離體小腸平滑肌生理特性

1、離體小腸平滑肌的離體小腸平滑肌的生理特性生理特性 目的目的 通過(guò)觀察化學(xué)物質(zhì)、溫度變化對(duì)離體小腸平滑肌收縮的影通過(guò)觀察化學(xué)物質(zhì)、溫度變化對(duì)離體小腸平滑肌收縮的影響，使學(xué)生掌握離體小腸平滑肌收縮的記錄方法，加深對(duì)平滑響，使學(xué)生掌握離體小腸平滑肌收縮的記錄方法，加深對(duì)平滑肌某些基本特性的理解。肌某些基本特性的理解。 原理原理 平滑肌除具有肌肉的一般生理特性外，還具有自動(dòng)節(jié)律性平滑肌除具有肌肉的一般生理特性外，還具有自動(dòng)節(jié)律性收縮的特性，并且受腸壁內(nèi)神經(jīng)叢與外來(lái)植物性神經(jīng)的支配。收縮的特性，并且受腸壁內(nèi)神經(jīng)叢與外來(lái)植物性神經(jīng)的支配。離體腸段雖然失去外來(lái)神經(jīng)的支配，但腸壁神經(jīng)叢仍存在，在離體腸段雖然失

2、去外來(lái)神經(jīng)的支配，但腸壁神經(jīng)叢仍存在，在適宜的條件下，仍能保持平滑肌收縮的特性及腸壁神經(jīng)叢的作適宜的條件下，仍能保持平滑肌收縮的特性及腸壁神經(jīng)叢的作用。離體小腸實(shí)驗(yàn)不僅在理論上可以證明平滑肌的生理特性，用。離體小腸實(shí)驗(yàn)不僅在理論上可以證明平滑肌的生理特性，而且還可用來(lái)研究各種因素對(duì)平滑肌的影響。而且還可用來(lái)研究各種因素對(duì)平滑肌的影響。 方法與步驟方法與步驟 一、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備一、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備 1.1.恒溫平滑肌浴槽裝置恒溫平滑肌浴槽裝置 向中央標(biāo)本槽內(nèi)加向中央標(biāo)本槽內(nèi)加入臺(tái)氏液至浴槽高入臺(tái)氏液至浴槽高度的度的2/3處。外部容處。外部容器為水浴鍋加自來(lái)器為水浴鍋加自來(lái)水。啟開(kāi)電源，恒水。啟開(kāi)電源，恒溫工作

3、點(diǎn)定在溫工作點(diǎn)定在38。 2.2.標(biāo)本制備標(biāo)本制備 向兔耳緣靜脈注射空氣向兔耳緣靜脈注射空氣( (或用木棒猛擊兔的后腦或用木棒猛擊兔的后腦部部) )使其致死，背位固定于手術(shù)臺(tái)上，腹部剪毛后，使其致死，背位固定于手術(shù)臺(tái)上，腹部剪毛后，沿正中線切開(kāi)皮膚和腹壁，找到胃，以胃幽門(mén)與十二沿正中線切開(kāi)皮膚和腹壁，找到胃，以胃幽門(mén)與十二指腸交界處為起點(diǎn)指腸交界處為起點(diǎn), ,快速沿腸緣剪去腸系膜，然后再快速沿腸緣剪去腸系膜，然后再剪取剪取202030 cm30 cm長(zhǎng)的十二指腸，置于長(zhǎng)的十二指腸，置于44左右的臺(tái)氏液左右的臺(tái)氏液中輕輕漂洗，可用注射器向腸腔內(nèi)注入臺(tái)氏液沖洗腸中輕輕漂洗，可用注射器向腸腔內(nèi)注入臺(tái)

4、氏液沖洗腸腔內(nèi)壁，并置于腔內(nèi)壁，并置于4 466臺(tái)氏液中備用。臺(tái)氏液中備用。3.3.儀器連接儀器連接 實(shí)驗(yàn)時(shí)將腸管剪成實(shí)驗(yàn)時(shí)將腸管剪成2 23 cm3 cm的腸段，用棉線結(jié)扎的腸段，用棉線結(jié)扎腸段兩端，將一端結(jié)扎線連于浴槽內(nèi)的標(biāo)本固定鉤上，腸段兩端，將一端結(jié)扎線連于浴槽內(nèi)的標(biāo)本固定鉤上，另一端連于張力換能器，適當(dāng)調(diào)節(jié)換能器的高度，使另一端連于張力換能器，適當(dāng)調(diào)節(jié)換能器的高度，使其與標(biāo)本之間松緊度合適。此相連的線必需垂直，并其與標(biāo)本之間松緊度合適。此相連的線必需垂直，并且不能與浴槽壁接觸，避免摩擦。用塑料管將充滿氣且不能與浴槽壁接觸，避免摩擦。用塑料管將充滿氣體的球膽或增氧泵與浴槽底部的通氣管相

5、連，調(diào)節(jié)塑體的球膽或增氧泵與浴槽底部的通氣管相連，調(diào)節(jié)塑料管上的螺旋夾，讓通氣管的氣泡一個(gè)一個(gè)的溢出，料管上的螺旋夾，讓通氣管的氣泡一個(gè)一個(gè)的溢出，為臺(tái)氏液供氧。將張力換能器輸入端與系統(tǒng)的通道相為臺(tái)氏液供氧。將張力換能器輸入端與系統(tǒng)的通道相連，進(jìn)入生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，選擇對(duì)應(yīng)通道項(xiàng)目為張連，進(jìn)入生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，選擇對(duì)應(yīng)通道項(xiàng)目為張力。力。 二、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目二、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 1.觀察、記錄觀察、記錄38 臺(tái)氏液中的腸段節(jié)律性收縮曲線。臺(tái)氏液中的腸段節(jié)律性收縮曲線。2.觀察、記錄觀察、記錄25臺(tái)氏液中的腸段節(jié)律性收縮曲線。臺(tái)氏液中的腸段節(jié)律性收縮曲線。 3.待中央標(biāo)本槽內(nèi)的臺(tái)氏液的溫度穩(wěn)定在待中央標(biāo)本槽內(nèi)

6、的臺(tái)氏液的溫度穩(wěn)定在38后，加后，加1:10 000腎上腺素腎上腺素12滴于中央標(biāo)本槽中，觀察腸段收縮曲線的滴于中央標(biāo)本槽中，觀察腸段收縮曲線的改變。在觀察到明顯的作用后，用預(yù)先準(zhǔn)備好的新鮮改變。在觀察到明顯的作用后，用預(yù)先準(zhǔn)備好的新鮮38臺(tái)臺(tái)氏液沖洗三次。氏液沖洗三次。4.待腸段活動(dòng)恢復(fù)正常后，再加待腸段活動(dòng)恢復(fù)正常后，再加1:10 000乙酰膽堿乙酰膽堿12滴于中滴于中央標(biāo)本槽中，觀察腸段收縮曲線的改變，作用出現(xiàn)后同上法沖央標(biāo)本槽中，觀察腸段收縮曲線的改變，作用出現(xiàn)后同上法沖洗腸段。洗腸段。 5.向中央標(biāo)本槽內(nèi)加入向中央標(biāo)本槽內(nèi)加入1 molL-1NaOH溶液溶液12滴，觀察腸段滴，觀察腸

7、段收縮曲線的改變。作用出現(xiàn)后同上法沖洗腸段。收縮曲線的改變。作用出現(xiàn)后同上法沖洗腸段。 6.向中央標(biāo)本槽內(nèi)加入向中央標(biāo)本槽內(nèi)加入1 molL-1HCl溶液溶液12滴，觀察腸段收滴，觀察腸段收縮曲線的改變。待作用出現(xiàn)后同上法沖洗腸段。縮曲線的改變。待作用出現(xiàn)后同上法沖洗腸段。 7.向中央標(biāo)本槽內(nèi)加入向中央標(biāo)本槽內(nèi)加入1%CaCl2溶液溶液23滴，觀察腸段收縮曲滴，觀察腸段收縮曲線的改變。線的改變。 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng) 1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物先禁食實(shí)驗(yàn)動(dòng)物先禁食24 h，于實(shí)驗(yàn)前，于實(shí)驗(yàn)前1 h喂食，然后處死喂食，然后處死,取出標(biāo)本，取出標(biāo)本，腸運(yùn)動(dòng)效果更好。腸運(yùn)動(dòng)效果更好。 2.標(biāo)本安裝好后，應(yīng)在新鮮標(biāo)本安

8、裝好后，應(yīng)在新鮮38臺(tái)氏液中穩(wěn)定臺(tái)氏液中穩(wěn)定510min，有收，有收縮活動(dòng)時(shí)即可開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。縮活動(dòng)時(shí)即可開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。3.注意控制溫度。加藥前，要先準(zhǔn)備好更換用的新鮮注意控制溫度。加藥前，要先準(zhǔn)備好更換用的新鮮38臺(tái)氏臺(tái)氏液，每個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目結(jié)束后，應(yīng)立即用液，每個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目結(jié)束后，應(yīng)立即用38臺(tái)氏液沖洗，待腸段臺(tái)氏液沖洗，待腸段活動(dòng)恢復(fù)正常后，再進(jìn)行下一個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目?；顒?dòng)恢復(fù)正常后，再進(jìn)行下一個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。 4.實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目中所列舉的藥物劑量為參考劑量，若效果不明顯，實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目中所列舉的藥物劑量為參考劑量，若效果不明顯，可以增補(bǔ)劑量，但要防止一次性加藥過(guò)量。可以增補(bǔ)劑量，但要防止一次性加藥過(guò)量。 結(jié)果與分析結(jié)果與

9、分析一、低溫對(duì)離體腸肌活動(dòng)的影響一、低溫對(duì)離體腸肌活動(dòng)的影響 離體腸肌收縮減弱。溫度降低，腸離體腸肌收縮減弱。溫度降低，腸肌細(xì)胞興奮型降低，代謝相關(guān)酶活性降肌細(xì)胞興奮型降低，代謝相關(guān)酶活性降低，腸肌代謝水平降低，腸肌收縮減弱。低，腸肌代謝水平降低，腸肌收縮減弱。二、滴加腎上腺素二、滴加腎上腺素 離體腸肌收縮減弱。腎上腺素可與腸肌細(xì)胞離體腸肌收縮減弱。腎上腺素可與腸肌細(xì)胞膜上腎上腺素能受體（膜上腎上腺素能受體（、型）結(jié)合，一方面型）結(jié)合，一方面可使可使CaCa2+2+、K K+ +外流增加，細(xì)胞膜電位發(fā)生超極化，外流增加，細(xì)胞膜電位發(fā)生超極化，興奮性降低；另一方面可促進(jìn)肌膜和肌漿網(wǎng)膜上興奮性降低

10、；另一方面可促進(jìn)肌膜和肌漿網(wǎng)膜上鈣泵活動(dòng)加強(qiáng)，使肌漿內(nèi)鈣泵活動(dòng)加強(qiáng)，使肌漿內(nèi)CaCa2+2+濃度降低，肌張力濃度降低，肌張力減弱。減弱。三、滴加乙酰膽堿三、滴加乙酰膽堿 離體腸肌收縮加強(qiáng)。乙酰膽堿可與腸肌細(xì)離體腸肌收縮加強(qiáng)。乙酰膽堿可與腸肌細(xì)胞膜上胞膜上M M型受體結(jié)合，使肌膜上型受體結(jié)合，使肌膜上CaCa2+2+通道開(kāi)放，通道開(kāi)放， CaCa2+2+內(nèi)流，肌漿內(nèi)內(nèi)流，肌漿內(nèi)CaCa2+2+濃度升高，腸肌收縮加強(qiáng)。濃度升高，腸肌收縮加強(qiáng)。四、滴加四、滴加NaOH 離體腸肌收縮加強(qiáng)。離體腸肌收縮加強(qiáng)。H H+ +濃度降低，促進(jìn)濃度降低，促進(jìn)CaCa2+2+通道開(kāi)放，通道開(kāi)放，CaCa2+2+內(nèi)流

11、增加；促進(jìn)肌漿網(wǎng)釋內(nèi)流增加；促進(jìn)肌漿網(wǎng)釋放放CaCa2+2+；促進(jìn)；促進(jìn)CaCa2+2+與肌鈣蛋白結(jié)合，最終導(dǎo)致與肌鈣蛋白結(jié)合，最終導(dǎo)致腸肌收縮加強(qiáng)。腸肌收縮加強(qiáng)。五、滴加五、滴加HCl 離體腸肌收縮減弱。離體腸肌收縮減弱。H H+ +濃度升高，抑制濃度升高，抑制CaCa2+2+通道開(kāi)放，通道開(kāi)放， CaCa2+2+內(nèi)流減少；抑制肌漿網(wǎng)內(nèi)流減少；抑制肌漿網(wǎng)釋放釋放CaCa2+2+；抑制；抑制CaCa2+2+與肌鈣蛋白結(jié)合，最終導(dǎo)與肌鈣蛋白結(jié)合，最終導(dǎo)致腸肌收縮減弱。致腸肌收縮減弱。六、滴加六、滴加CaCl2 離體腸肌收縮加強(qiáng)。滴加離體腸肌收縮加強(qiáng)。滴加CaClCaCl2 2后，腸后，腸肌細(xì)胞膜

12、內(nèi)外肌細(xì)胞膜內(nèi)外CaCa2+2+濃度差加大，濃度差加大， CaCa2+2+順濃度順濃度差內(nèi)流，使腸肌細(xì)胞胞漿內(nèi)差內(nèi)流，使腸肌細(xì)胞胞漿內(nèi)CaCa2+2+濃度升高，濃度升高，腸肌活動(dòng)加強(qiáng)。腸肌活動(dòng)加強(qiáng)。 目的目的 通過(guò)觀察化學(xué)物質(zhì)、溫度變化對(duì)離體小腸平滑肌收縮的影通過(guò)觀察化學(xué)物質(zhì)、溫度變化對(duì)離體小腸平滑肌收縮的影響，使學(xué)生掌握離體小腸平滑肌收縮的記錄方法，加深對(duì)平滑響，使學(xué)生掌握離體小腸平滑肌收縮的記錄方法，加深對(duì)平滑肌某些基本特性的理解。肌某些基本特性的理解。 原理原理 平滑肌除具有肌肉的一般生理特性外，還具有自動(dòng)節(jié)律性平滑肌除具有肌肉的一般生理特性外，還具有自動(dòng)節(jié)律性收縮的特性，并且受腸壁內(nèi)神

13、經(jīng)叢與外來(lái)植物性神經(jīng)的支配。收縮的特性，并且受腸壁內(nèi)神經(jīng)叢與外來(lái)植物性神經(jīng)的支配。離體腸段雖然失去外來(lái)神經(jīng)的支配，但腸壁神經(jīng)叢仍存在，在離體腸段雖然失去外來(lái)神經(jīng)的支配，但腸壁神經(jīng)叢仍存在，在適宜的條件下，仍能保持平滑肌收縮的特性及腸壁神經(jīng)叢的作適宜的條件下，仍能保持平滑肌收縮的特性及腸壁神經(jīng)叢的作用。離體小腸實(shí)驗(yàn)不僅在理論上可以證明平滑肌的生理特性，用。離體小腸實(shí)驗(yàn)不僅在理論上可以證明平滑肌的生理特性，而且還可用來(lái)研究各種因素對(duì)平滑肌的影響。而且還可用來(lái)研究各種因素對(duì)平滑肌的影響。 二、滴加腎上腺素二、滴加腎上腺素 離體腸肌收縮減弱。腎上腺素可與腸肌細(xì)胞離體腸肌收縮減弱。腎上腺素可與腸肌細(xì)胞膜上腎上腺素能受體（膜上腎上腺素能受體（、型）結(jié)合，一方面型）結(jié)合，一方面可使可使CaCa2+2+、K K+ +外流增加，細(xì)胞膜電位發(fā)生超極化，外流增加，細(xì)胞膜電位發(fā)生超極化，興奮性降低；另一方面可促進(jìn)肌膜和肌漿網(wǎng)膜上興奮性降低；另一方面可促進(jìn)肌膜