jìn)行 第四節(jié)第四節(jié) 含量測(cè)定含量測(cè)定HAClOBHHClOABH44 置換滴定：置換滴定： 中國(guó)藥典的測(cè)定方法為：中國(guó)藥典的測(cè)定方法為：取經(jīng)適當(dāng)方取經(jīng)適當(dāng)方法

17、干燥的供試品適量，加冰醋酸法干燥的供試品適量，加冰醋酸1030 ml使溶解。若供試品為氫鹵酸鹽，應(yīng)再加使溶解。若供試品為氫鹵酸鹽，應(yīng)再加5醋酸汞的冰醋酸溶液醋酸汞的冰醋酸溶液35 m1，加適宜的指，加適宜的指示液示液12滴，用高氯酸滴定液（滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。滴定，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。 （二）一般測(cè)定方法（二）一般測(cè)定方法 1. 溶劑溶劑 酸性溶劑：酸性溶劑：冰醋酸、冰醋酸冰醋酸、冰醋酸+醋酐、醋酐、醋酐醋酐 惰性溶劑：惰性溶劑：苯、氯仿、四氯化碳苯、氯仿、四氯化碳 能影響溶質(zhì)的解離情況和能影響能影響溶質(zhì)的解離情況和能影響酸堿強(qiáng)度很大

18、的溶劑：硝基甲烷、丙酸堿強(qiáng)度很大的溶劑：硝基甲烷、丙酮、二氧六環(huán)酮、二氧六環(huán) 2. 滴定劑：高氯酸的冰醋酸溶液高氯酸的冰醋酸溶液 或高氯酸的二氧六環(huán)溶液或高氯酸的二氧六環(huán)溶液 3. 指示終點(diǎn)的方法 電位法：玻璃電位法：玻璃甘汞電極系統(tǒng)甘汞電極系統(tǒng) 指示劑法：結(jié)晶紫、喹哪啶紅、指示劑法：結(jié)晶紫、喹哪啶紅、二甲基黃、橙黃二甲基黃、橙黃IV 等等 （三）注意事項(xiàng)（三）注意事項(xiàng)1 1、水分的存在可影響滴定突躍，通、水分的存在可影響滴定突躍，通常加入醋酐，以吸收冰醋酸及高氯常加入醋酐，以吸收冰醋酸及高氯酸中含有的水分。酸中含有的水分。2 2、溫度及貯存條件對(duì)滴定液的濃度、溫度及貯存條件對(duì)滴定液的濃度有影

19、響。有影響。（三）方法適用范圍 主要用于主要用于K Kb b10 氫溴酸 硫酸 鹽酸 硫酸氫根 硝酸 磷酸、有機(jī)酸HAClOBHHClOABH44 置換滴定：置換滴定： 一般均預(yù)先在溶液中加入一般均預(yù)先在溶液中加入Hg(Ac)2 的冰醋酸溶液，以消除氫鹵的冰醋酸溶液，以消除氫鹵酸對(duì)滴定的干擾。酸對(duì)滴定的干擾。 22HgXAc2BHHg(Ac)X2BH 理論量理論量13倍倍 1. 氫鹵酸鹽的測(cè)定取本品約取本品約 0.15g，精密稱定，加冰醋酸，精密稱定，加冰醋酸 10ml，加熱溶解后，加，加熱溶解后，加醋酸汞試液醋酸汞試液 4ml 與結(jié)晶紫指示液與結(jié)晶紫指示液 1滴，用高氯酸滴滴，用高氯酸滴定液

20、（定液（0.1mo1/L）滴定至溶液顯翠綠）滴定至溶液顯翠綠色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每每 1ml 高氯酸滴定液（高氯酸滴定液（0.1mol/L）相）相當(dāng)于當(dāng)于 20.17mg 的的C10H15NO HCl。鹽酸麻黃堿鹽酸麻黃堿 生物堿的硫酸鹽，在冰醋酸介質(zhì)中只生物堿的硫酸鹽，在冰醋酸介質(zhì)中只能被滴定至生物堿的能被滴定至生物堿的硫酸氫鹽硫酸氫鹽。 2-+BH+ ClO4 BH+ HSO4+(BH+)2 SO4 HClO42. 硫酸鹽的測(cè)定A. 硫酸阿托品 HClO4直接滴定時(shí)，反應(yīng)摩爾比為1 1H2OH2SO42NCH3OCO CHCH2OHB. 硫酸

21、奎寧 HClO4直接滴定時(shí)，反應(yīng)摩爾比為1 3 NCH3OCOHHNCH CH2H2H2SO4H2OC.硫酸奎寧片硫酸奎寧片 堿化、有機(jī)溶劑提取后滴定反應(yīng)摩爾堿化、有機(jī)溶劑提取后滴定反應(yīng)摩爾 為為1 4NCH3OCOHHNCH CH2H2H2SO4H2Omlmg18.02Lg18.02 1molg180.16Lmol0.1nCMT滴定度，每1 ml滴定液相當(dāng)于被測(cè)組分的mg數(shù)，mg/ml滴定液濃度，滴定液濃度，mol/Lmol/L被測(cè)物的摩爾質(zhì)量，被測(cè)物的摩爾質(zhì)量，g/molg/mol1 mol1 mol樣品消耗滴定液的摩爾數(shù)，樣品消耗滴定液的摩爾數(shù)，常體現(xiàn)為反應(yīng)摩爾比，即常體現(xiàn)為反應(yīng)摩爾比，

22、即1n1n 因因HNO3具有氧化性，可使指示劑具有氧化性，可使指示劑變色，一般電位法指示終點(diǎn)。如硝酸變色，一般電位法指示終點(diǎn)。如硝酸士的寧、硝酸毛果蕓香堿士的寧、硝酸毛果蕓香堿 3. 硝酸鹽的測(cè)定 取本品約取本品約 0.3g，精密稱定，加冰，精密稱定，加冰醋酸醋酸 20ml，振搖使溶解，照電位滴定，振搖使溶解，照電位滴定法（附錄法（附錄 A），用高氯酸滴定液），用高氯酸滴定液（0.1mo1/L）滴定，并將滴定的結(jié)果）滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每用空白試驗(yàn)校正。每 1ml 高氯酸滴定高氯酸滴定液（液（0.1mol/L）相當(dāng)于）相當(dāng)于39.74mg的的C21H22N2O2 HNO3。硝酸

23、士的寧硝酸士的寧 在冰醋酸介質(zhì)中是弱酸，可直接在冰醋酸介質(zhì)中是弱酸，可直接用高氯酸進(jìn)行滴定，用高氯酸進(jìn)行滴定，如磷酸氯喹、磷如磷酸氯喹、磷酸可待因酸可待因 4. 磷酸鹽的測(cè)定 由于有機(jī)酸系弱酸，對(duì)滴定無干由于有機(jī)酸系弱酸，對(duì)滴定無干擾，能準(zhǔn)確滴定，擾，能準(zhǔn)確滴定，可直接用高氯酸進(jìn)可直接用高氯酸進(jìn)行滴定行滴定。 5. 有機(jī)酸鹽的測(cè)定有機(jī)酸鹽的測(cè)定 取本品約取本品約 60mg，精密稱定，加冰醋酸，精密稱定，加冰醋酸 20ml 溶解后，加結(jié)晶紫指示液溶解后，加結(jié)晶紫指示液 1滴，用高滴，用高氯酸滴定液（氯酸滴定液（0.05mo1/L）滴定，至溶液顯）滴定，至溶液顯藍(lán)綠色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正

24、。藍(lán)綠色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每每 1ml 高氯酸滴定液（高氯酸滴定液（0.05mol/L）相當(dāng)于）相當(dāng)于 22.07mg 的的C19H23N3O2 C4H4O4。馬來酸麥角新堿馬來酸麥角新堿 若被置換出的有機(jī)酸不溶于冰醋若被置換出的有機(jī)酸不溶于冰醋酸，應(yīng)先將樣品堿化，有機(jī)溶劑提取酸，應(yīng)先將樣品堿化，有機(jī)溶劑提取游離堿后，再非水堿量法測(cè)定。游離堿后，再非水堿量法測(cè)定。對(duì)不同酸根采取的措施對(duì)不同酸根采取的措施 HX加加HgAc2 2HgXHgX2 2 H H2 2SOSO4 4生物堿的硫酸鹽通常為生物堿的硫酸鹽通常為2 2分子分子生物堿與生物堿與1 1分子硫酸成鹽，可直接滴定分子硫酸成

25、鹽，可直接滴定至至HSOHSO4 4- -（注意摩爾比）（注意摩爾比） HNOHNO3 3可氧化指示劑，妨礙終點(diǎn)觀察，可氧化指示劑，妨礙終點(diǎn)觀察，改用電位法測(cè)定改用電位法測(cè)定 磷酸、有機(jī)酸磷酸、有機(jī)酸無需處理，直接滴定無需處理，直接滴定二、提取中和法（二、提取中和法（提取酸堿滴定法、提取酸堿滴定法、提取容量法）提取容量法） （一）原理與方法 生物堿鹽類可溶解于水，不溶于有機(jī)溶劑游離生物堿不溶于水，易溶于有機(jī)溶劑依據(jù)性質(zhì)中和法測(cè)定有機(jī)層（B）水層有機(jī)溶劑OH-sol過濾sol(BH+)稀酸或H2O游離生物堿或生物堿鹽類1. 堿化2. 有機(jī)溶劑提取磷酸可待因片磷酸可待因片 應(yīng)用應(yīng)用水水硫酸溶液硫酸

26、溶液溶解、過濾溶解、過濾濾液濾液氨試液堿化氨試液堿化三氯甲烷提取三氯甲烷提取磷酸可待因片的含量測(cè)定（剩余滴定法）磷酸可待因片的含量測(cè)定（剩余滴定法）水浴蒸干水浴蒸干過量的硫酸滴定液過量的硫酸滴定液氫氧化鈉滴定氫氧化鈉滴定液回滴液回滴3. 中和法測(cè)定 終點(diǎn)酸滴定液滴定）（中性乙醇）殘?jiān)?，蒸干）有機(jī)層（BsolBB（1）直接滴定法直接滴定法 用于堿性較強(qiáng)的生物堿用于堿性較強(qiáng)的生物堿 （2）剩余滴定法剩余滴定法 用于堿性較弱的生物堿用于堿性較弱的生物堿 終點(diǎn)堿滴定液滴定）（定量過量的酸標(biāo)準(zhǔn)溶液）殘?jiān)?，蒸干）有機(jī)層（HBHsolBB（3）酸滴定液返提后剩余滴定法酸滴定液返提后剩余滴定法 用于對(duì)熱不

27、穩(wěn)定的生物堿用于對(duì)熱不穩(wěn)定的生物堿 終點(diǎn)堿滴定液滴定水層）水層（有機(jī)層（棄去）定量過量的酸滴定液）有機(jī)層（HBHB 1. 堿化試劑 最常用氨水最常用氨水 2. 提取溶劑 最常用氯仿最常用氯仿（二）測(cè)定條件的選擇（3）提取溶劑的用量及提取次數(shù)）提取溶劑的用量及提取次數(shù) 通常應(yīng)提取通常應(yīng)提取4次，第一次用量至次，第一次用量至少應(yīng)為水液體積的一半，以后幾次應(yīng)少應(yīng)為水液體積的一半，以后幾次應(yīng)各為第一次的一半各為第一次的一半 3. 指示劑的選擇指示劑的選擇 由于滴定生成的由于滴定生成的鹽是強(qiáng)酸弱堿鹽，故選用甲基紅、溴鹽是強(qiáng)酸弱堿鹽，故選用甲基紅、溴酚藍(lán)、溴甲酚紫等在酸性區(qū)域變色的酚藍(lán)、溴甲酚紫等在酸性區(qū)

28、域變色的指示劑。指示劑。 儀器簡(jiǎn)單、試劑常用，但操作繁儀器簡(jiǎn)單、試劑常用，但操作繁瑣、費(fèi)時(shí)、精密度差、準(zhǔn)確度差，主瑣、費(fèi)時(shí)、精密度差、準(zhǔn)確度差，主要用于制劑分析要用于制劑分析（三）特點(diǎn)（三）特點(diǎn)三.酸性染料比色法 原理：在適當(dāng)?shù)膒H介質(zhì)中 測(cè)定有機(jī)相吸收度或?qū)⒂袡C(jī)相堿化后測(cè)定釋放出來的有機(jī)染料的吸收度，按標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法計(jì)算含量1. 水相中反應(yīng)水相中反應(yīng) 離子對(duì)離子對(duì)BH+In-被有機(jī)溶劑提取，被有機(jī)溶劑提取，使有機(jī)相呈色。剩余的酸性染料留使有機(jī)相呈色。剩余的酸性染料留于水相于水相3. 比色法測(cè)定比色法測(cè)定2. 有機(jī)溶劑提取有機(jī)溶劑提取影響因素 水相pH值：要使有機(jī)堿以BH+形式，染料以ln-形式存

29、在 酸性染料的選擇：與有機(jī)堿定量結(jié)合，生成的絡(luò)合物在有機(jī)相中有較大的溶解度和較高的吸收度 有機(jī)溶劑的選擇：對(duì)絡(luò)合物有大的溶解度，即與離子對(duì)形成氫鍵的能力強(qiáng)，不與或極少與水相混溶常用的酸性染料有：溴麝香草酚藍(lán)溴甲酚藍(lán)溴酚藍(lán)溴用酚紫常用的有機(jī)溶劑：氯仿二氯甲烷等5. 有色雜質(zhì)的排除有色雜質(zhì)的排除4. 水分的影響水分的影響 嚴(yán)防水分的混入嚴(yán)防水分的混入 有機(jī)層可加入無水硫酸鈉等脫水有機(jī)層可加入無水硫酸鈉等脫水劑或經(jīng)干燥濾紙濾過劑或經(jīng)干燥濾紙濾過 3. 準(zhǔn)確度差，不能用于原料藥的準(zhǔn)確度差，不能用于原料藥的測(cè)定，只能用于制劑分析測(cè)定，只能用于制劑分析（三）特點(diǎn)（三）特點(diǎn) 1. 選擇性高（選用適當(dāng)選擇性高

30、（選用適當(dāng)pH緩沖液緩沖液可消除干擾）可消除干擾）2. 靈敏度高、供試品用量少靈敏度高、供試品用量少硫酸阿托品硫酸阿托品片劑片劑 ChP（2010）%100%標(biāo)示對(duì)供對(duì)標(biāo)示量cnAAc片劑片劑 對(duì)照法對(duì)照法（四）應(yīng)用（四）應(yīng)用%100%標(biāo)示量平均片重標(biāo)示量對(duì)供對(duì)smVnAAc片劑片劑 對(duì)照法對(duì)照法四、置換酸堿滴定法 某些生物堿不能直接用酸或堿滴定，但與某些試劑反應(yīng)后，能置換產(chǎn)生定量的酸或堿，可用酸或堿滴定液測(cè)定置換出的酸或堿，從而間接計(jì)算被測(cè)藥物的質(zhì)量。 主要用于某些不具酸堿性或酸堿性較弱藥物的含量測(cè)定。安茶堿原料藥中茶堿的含量測(cè)定： 茶堿含活潑的氫顯酸性，但酸性太弱，直接用酸堿滴定沒有明顯的

31、突躍，加入硝酸溶液后與茶堿反應(yīng)生成茶堿銀鹽沉淀，同時(shí)置換出定量的硝酸，再用氫氧化鈉滴定液滴定硝酸，可間接地計(jì)算出堿的含量。（五）紫外分光光度法（五）紫外分光光度法 大多數(shù)生物堿藥物分子結(jié)構(gòu)中都含有不飽和鍵、共軛體系或含有芳香環(huán)，在紫外光區(qū)有特征吸收，可采用紫外分光光度法進(jìn)行含量測(cè)定二、含量測(cè)定二、含量測(cè)定非水堿量法非水堿量法1. 原理原理HAClOBHABH4HClO4 反應(yīng)摩爾比為反應(yīng)摩爾比為1 1CCCH3OH NHCH3HH空空樣樣高氯酸滴定液高氯酸滴定液冰醋酸冰醋酸空白空白樣品樣品VV2. 測(cè)定方法測(cè)定方法（約（約8ml）半微量法半微量法溶劑溶劑 冰醋酸冰醋酸滴定劑滴定劑 高氯酸高氯酸

32、(0.1mol/L)指示終點(diǎn)的方法指示終點(diǎn)的方法 電位法電位法 指示劑法指示劑法3. 氫鹵酸鹽的測(cè)定氫鹵酸鹽的測(cè)定在冰醋酸中的酸性次序?yàn)樵诒姿嶂械乃嵝源涡驗(yàn)?4424HNOHSOSOHHClHBrHClO HXClOBHHClOXBH44 氫鹵酸鹽的干擾氫鹵酸鹽的干擾酸性較強(qiáng)酸性較強(qiáng)需加醋酸汞的冰醋酸溶液需加醋酸汞的冰醋酸溶液22HgXAc2BHHg(Ac)X2BH HAcClOBHHClOAcBH44 排除氫鹵酸鹽干擾的方法排除氫鹵酸鹽干擾的方法理論量理論量13倍倍難解離難解離鹽酸麻黃堿鹽酸麻黃堿 ChP（2000） 取本品約取本品約0.15g，精密稱定，加冰，精密稱定，加冰醋酸醋酸10m

33、l溫?zé)崛芙?，加醋酸汞試液溫?zé)崛芙猓哟姿峁囈?ml與結(jié)晶紫指示液與結(jié)晶紫指示液1滴，用高氯酸滴滴，用高氯酸滴定液（定液（0.1mol/L）滴定至翠綠色，并）滴定至翠綠色，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正NCH3OCOCHCH2OH2H2SO4H2O35. 4pKb 脂脂環(huán)環(huán)胺胺第二節(jié)第二節(jié) 硫酸阿托品的分析硫酸阿托品的分析 莨菪酸莨菪酸莨菪醇莨菪醇1. Vitali反應(yīng)反應(yīng) 托烷生物堿反應(yīng)托烷生物堿反應(yīng) 一、鑒別一、鑒別KOH醇制醇制3HNO發(fā)煙發(fā)煙硫酸阿托品硫酸阿托品黃色黃色深紫色深紫色2. IR3. 的反應(yīng)的反應(yīng) 24SO（1） 不不溶溶于于鹽鹽酸酸或或硝硝酸酸）白白(

34、 BaSOBaSO4224 （2） ）溶溶于于醋醋酸酸銨銨或或氫氫氧氧化化鈉鈉白白( PbSOPbSO4224 （3）+HCl不生成白色沉淀不生成白色沉淀 二、特殊雜質(zhì)檢查二、特殊雜質(zhì)檢查（一）硫酸阿托品中莨菪堿的檢查（一）硫酸阿托品中莨菪堿的檢查（dl）（l）旋光度法旋光度法（二）其他生物堿的檢查（二）其他生物堿的檢查利用堿性和溶解性的差異利用堿性和溶解性的差異三、含量測(cè)定三、含量測(cè)定（一）原料（一）原料 非水堿量法非水堿量法反應(yīng)摩爾比為反應(yīng)摩爾比為1 1HAClOBHABH4HClO4 NCH3OCOCHCH2OH（二）片劑（二）片劑 酸性染料比色法酸性染料比色法原理原理 在適當(dāng)?shù)脑谶m當(dāng)?shù)?/p>

35、pH介質(zhì)中介質(zhì)中 BHHB InHHIn+）（ InBH（有機(jī)溶劑）（有機(jī)溶劑）A離子對(duì)離子對(duì)H2OH2SO42NCHCH2HNCH3OCOHH第三節(jié)第三節(jié) 硫酸奎寧的分析硫酸奎寧的分析 喹啉環(huán)喹啉環(huán)7 . 9pKb2 07. 5pKb1 一、鑒別一、鑒別1. 熒光反應(yīng)熒光反應(yīng)藍(lán)藍(lán)色色熒熒光光硫硫酸酸奎奎寧寧稀稀42SOH2. IR3. 的反應(yīng)的反應(yīng) 24SO4. 綠奎寧反應(yīng)綠奎寧反應(yīng) 含氧喹啉的反應(yīng)含氧喹啉的反應(yīng) 褪色褪色奎尼丁奎尼丁奎寧奎寧或或22ClBrH+翠綠色翠綠色氨水氨水二、特殊雜質(zhì)的檢查二、特殊雜質(zhì)的檢查（一）氯仿（一）氯仿乙醇中不溶物的檢查乙醇中不溶物的檢查 殘?jiān)鼩堅(jiān)?.2mg

36、（105）（二）其他金雞納堿的檢查（二）其他金雞納堿的檢查 TLC的高低濃度對(duì)比法的高低濃度對(duì)比法限量限量=0.0510.0100%=0.5%三、含量測(cè)定三、含量測(cè)定非水堿量法非水堿量法（一）硫酸奎寧（一）硫酸奎寧 HClO4直接滴定直接滴定 反應(yīng)摩爾比為反應(yīng)摩爾比為1 3-NCHHONCHCH2CH3ONCHHONCHCH2CH3ONCHHONCHCH2CH3ONCHHONCHCH2CH3O-2SO4+HHNCHHONCHCH2CH3ONCHHONCHCH2CH3O硫酸奎寧硫酸奎寧 4HSOH 4ClOH 4ClOH 4ClOHHAc. g4HClO3反應(yīng)摩爾比反應(yīng)摩爾比1 3NCHHONC

37、HCH2CH3ONCHHONCHCH2CH3OHH+SO42 -（二）硫酸奎寧片（二）硫酸奎寧片 堿化、有機(jī)溶劑提取后滴定堿化、有機(jī)溶劑提取后滴定 反應(yīng)摩爾比為反應(yīng)摩爾比為1 4NCHHONCHCH2CH3ONCHHONCHCH2CH3ONaOH硫酸奎寧片硫酸奎寧片 反應(yīng)摩爾比反應(yīng)摩爾比1 4 NCHHONCHCH2CH3ONCHHONCHCH2CH3OHH+SO42 -NCHHONCHCH2CH3ONCHHONCHCH2CH3O 4ClOH 4ClOH 4ClOH 4ClOH4HClO4第四節(jié)第四節(jié) 鹽酸嗎啡的分析鹽酸嗎啡的分析 1 . 6pKb 脂脂環(huán)環(huán)胺胺85. 9pKa 酚酚羥羥基基弱

38、弱酸酸性性（兩性）（兩性）OHOOHHNCH3一、鑒別一、鑒別1. Marquis反應(yīng)反應(yīng) 嗎啡特征反應(yīng)嗎啡特征反應(yīng) 硫硫酸酸甲甲醛醛鹽鹽酸酸嗎嗎啡啡紫堇色紫堇色2. 與鉬硫酸試液的反應(yīng)與鉬硫酸試液的反應(yīng) 嗎啡特征反應(yīng)嗎啡特征反應(yīng) 鹽酸嗎啡鹽酸嗎啡+鉬硫酸鉬硫酸 紫色紫色藍(lán)色藍(lán)色棕綠色棕綠色3. 還原反應(yīng)還原反應(yīng) 嗎啡的弱還原性嗎啡的弱還原性 4. IR 5. Cl-的反應(yīng)的反應(yīng) 3FeCl6263Fe(CN)KFe(CN)K普普魯魯士士藍(lán)藍(lán)嗎嗎啡啡嗎啡與磷酸可待因的區(qū)分反應(yīng)嗎啡與磷酸可待因的區(qū)分反應(yīng)二、特殊雜質(zhì)檢查二、特殊雜質(zhì)檢查1. 阿撲嗎啡阿撲嗎啡 靈敏度法靈敏度法2I阿阿撲撲嗎嗎啡啡N

39、a2CO3綠色綠色乙醚乙醚深寶石紅色深寶石紅色醚層醚層水層水層綠色綠色2. 罌粟酸罌粟酸 靈敏度法靈敏度法NCH3OCH3ONHOOCH33FeCl罌罌粟粟酸酸H+紅色紅色3. 其他生物堿其他生物堿 TLC法法 可待因可待因 雜質(zhì)對(duì)照品法雜質(zhì)對(duì)照品法 其他生物堿其他生物堿 高低濃度對(duì)比法高低濃度對(duì)比法CH3OOONCH3OH可待因可待因%1%1001011 . 01011 . 01011 . 0% 其其他他生生物物堿堿%1%1005105. 01011 . 05105. 0% 可可待待因因三、含量測(cè)定三、含量測(cè)定1. 非水堿量法非水堿量法 原料原料 加醋酸汞試液消除鹽酸對(duì)滴定加醋酸汞試液消除鹽

40、酸對(duì)滴定 的影響的影響2. 紫外分光光度法紫外分光光度法 片劑片劑NONO士的寧士的寧061.pKb 第五節(jié)第五節(jié) 硝酸士的寧的分析硝酸士的寧的分析 吲哚環(huán)吲哚環(huán)7112.pKb 一、鑒別一、鑒別1. 與重鉻酸鉀的反應(yīng)與重鉻酸鉀的反應(yīng)72242OCrKSOH士士的的寧寧紫色紫色2. 的反應(yīng)的反應(yīng) 藥典附錄藥典附錄“一般鑒別試驗(yàn)一般鑒別試驗(yàn)” 3NO(3) 加高錳酸鉀試液，加高錳酸鉀試液，紫色紫色不褪不褪 442FeSOSOH3NONO(1)Fe2+棕色棕色棕棕 2OSOH3NONONO242(2)Cu二、特殊雜質(zhì)檢查二、特殊雜質(zhì)檢查馬錢子堿馬錢子堿 NOONCH3OCH3O OHHNO23馬馬錢錢子子堿堿硝化反應(yīng)硝化反應(yīng)紅色紅色不得顯色不得顯色靈敏度法靈敏度法三、含