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文檔簡介
1、華 南 師 范 大 學 實 驗 報 告學生姓名 何茂輝 學號 20062501302 專 業(yè) 生物科學 年級、班級 06科三 課程名稱 細胞生物學實驗 實驗項目 實驗類型 驗證 設計 綜合 實驗時間 09 年 5 月 19 日 實驗指導老師 尤蓉、周仁超 實驗評分 細胞膜的滲透性及巨噬細胞的吞噬作用實驗目的:1. 通過紅細胞的溶血過程的觀察,了解細胞膜的滲透性及各種物質進入細胞膜的速度。2. 通過小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞的過程,了解巨噬細胞對大分子或顆粒物質的內吞作用。實驗原理:1. 紅細胞在低滲液中,細胞很快吸水而脹裂,稱為溶血。在等滲液中,由于有些溶質會進入紅細胞內、引起細胞滲透壓升高,細
2、胞也會吸水脹裂,由于各種物質透入細胞的速度不同,溶血的時間不同。2. 高等動物具有大小兩類吞噬細胞(即巨噬細胞和嗜中性粒細胞),專司吞噬作用,為非持異免疫功能的重要組成部分。3. 小鼠腹腔注射淀粉肉湯液,可誘導巨噬細胞大量產生,增強巨噬細胞吞噬活性。實驗步驟:細胞膜的滲透性(兔紅細胞)1. 取1mL兔的抗凝全血于50mL小燒杯中,再加入10mL0.17 mol/L氯化鈉,稀釋兔血制成兔的紅細胞懸液,觀察它的特點為一種不透明的紅色渾濁液體。2. 取1支試管加入10ml蒸餾水,再加入1ml紅細胞懸液,搖動2次混勻,可見溶液由不透明的紅色迅速變成紅色澄清液 3. 取6支試管貼上標簽,依次加入下列等滲
3、溶液10ml:0.32M 甲醇、0.32M 乙醇、0.32M 丙醇、0.32M 乙二醇、0.32M 甘油、0.32M 葡萄糖4. 向每支試管加入1ml紅細胞懸液,搖動2次混勻,觀察是否有溶血現象發(fā)生,記下溶血時間并給予分析小鼠巨噬細胞的吞噬作用觀察1. 實驗前一天向小白鼠腹腔注射6淀粉肉湯液(含臺盼藍)1ml2. 雞紅細胞懸液制備:取抗凝全血1mL,移入10mL離心管,加入4mL生理鹽水混勻, 1500rpm離心5 min。洗滌2次,最后按壓積紅細胞體積加生理鹽水配成1%雞紅細胞懸液3. 小鼠腹腔注射1的雞紅細胞懸液1ml,輕揉腹部使雞紅細胞分散4. 2030min后,頸椎脫臼法處死小鼠5.
4、將小鼠置于解剖盤中,剪開腹腔,把內臟推向一側,加適量生理鹽水與腹腔液混勻,用吸管吸取腹腔液于試管或小燒杯中備用6. 吸取腹腔液12滴,制作臨時裝片7. 鏡檢結果與分析:1、編號溶液種類是否溶血溶血時間結果分析10.17M 氯化鈉否離子不能通過質膜2水是1s低滲溶液,紅細胞吸水破裂30.32M 甲醇是15s溶質分子進入細胞膜的速度與溶質分子的極性、分子大小有關;同時細胞膜對進入溶質分子的選擇性也對溶血現象的發(fā)生起重要作用。40.32M 乙醇是7s50.32M 丙醇是6s60.32M 乙二醇是7s70.32M 甘油是147s80.32M 葡萄糖否大分子不能通過質膜2、思考題1、溶液的滲透壓主要與哪些因素有關?對簡單鹽溶液如何粗略計算出其滲透壓? 溶液的滲透壓主要與溶液中溶質顆??倲涤嘘P。滲透壓=ciRT或n/VRT(ci是解離常數、R是氣體常數、T是絕對溫度),可以通過這兩個公式粗略計算出簡單鹽溶液的滲透壓
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