臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)CLSIEP文件ppt課件

1、決議性方法決議性方法definitive method：經(jīng)詳盡：經(jīng)詳盡研討尚未發(fā)現(xiàn)不準(zhǔn)確度或不確定性緣由研討尚未發(fā)現(xiàn)不準(zhǔn)確度或不確定性緣由的方法。的方法。參考方法參考方法reference method：經(jīng)詳盡研：經(jīng)詳盡研討證明其不準(zhǔn)確度與不精細(xì)度可以忽略討證明其不準(zhǔn)確度與不精細(xì)度可以忽略的方法。的方法。常規(guī)方法常規(guī)方法routing method：可滿足臨：可滿足臨床或其他目的需求的日常運(yùn)用的方法。床或其他目的需求的日常運(yùn)用的方法。分分析析物物 決決定定性性方方法法參參考考方方法法CaID-MS原原子子吸吸收收分分光光光光度度法法Cl電電量量滴滴定定中中子子活活化化法法電電流流滴滴定定法法F

2、eID-MS沉沉淀淀蛋蛋白白后后亞亞鐵鐵嗪嗪反反應(yīng)應(yīng)MgID-MS原原子子吸吸收收分分光光光光度度法法PID-MSKID-MS中中子子活活化化法法火火焰焰光光度度法法Na重重量量分分析析法法中中子子活活化化法法火火焰焰光光度度法法分析物分析物決定性方法決定性方法參考方法參考方法AlbAlb免疫化學(xué)法免疫化學(xué)法TPTP雙縮脲法雙縮脲法CreaCreaID-MSID-MS中子活化法中子活化法離子交換層析離子交換層析UreaUreaID-MSID-MS尿素酶法尿素酶法UAUAID-MSID-MS尿酸酶法尿酸酶法BilBil重氮法重氮法GluGluID-MSID-MS己糖激酶法己糖激酶法CholCho

3、lID-MSID-MS膽固醇氧化酶法膽固醇氧化酶法TGTGID-MSID-MS酶法酶法儀器參數(shù)儀器參數(shù)試劑試劑評(píng)價(jià)內(nèi)容：評(píng)價(jià)內(nèi)容： 初步評(píng)價(jià)初步評(píng)價(jià)NCCLS EP10 精細(xì)度精細(xì)度 NCCLS EP5 對(duì)比及偏向?qū)Ρ燃捌?NCCLS EP9 線性線性 NCCLS EP6 抗干擾才干抗干擾才干 NCCLS EP7 基質(zhì)效應(yīng)基質(zhì)效應(yīng) NCCLS EP14 臨床準(zhǔn)確度敏感性和特異性臨床準(zhǔn)確度敏感性和特異性 NCCLS GP10，ROC曲線曲線NCCLS文件文件EP9-A用患者樣本進(jìn)展方法對(duì)比用患者樣本進(jìn)展方法對(duì)比及偏向評(píng)價(jià)及偏向評(píng)價(jià)同意指南同意指南2019年年12月月評(píng)價(jià)兩種分析方法同一分析工程

4、評(píng)價(jià)兩種分析方法同一分析工程的偏向。的偏向。評(píng)價(jià)要求：評(píng)價(jià)要求：熟習(xí)儀器操作熟習(xí)儀器操作熟習(xí)評(píng)價(jià)方案熟習(xí)評(píng)價(jià)方案質(zhì)控質(zhì)控足夠的數(shù)據(jù)最少足夠的數(shù)據(jù)最少5個(gè)任務(wù)日，個(gè)任務(wù)日，40個(gè)樣本個(gè)樣本用途：用途：目的：目的： 引進(jìn)新方法前或用一種方法替代另一種方引進(jìn)新方法前或用一種方法替代另一種方 法時(shí)進(jìn)展偏向分析。法時(shí)進(jìn)展偏向分析。測(cè)定范圍：醫(yī)學(xué)決議程度范圍內(nèi)均勻分布測(cè)定范圍：醫(yī)學(xué)決議程度范圍內(nèi)均勻分布 樣本數(shù)：至少樣本數(shù)：至少40例，添加可提高可信性。例，添加可提高可信性。測(cè)定方法：兩種方法分別做雙份測(cè)定。測(cè)定方法：兩種方法分別做雙份測(cè)定。測(cè)定順序：測(cè)定順序： 每天每天 ：1、2、3、4、5、6、7、8

5、 8、7、6、5、4、3、2、1測(cè)定次數(shù)：測(cè)定次數(shù)： 每天分別用兩種方法進(jìn)展測(cè)定，每天分別用兩種方法進(jìn)展測(cè)定， 至少測(cè)定至少測(cè)定5天，共天，共40個(gè)樣本個(gè)樣本數(shù)據(jù)監(jiān)視：系統(tǒng)誤差、人為誤差數(shù)據(jù)監(jiān)視：系統(tǒng)誤差、人為誤差質(zhì)控：常規(guī)質(zhì)控質(zhì)控：常規(guī)質(zhì)控表表 1 1 病病 人人 樣樣 本本 檢檢 驗(yàn)驗(yàn) 結(jié)結(jié) 果果B BE EC CK KM MA AN N（Y Y） （g g/ /l l）H HI IT TA AC CH HI I( (X X) )( (g g/ /l l) )樣樣 品品號(hào)號(hào)結(jié)結(jié) 果果1 1( (Y Y1 1) )結(jié)結(jié) 果果2 2( (Y Y2 2) )均均 值值Y Yi i) )D DY

6、Yi i結(jié)結(jié) 果果1 1( (X X1 1) )結(jié)結(jié) 果果2 2( (X X2 2) )均均 值值( (X Xi i) )D DX Xi iY Yi i- -X Xi i1 12 25 52 25 52 25 50 02 28 8. .3 32 28 8. .1 12 28 8. .2 20 0. .2 2- -3 3. .2 22 24 46 64 47 74 46 6. .5 51 14 47 7. .5 54 47 7. .4 44 47 7. .5 50 0. .1 1- -1 13 33 36 63 36 63 36 60 03 38 8. .4 43 38 8. .1 13 38

7、8. .3 30 0. .2 2- -2 2. .3 34 43 39 94 40 03 39 9. .5 51 14 41 1. .3 34 40 0. .8 84 41 1. .1 10 0. .5 5- -0 0. .6 65 51 14 41 14 41 14 40 01 18 8. .7 71 18 8. .9 91 18 8. .8 80 0. .2 2- -4 4. .8 86 63 32 23 32 23 32 20 03 36 6. .1 13 36 6. .2 23 36 6. .2 20 0. .1 1- -4 4. .2 27 72 27 72 28 82 27 7.

8、.5 51 13 31 1. .2 23 31 1. .2 23 31 1. .2 20 0- -3 3. .7 78 84 42 24 43 34 42 2. .5 51 14 43 3. .8 84 43 3. .9 94 43 3. .9 90 0. .1 1- -1 1. .4 433343434035.636.335.90.3-1.934303030032.132.632.30.5-2.335404040041.14141.10.1-1.136424242043.243.443.30.2-1.337383838038.638.938.70.3-0.73843434304544.944

9、.90.1-1.939353535036.93736.90.1-1.940444544.5144.845.3450.5-0.5平平 均均 數(shù)數(shù)0 0. .3 37 70 0. .4 41 1- -2 2. .7 7y = 1.1722x - 9.0485R = 0.969510203040501020304050HITACHI 7170(BCG)BECKMAN CX9(BCP)Yi-Xi對(duì)X i偏 倚圖-15-10-505101520304050HITACHI 7170（B CG）Yi-Xi偏向圖：每次測(cè)定的偏向圖：每次測(cè)定的Y均值與均值與X均值均值 之差之差-相應(yīng)相應(yīng)X均值圖均值圖X 最適范

10、圍檢查相關(guān)最適范圍檢查相關(guān) （ALB）r =N Ni i2 2ijij2 2j jN Ni i2 2ijij2 2j jN Ni i2 2j jijijijij) )y y(y(y) )x x(x(x) )y y)(y)(yx x(x(xr =0.9695回歸系數(shù)評(píng)價(jià)計(jì)算回歸系數(shù)評(píng)價(jià)計(jì)算截距截距 a = - 9.05斜率斜率 b = 1.17Y = 1.17 X 9.05B BC CP P 與與B BC CG G 法法測(cè)測(cè)定定血血清清A AL LB B 時(shí)時(shí)結(jié)結(jié)果果的的預(yù)預(yù)期期偏偏倚倚估估計(jì)計(jì)B BP PG G 法法( (g g/ /l l) )B BC CP P 法法( (g g/ /l l

11、) )預(yù)預(yù)期期偏偏倚倚（g g/ /l l）相相對(duì)對(duì)偏偏倚倚（% %）3 30 02 26 6. .5 5- -3 3. .5 51 11 1. .6 64 40 03 37 7. .8 8- -2 2. .2 25 5. .5 55 50 04 49 9. .1 1- -0 0. .9 91 1. .8 8Evaluation of The Linearity of Quantitative Analytical MethodsEP6-P 為實(shí)驗(yàn)室中采用定量分析方法的用戶提為實(shí)驗(yàn)室中采用定量分析方法的用戶提供評(píng)價(jià)儀器或方法能否滿足廠家線性目供評(píng)價(jià)儀器或方法能否滿足廠家線性目的的評(píng)價(jià)方法。的的

12、評(píng)價(jià)方法。 用戶可為分析方法設(shè)定線性范圍。用戶可為分析方法設(shè)定線性范圍。 Assay RangeLinear Range) The range of concentration or activity in which the final output value of a system is proportional to the analyte concentration or activity within a stated tolerance. Linearity:The measure of the degree to which a curve approximates a str

13、aight line.It refers to overall system response (i.e., the final analytical answer rather than the instrument output) 線性是分析方法的一個(gè)特征，不同于準(zhǔn)線性是分析方法的一個(gè)特征，不同于準(zhǔn)確性和精細(xì)度。確性和精細(xì)度。 線性實(shí)驗(yàn)應(yīng)該運(yùn)用與待分析物基質(zhì)類似線性實(shí)驗(yàn)應(yīng)該運(yùn)用與待分析物基質(zhì)類似的樣本。的樣本。 線性檢驗(yàn)系統(tǒng)反響，包括校準(zhǔn)、線性化線性檢驗(yàn)系統(tǒng)反響，包括校準(zhǔn)、線性化技術(shù)、系數(shù)和儀器反響。技術(shù)、系數(shù)和儀器反響。 用簡單的實(shí)驗(yàn)來檢驗(yàn)廠家標(biāo)示的線性范用簡單的實(shí)驗(yàn)來檢驗(yàn)廠家標(biāo)示的線性

14、范圍及定量分析方法的分析范圍。圍及定量分析方法的分析范圍。 在實(shí)驗(yàn)室中作為方法學(xué)的信息方法線在實(shí)驗(yàn)室中作為方法學(xué)的信息方法線性。性。 進(jìn)展線性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)。進(jìn)展線性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)。 執(zhí)行分析過程的實(shí)驗(yàn)室人員必需掌握儀執(zhí)行分析過程的實(shí)驗(yàn)室人員必需掌握儀器操作和維護(hù)程序、樣本預(yù)備方法和校器操作和維護(hù)程序、樣本預(yù)備方法和校準(zhǔn)。準(zhǔn)。 對(duì)較簡單的設(shè)備需求對(duì)較簡單的設(shè)備需求5天或更少時(shí)間。天或更少時(shí)間。 對(duì)較復(fù)雜的多通道設(shè)備需求對(duì)較復(fù)雜的多通道設(shè)備需求5天或更長時(shí)天或更長時(shí)間。間。 在完成儀器熟習(xí)過程后開場實(shí)驗(yàn)并搜集在完成儀器熟習(xí)過程后開場實(shí)驗(yàn)并搜集數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)。 全部實(shí)驗(yàn)和數(shù)據(jù)采集應(yīng)在同一任務(wù)日內(nèi)全部實(shí)驗(yàn)和數(shù)據(jù)采集

15、應(yīng)在同一任務(wù)日內(nèi)完成。完成。 樣本要求： 最少4個(gè)濃度程度，引薦5個(gè)程度。 基質(zhì)效應(yīng)： 應(yīng)運(yùn)用與病人樣本類似的樣本或注明基質(zhì)類型。 病人混合血清病人混合血清 理想的樣本基質(zhì)理想的樣本基質(zhì) 高值樣本：高于上限高值樣本：高于上限30% 低值樣本：線性低限或更低。低值樣本：線性低限或更低。 Patient-Sample Pool Spiked with Analyte 參與品在沒有干擾物存在時(shí)不需高純度。參與品在沒有干擾物存在時(shí)不需高純度。 Pool Diluted with Treated Pool Material 用于降低分析物濃度，如：透析、熱處用于降低分析物濃度，如：透析、熱處置、層析。置

16、、層析。 Pool Diluted with Saline。 在線性實(shí)驗(yàn)中運(yùn)用此類樣本可掩蓋不同的基在線性實(shí)驗(yàn)中運(yùn)用此類樣本可掩蓋不同的基質(zhì)效應(yīng)。質(zhì)效應(yīng)。 Commercial Control/Calibrator Material 此類樣本由于不是正常的生理方式，可掩蓋此類樣本由于不是正常的生理方式，可掩蓋實(shí)踐的線性結(jié)果。實(shí)踐的線性結(jié)果。 Underdiluted/Overdiluted Commercial Control Material Aqueous Solutions 普通無基質(zhì)效應(yīng)普通無基質(zhì)效應(yīng) Solution in Other Solvents 基質(zhì)效應(yīng)與基質(zhì)效應(yīng)與有機(jī)溶劑類

17、似有機(jī)溶劑類似 ALB：白蛋白干粉、：白蛋白干粉、human fraction V. 乙醇：無水乙醇乙醇：無水乙醇 ALP：純酶：純酶 AMS：腮腺或胰腺提取物：腮腺或胰腺提取物 BIL： 膽紅素純品膽紅素純品 Ca: CaCO3 Cl: NaCl CHOL：膽固醇純品或稀釋質(zhì)控品：膽固醇純品或稀釋質(zhì)控品 CO2： CaCO3 CREA：規(guī)范液或高值血清：規(guī)范液或高值血清-ALT： 純酶純酶 GLU： 右旋糖右旋糖 AST： 純酶純酶 ALT： 純酶純酶 HBD： 純酶純酶 LDH： 純酶純酶 Lipase： 胰腺提取物胰腺提取物 Mg： MgCl2 P: K(H)2PO4或或Na(H)PO4

18、 TP： 白蛋白干粉、人或牛的成份白蛋白干粉、人或牛的成份V UA： 在得不到高值病人樣本時(shí)，運(yùn)用規(guī)范貯藏液或在得不到高值病人樣本時(shí)，運(yùn)用規(guī)范貯藏液或枯燥尿酸枯燥尿酸 。 BUN：在得不到高值病人樣本時(shí)，運(yùn)用規(guī)范貯藏液或：在得不到高值病人樣本時(shí)，運(yùn)用規(guī)范貯藏液或枯燥尿素枯燥尿素 。 分析序列應(yīng)為隨機(jī)陳列。分析序列應(yīng)為隨機(jī)陳列。 有顯著攜帶污染時(shí)，運(yùn)用空白隔開樣本。有顯著攜帶污染時(shí)，運(yùn)用空白隔開樣本。 每個(gè)實(shí)驗(yàn)組內(nèi)應(yīng)至少分析每個(gè)實(shí)驗(yàn)組內(nèi)應(yīng)至少分析4個(gè)最好是個(gè)最好是5個(gè)不同濃度程度的樣本。個(gè)不同濃度程度的樣本。 應(yīng)覆蓋待評(píng)線性范圍的上、下限。應(yīng)覆蓋待評(píng)線性范圍的上、下限。 評(píng)價(jià)結(jié)果不稱心時(shí)應(yīng)重新設(shè)

19、定濃度。評(píng)價(jià)結(jié)果不稱心時(shí)應(yīng)重新設(shè)定濃度。 線性范圍內(nèi)至少應(yīng)保管有線性范圍內(nèi)至少應(yīng)保管有4個(gè)濃度。個(gè)濃度。 足量的混合血清。足量的混合血清。 低濃度混合血清低濃度混合血清No1；高濃度混合血；高濃度混合血清清No5 血清血清No2：3份份“No1 + 1份份“No5 血清血清No3：2份份“No1 + 2份份“No5 血清血清No4：1份份“No1 + 3份份“No5 C1V1 + C5 V5濃度 = - V1 + V5x1 y1-1 y1-2 y1-3 y1-4x2 y2-1 y2-2 y2-3 y2-4x3 y3-1 y3-2 y3-3 y3-4 x4 y4-1 y4-2 y4-3 y4-4

20、x5 y5-1 y5-2 y5-3 y5-4 察看有無明顯的數(shù)據(jù)錯(cuò)誤。察看有無明顯的數(shù)據(jù)錯(cuò)誤。 假設(shè)有明顯異常時(shí)應(yīng)判別能否為離群點(diǎn)。假設(shè)有明顯異常時(shí)應(yīng)判別能否為離群點(diǎn)。 如離群點(diǎn)超出如離群點(diǎn)超出2點(diǎn)，那么保管全部數(shù)據(jù)或點(diǎn)，那么保管全部數(shù)據(jù)或重做全部實(shí)驗(yàn)。重做全部實(shí)驗(yàn)。 用于特定濃度用于特定濃度Y值離群點(diǎn)的檢驗(yàn)。值離群點(diǎn)的檢驗(yàn)。 將將4個(gè)反復(fù)值從大到小陳列個(gè)反復(fù)值從大到小陳列Y1到到Y(jié)4。 計(jì)算：計(jì)算：D = Y1 - Y4 假設(shè)假設(shè)Y1能夠是離群點(diǎn)，計(jì)算：能夠是離群點(diǎn)，計(jì)算： D1 = Y1 - Y2/ D 假設(shè)假設(shè)Y4能夠是離群點(diǎn)，計(jì)算：能夠是離群點(diǎn)，計(jì)算： D4 = Y3 - Y4/ D判

21、別值判別值Critical value)(0.05) 0.765(0.01) 0.889 線性線性X-Y圖，圖，X軸為分析物濃度。軸為分析物濃度。 反響值或儀器輸出值為反響值或儀器輸出值為Y軸。軸。 目測(cè)離群值。目測(cè)離群值。 ( Y= aX + b ) 目測(cè)線性判別能否符合要求。目測(cè)線性判別能否符合要求。 進(jìn)展統(tǒng)計(jì)學(xué)判別和評(píng)價(jià)。進(jìn)展統(tǒng)計(jì)學(xué)判別和評(píng)價(jià)。 統(tǒng)計(jì)學(xué)規(guī)范和臨床可接受限不同。統(tǒng)計(jì)學(xué)規(guī)范和臨床可接受限不同。 慎用方法學(xué)線性范圍從慎用方法學(xué)線性范圍從0開場。開場。 有臨床意義的濃度應(yīng)在線性評(píng)價(jià)中：有臨床意義的濃度應(yīng)在線性評(píng)價(jià)中： 最小的線性濃度最小的線性濃度 醫(yī)學(xué)決議程度醫(yī)學(xué)決議程度 最大的線性濃度最大的線性濃度 Dixon W.J. and Ma