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1、生化儀檢測(cè)原理及應(yīng)用銀聯(lián)立生化分析技術(shù)基本原理:生化分析技術(shù)基本原理:1:反射分析技術(shù)原理:反射分析技術(shù)原理:儀器內(nèi)部光源發(fā)出一束光透過(guò)透明支持層,在試劑層光被有色化合物部分吸收后,在擴(kuò)散層提供的反射面被反射,反射光經(jīng)濾光裝置后回到光度檢測(cè)器被讀數(shù)。光密度由此被轉(zhuǎn)化為電壓讀數(shù),并計(jì)算成分析物濃度。2散射免疫比濁法技術(shù)原理:散射免疫比濁法技術(shù)原理:是指一定波長(zhǎng)的光沿水平軸照射,通過(guò)溶液使遇到抗原抗體復(fù)合物粒子,光線被粒子顆粒折射,發(fā)生偏轉(zhuǎn),光線偏轉(zhuǎn)的角度與發(fā)射光的波長(zhǎng)和抗原抗體復(fù)合物顆粒大小和多少密切相關(guān)。散射光的強(qiáng)度與復(fù)合物的含量成正比。3. 透射免疫比濁法的技術(shù)原理:透射免疫比濁法的技術(shù)原理
2、:是測(cè)定一定體積的溶液通過(guò)的光線量,當(dāng)光線通過(guò)時(shí),由于溶液中存在的抗原抗體復(fù)合物粒子對(duì)光線的反射和吸收,引起透射光的減少,測(cè)定的光通量和抗原抗體復(fù)合物的量成反比?;瘜W(xué)發(fā)光技術(shù)基本原理:化學(xué)發(fā)光技術(shù)基本原理: 1:電化學(xué)發(fā)光分析技術(shù)(:電化學(xué)發(fā)光分析技術(shù)(ECL):):是一種在電極表面由電化學(xué)引發(fā)的特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng)。包括了兩個(gè)過(guò)程,發(fā)光底物二價(jià)的三聯(lián)吡啶釕及反應(yīng)參與物三丙胺在電極表面失去電子而被氧化。氧化的三丙胺失去一個(gè)H成為強(qiáng)還原劑,將氧化型的三價(jià)釕還原成激發(fā)態(tài)的二價(jià)釕,隨即釋放光子恢復(fù)為基態(tài)的發(fā)光底物。 (發(fā)光標(biāo)記物-三聯(lián)吡啶釕) 代表儀器品牌-德國(guó)羅氏德國(guó)羅氏Cobas E601 2:化
3、學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫分析:化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫分析: 化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫分析又稱化學(xué)發(fā)光免疫分析(CLIA ) , 是用化學(xué)發(fā)光劑直接標(biāo)記抗原或抗體的免疫分析方法。常用于標(biāo)記的化學(xué)發(fā)光物質(zhì)有吖啶酯類化合物acridin ium ester (A E) , 是有效的發(fā)光標(biāo)記底物 , 其通過(guò)起動(dòng)發(fā)光試劑(NaOH2H2O 2 ) 作用而發(fā)光, 強(qiáng)烈的直接發(fā)光在一秒鐘內(nèi)完成, 為快速的閃爍發(fā)光。吖啶酯作為標(biāo)記物用于免疫分析, 其化學(xué)反應(yīng)簡(jiǎn)單、快速、無(wú)須催化劑; 檢測(cè)小分子抗原采用競(jìng)爭(zhēng)法, 大分子抗原則采用夾心法 , 非特異性結(jié)合少, 本底低; 與大分子的結(jié)合不會(huì)減小所產(chǎn)生的光量, 從而增加靈敏度。 代表儀器品牌
4、-美國(guó)貝克曼美國(guó)貝克曼DXC800 DXC800照片3.干化學(xué)反射分析技術(shù)原理及優(yōu)點(diǎn):干化學(xué)反射分析技術(shù)原理及優(yōu)點(diǎn): 與普通生化儀比較,干化學(xué)被測(cè)物質(zhì)的化學(xué)反應(yīng)是在干燥的基質(zhì)中進(jìn)行,入射光通過(guò)基質(zhì)被吸收后,檢測(cè)反射光的減弱程度來(lái)反映被測(cè)物質(zhì)濃度的大小。 普通生化儀反應(yīng)載體是水溶液,入射光被有色反應(yīng)產(chǎn)物吸收后減弱,通過(guò)吸光度的大小來(lái)反映被測(cè)物質(zhì)濃度的大小。 干化學(xué)均用一次性消耗品,無(wú)交叉污染和攜帶污染。缺點(diǎn)是:成本比較高。4:生化儀恒溫裝置:生化儀恒溫裝置-自動(dòng)生化分析儀通過(guò)溫度控制系統(tǒng)保持溫度的恒定,以保證反應(yīng)的正常進(jìn)行,可以對(duì)25、30、和37三種溫度進(jìn)行恒溫。保持恒溫的方式有三種: 空氣干
5、式浴恒溫空氣干式浴恒溫:在比色杯與加熱器之間隔有空氣。 優(yōu)點(diǎn):方便,速度快,不需要特殊的保護(hù)。 缺點(diǎn):穩(wěn)定性和均勻性稍差。 -代表儀器貝克曼代表儀器貝克曼DXC800水浴式循環(huán)加熱式水浴式循環(huán)加熱式:在比色杯周圍充盈有水,加熱器控制水的溫度。優(yōu)點(diǎn):溫度準(zhǔn)確,可達(dá)0.1。缺點(diǎn):需要特殊的防腐劑才能保證水質(zhì)的潔凈。-代表儀器羅氏代表儀器羅氏Modul P800 恒溫液循環(huán)間接加熱恒溫液循環(huán)間接加熱:在比色杯周圍流動(dòng)著一種特殊的恒溫液(具有無(wú)味、無(wú)污染、不變質(zhì)、不蒸發(fā)等特點(diǎn)的能夠傳導(dǎo)熱量的一種介質(zhì)),在比色杯與恒溫液又有一個(gè)幾毫米的空氣夾縫,恒溫液通過(guò)加熱夾縫的空氣達(dá)到恒溫。 優(yōu)點(diǎn):均勻性、穩(wěn)定性優(yōu)
6、于干式,又有升溫迅速,不需要特殊保養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)。5:反滲透純水系統(tǒng):反滲透純水系統(tǒng): 原水為自來(lái)水,首先經(jīng)過(guò)機(jī)械過(guò)濾器,去除混在水中的鐵銹、砂、紅蟲(chóng)、膠體等大顆粒雜質(zhì);首級(jí)過(guò)濾后的水進(jìn)入活性碳濾器,活性炭對(duì)水中的余氯、有機(jī)物及異味有極高的去除效果;然后經(jīng)過(guò)軟水處理器去除水中造成結(jié)垢的鈣、鎂等離子,變成軟水。經(jīng)過(guò)處理后出來(lái)的水,再經(jīng)過(guò)5m保安過(guò)濾器,防止預(yù)處理濾料微粒及5m以上的雜質(zhì)進(jìn)入反滲透系統(tǒng),再經(jīng)高壓泵增壓1.0MPa或1.5MPa,在此壓力下,反滲透析出純水,然后送到純水箱。 1級(jí)別 分析實(shí)驗(yàn)室用水的原水應(yīng)為飲用水或適當(dāng)純度的水。 分析實(shí)驗(yàn)室用水共分三個(gè)級(jí)別:一級(jí)水、二級(jí)水和三級(jí)水。 2一級(jí)
7、水 一級(jí)水用于有嚴(yán)格要求的分析試驗(yàn),包括對(duì)顆粒有要求的試驗(yàn)。如高效液相色譜分析用水 一級(jí)水可用二級(jí)水經(jīng)過(guò)石英設(shè)備蒸餾或離子交換混合床處理后,再經(jīng)o2pm微孔濾膜過(guò)濾來(lái)制取。 3二級(jí)水 二級(jí)水用于無(wú)機(jī)痕量分析等試驗(yàn),如原子吸收光譜分析用水。 二級(jí)水可用多次蒸餾或離子交換等方法制取。 4三級(jí)水 三級(jí)水用于一般化學(xué)分析試驗(yàn)。 三級(jí)水可用蒸餾或離子交換等方法制取。 5貯存 各級(jí)用水在貯存期間,其沾污成分的主要來(lái)源是容器可溶成分的溶解、空氣中二氧化碳和其他雜質(zhì)。因此,一級(jí)水不可貯存,使用前準(zhǔn)備.二級(jí)水、三級(jí)水可適量準(zhǔn)備,分別貯存在預(yù)先經(jīng)同級(jí)水清洗過(guò)的容器中。 各級(jí)用水在運(yùn)輸過(guò)程中應(yīng)避免沾污。5.2水質(zhì)常
8、引起的問(wèn)題:水質(zhì)常引起的問(wèn)題: Frequent Calibrations 頻繁的校正頻繁的校正 High CV% 高高CV Fluctuation in quality results over the day/week/month 積累和波動(dòng)現(xiàn)象積累和波動(dòng)現(xiàn)象 Interfered assays 直接干擾分析直接干擾分析分析儀參數(shù)設(shè)定及相關(guān)資料:分析儀參數(shù)設(shè)定及相關(guān)資料:7600基本設(shè)置雙波長(zhǎng):雙波長(zhǎng):有兩個(gè)不同的波長(zhǎng)即測(cè)量波長(zhǎng)(主波長(zhǎng))和參比波長(zhǎng)(次波長(zhǎng))。由檢測(cè)器測(cè)出的吸收度是這兩個(gè)波長(zhǎng)下吸收度的差值A(chǔ)。A與被測(cè)定物質(zhì)的濃度成正比,這個(gè)方法稱雙波長(zhǎng)法。雙波長(zhǎng)差吸光度法具有可以克服樣本混
9、濁(溶血、脂血、黃疸)、共存組分吸收譜線疊加的干擾,以及減少比色杯的光學(xué)不均一等優(yōu)點(diǎn)。空白空白(blank)校正校正:在分光光度法中,常利用空白溶液來(lái)調(diào)節(jié)儀器的吸光度零點(diǎn),或用來(lái)抵消某些測(cè)定的干擾因素。濕化學(xué)常見(jiàn)的比色分析反應(yīng)類型:濕化學(xué)常見(jiàn)的比色分析反應(yīng)類型:直接測(cè)量:具有特征性的吸收峰,不經(jīng)過(guò)任何反應(yīng)直接在指定波長(zhǎng)測(cè)量;單一反應(yīng):待測(cè)反應(yīng)本身有特征性吸收峰的底物或產(chǎn)物量的變化;如ALB測(cè)定原理:白蛋白+BCG-白蛋白-溴甲酚綠復(fù)合物溴甲酚綠復(fù)合物在波長(zhǎng)為570nm處吸光度最強(qiáng),固此法ALB主波長(zhǎng)應(yīng)設(shè)定在570nm;偶聯(lián)反應(yīng):底物或產(chǎn)物無(wú)特征性吸收峰,需經(jīng)過(guò)其他反應(yīng)生成有特征性的吸收峰測(cè)量的
10、化合物,這種反應(yīng)稱為指示反應(yīng)。如ALT測(cè)定原理:L-丙氨酸+酸戊二酸 丙酮酸+L-谷氨酸丙酮酸+NADH+H+ 乳酸+ NAD NADH在340nm處吸光度最強(qiáng),其吸光度與NADH的濃度成正比,固ALT此法檢測(cè)主波長(zhǎng)應(yīng)設(shè)定在340nm處。一點(diǎn)終點(diǎn)法:當(dāng)待測(cè)物與試劑反應(yīng)到達(dá)平衡,測(cè)定其吸光度,計(jì)算待測(cè)物濃度,該法在標(biāo)本正常情況下較穩(wěn)定,若空白對(duì)照較大時(shí)(如有干擾吸光度物質(zhì))影響檢測(cè)真實(shí)值。2、兩點(diǎn)終點(diǎn)法:在被測(cè)物反應(yīng)或指示反應(yīng)未開(kāi)始時(shí),選擇第一個(gè)吸光度點(diǎn),在反應(yīng)到達(dá)平衡后選擇第二個(gè)吸光度點(diǎn),兩點(diǎn)吸光度點(diǎn)之差用于計(jì)算結(jié)果。此法能有效減少標(biāo)本溶血、脂血、黃疸造成的干擾。 3、連續(xù)監(jiān)測(cè)法:在零級(jí)反應(yīng)期
11、連續(xù)測(cè)定酶促反應(yīng)過(guò)程中底物或產(chǎn)物量的變化,求出酶反應(yīng)初速度,間接計(jì)算出酶活力濃度。此法主要用于酶活性及其代謝物的測(cè)定,較終點(diǎn)法準(zhǔn)確。4、兩點(diǎn)固定時(shí)間法:指在時(shí)間-吸光度曲線上取尚在反應(yīng)中的兩點(diǎn)間的差值來(lái)計(jì)算結(jié)果,此兩點(diǎn)既不是起始點(diǎn)也不是反應(yīng)終點(diǎn)。此法應(yīng)選用酶反應(yīng)的線性期進(jìn)行測(cè)定,同時(shí)還應(yīng)確定該法能測(cè)定酶活性的最高限度,對(duì)于超過(guò)此限的樣品,應(yīng)采用縮短反應(yīng)時(shí)間或減少樣品用量的辦進(jìn)行測(cè)定。常見(jiàn)幾種報(bào)警:常見(jiàn)幾種報(bào)警:臨床生化檢驗(yàn)的校準(zhǔn)與質(zhì)控臨床生化檢驗(yàn)的校準(zhǔn)與質(zhì)控常用的有Linear單點(diǎn)校準(zhǔn):需要設(shè)置一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品(濃度必須大于0),以原點(diǎn)和標(biāo)準(zhǔn)品的連線為校準(zhǔn)曲線(橫坐標(biāo)為濃度C,縱坐標(biāo)為吸光度A)。單
12、點(diǎn)校準(zhǔn)必須設(shè)置空白校準(zhǔn)0點(diǎn)。Logistic-Log 4P: 標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量至少為4個(gè),其中第1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為0,標(biāo)準(zhǔn)品的濃度必須從低到高的順序排列。適用于隨著濃度的增加需吸光度偏移的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的標(biāo)準(zhǔn)曲線。Spline:此校準(zhǔn)方式要求提供26個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品,其中第1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度必須為0,標(biāo)準(zhǔn)品的濃度必須從低到高的順序排列。計(jì)算方法:K因數(shù)法(1點(diǎn)線性法)-由空白液的標(biāo)準(zhǔn)(C1)通過(guò)公式計(jì)算得出的K因數(shù)制成的曲線。K因數(shù)法測(cè)定C1(空白試劑)的吸光度時(shí),先輸入K值,再計(jì)算濃度值。 公式:CX=K(AX-B)+C1兩點(diǎn)線性法-由空白液和含有一定濃度標(biāo)準(zhǔn)液的標(biāo)準(zhǔn)2 的兩點(diǎn)吸光度繪制的曲線(Y=aX+b,通
13、過(guò)水來(lái)計(jì)算得到b,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)品來(lái)得到a.)。此法適用于所有的分析方法:1點(diǎn)法、2點(diǎn)速率法和速率法。常用項(xiàng)目:TP、ALB、TC、TG等多點(diǎn)線性(非線性)-要提供至少4個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品,第一個(gè)為活性為0,然后用二次函數(shù)或指數(shù)來(lái)描繪校準(zhǔn)的曲線與公式。X=K/1+A(Cx+C1)+S1ABSX:樣本吸光度或吸光度的變化量;Cx:樣本濃度;C1:標(biāo)準(zhǔn)液1濃度;常用項(xiàng)目:APOB、APOA、PA等。二:質(zhì)控質(zhì)控質(zhì)控的基礎(chǔ)就是質(zhì)控的基礎(chǔ)就是 正態(tài)分布圖正態(tài)分布圖。幾個(gè)概念:幾個(gè)概念:準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度:一個(gè)檢測(cè)結(jié)果與可接受的參考值之間的一致程度。(ISO3534-1:1993)正確度正確度:很大一個(gè)系列檢測(cè)結(jié)果的均值與可
14、接受的參考值之間的一致程度。(ISO3534-1:1993)。與系統(tǒng)誤差有關(guān),常用偏倚(bias)表示不正確度。精密度精密度:在規(guī)定條件下獨(dú)立檢測(cè)結(jié)果之間的一致程度(ISO3534-1:1993)。與隨機(jī)誤差有關(guān),常用SD或CV表示不精密度。靶值與SD的設(shè)定:1 平均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差 質(zhì)控品的均值和標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)建立在實(shí)驗(yàn)室常規(guī)使用方法對(duì)質(zhì)控品重復(fù)測(cè)定的基礎(chǔ)上。2 定值質(zhì)控品 若使用定值質(zhì)控品,使用說(shuō)明書(shū)上的原有標(biāo)定值只能作參考。必須由實(shí)驗(yàn)室作重測(cè)定來(lái)確定實(shí)際的均值和標(biāo)準(zhǔn)差。 3 新批號(hào)質(zhì)控品均值的建立 新批號(hào)質(zhì)控品的每個(gè)項(xiàng)目都應(yīng)和現(xiàn)用的質(zhì)控品作平行檢測(cè),最好是在不同天內(nèi)至少作 20 瓶的檢測(cè)。若無(wú)法從
15、20 天內(nèi)得到 20 個(gè)數(shù)值,至少在 5 天內(nèi),每天作不少于 4 次重復(fù)檢測(cè)來(lái)獲得。4 新批號(hào)質(zhì)控品標(biāo)準(zhǔn)差的建立 若在相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)操作穩(wěn)定,有大量質(zhì)控?cái)?shù)據(jù),則由此確定的標(biāo)準(zhǔn)差評(píng)估值應(yīng)可用于新批號(hào)。但對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差評(píng)估值應(yīng)定期重新評(píng)估。若無(wú)較好的資料,則應(yīng)重新作評(píng)估。最好是在 20 天得到至少 20 個(gè)數(shù)據(jù)。在以后能有較長(zhǎng)的穩(wěn)定操作的數(shù)據(jù)時(shí),計(jì)算的評(píng)估值更好,用其替代前者。5 累積值 由每個(gè)月質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差的估計(jì)(對(duì)均值亦有一定影響)常因檢測(cè)數(shù)的固有困難,造成月與月之間的變異較大(例如:由20 個(gè)檢測(cè)數(shù)估計(jì)標(biāo)準(zhǔn)差,它和標(biāo)準(zhǔn)差真值間的差異可達(dá)30%;由 100個(gè)檢測(cè)數(shù)估計(jì)標(biāo)準(zhǔn),估計(jì)值和真值的差異還要
16、大于10%)。較好的估計(jì)是將較短時(shí)間周期內(nèi)的質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)累積起來(lái),例如,累積 6 個(gè)月連續(xù)每月質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)成為 6 個(gè)月累積值。要注意的是作為每個(gè)月周期的均值沒(méi)有持續(xù)下降或上升的改變。 3質(zhì)控統(tǒng)計(jì)方法:a L-J質(zhì)控圖質(zhì)控圖(最常用最常用) -L-J質(zhì)控曲線,全稱Levey-Jennings。1924年,美國(guó)休哈特(W.A.Shewhart)首先提出質(zhì)控圖。20世紀(jì)50年代,Levey和Jennings把質(zhì)控圖引入到臨床檢驗(yàn)中。(質(zhì)控方法是建立在單個(gè)質(zhì)控品雙份測(cè)定值的均值和極差的基礎(chǔ)上) Henry和Segalove對(duì)L-J質(zhì)控圖(X-R)進(jìn)行了修改,以20份質(zhì)控品的試驗(yàn)結(jié)果,計(jì)算均值和標(biāo)準(zhǔn)差,定出質(zhì)
17、控限,每天或每批隨患者標(biāo)本測(cè)定質(zhì)控品一次,將所得的質(zhì)控結(jié)果標(biāo)在質(zhì)控圖上。這各質(zhì)控圖一般稱為單值質(zhì)控圖,也就目前大家所熟悉的L-J質(zhì)控圖。b Z-分?jǐn)?shù)圖分?jǐn)?shù)圖-z分?jǐn)?shù)(z-score),也叫標(biāo)準(zhǔn)分?jǐn)?shù)(standard score)是一個(gè)分?jǐn)?shù)與平均數(shù)的差再除以標(biāo)準(zhǔn)差的過(guò)程. z分?jǐn)?shù)是一種可以看出某分?jǐn)?shù)在分布中相對(duì)位置的方法。Z分?jǐn)?shù)是以標(biāo)準(zhǔn)差為單位所表示的原始分?jǐn)?shù)(x)與平均數(shù)的偏離,也可以說(shuō)是一個(gè)以標(biāo)準(zhǔn)差為單位來(lái)表示的偏離分?jǐn)?shù)。Z-分?jǐn)?shù)圖就是將不同濃度水平的繪在同一圖上。分?jǐn)?shù)圖就是將不同濃度水平的繪在同一圖上。 c Youden圖圖-制作雙值質(zhì)控圖,是以低值畫(huà)在水平軸,高值畫(huà)在垂直軸,形成正方形圖
18、,正方形的中心點(diǎn),即為兩個(gè)平均值的交叉點(diǎn)。既能區(qū)分系統(tǒng)誤差及隨機(jī)誤差,也適用于室間質(zhì)量評(píng)價(jià)??煞秩N形式:穩(wěn)定型質(zhì)控圖穩(wěn)定型質(zhì)控圖:兩種質(zhì)控品的測(cè)定值主要變動(dòng)于BC之對(duì)角線上,集中于、區(qū),呈橢圓形分布。 隨機(jī)誤差質(zhì)控圖隨機(jī)誤差質(zhì)控圖:兩種質(zhì)控品的測(cè)定值主要變動(dòng)于AD之對(duì)角線上,集中于、區(qū)以及其外側(cè)。 系統(tǒng)誤差質(zhì)控圖系統(tǒng)誤差質(zhì)控圖:兩種質(zhì)控品的測(cè)定值主要變動(dòng)于BC之對(duì)角線上,集中于、區(qū):以及其外側(cè)。 質(zhì)控規(guī)則的選擇 警告(隨機(jī)誤差) 失控(隨機(jī)誤差/新的系統(tǒng)誤差) Westgard多規(guī)則檢索程序: 3:生化室內(nèi)質(zhì)控失控后的處理Westgard多規(guī)則注意問(wèn)題多規(guī)則注意問(wèn)題:12S警告規(guī)則,不是失控
19、規(guī)則。若本批數(shù)據(jù)無(wú)超出2S限制線(即使數(shù)據(jù)剛好落在2S限制線上),表示本批結(jié)果沒(méi)問(wèn)題。沒(méi)有出現(xiàn)12S的表現(xiàn),但數(shù)據(jù)出現(xiàn)傾向性表現(xiàn),如多個(gè)數(shù)據(jù)偏于一側(cè),甚至偏于+1S或-1S以外,這種情況都不屬于失控,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量目標(biāo)要求做相應(yīng)處理。失控后不恰當(dāng)?shù)淖龇ㄊЭ睾蟛磺‘?dāng)?shù)淖龇ǎ海?)重做控制品(應(yīng)用12S規(guī)則時(shí),1個(gè)控制品時(shí)的假失控報(bào)告可能性為5%,2個(gè)控制品為9%,3個(gè)控制品是時(shí)為14%,當(dāng)出現(xiàn)12S表現(xiàn)后重做控制品,得到的控制值常在“限值內(nèi)”,感覺(jué)“這次又正好過(guò)關(guān)了”)-延誤了解決誤差的時(shí)機(jī),將問(wèn)題留給了以后。(2)試用新的控制品-將問(wèn)題簡(jiǎn)單地推給控制品。(3)重新校準(zhǔn)-掩蓋問(wèn)題真相。 失控后比較恰當(dāng)?shù)奶幚聿襟E:a檢查控制圖或失控的規(guī)則,確定誤差類型13S和R4S規(guī)則通常提示隨機(jī)誤差。22S 、41S 和10X規(guī)則
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