無菌檢查法藥品無菌檢查規(guī)程

1、無菌檢查法藥品無菌檢查規(guī)程一、目 的：闡述無菌檢查規(guī)程。二、適用范圍：適用于無菌檢查規(guī)程。三、責(zé) 任 者：品控部。四、正 文：1 概述無菌檢查是檢查藥品、敷料、縫合線、無菌器具及適用于中國獸藥典要求無菌檢查的其它品種是否染有活菌的一種方法。無菌檢查的操作環(huán)境和全部過程應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作。該檢查法根據(jù)供試品有無抑菌作用而采用薄膜過濾法或直接接種法兩種方式。2 儀器、設(shè)備和用具2.1 無菌室分無菌操作室和緩沖間。在緩沖間應(yīng)有洗手盆、毛巾、無菌衣褲放置架及掛鉤、拖鞋等。無菌操作室應(yīng)具有空氣除菌過濾的單向流空氣裝置，局部潔凈度100級或放置同等級別的超凈工作臺，室內(nèi)溫控(25±2)及除濕裝置

2、。緩沖間及操作室內(nèi)均設(shè)置能達(dá)到空氣消毒的紫外燈和照明燈，操作室或工作臺應(yīng)保持正壓。 無菌室應(yīng)每周和每次操作前用0.1%新潔爾滅或2%甲酚液或其他適宜消毒液擦拭操作臺及可能污染的死角，開動無菌空氣過濾器及紫外燈殺菌半小時。在每次操作完畢，同樣上述消毒溶液擦拭工作臺面，除去室內(nèi)濕氣，用紫外燈殺菌半小時。 無菌室的無菌程度檢查無菌室在消毒處理后，無菌試驗(yàn)前及操作過程中需檢查空氣中菌落數(shù)；取直徑約90mm雙碟，在接種室內(nèi)點(diǎn)燃乙醇燈，在乙醇燈旁，以無菌操作，將雙碟半開注入溶化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基約20ml，制成平板，在3035培養(yǎng)48小時，取出檢查，100級清潔度要求:3個平板上生長的菌落數(shù)平均不得超過1個

3、。無菌操作臺面或超凈工作臺應(yīng)定期請有關(guān)部門檢測其潔凈度，應(yīng)達(dá)到100級(一般用塵埃粒子計(jì)數(shù)儀)檢測塵埃粒徑5m的粒數(shù)不得超過3.5個/升；空氣流量應(yīng)控制在0.751.0m3/S；細(xì)菌菌落數(shù)平均1個，可根據(jù)無菌狀況必要時置換過濾器。2.3 恒溫培養(yǎng)箱及可調(diào)2025的生化培養(yǎng)箱。2.4 離心機(jī)、顯微鏡、蒸汽滅菌器、標(biāo)準(zhǔn)PH比色器(0.02%酚磺酞指示液和溴鉀酚藍(lán)指示液)、恒溫烤箱。2.5 玻璃器皿 試管、量筒、三角瓶、移液管、刻度吸管(1、5、10ml)、注射器(2、5、10ml)、雙碟等，用玻璃洗滌劑或清潔液浸泡，水洗3次。使用過后如與細(xì)菌接觸，應(yīng)先滅菌倒出內(nèi)容物后再清洗，晾干。凡無菌操作過程中

4、所用的器皿，都應(yīng)用牛皮紙包扎嚴(yán)密，121滅菌30分鐘，或置于耐熱容器中蓋妥160干熱滅菌2小時。 移液管、刻度吸管在管口上端內(nèi)，松松地塞少許棉花，然后放于吸管筒內(nèi)或牛皮紙袋內(nèi)，蓋嚴(yán)，滅菌備用。 試管、離心管、三角瓶等在管(瓶)口塞上海棉膠專用塞或紗布棉塞，塞子應(yīng)塞進(jìn)管口內(nèi)2/3之處，用牛皮紙將管口(包括塞子)包扎嚴(yán)，滅菌備用。 將注射器、針頭(9號、11號、12號)配對，檢查針頭是否暢通后，將注射芯、管和針頭分別放在雙層紗布(或布)內(nèi)，包扎嚴(yán)密，置帶蓋容器(瓷盤或鋁制飯盒)內(nèi)，蓋嚴(yán)，用牛皮紙包扎后，滅菌備用。2.6 無菌衣、褲、帽、口罩等洗凈晾干，配套，用牛皮紙包嚴(yán)，滅菌備用或用一次性的無菌物

5、品代替。2.7 長柄取樣匙，放于長的玻璃筒內(nèi)(或不銹鋼長筒內(nèi))，蓋嚴(yán)，干熱滅菌備用。2.8 微孔濾膜直徑50mm、孔徑0.45m。購得一批濾膜，需進(jìn)行孔徑大小的測試，一般有三種方法，選其中一種方法即可。氣泡法 先將濾膜浸入水中，使完全濕潤，然后用鑷子夾住一片濾膜放于氣泡點(diǎn)測定裝置或?yàn)V膜孔徑測定儀上，膜上放一塊與濾膜大小相同的尼龍篩網(wǎng)，再加上多孔板，將螺旋固定圈旋緊，在多孔板上加35mm深的水(注意排除氣泡)關(guān)閉放氣閥，啟動空壓機(jī)或氮?dú)馄块y，使壓力緩緩上升，注意觀察水面上產(chǎn)生第一個氣泡時，記錄壓力表的壓力，氣泡點(diǎn)壓力不應(yīng)小于2.2kg/cm2(0.2MPa)水流量法 將濾膜裝于除菌濾器上，開動真

6、空泵，壓力在700mmHg(93kPa)下，抽濾已濾清的水約500ml，計(jì)算出每1min的濾速。1995年版中國獸藥藥典對濾膜的濾速明確規(guī)定，而USP(XX)規(guī)定在700mmHg(93kPa)壓力下，濾膜直徑47mm；流速5575ml/min。細(xì)菌過濾法 常用的細(xì)菌為粘質(zhì)沙雷氏菌(Serratia marcescens CMCC(B)41002)，將該菌的新鮮營養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)物，接種于營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，3035培養(yǎng)1820小時，用無菌0.9%氯化鈉溶液稀釋至103（約相當(dāng)于7×105CFU/ml），取此菌液1ml加至50ml無菌0.9%氯化鈉溶液中，按薄膜過濾法過濾，取該濾液5ml接

7、種于營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基40ml中，3035培養(yǎng)24小時，應(yīng)無菌生長。不符合規(guī)定的濾膜不得使用。2.9 除菌濾器 目前有多種濾器；如STV2型無菌檢查薄膜器及封閉式濾器的準(zhǔn)備分述如下： STV2型無菌檢查薄膜濾器是由除菌過濾器和底座排液架兩部分組成。新購置的濾器，需用毛刷將該濾器的各部件用水刷凈，除去垢物，用水沖洗45次，蒸餾水沖洗1次。玻璃筒放于玻璃洗滌液或清潔液中過濾，再用水、蒸餾水洗凈、晾干。除菌過濾器的裝配 在濾器的漏斗部上面置1個橡膠圈，圈上加多孔墊板，在墊板上墊一個四氯乙烯薄膜墊圈，放上乙浸濕的微孔濾膜1片，在其上墊一個四氯乙烯薄膜圈及橡膠圈，安裝玻璃筒，套上金屬固定架，擰上底部螺母，漏

8、斗底部套上橡皮塞。將已裝配妥的濾器放于帶蓋的瓷盒（或飯盒）中，蓋嚴(yán)，外用牛皮紙包扎滅菌備用。底座排液架的排液管口接一耐壓橡膠管，將管口用紗布，牛皮紙包扎滅菌備用。該架經(jīng)滅菌后放于無菌室內(nèi)可反復(fù)使用。2.9.2 封閉式濾器一般由電腦集菌儀和一次性使用集菌培養(yǎng)器組成。前者放于無菌操作區(qū)臺面上。2.10 手術(shù)鑷、手術(shù)剪洗凈、擦干。用雙層紗布將1把剪和1個鑷間隔包扎在一起2.11 抽濾瓶一般為10002000ml，用水及蒸餾水洗凈，晾干。瓶口用已配有兩個玻璃管（一個通至瓶底，一個短些）的橡皮塞蓋緊，短的玻璃管上套一個短耐壓橡膠管。抽氣口用耐壓橡膠管與空氣過濾玻璃器（內(nèi)充填以棉花）相連，空氣過濾玻璃器的

9、另一管口用紗布、牛皮紙包扎嚴(yán)緊，抽氣瓶的全部裝置用牛皮紙包扎，滅菌備用。2.12 用具的滅菌 將包扎妥的用具（除另有規(guī)定外）在（121±0.5）蒸氣滅菌30分鐘，物品取出時切勿立即置冷處，以免急速冷卻，使滅菌物品內(nèi)蒸氣冷凝造成負(fù)壓，易致染菌。應(yīng)置恒溫培養(yǎng)箱中烘干。適于高溫滅菌的器皿也可采用160干熱滅菌2小時。3 試液3.1 75%乙醇溶液配制酒精棉球用。3.2 碘酊溶液配制碘酒棉球用。3.3 無菌0.9%氯化鈉溶液，分裝于試管、三角瓶或玻璃瓶中，瓶口用棉塞、橡膠塞或海綿膠專用塞塞緊并用牛皮紙包扎，滅菌備用。也可用氯化鈉注射液。3.4 新潔爾滅（1：1000）溶液。3.5 35%甲酚

10、磺溶液或其他適宜消毒溶液。3.6 0.02%酚磺酞指示液PH6.88.4系列比色液管。3.7 溴甲酚藍(lán)指示液PH6.07.6系列比色液管。3.8 2mol/L鹽酸溶液。3.9 2mol/L氫氧化鈉溶液。3.10 無菌的青霉素酶溶液。4 培養(yǎng)基4.1 一般采用商品脫水培養(yǎng)基，臨用時按照使用說明書進(jìn)行配制，需注意培養(yǎng)基的PH值應(yīng)符合規(guī)定，否則必須校正后，滅菌使用。4.2 新鮮配制的培養(yǎng)基，應(yīng)按中國獸藥典規(guī)定的處方，對培養(yǎng)基的原材料要進(jìn)行挑選，化學(xué)藥品均需用CP試劑規(guī)格。 除葡萄糖和指示液外，將處方中各成分加水后置有石棉網(wǎng)的電爐或適宜的加熱設(shè)備中，使微溫溶解。用2mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH，使其

11、比規(guī)定的PH值略高0.40.6，煮沸，用棉(紙)漿減壓抽濾或以脫脂棉，濾紙等濾材過濾，使培養(yǎng)基澄清。 加入葡萄糖和指示液，搖勻，補(bǔ)足水量，調(diào)節(jié)PH值(比規(guī)定的PH值略高0.20.4)，使滅菌后為7.1±0.2，分裝，裝量不宜超過容器的2/3，以免滅菌時溢出。4.3 培養(yǎng)基靈敏度檢查新購的脫水培養(yǎng)基或采用不同品牌原材料的配制的新鮮培養(yǎng)基，其質(zhì)量均應(yīng)符合靈敏度檢查要求。 菌種（1）騰黃微球菌Micrococcus luteus CMCC(B)28001（2）生孢梭菌Clostridium sporogenes CMCC(B)64941（3）白色念珠菌Candida albicans CM

12、CC(F)98001 操作.1 需氣菌、壓氣菌培養(yǎng)基用騰黃微球菌和生孢梭菌兩種菌檢查。取藤黃微球菌的營養(yǎng)瓊脂斜面新鮮培養(yǎng)物，加無菌0.9%氯化鈉溶液3ml，制成均勻的菌懸液，再以無菌0.9%氯化鈉溶液稀釋至與細(xì)菌濁度標(biāo)準(zhǔn)管相同的濃度，然后作10倍系列稀釋，制成1ml中含10100個菌（CFU）并計(jì)數(shù)。取生孢梭菌的需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基的新鮮培養(yǎng)物，用滅菌毛細(xì)管將其吸至滅菌離心管內(nèi)，離心，棄去上清液，取沉淀菌體用無菌0.9%氯化鈉溶液制成均勻菌懸液，吸取上述菌懸液，用無菌0.9%氯化鈉溶液稀釋，照上述方法制成1ml中含10100個菌并計(jì)數(shù)。.2 真菌培養(yǎng)基用白色念珠菌檢查取白色念珠菌的真菌瓊脂斜面

13、新鮮培養(yǎng)物，加無菌0.9%氯化鈉溶液3 ml，制成均勻的菌懸液，照藤黃微球菌項(xiàng)下方法稀釋制成1ml中含10100個菌并計(jì)數(shù)。.3 取藤黃微球菌的營養(yǎng)肉湯，生孢梭菌的需氣菌厭氣菌培養(yǎng)基的新鮮培養(yǎng)物，白色念珠菌的真菌培養(yǎng)基的新鮮培養(yǎng)物各1ml，用無菌0.9%氯化鈉溶液作10倍系列稀釋，制成1ml中含10100個菌并計(jì)數(shù)。.4 將藤黃微球菌的上述之一的稀釋液各1ml，分別接種至每管裝量為9ml的需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基3管，生孢梭菌的上述之一的稀釋液各1ml，分別接種至每管裝量為12ml的需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基3管，以未接種的培養(yǎng)基作對照，按規(guī)定的溫度培養(yǎng)5天，并逐日記錄結(jié)果。 結(jié)果判斷以每株菌接種后的培

14、養(yǎng)基不得少于2管呈現(xiàn)生長，即該培養(yǎng)基的靈敏度檢查符合要求。4.4 配制的培養(yǎng)基應(yīng)保存在涼暗處，一般不得超過2周，臨用前細(xì)菌和真菌培養(yǎng)基分別經(jīng)3035和2025培養(yǎng)不少于48小時和72小時，證明無菌生長后方可使用。4.5 需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基的指示劑氧化層不得超過培養(yǎng)基深度的1/5，否則經(jīng)水溶煮沸10分鐘，但只限加熱一次。無菌試驗(yàn)培養(yǎng)時間結(jié)束時，指示劑氧化層應(yīng)不超過培養(yǎng)基深度的1/2。5 對照用菌液的制備5.1 試驗(yàn)用菌種、菌種的復(fù)蘇、轉(zhuǎn)種與保存等均應(yīng)按照“抗生素微生物檢定法”標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程項(xiàng)下操作。5.2 金黃色葡萄球菌菌液用接種環(huán)取金黃色葡萄球菌Staphylococcus auteus CM

15、CC（B）26003的營養(yǎng)瓊脂斜面新鮮培養(yǎng)物少許，接種至需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基內(nèi)，在3035培養(yǎng)1618小時，用無菌0.9%氯化鈉溶液稀釋制成每1ml中含1100個菌。5.3 生孢梭菌菌液用接種環(huán)取生孢梭菌Clostridium sporogones CMCC(B)64941的需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基新鮮培養(yǎng)物少許，接種至相同的培養(yǎng)基內(nèi)，在3035培養(yǎng)1824小時，用無菌0.9%氯化鈉溶液稀釋制成每1ml中含1100個菌。5.4 白色念珠菌菌液用接種環(huán)取白色念珠菌Candida albicans CMCC(F)98001的真菌瓊脂培養(yǎng)基斜面培養(yǎng)物少許，接種至真菌培養(yǎng)基內(nèi)，在2025培養(yǎng)24小時，用無

16、菌0.9%氯化鈉溶液稀釋制成每1ml中含1100個菌。5.5 上述制備的菌液，一般當(dāng)日使用。6 抑細(xì)菌和抑真菌試驗(yàn)取每管裝量為9ml的需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基4管及真菌培養(yǎng)基2管，分別接種金黃色葡萄球菌、生孢梭菌、白色念珠菌10100個菌各兩管，其中1管加供試品規(guī)定量，按規(guī)定的溫度培養(yǎng)35日，如培養(yǎng)基各管24小時內(nèi)微生物生長良好，則供試品無抑菌作用。如加供試品的培養(yǎng)基管與未加供試品的培養(yǎng)基管對照比較，微生物生長微弱、緩慢或不生長，均判斷為供試品有抑菌作用。該供試品需用稀釋法或中和法、薄膜過濾法處理，消除供試品的抑菌性后，方可接種至培養(yǎng)基。7 檢查法 采用直接接種法和薄膜過濾法。前者適用于非抗菌作用

17、的供試品；后者適用于有抗菌作用的或大容量的供試品。7.1 供試品檢驗(yàn)量和培養(yǎng)基用量照中國獸藥典2005年版無菌檢查法項(xiàng)下表1、或表2、表3規(guī)定，備妥。除供試品外，培養(yǎng)基在移入緩沖間前應(yīng)先編號，并用0.1%新潔爾滅或酒精棉擦拭瓶(管)外壁，然后連同其他用具(包括無菌衣、帽、口罩等)移入緩沖間，開無菌間紫外燈和空氣過濾裝置開關(guān)并使其工作在1小時以上。7.2 操作人員用肥皂、水清洗雙手，關(guān)閉紫外光燈，進(jìn)入緩沖間，換拖鞋，再用碘酒棉、75%乙醇棉球擦手、穿戴衣、帽、口罩。將所需物品剝?nèi)ヅＦぜ?，移入無菌間，每次試驗(yàn)中所用物品必須計(jì)劃好，并有備用物。7.3 供試品外部消毒 粉針劑、油劑等鋁蓋壓封的橡皮塞小

18、瓶先用75%乙醇棉球擦拭外壁及瓶塞，待干，用滅菌鑷子剔去鋁蓋上的鋁質(zhì)小圓片，過火焰數(shù)次。 安瓿針劑先用碘酒棉球?qū)碴惩獠坎潦脺缇?，用砂輪或滅菌銼輕割安瓿頸部(便于折開安瓿)，再用75%乙醇棉球?qū)⒌饩撇羶?，待干?其他供試品容器表面或外包裝可參照上述用適當(dāng)消毒液擦拭或浸沒后以無菌的方式取內(nèi)容物。7.4 直接接種法 用滅菌鑷取出注射器，在火焰旁將針芯插入針管并安上針頭，供試品瓶蓋和注射器針頭均應(yīng)迅速通過火焰數(shù)次；當(dāng)供試品為粉針劑，瓶蓋為橡膠塞時，用注射器吸收規(guī)定的溶劑在已消毒好的橡膠塞中心位置刺入小瓶加入溶劑，使溶解，混勻后吸出溶液。如為注射液、供角膜創(chuàng)傷及手術(shù)用的滴眼劑或滅菌溶液等可直接用

19、注射器吸取藥液。按規(guī)定或需滅活的供試品可用滅活劑溶解，將瓶內(nèi)供試液抽出稀釋至規(guī)定的濃度。需加入空氣加壓后便于抽出的供試品，應(yīng)用注射器對著火焰抽取空氣加入，抽取瓶中液體時，應(yīng)將供試品倒置并使針頭在液面下。供試品如為供直接分裝成注射用無菌粉末的原料藥(大包裝粉針劑)，取樣時為縮短暴露時間，應(yīng)有兩人操作。將經(jīng)置緩沖間中用0.1%新潔爾滅抹凈外壁且經(jīng)紫外線照射1小時的大包裝瓶移入操作間(臺)，除去鋁蓋，用75%乙醇棉擦拭瓶口橡膠塞外壁和瓶口縫隙，待干，戴好醫(yī)用消毒手套，在火焰旁小心揭開瓶塞，用滅菌長柄不銹鋼藥匙取出規(guī)定量的樣品，置經(jīng)1/1000天平稱定重量的滅菌試管中，密塞待用，立即蓋好大包裝瓶塞，用

20、橡皮膠布及時封口，再用封箱紙包扎瓶口。從上述待無菌檢查用的樣品試管中，以無菌操作稱取一定重量，按各該藥品項(xiàng)下的規(guī)定制成溶液，依法接種于上述培養(yǎng)基中。供試品如為外科敷料，取經(jīng)紫外線照射后的供試品4個包裝，以無菌操作拆包裝，于不同部位分別剪取約100mg或1×3cm2的供試品11份，縫合線取最小包裝5個，拆開包裝，用滅菌鑷子共取11股，接種足以浸沒供試品的適量培養(yǎng)基中。供試品如為滅菌醫(yī)用器具，依照供試品大小，形狀不同，用滅菌鑷取供試品11個，接種于足以浸沒供試品的適量培養(yǎng)基中或用滅菌注射器吸取無菌0.9%氯化鈉溶液各40ml，分別沖洗內(nèi)壁(輸血、輸液袋)收集各種沖洗液混合，按薄膜過濾法檢

21、查。供試品如為放射性藥品，用適當(dāng)滅菌用具取供試品1瓶(支)，接種于裝量為7.5ml的培養(yǎng)基中，每管接種0.2ml。 操作用適當(dāng)滅菌用具，取上述制備妥的供試品在近火焰上以右手握拳，小指為主撥開培養(yǎng)基管的塞子，管口通過火焰，移至火焰下側(cè)，沿著培養(yǎng)基管壁分別接種于需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基6管，(其中1管于操作結(jié)束后移至接種室接種金黃色葡萄球菌對照菌液1ml)，真菌液培養(yǎng)基5管。輕輕搖動使勻。需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基在3035培養(yǎng)，真菌培養(yǎng)基在2025培養(yǎng)7日，培養(yǎng)期間應(yīng)逐日檢查是否有菌生長(陽性對照在24小時內(nèi)應(yīng)有菌生長)，并填寫檢查記錄表。如在加入供試品后，培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁，培養(yǎng)7日后，不能從外觀上判斷無微

22、生物生長，可取該培養(yǎng)液適量接種于同種新鮮培養(yǎng)基中或斜面上，繼續(xù)培養(yǎng)，細(xì)菌培養(yǎng)2日，真菌培養(yǎng)3日，觀察是否再現(xiàn)渾濁或斜面上有無菌落生長，在接種的同時，取培養(yǎng)液少量，涂片制成染色標(biāo)本，用顯微鏡觀察是否有菌生長。7.5 薄膜過濾法依照所用的薄膜濾器種類不同，操作方法各異，就目前普遍使用的有二:一種為薄膜過濾系統(tǒng)，一種為封閉式過濾器?，F(xiàn)分述于下: 過濾系統(tǒng)的安裝如采用STV2型薄膜過濾器時，擰緊薄膜過濾器的金屬底座螺母，將其固定在排液金屬架上，用耐壓橡皮管將排液金屬架的排液口與抽濾瓶塞中長的玻璃管相連，用螺旋夾擰緊瓶塞的另一個排氣管，本將抽濾瓶的空氣過濾裝置的玻璃管與真空泵相連。采用其他薄膜過濾系統(tǒng)時

23、，按其使用說明書進(jìn)行操作。如采用封閉式過濾器時，將一次性集菌培養(yǎng)器(依供試品種類不同選擇適宜的集菌培養(yǎng)器如抗生素類采用抗生素專用集菌培養(yǎng)器)放于電腦集菌儀的架上，而塑膠軟導(dǎo)管放于電腦集菌儀的蠕動泵的管槽內(nèi)，其進(jìn)液導(dǎo)管的雙芯針頭，插入供試液或沖洗液等容器的塞上。 操作.1 如供試品有抗菌作用，按中國獸藥典2000年版無菌檢查法表1或表3規(guī)定量取供試品，照直接接種法供試品制備項(xiàng)下，吸取供試液加入無菌0.9%氯化鈉溶液或其他適宜的溶液至少100ml具塞的瓶中，混勻。采用薄膜過濾器時，通過火焰，將瓶塞打開倒入薄膜濾器內(nèi)，立即開動真空泵將供試液抽干，然后用無菌0.9%氯化鈉溶液或其他適宜的溶劑沖洗濾膜，

24、每沖洗一次需將液體抽干，沖洗次數(shù)及沖洗液量供試品種類及量而異，至陽性對照菌正常生長為度，打開抽氣瓶塞中的排氣管的螺旋夾，將過濾器從排液管架取下，松動底座的螺母，取下濾膜部分，用滅菌鑷將濾膜取出，放入火菌雙碟中，用火菌剪刀將濾膜剪成3等份，分別加入需氣菌、厭氣菌和真菌培基中。采用封閉式過濾器時，將雙芯針頭插至供試液容器塞上，開動電腦蠕動泵電源，使藥液均勻通過3個一組的集菌培養(yǎng)器，待藥液排盡，關(guān)閉電源，將針頭取下插至無菌0.9%氯化鈉溶液或其他適宜的沖洗溶液的容器塞上，沖洗集菌培養(yǎng)器的濾膜，照上述操作要求，沖洗次數(shù)及量以陽性對照管細(xì)菌生長為度。關(guān)閉電源，將集菌培養(yǎng)器上排氣孔膠帽取下，套于集菌培養(yǎng)器底部的排液管口上；