集中空調(diào)微生物檢測技術(shù)及質(zhì)量控制

1、集中空調(diào)微生物檢測技術(shù)及質(zhì)量控制集中空調(diào)微生物檢測技術(shù)及質(zhì)量控制20152015 集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)微生物檢測項目及相關(guān)檢測方法 質(zhì)量控制及檢測過程中相關(guān)問題集中空調(diào)微生物檢驗項目 集中空調(diào)送風(fēng)中細菌總數(shù)檢驗 集中空調(diào)送風(fēng)中真菌總數(shù)檢驗 集中空調(diào)送風(fēng)中-溶血性鏈球菌檢驗 集中空調(diào)送風(fēng)中嗜肺軍團菌檢驗（不作為許可的必檢項目） 集中空調(diào)風(fēng)管內(nèi)表面微生物檢驗 集中空調(diào)系統(tǒng)冷卻水、冷凝水中嗜肺軍團菌檢驗集中空調(diào)送風(fēng)中細菌總數(shù)檢驗 檢驗依據(jù)：WS 394-2012 附錄D 采樣儀器：六級篩孔撞擊式微生物采樣器 采樣方法：每套系統(tǒng)35個檢測點，流量 28.3L/min 515min 培養(yǎng)基：營養(yǎng)瓊脂 培養(yǎng)：

2、3537培養(yǎng)48h集中空調(diào)送風(fēng)中細菌總數(shù)檢驗 結(jié)果報告1.單位：CFU/m32.計算公式： 平皿菌落數(shù)之和1000測定值（ CFU/m3 ）= 流量（L/min） 采樣時間（min）注意：平皿菌落數(shù)之和即為一個檢測點6個平皿的菌落數(shù)的總和，送風(fēng)中的其他項目的平皿菌落數(shù)之和的計算均與此相同。3. 報告值：一個系統(tǒng)送風(fēng)中細菌總數(shù)的測定結(jié)果按該系統(tǒng)全部檢測的送風(fēng)口細菌總數(shù)測定值中的最大值給出集中空調(diào)送風(fēng)中真菌總數(shù)檢驗 檢驗依據(jù)：WS 394-2012 附錄E 采樣儀器：六級篩孔撞擊式微生物采樣器 采樣方法：每套系統(tǒng)35個檢測點，流量 28.3L/min 515min 培養(yǎng)基：沙氏瓊脂 培養(yǎng)：28培養(yǎng)

3、5d集中空調(diào)送風(fēng)中真菌總數(shù)檢驗 結(jié)果報告1.單位：CFU/m32.計算公式： 平皿菌落數(shù)之和1000測定值（ CFU/m3 ）= 流量（L/min） 采樣時間（min）3. 報告值：一個系統(tǒng)送風(fēng)中真菌總數(shù)的測定結(jié)果按該系統(tǒng)全部檢測的送風(fēng)口真菌總數(shù)測定值中的最大值給出集中空調(diào)送風(fēng)中-溶血性鏈球菌檢驗 檢驗依據(jù)：WS 394-2012 附錄F 采樣儀器：六級篩孔撞擊式微生物采樣器 采樣方法：每套系統(tǒng)35個檢測點，流量 28.3L/min 515min 培養(yǎng)基：血瓊脂平板 培養(yǎng)：3537培養(yǎng)2448h集中空調(diào)送風(fēng)中-溶血性鏈球菌檢驗 菌落特征：灰白色、表面突起、直徑0.50.7mm、透明或半透明、菌

4、落周圍有明顯的24mm界限分明完全透明的無色溶血環(huán) 革蘭氏染色鏡檢：革蘭氏陽性無芽孢球菌、圓形或卵圓形、鏈狀排列集中空調(diào)送風(fēng)中-溶血性鏈球菌檢驗集中空調(diào)送風(fēng)中-溶血性鏈球菌檢驗集中空調(diào)送風(fēng)中-溶血性鏈球菌檢驗 結(jié)果報告1.單位：CFU/m32.計算公式： 平皿菌落數(shù)之和1000測定值（ CFU/m3 ）= 流量（L/min） 采樣時間（min）3. 報告值：一個系統(tǒng)送風(fēng)中-溶血性鏈球菌的測定結(jié)果按該系統(tǒng)全部檢測的送風(fēng)口-溶血性鏈球菌測定值中的最大值給出集中空調(diào)送風(fēng)中嗜肺軍團菌檢驗 檢驗依據(jù)： WS 394-2012 附錄G 采樣儀器：液體沖擊式微生物氣溶膠采樣器 采樣方法：每套系統(tǒng)35個檢測點

5、 采樣吸收液1.采樣吸收液1：GVPC液體培養(yǎng)基2.采樣吸收液2：酵母提取液集中空調(diào)送風(fēng)中嗜肺軍團菌檢驗 培養(yǎng)基：GVPC瓊脂 BCYE瓊脂 BCYE-CYE瓊脂 培養(yǎng)： 3537 5%CO2培養(yǎng)箱 菌型確定：生化試驗、血清學(xué)試驗 采樣點測定結(jié)果：任一吸收液培養(yǎng)出嗜肺軍團菌即判定為陽性結(jié)果 結(jié)果報告：檢出/未檢出，一套系統(tǒng)中任意一個采樣點檢出，即報告該套空調(diào)送風(fēng)中嗜肺軍團菌檢測結(jié)果為檢出集中空調(diào)風(fēng)管內(nèi)表面微生物檢驗 檢驗依據(jù)： WS 394-2012 附錄I 采樣方法：1.刮拭法：表面積塵較多時采用該方法2.擦拭法：積塵較少時采用該方法3.采樣面積：50cm2或100cm24.采樣儀器：采樣機

6、器人或采樣規(guī)格板集中空調(diào)風(fēng)管內(nèi)表面微生物檢驗 檢驗項目：細菌總數(shù)、真菌總數(shù) 培養(yǎng)基：營養(yǎng)瓊脂、沙氏瓊脂 采樣液及稀釋液：0.1%吐溫80水溶液 檢驗步驟：1.刮拭法：稱取1g加入9mL吐溫80水溶液中制成1:10樣液，做10倍梯級稀釋，取適宜稀釋度接種平皿，傾注瓊脂。2.擦拭法：擦拭物加入10mL吐溫80水溶液中，此即為1:10樣液，做10倍梯級稀釋，取適宜稀釋度接種平皿，傾注瓊脂。集中空調(diào)風(fēng)管內(nèi)表面微生物檢驗 培養(yǎng)1.細菌總數(shù)： 3537培養(yǎng)48h2.真菌總數(shù)： 28培養(yǎng)5d 結(jié)果計算 1.刮拭法 平均菌落數(shù)測定值(CFU/cm2)= 積塵總重量稀釋倍數(shù) 采樣面積2.擦拭法 平均菌落數(shù)測定值

7、(CFU/cm2)= 稀釋倍數(shù) 采樣面積注意：此處為平均菌落數(shù)，即適宜稀釋度的兩個平皿的菌落數(shù)平均值。集中空調(diào)風(fēng)管內(nèi)表面微生物檢驗 結(jié)果報告1.單位：CFU/cm22.報告值：一個系統(tǒng)風(fēng)管內(nèi)表面細菌總數(shù)、真菌總數(shù)的測定結(jié)果按該系統(tǒng)全部檢測的風(fēng)管內(nèi)表面細菌總數(shù)、真菌總數(shù)測定值中的最大值給出集中空調(diào)系統(tǒng)冷卻水、冷凝水中嗜肺軍團菌檢驗 檢驗依據(jù)： WS 394-2012 附錄B 采樣容器：滅菌500mL玻璃或聚乙烯材料磨口瓶，瓶中加有硫代硫酸鈉溶液以中和樣品中的氧化物。 培養(yǎng)基：GVPC瓊脂 BCYE瓊脂 BCYE-CYE瓊脂 培養(yǎng)： 3537 5%CO2培養(yǎng)箱 菌型確定：生化試驗、血清學(xué)試驗 結(jié)果

8、報告：檢出/未檢出嗜肺軍團菌質(zhì)量控制及檢測過程中相關(guān)問題 采樣物品的準備：滅菌 實驗室環(huán)境：1000級潔凈室、生物安全實驗室 各采樣平皿質(zhì)量1.對平皿的要求：直徑90mm，厚度18mm2.平皿中培養(yǎng)基均勻性3.平皿中培養(yǎng)基厚度：加入2025mL相應(yīng)培養(yǎng)基，以保證采樣時噴孔與瓊脂表面之間達到最佳撞擊距離4.已加入培養(yǎng)基的采樣平皿至少提前兩天配制，經(jīng)無菌試驗合格后方可用于采樣質(zhì)量控制及檢測過程中相關(guān)問題 真菌總數(shù)培養(yǎng)結(jié)果觀察：從培養(yǎng)48h開始觀察計數(shù) 細菌總數(shù)及真菌總數(shù)結(jié)果計數(shù)：檢測細菌總數(shù)的營養(yǎng)瓊脂平板中有真菌生長時不對其進行計數(shù)，反之亦然 風(fēng)管內(nèi)表面微生物計數(shù)結(jié)果適宜稀釋度的選擇 （編寫作業(yè)指

9、導(dǎo)書）1.細菌總數(shù)：參照GB/T18204.2-2000 30300CFU2.真菌總數(shù)：參照GB/T18204.8-2000 30100CFU質(zhì)量控制及檢測過程中相關(guān)問題 結(jié)果報告（編寫作業(yè)指導(dǎo)書）結(jié)果報告（編寫作業(yè)指導(dǎo)書）1.集中空調(diào)送風(fēng)中細菌總數(shù)、真菌總數(shù)所有檢測點都無菌生長測定值均為0時，則報告11000/(流量采樣時間）CFU/m3，如采樣時間為5min，則報告為7 CFU/m3測定值不為0時，即直接以所有檢測點中最大值為報告值，小數(shù)點后四舍五入，取整數(shù)報告。例如：某檢測點采樣流量28.3L/min 采樣5min，平皿菌落數(shù)之和為14CFU，測定值為98.9CFU/m3，若該點測定值為

10、所有檢測點中最大值，則結(jié)果報告為99CFU/m3質(zhì)量控制及檢測過程中相關(guān)問題2. 集中空調(diào)送風(fēng)中-溶血性鏈球菌所有檢測點都無菌生長測定值均為0時，報告未檢出測定值不為0時，即直接以所有檢測點中最大值為報告值，小數(shù)點后四舍五入，取整數(shù)報告。例如：某檢測點采樣流量28.3L/min 采樣5min，平皿菌落數(shù)之和為14CFU，測定值為98.9CFU/m3，若該點測定值為所有檢測點中最大值，則結(jié)果報告為99CFU/m3質(zhì)量控制及檢測過程中相關(guān)問題2.風(fēng)管內(nèi)表面微生物中細菌總數(shù)、真菌總數(shù)所有檢測點都無菌生長測定值均為0時，則報告1CFU/cm2所有測定值均1CFU/cm2時，則報告1CFU/cm2最大測定值1CFU/cm2時，即直接以所有檢測點中最大值為報告值，小數(shù)點后四舍五入，取整數(shù)報告補充說明 風(fēng)管內(nèi)表面微生物檢測原始記錄中公式里平皿平均數(shù)改為平均菌落數(shù)。 送風(fēng)中-溶血性鏈球菌檢測原始記錄的計算公式中平皿菌落數(shù)改為平皿菌落數(shù)之和。 對結(jié)果報告為什么不取2位有效數(shù)的解釋：方法結(jié)果報告中規(guī)定每套系統(tǒng)以所有檢測點中最大