項目凝血因子檢查ppt課件

1、工程工程14 凝血因子檢查凝血因子檢查模塊模塊1 內(nèi)源性凝血系統(tǒng)的檢驗內(nèi)源性凝血系統(tǒng)的檢驗根底實際v血液分開血管數(shù)分鐘后，血液就由流動的溶膠形狀變成不能流動的膠凍狀凝塊，這一過程稱為血液凝固bloodcoagulation或血凝。v在凝血過程中，血漿中的纖維蛋白源轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗艿难w維。v血纖維交錯成網(wǎng)，將很多血細(xì)胞網(wǎng)羅在內(nèi)，構(gòu)成血凝塊。血液凝固后1-2小時，血凝塊又發(fā)生回縮，并釋出淡黃色的液體，稱為血清。血液離體，血液離體，血細(xì)胞下沉。血細(xì)胞下沉。上層析出的上層析出的黃色清亮液黃色清亮液體是血清？體是血清？還是血漿？還是血漿？v血漿：分開血管的全血經(jīng)抗凝處置后，經(jīng)過血漿：分開血管的全血經(jīng)抗凝處置

2、后，經(jīng)過離心沉淀，所獲得的不含細(xì)胞成分的液體，離心沉淀，所獲得的不含細(xì)胞成分的液體，即血漿。即血漿。 v血清：離體的血液凝固之后，經(jīng)血凝塊聚縮血清：離體的血液凝固之后，經(jīng)血凝塊聚縮釋出的液體，即血清。釋出的液體，即血清。 v血清與血漿的區(qū)別：血清與血漿的區(qū)別：v 主要在于血清不含纖維蛋白原。主要在于血清不含纖維蛋白原。 v 纖維蛋白原能轉(zhuǎn)換成纖維蛋白，具有凝血纖維蛋白原能轉(zhuǎn)換成纖維蛋白，具有凝血作用。作用。 血液凝固血液凝固定義：血液由流動的液體形狀變定義：血液由流動的液體形狀變成不能流動的凝膠形狀的過程。成不能流動的凝膠形狀的過程。方式：激活凝血系統(tǒng)，使血漿中方式：激活凝血系統(tǒng)，使血漿中 纖

3、維蛋白原纖維蛋白原 纖維纖維蛋白，蛋白，構(gòu)成纖維蛋白網(wǎng)加固血小板血栓構(gòu)成纖維蛋白網(wǎng)加固血小板血栓有效止血。有效止血。 血管損傷血管損傷暴露血管內(nèi)皮下膠原暴露血管內(nèi)皮下膠原血小板激活血小板激活粘附、聚集、釋放粘附、聚集、釋放血小板止血栓血小板止血栓血凝塊構(gòu)成血凝塊構(gòu)成血管收縮血管收縮凝血系統(tǒng)凝血系統(tǒng)激活激活纖維蛋白纖維蛋白構(gòu)成構(gòu)成一一 凝血因子凝血因子(blood clotting factor)(blood clotting factor) 定義：血漿與組織中直接參與血液凝定義：血漿與組織中直接參與血液凝 固的物質(zhì)。固的物質(zhì)。 種類：種類：1313種其中種其中F VIF VI是是F VaF V

4、a，實為，實為 12 12種種) )。凝血因子的特點凝血因子的特點 除除Ca2+Ca2+和磷脂外，其他凝血因子均為蛋白質(zhì)和磷脂外，其他凝血因子均為蛋白質(zhì) 除除F IIIF III組織因子外，其他凝血因子均組織因子外，其他凝血因子均存在于新穎血漿中，存在于新穎血漿中，F(xiàn) F 、在肝臟在肝臟合成，需維生素合成，需維生素K K參與。參與。 凝血因子以無活性酶原方式存在血液中，經(jīng)凝血因子以無活性酶原方式存在血液中，經(jīng)其他酶水解后暴露或構(gòu)成活性中心，才有活性，其他酶水解后暴露或構(gòu)成活性中心，才有活性，這一過程稱凝血因子的激活。激活后，在該因這一過程稱凝血因子的激活。激活后，在該因子右下角標(biāo)上子右下角標(biāo)上

5、“a a 在凝血中起酶促作用的因子有在凝血中起酶促作用的因子有F 、 、XIII、前激肽、前激肽釋放酶。釋放酶。 在凝血中被耗費的因子是在凝血中被耗費的因子是、 、XIII；最不穩(wěn)定的是；最不穩(wěn)定的是、。 a.凝血酶原激活物生成階段；b.凝血酶原的激活；c.纖維蛋白的生成 Va、Ca2+模塊模塊1 內(nèi)源性凝血系統(tǒng)的檢驗內(nèi)源性凝血系統(tǒng)的檢驗l內(nèi)源性凝血途徑內(nèi)源性凝血途徑定義：參與凝血的因子全部來自血液。定義：參與凝血的因子全部來自血液。外表激活：血液與帶負(fù)電荷的異物外表外表激活：血液與帶負(fù)電荷的異物外表 接觸而啟動凝血的過程。接觸而啟動凝血的過程。凝血使動因子為凝血使動因子為 1、靜脈采血2、活

6、化部分凝血活酶時間測定APTTv【實驗原理】v在抗凝血中，參與足夠量的活化接觸因子激活劑如白陶土和部分凝血活酶替代血小板的磷脂，再參與適量的鈣離子即可滿足內(nèi)源凝血的全部條件。從參與鈣離子到血漿凝固所需的時間即稱為活化部分凝血活酶時間activatedpartialthromboplastintime,APTT。vAPTT的長短反映了血漿中內(nèi)源凝血系統(tǒng)凝血因子、共同途徑中凝血酶原、纖維蛋白原和因子、的程度。v本實驗是目前最常用的檢查內(nèi)源凝血系統(tǒng)敏感的挑選實驗。v【試劑】v1受檢血漿以0.109mol/L枸櫞酸鈉溶液1:9抗凝，3000r/min，離心510min，獲貧血小板血漿。v24%白陶土-

7、腦磷脂懸液同ACT。v30.025mol/L氯化鈣溶液。v【操作方法】v1受檢血漿、白陶土-腦磷脂懸液各0.1ml，混勻，37C水浴3min，其間悄然振搖數(shù)次。v2參與0.025mol/L氯化鈣溶液0.1ml，立刻啟動秒表，不停振搖并察看出現(xiàn)纖維蛋白絲的時間。反復(fù)2次，取平均值，同時作正常對照。v【參考值】v男性：373.3(31.543.5)s。v女性：37.52.8(3243)s。v受檢者的測定值較正常對照延伸超越10s以上才有病理意義。v【質(zhì)量控制】v1抗凝劑與血液的比例要準(zhǔn)確。v2標(biāo)本放置不宜超越3h，溫育時間不宜少于3min。v3分別血漿時，離心速度和時間要夠，務(wù)必除去血小板，特別是

8、用于肝素治療監(jiān)測時。v4假設(shè)正常對照延伸，應(yīng)重新配制試劑。v5APTT測定因所用的激活劑不同，以及部分凝血活酶來源及制備的不同，均可影響測定結(jié)果。v6用自動血液凝固儀測定APTT，可提高檢測速度和結(jié)果準(zhǔn)確性，但儀器本身也會產(chǎn)生一定誤差，2019年國際血栓與止血委員會InternationalCommitteeofThrombosisandHaemostasis,ICTH和ICSH已開場所作研討運用APTT監(jiān)測肝素治療時的規(guī)范化問題。v【臨床意義】v根本與凝血時間意義一樣，但敏感性高。目前所用的大多數(shù)APTT測定方法，凡當(dāng)血漿凝血因子低于正常程度的15%30%即可異常。v1APTT延伸超越正常對

9、照10s以上主要用于發(fā)現(xiàn)輕型的血友病。雖可檢出因子：C程度低于25%甲型血友病，但對亞臨床血友病因子大于25%和血友病攜帶者敏感性欠佳。結(jié)果延伸也見于因子血友病乙、和缺乏癥；血中抗凝物如凝血因子抑制物或肝素程度增高時；當(dāng)凝血酶原、纖維蛋白原及因子、缺乏時也可延伸，但敏感性略差；其他尚有肝病、DIC、大量輸入庫存血等。v2.APTT縮短見于DIC，血栓前形狀及血栓性疾病。v3.肝素治療的監(jiān)護(hù)APTT對血漿肝素的濃度很為敏感，故是目前廣泛運用的實驗室監(jiān)護(hù)目的。此時，要留意APTT測定結(jié)果必需與肝素治療范圍的血漿濃度呈線性關(guān)系，否那么不宜運用。普通在肝素治療期間，APTT維持在正常對照的1.53.0

10、倍為宜。模塊模塊2 外源性凝血系統(tǒng)的檢驗外源性凝血系統(tǒng)的檢驗定義：指始動凝血的組織因子來自定義：指始動凝血的組織因子來自 組織，不是血液。組織，不是血液。凝血使動因子為凝血使動因子為 /組織因子組織因子/TF 1、靜脈采血同前2、血漿凝血酶原時間PT測定v【實驗原理】v在受檢血漿中參與過量的組織凝血活酶和適量的鈣離子后，測其凝固時間為PT。是反映血漿中凝血酶原、因子V、X及纖維蛋白原的實驗，也是外源性凝血系統(tǒng)常用的挑選實驗之一。vPT測定通常用于以下三種情況：v1出血性疾病的病情察看和出血及手術(shù)時應(yīng)補何種凝血因子的檢查；v2用于檢查肝合成維生素K依賴因子因子、能否減少，是維生素K缺乏、肝臟病的

11、一項檢查目的；v3用于缺血性心臟病如心肌堵塞和人工瓣膜運用者，在運用雙香豆素等口服抗凝劑進(jìn)展抗凝治療時的監(jiān)控工程。v【試劑】v1兔腦粉浸出液取150mg枯燥兔腦粉，置于試管中，加生理鹽水2.5ml，放入37水浴，充分?jǐn)嚢?0min，并置其水浴中備用。v20.025mol/LCaCl2溶液。v【操作方法】v1在試管中參與109mmol/L枸櫞酸鈉或0.1mol/L草酸鈉溶液0.2ml，然后加受檢血1.8ml混勻，低速離心，分別血漿。v2取小試管1支，參與血漿和兔腦粉浸出液各0.1ml，37預(yù)溫，再參與0.1mlCaCl2溶液37預(yù)溫，立刻開動秒表，不斷傾斜試管，至液體流動停頓所需時間，即為凝血酶

12、原時間。反復(fù)操作23次，取平均值，并作正常對照。v【參考區(qū)間】【參考區(qū)間】 1214s一期法一期法v【質(zhì)量控制】【質(zhì)量控制】v 1抽血要順利，抗凝要充分，否那么抽血要順利，抗凝要充分，否那么PT延伸。延伸。v 2采血后宜在采血后宜在1小時內(nèi)完成，置冰箱保管小時內(nèi)完成，置冰箱保管不能超越不能超越4h。v 3實驗溫度要恒定于實驗溫度要恒定于371，否那么，否那么影響結(jié)果。影響結(jié)果。v【臨床意義】【臨床意義】 v凝血酶原時間延伸超越正常對照凝血酶原時間延伸超越正常對照3s以上以上見于：見于：v1先天性凝血因子異常，如先天性凝血因子異常，如、因子之一或兩種以上異常時。但單一凝因子之一或兩種以上異常時。

13、但單一凝血因子異常時，其活性要減少到一定程度，血因子異常時，其活性要減少到一定程度，PT才延伸。如因子才延伸。如因子I要要1000mg/L，5%，、要要10%。v2后天性凝血因子異常，如嚴(yán)重肝病、維生后天性凝血因子異常，如嚴(yán)重肝病、維生素素K缺乏慢性胃腸疾患、阻塞性黃疸、缺乏慢性胃腸疾患、阻塞性黃疸、纖溶亢進(jìn)、纖溶亢進(jìn)、DIC后期、血液中抗凝物質(zhì)增多后期、血液中抗凝物質(zhì)增多及運用抗凝藥物，如雙香豆素類等。及運用抗凝藥物，如雙香豆素類等。v凝血酶原時間縮短見于DIC早期及血栓性疾病，如心肌堵塞、腦血栓構(gòu)成、急性血栓性靜脈炎等模塊模塊3 血友病血友病病例病例v李某，女，23歲，干部。因反復(fù)血腫9年

14、，右下肢腫脹疼痛6日入院。v患者14歲時無明顯誘因出現(xiàn)四肢皮疹，為散在暗紅色丘疹，伴瘙癢，無水皰或潰瘍，疑過敏性皮炎，予苯海拉明、膠性鈣等對癥治療后好轉(zhuǎn)。但2個月后右手臂發(fā)生血腫，以后右臂與右腿反復(fù)發(fā)生血腫，以后每年發(fā)作2-4次，每次發(fā)作前或發(fā)作時均有皮疹加劇，無發(fā)熱畏寒，無關(guān)節(jié)腫痛、腹痛腹瀉或黑便，無腰酸腰痛或血尿，在當(dāng)?shù)蒯t(yī)院檢查血小板、凝血酶原時間及纖維蛋白原均正常，未能明確診斷，但與糖皮質(zhì)激素潑尼松或地塞米松治療病情可緩解，停藥后那么易反復(fù)。近1年來患者不規(guī)那么服用地塞米松及環(huán)磷酰胺，已自行停藥1月余。6天前患者又出現(xiàn)右腿腫脹疼痛并逐漸加劇，伴四肢皮疹增多，為進(jìn)一步診治而入院。自起病以來

15、，無發(fā)熱畏寒、關(guān)節(jié)腫痛，無鼻出血或牙齦出血，無口腔潰瘍、全身骨痛，精神欠佳，食欲普通，體重下降約5千克。v既往史：平素體健，14歲以前無出血傾向或貧血史。從未輸注血漿或因子濃縮物。無肝病、腎病或消化性潰瘍病史，無結(jié)核、傷寒等傳染病史，無手術(shù)或外傷史，無食物或藥物過敏史。v個人史：原籍出生，從事銀行業(yè)務(wù)，無疫水接觸史，不嗜煙酒，無特殊喜好。v月經(jīng)、婚育史：14歲月經(jīng)初潮，月經(jīng)不規(guī)那么，月經(jīng)周期20-45天不等，經(jīng)期3-10天，月經(jīng)量時多時少，LMP2019-06-15，白帶不多，無痛經(jīng)。未婚未育。v家族史：患者父母為姨表兄妹，但無出血景象?；颊叩拿妹眉凹易逯衅渌蓡T也無出血傾向，否認(rèn)有家族性或遺

16、傳性疾病。v體格檢查：體溫36，脈搏96次/分，呼吸22次/分，血壓13/8kPa。神清，發(fā)育正常，營養(yǎng)中等，輕度貧血貌。四肢皮膚均見有較大面積的暗紅色丘疹，伴脫屑與結(jié)痂，未見出血點或淤斑。淺表淋巴結(jié)無腫大，頭顱五官無畸形，鞏膜無黃染。頸軟，頸靜脈無怒張，甲狀腺不大，氣管居中。胸廓無畸形，胸骨無壓痛，雙肺呼吸音清，未聞及干濕性啰音，心率96次/分，心律齊，心尖部可聞及/6級收縮期雜音。腹平軟，全腹無壓痛，未捫及包塊，肝脾不大，腸鳴音正常。右大腿明顯腫脹并見有大片淤斑。右大腿下1/4處周徑為44cm左側(cè)39cm，右腓腸肌周徑為33cm左側(cè)27cm，觸痛明顯。四肢關(guān)節(jié)無腫脹畸形，生理反射存在，未引

17、起病理反射，腦膜刺激征陰性。v實驗室檢查：紅細(xì)胞RBC3.361012/L，血紅蛋白Hb101g/L，白細(xì)胞WBC3.24109/L，分類正常，血小板PLT370109/L，大、小便常規(guī)正常。血清鈉Na140mmol/L，鉀K4.1mmol/L，氯Cl108mmol/L，血糖Glu4.8mmol/L，血尿素氮BUN7.3mmol/L，血肌酐Cr89umol/L。肝功能：天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶AST32U/L,丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶ALT29U/L,乳酸脫氫酶LDH122U/L,血總膽紅素TBIL19.8umol/L，直接膽紅素DBIL10.2umol/L，間接膽紅素IBIL9.6umol/L。白陶土部分凝血活酶

18、時間KPTT98.5秒對照40秒，凝血酶原時間PT15秒對照13秒，凝血酶時間TT13秒對照12秒，凝血時間CT10分25秒。纖維蛋白原FIB3g/L對照24g/L。凝血活酶生成不能被正常吸附血漿或血清糾正。交叉復(fù)鈣也不能糾正患者血漿的凝固缺陷，正常血漿與稀釋至1/512的患者血漿溫浴時，凝固時間仍長達(dá)9分20秒正常對照3分18秒。因子活性為2.9對照13335?？筍m抗體、抗核抗體ANA、抗雙鏈DNA抗體。血沉ESR38mm/h。IgG16.84g/L、IgA2.69g/L、IgM1.12g/L、補體C30.44g/L、補體C40.32g/L?；颊呖沽字贵w與類風(fēng)濕膠乳試劑均為陰性，血液中未

19、找到LE細(xì)胞。皮膚活檢的病理診斷為亞急性皮炎，不排除紅斑狼瘡。心電圖、胸片及腹部B超均無明顯異常。v思索題：v1例有那些臨床特點，診斷線索是什么，最能夠是什么疾病？v2為明確診斷，需進(jìn)一步作哪些實驗室檢查，本例應(yīng)與哪些疾病鑒別？v3如何對本例進(jìn)展有效的治療？血友病v血友病(Hemophilia)是一組先天性凝血因子缺乏，以致凝血活酶生成妨礙的出血性疾病。其中包括血友病甲因子、AHG缺乏，血友病乙因子缺乏、PTC缺乏及血友病丙因子、PTA缺乏。血友病甲多見，約為血友病乙的七倍。v遺傳方式與發(fā)病機理:v先天性因子缺乏為典型的性聯(lián)隱性遺傳，由女性傳送，男性發(fā)病，控制因子凝血成分合成的基因位于X染色體

20、?；疾∧行耘c正常女性婚配，子女中男性均正常，女性為傳送者；正常男性與傳送者女性婚配，子女中男性半數(shù)為患者，女性半數(shù)為傳送者；患者男性與傳送者女性婚配，所生男孩半數(shù)有血友病，所生女孩半數(shù)為血友病，半數(shù)為傳送者。約30無家族史，其發(fā)病能夠因基因突變所致。v因子缺乏的遺傳方式與血友病甲一樣，但女性傳送者中，因子程度較低，有出血傾向。因子X1缺乏，均導(dǎo)致血液凝血活酶構(gòu)成發(fā)生妨礙，凝血酶原不能轉(zhuǎn)變?yōu)槟?，纖維蛋白原也不能轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白而易發(fā)生出血。v臨床表現(xiàn)v出血特點是延遲、繼續(xù)而緩慢的滲血，可自發(fā)出血，但主要是輕傷后出血不易停頓。因子、缺乏出血較重，二者臨床表現(xiàn)無差別；因子缺乏病癥輕，自發(fā)性出血者甚少見。因子濃度越低，出血越嚴(yán)重。1、實驗室檢查、實驗室檢查v一、常規(guī)檢查v出血時間、血小