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文檔簡(jiǎn)介
1、生物化學(xué)學(xué)習(xí)指導(dǎo)及習(xí)題第一章 蛋白質(zhì)化學(xué)第二章 核酸化學(xué)第三章 酶 學(xué)第四章 維生素和輔酶第五章 糖代謝第六章 新陳代謝總論與生物氧化第七章 脂類代謝第八章 氨基酸代謝第九章 核酸的生物合成第十章 蛋白質(zhì)的生物合成第十一章 代謝的相互關(guān)系及調(diào)節(jié)控制二00九年三月8第一章 蛋白質(zhì)化學(xué)I 主要內(nèi)容一、蛋白質(zhì)的生物學(xué)意義 蛋白質(zhì)是生物體內(nèi)最為重要的有機(jī)化學(xué)物質(zhì)之一,它幾乎參與了生物體所有的生命活動(dòng),如生物體的構(gòu)成、機(jī)體的運(yùn)動(dòng)、化學(xué)催化、機(jī)體的免疫保護(hù)、生物遺傳信息的傳遞與表達(dá)等等,可以說(shuō)蛋白質(zhì)是一切生命活動(dòng)的重要支柱,沒(méi)有蛋白質(zhì)就沒(méi)有生命現(xiàn)象的存在,因此,蛋白質(zhì)化學(xué)是生物化學(xué)中一個(gè)重要的研究方面。二
2、、 蛋白質(zhì)的元素組成 蛋白質(zhì)是由C、H、O、N、S等幾種元素構(gòu)成,其中C 50-55%、H 6-8%、O 20-30%、 N 15-17%、S 0-4%,且含量基本相同,因此通過(guò)測(cè)定蛋白質(zhì)樣品中元素含量就可以推測(cè)出樣品中蛋白質(zhì)的含量。三、 蛋白質(zhì)的氨基酸組成 (一)氨基酸的結(jié)構(gòu)及特點(diǎn) 一般的蛋白質(zhì)都是由20種氨基酸構(gòu)成,這些氨基酸都是在蛋白質(zhì)的合成過(guò)程中直接加進(jìn)去的,并有專門的遺傳密碼與其對(duì)應(yīng),這些構(gòu)成蛋白質(zhì)的基本氨基酸稱為天然氨基酸(通用氨基酸)。天然氨基酸具有如下特點(diǎn): 1. 20種天然氨基酸均有專門的遺傳密碼與其對(duì)應(yīng),它們?cè)诘鞍踪|(zhì)的合成中是直接加上去的。 2. 除甘氨酸外,其它氨基酸至少
3、含有一個(gè)手性碳原子。 3. 除脯氨酸外,其它氨基酸均為a-氨基酸。 4. 氨基酸雖有D、L型之分,但存在于天然蛋白質(zhì)中的氨基酸均為L(zhǎng)-型氨基酸。 (二)天然氨基酸的分類 1.根據(jù)氨基酸分子中氨基和羧基的相對(duì)數(shù)量進(jìn)行分類 2.根據(jù)氨基酸分子結(jié)構(gòu)分類 3.根據(jù)氨基酸側(cè)鏈基團(tuán)極性分類 氨基酸根據(jù)其側(cè)鏈基團(tuán)在近中性的pH條件下是否帶電荷以及帶電荷的種類分成四類:非極性氨基酸、極性不帶電荷氨基酸、極性帶正電荷氨基酸、極性帶負(fù)電荷氨基酸。 (三)稀有蛋白質(zhì)氨基酸 這部分主要是指雖然在蛋白質(zhì)中有所存在,含量卻較少的一類氨基酸。蛋白質(zhì)中的稀有氨基酸是在蛋白質(zhì)合成后的加工過(guò)程中通過(guò)化學(xué)的方法在天然氨基酸的基礎(chǔ)上
4、增加某些基團(tuán)而形成的。 (四)非蛋白質(zhì)氨基酸 非蛋白質(zhì)氨基酸是細(xì)胞中不參與天然蛋白質(zhì)合成的一類氨基酸。 (五)氨基酸的重要理化性質(zhì) 1. 一般理化性質(zhì) 2. 氨基酸的酸堿性質(zhì)與等電點(diǎn) 3. 氨基酸的主要化學(xué)性質(zhì) (1)茚三酮反應(yīng) (2)桑格反應(yīng)(Sanger reaction) (3)埃德曼反應(yīng)(Edman reaction ) 4. 氨基酸的光學(xué)性質(zhì) 由于氨基酸分子中除甘氨酸外都有不對(duì)稱碳原子的存在,因此,天然氨基酸中除甘氨酸外均有旋光現(xiàn)象的存在。20種天然氨基酸在可見(jiàn)光范圍內(nèi)都沒(méi)有明顯的光吸收現(xiàn)象,但在紫外區(qū)有三種氨基酸確有明顯的光吸收作用。五、蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu) 為研究方便,人們將蛋白質(zhì)結(jié)
5、構(gòu)分成不同的層次,1952年Linderstron-Lang 將蛋白質(zhì)分成三個(gè)結(jié)構(gòu)層次,1953年Bernal又提出四級(jí)結(jié)構(gòu),此后人們又在結(jié)構(gòu)與功能的研究中提出了超二級(jí)結(jié)構(gòu)及結(jié)構(gòu)域概念,因此,目前,目前人們認(rèn)為蛋白質(zhì)可以分成六個(gè)結(jié)構(gòu)層次進(jìn)行研究。 (一)蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu) 根據(jù)1969年國(guó)際理論化學(xué)和應(yīng)用化學(xué)協(xié)會(huì)(IUPAC)的規(guī)定蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)(Primary structure)是指蛋白質(zhì)分子中氨基酸的排列順序。 氨基酸與氨基酸之間通過(guò)酰胺鍵相連構(gòu)成的化合物稱為肽或蛋白質(zhì),通常構(gòu)成肽鏈的氨基酸數(shù)目在10個(gè)以下的稱為寡肽,10以上者稱為多肽或蛋白質(zhì)。 蛋白質(zhì)與多肽鏈的區(qū)別: (1)氨基酸組成
6、數(shù)量。一般都在100個(gè)以上,分子量在10,000以上。 (2)具有特定的空間結(jié)構(gòu)。 (3)結(jié)構(gòu)與功能之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系。 (二)蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu) 蛋白質(zhì)多肽鏈主鏈本身、局部的、有規(guī)則的空間排布方式蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)。蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)主要包括a-螺旋結(jié)構(gòu)、b-折疊、b-轉(zhuǎn)角、無(wú)規(guī)則卷曲(自由回轉(zhuǎn)) 1、蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的主要類型 a-螺旋結(jié)構(gòu)是美國(guó)麻省理工學(xué)院的Pauling、 Corey 在 1953 年對(duì)動(dòng)物毛發(fā)結(jié)構(gòu)的X- 光衍射分析中發(fā)現(xiàn)的一種蛋白結(jié)構(gòu), a- 螺旋結(jié)構(gòu)有左旋和右旋兩種。 多肽鏈主鏈圍繞其中心軸盤(pán)繞而成的一種螺旋管狀結(jié)構(gòu),螺旋結(jié)構(gòu)每螺旋上升一圈需要3.6個(gè)氨基酸殘基,垂直上升0.5
7、4nm;螺旋結(jié)構(gòu)中每個(gè)氨基酸殘基上的氨基氫與其后第四個(gè)氨基酸殘基的羰基氧形成氫鍵,其氫鍵的走向與螺旋軸平行。 b-折疊結(jié)構(gòu)也是Pauling和Corey在蠶絲絲心蛋白中發(fā)現(xiàn)的一種蛋白結(jié)構(gòu)。 b-折疊結(jié)構(gòu)是由幾條多肽鏈或一條多肽鏈的幾個(gè)片段平行折疊形成的一種片層結(jié)構(gòu);相鄰的主鏈之間借助于鏈內(nèi)或鏈間氫鏈相連形成片層,主鏈中相鄰氨基酸殘基的側(cè)鏈基團(tuán)上下交替排列在片層的上方或下方;b-折疊結(jié)構(gòu)分平行或反平行兩種結(jié)構(gòu)。 b- 轉(zhuǎn)角是指多肽鏈走向發(fā)生180°回折,其轉(zhuǎn)角處的結(jié)構(gòu)。 無(wú)規(guī)則卷曲(自由回轉(zhuǎn)) 2、超二級(jí)結(jié)構(gòu)與結(jié)構(gòu)域 (1)超二級(jí)結(jié)構(gòu)(Supersecodary structure)是
8、指由兩個(gè)或多個(gè)二級(jí)結(jié)構(gòu)單元被長(zhǎng)度不等,走向不規(guī)則的連接肽彼此相連,形成的有規(guī)律的、在空間上可以辨認(rèn)的二級(jí)結(jié)構(gòu)組合體稱為超二級(jí)結(jié)構(gòu)。超二級(jí)結(jié)構(gòu)根據(jù)其復(fù)雜程度分為簡(jiǎn)單超二級(jí)結(jié)構(gòu)和復(fù)雜超二級(jí)結(jié)構(gòu)兩種類型。由兩個(gè)或少數(shù)構(gòu)象單元經(jīng)連接肽相連形成的超二級(jí)結(jié)構(gòu)稱簡(jiǎn)單超二級(jí)結(jié)構(gòu),一般包括a-a corner)、a-發(fā)夾 (a-hairpin)、 b-發(fā)夾(b-hairpin)、拱形結(jié)構(gòu)(arch)。 由多個(gè)構(gòu)象單元或由簡(jiǎn)單的超二級(jí)結(jié)構(gòu)進(jìn)一步組合形成的有規(guī)律的在空間上可辯識(shí)的結(jié)構(gòu),具體可分為a-螺旋超螺旋、 bXb結(jié)構(gòu)、 b-迂回、 b-折疊桶四種形式。(2)結(jié)構(gòu)域(Structural domain) 也叫轄
9、區(qū),是指存在于球狀蛋白質(zhì)分子內(nèi)部由相鄰的多個(gè)二級(jí)結(jié)構(gòu)單元彼此相連形成的球狀亞單位。結(jié)構(gòu)域是獨(dú)立的結(jié)構(gòu)單位、功能單位和獨(dú)立的結(jié)構(gòu)形成單位。結(jié)構(gòu)域主要包括a-結(jié)構(gòu)域、b-折疊域、a+b 結(jié)構(gòu)域和a/b 結(jié)構(gòu)域。 結(jié)構(gòu)域作為獨(dú)立的結(jié)構(gòu)單位,具有內(nèi)在的穩(wěn)定性,結(jié)構(gòu)域之間通過(guò)柔性肽段相連。多數(shù)蛋白質(zhì)具有多個(gè)結(jié)構(gòu)域,其結(jié)構(gòu)域可能相同,如磷酸丙糖異構(gòu)酶具有兩個(gè)相似的結(jié)構(gòu)域,也可能不同,如丙酮酸激酶。(三)蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu) 在二級(jí)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上,多肽鏈進(jìn)一步盤(pán)繞折疊形成的球狀蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)稱為蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)。換言之是指構(gòu)成球狀蛋白質(zhì)的多肽鏈中所有原子和基團(tuán)的空間排布。它是由不同的二級(jí)結(jié)構(gòu)單元按照一定的方式彼此組合
10、而成的一種蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)。 (四)蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu) 由兩個(gè)及其以上具有三級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽鏈鏈相互聚集形成的蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)稱為蛋白質(zhì)四級(jí)結(jié)構(gòu)。四級(jí)結(jié)構(gòu)形成的意義:四級(jí)結(jié)構(gòu)賦予蛋白質(zhì)更加復(fù)雜的結(jié)構(gòu),以便執(zhí)行更復(fù)雜的功能如在酶類中,除功能簡(jiǎn)單的水解酶,其它酶大多數(shù)是寡聚蛋白。通過(guò)亞基間的相互作用,可以對(duì)酶或其它功能蛋白的活性進(jìn)行調(diào)節(jié)。催化相關(guān)代謝的酶形成多酶復(fù)合物,可以提高酶促反應(yīng)的速度??梢缘糜么笮 ⒎N類有限的亞基組合成結(jié)構(gòu)復(fù)雜的大分子蛋白質(zhì)。可以降低細(xì)胞內(nèi)的滲透壓。節(jié)約編碼的信息量。 (五)維持蛋白質(zhì)空間構(gòu)象的作用力 在不同蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中起主要作用的穩(wěn)定因素不同,在蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)中起主要穩(wěn)定作用的因素是共
11、價(jià)鍵;在蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)中起主要作用的穩(wěn)定因素是氫鍵;在蛋白質(zhì)三、四級(jí)結(jié)構(gòu)中起最主要作用的因素是疏水力。五、蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系 (一)蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系 蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)是決定蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)及其生物學(xué)功能的重要基礎(chǔ),在細(xì)胞內(nèi)特定的環(huán)境條件下,蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)決定蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu),蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)通過(guò)決定蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的方式間接地決定和影響蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能。蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)與生物進(jìn)化的關(guān)系、蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)與分子病的關(guān)系是生物化學(xué)中研究較為清楚的兩個(gè)例子。 (二)蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)直接決定和影響蛋白質(zhì)的功能,蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的變化必然導(dǎo)致蛋白質(zhì)生物功能的改變,如核糖核酸
12、酶空間結(jié)構(gòu)變化與功能關(guān)系、血紅蛋白空間結(jié)構(gòu)變化與功能關(guān)系以及調(diào)節(jié)酶結(jié)構(gòu)變化與酶活性變化等。II 習(xí) 題一、 名詞解釋 端與端: 蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu): 氨基酸殘基: n=3.613: 肽單位、肽平面: 寡聚蛋白: 蛋白質(zhì)變性:8超二級(jí)結(jié)構(gòu)與結(jié)構(gòu)域:二、是非題 判斷下列各句話意思的正確與否,正確的在題后括號(hào)內(nèi)畫(huà)“”,錯(cuò)誤 的畫(huà)“×”,如果是錯(cuò)誤的,請(qǐng)說(shuō)明其理由1.組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸,它們至少含有一個(gè)不對(duì)稱碳原子。2.氨基酸立體異構(gòu)體雖有-型和-型之分,但在蛋白質(zhì)中所發(fā)現(xiàn)的氨基酸均為型。3.等摩爾的-la和-la混合液,不能引起偏振光平面的偏轉(zhuǎn)。4.從蛋白質(zhì)酸水解液中可以得到所有20種天
13、然氨基酸。5.氨基酸在水溶液或固體狀態(tài)是以兩性離子形式存在的。6.內(nèi)部氫鍵的形成的是驅(qū)使蛋白質(zhì)折疊的主要力量。7.在外界環(huán)境一定的條件下,蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)主要是由它的一級(jí)結(jié)構(gòu)所決定的。8.原來(lái)溶于水的蛋白質(zhì),經(jīng)加熱后從水中析出主要是因?yàn)榈鞍踪|(zhì)的空間結(jié)構(gòu)破壞,原來(lái)位于分子內(nèi)部的疏水氨基酸外露的結(jié)果。9.天然蛋白質(zhì)中多肽鏈的螺旋構(gòu)象都是右旋的。10.SDS聚丙烯酰胺電泳測(cè)定白質(zhì)分子量的方法是根椐蛋白質(zhì)所帶電荷的不同。11.某一蛋白質(zhì)樣品,當(dāng)其酸性氨基酸數(shù)目等于堿性氨基酸數(shù)目時(shí),此蛋白質(zhì)樣品的等電點(diǎn)pH是。12.在膠原蛋白質(zhì)中,由于組分中主要是甘氨酸、脯氨酸和羥脯氨酸,它們?cè)趨⒂陔逆I形成后,不再含有
14、可供形成氫鍵的氫原子,故不能形成螺旋,膠原蛋白中多肽鏈構(gòu)象主要是折疊結(jié)構(gòu)。13.血紅蛋白和細(xì)胞色素都是含鐵卟啉的色蛋白,兩者的功能雖然不同,但它們的作用機(jī)制相同,都是通過(guò)鐵離子化合價(jià)的變化來(lái)實(shí)現(xiàn)的。14用層析技術(shù)分離氨基酸是根據(jù)各種氨基酸的極性不同。15用凝膠電泳技術(shù)分離蛋白質(zhì)是根據(jù)各種蛋白質(zhì)的分子大小和電荷不同。16從細(xì)胞內(nèi)提取出某種物質(zhì),用羧肽酶A不能使其水解,與茚三酮反應(yīng)呈陰性,因此可以肯定地判斷它是非肽物質(zhì)。17蛋白質(zhì)構(gòu)象的變化伴隨自由能的變化,最穩(wěn)定的構(gòu)象自由能最低。18剛性平面結(jié)構(gòu)的肽單位是蛋白質(zhì)主鏈骨架的重復(fù)單位。19蛋白質(zhì)分子的亞基就是蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)域。20脯氨酸不能維持螺旋,凡
15、有脯氨酸的部位肽鏈都發(fā)生彎轉(zhuǎn)。21有機(jī)溶劑引起蛋白質(zhì)變性的主要原因之一是降低介質(zhì)的介電常數(shù)。22血紅蛋白比肌紅蛋白攜氧能力高,這是因?yàn)樗卸鄠€(gè)亞基。23蛋白質(zhì)和酶原的激活過(guò)程說(shuō)明蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)變化與蛋白質(zhì)的功能密切相關(guān)。24肌紅蛋白和血紅蛋白的和鏈有共同的三級(jí)結(jié)構(gòu)。 25利用鹽濃度的不同可以提高或降低蛋白質(zhì)的溶解度。三、填空題 組成蛋白質(zhì)的氨基酸有20種,其中,必須氨基酸有 種,即 。通用氨基酸除 外都有旋光性; 和 分子量比較小而且不合硫,在折疊的多肽鏈中能形成氫鍵; 在穩(wěn)定許多蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中起重要作用,因?yàn)樗蓞⑴c形成鏈內(nèi)和鏈間的共價(jià)鍵。 具有非極性側(cè)鏈且是生成酪氨酸的前體。氨基酸結(jié)構(gòu)上的
16、共同點(diǎn)是:(1) ,(2) ,(3) 。在蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)測(cè)定中,常用來(lái)做端分析的方法有 , 和 三種。 有一蛋白質(zhì)經(jīng)末端分析知道有兩個(gè)末端,電泳均顯示兩條帶,說(shuō)明該蛋白質(zhì)含有 亞基,另一種蛋白質(zhì)分子用羥基乙醇處理,在酸性堿性條件下均顯示一條帶,說(shuō)明該蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是 。蛋白質(zhì)的主鏈構(gòu)象單元有 , , , 四種。鹽濃度低時(shí),鹽的加入使蛋白質(zhì)的溶解度 ,稱為 現(xiàn)象;鹽濃度高時(shí),鹽的加入使蛋白質(zhì)的溶解度 ,稱為 現(xiàn)象。在典型的螺旋結(jié)構(gòu)中,一個(gè)氨基酸的氨基氫與其前面第 個(gè)氨基酸殘基的羰基氧形成氫鍵,在此封閉體系內(nèi),共含有 個(gè)主鏈原子。9在正常生理?xiàng)l件下(pH7),蛋白質(zhì)分子中 和 的側(cè)鏈部分帶正
17、電荷。102,4二硝基氟苯(DNFB或FDNB)與氨基酸作用可生成黃色的 ,簡(jiǎn)稱 。11球蛋白分子中 基團(tuán)排列在外部, 基團(tuán)排列在分子的內(nèi)部。121953年英國(guó)科學(xué)家 等人首次完成牛胰島素 的測(cè)定,證明牛胰島素是由 條多肽鏈,共 個(gè)氨基酸組成。13生活在西藏高原的人血液中,2,3二磷酸甘油酸的濃度比一般人 。14用紫外光吸收法測(cè)定蛋白質(zhì)含量的依據(jù)是所有的蛋白質(zhì)分子中都含有 、 和 三種氨基酸。15 1965年中國(guó)科學(xué)家完成了由51個(gè)氨基酸殘基組成的 合成。16目前己知的超二級(jí)結(jié)構(gòu)有 、 、 和 四種基本形式。l7維持蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)的作用力是 , , 和鹽鍵。18膠原蛋白的基本組成單位是由 組成
18、的原膠原蛋白,再經(jīng)多次聚合形 。19在pH6.0時(shí)將G1y,A1a,G1u,Lys,Arg和Ser的混合物進(jìn)行紙電泳,向陽(yáng)極移動(dòng) 快的是 ;向陰極移動(dòng)最快的是 和 ;移動(dòng)很慢接近原點(diǎn)的是 , 和 。 20測(cè)定肽段常用的方法是Edman化學(xué)降解法,Edman試劑是 。22去污劑如十二烷基磺酸鈉(SDS)使蛋白質(zhì)變性是由于SDS能破壞 使疏水基團(tuán)暴露到介質(zhì)中。23研究蛋白質(zhì)構(gòu)象的方法很多,但主要是應(yīng)用 。四、選擇題在生理H條件下,帶正電荷的氨基酸是: Ala Try Trp Lys下列哪些氨基酸只含非必須氨基酸: 芳香族氨基酸 堿性氨基酸 酸性氨基酸 支鏈氨基酸下列哪些蛋白質(zhì)是不溶于水的? 血紅蛋
19、白 酶 抗體 膠原蛋白細(xì)胞色素氧化酶除含有血色素輔基外,還含有: 銅 鐵 鎂 鋅蛋白質(zhì)在280nm有最大光吸收,主要是因?yàn)槠渲泻校?Phe Tyr His Trpp在pH附近的是: Ser Glu Asn His下列哪種蛋白質(zhì)含有三股螺旋: 角蛋白 血紅蛋白 原膠原蛋白 絲心蛋白維持蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的主要因素是: 疏水作用 氫鍵 范德華作用力 鹽鍵茚三酮與脯氨酸反應(yīng)時(shí),在濾紙層析譜上呈現(xiàn): 藍(lán)紫色 紅色 黃色 綠色10在效應(yīng)物作用下,蛋白質(zhì)產(chǎn)生的變構(gòu)(或別構(gòu))效應(yīng)是由于蛋白質(zhì)的 A 一級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化 B 構(gòu)型發(fā)生變化 C 構(gòu)象發(fā)生變化D 氨基酸序列發(fā)生變化11下列具有協(xié)同效應(yīng)的蛋白質(zhì)是:
20、A 肌紅蛋白B 血紅蛋白 C 絲心蛋白D 彈性蛋白12同源蛋白是指: A 來(lái)源相同的各種蛋白質(zhì) B 來(lái)源不同的同一種蛋白質(zhì) C 來(lái)源相同的同一種蛋白質(zhì) D 來(lái)源不同的各種蛋白質(zhì)13如下哪些敘述是正確的: 肽鍵中的具有部分雙鍵性質(zhì); 肽單位中的六個(gè)原子處在一個(gè)平面上; 兩個(gè)相鄰近的碳呈反式分布; 的二面角在0180°內(nèi)可以自由旋轉(zhuǎn)。14膠原蛋白中含量最多的氨基酸是: A 甘氨酸和丙氨酸 B 脯氨酸和羥脯氨酸C 谷氨酸和天冬氨酸 D 精氨酸和賴氨酸15蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)穩(wěn)定機(jī)制中,包括下列哪種氨基酸與賴氨酸殘基的相互作用。A G1u B ArgC His D Asp五、問(wèn)答與計(jì)算1什么是蛋白
21、質(zhì)的一、二、三、四級(jí)結(jié)構(gòu)?主要的穩(wěn)定因素各是什么? 2什么是蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)(pI)?為什么說(shuō)在等電點(diǎn)時(shí)蛋白質(zhì)的溶解度最低?3將固體氨基酸溶于pH7的水中所得的氨基酸溶液,有的pH大于7,有的小于7,這種現(xiàn)象說(shuō)明什么?4根據(jù)下列信息推斷含等量Met,Phe,Asp,Ser,Thr的五肽序列: (1)用BrCN處理五肽,釋放出肽段和一個(gè)游離的高絲氨酸; (2)用胰凝乳蛋白酶處理五肽得到兩個(gè)碎片,酸性較強(qiáng)的碎片含甲硫氨酸;(3)用羧肽酶A處理五肽,迅速放出Ser,隨后放出Thr。5指出用電泳技術(shù)分離下列物質(zhì),pH是多少時(shí)最合適?(1) 血清清蛋白(pI4.9)和血紅蛋白(pI6.8);(2) 肌紅蛋
22、白(pI7.0)和胰凝乳蛋白梅(pI9.5);(3) 卵清蛋白(pI4.6)、血清清蛋白和肽酶(pI5.0)。 610ml溶液內(nèi)含有某化合物5mg,從此溶液中取2ml稀釋至20ml,取此溶液1.5ml置于0.5cm光徑的比色杯中,測(cè)得280nm處的O.D值為0.4,設(shè)此化合物的摩爾消光系數(shù)為1×104,.為500,求此化合物的濃度? 7某氨基酸的水溶液pH值為6.0,問(wèn)此氨基酸的等電點(diǎn)是大于6,等于6,還是小于6? 8用畫(huà)圖法比較肌紅蛋白和血紅蛋白氧合曲線的差異,并說(shuō)明為什么? 2,3二磷酸甘油酸(DPG)與血紅蛋白對(duì)氧的親和力有什么影響9舉例說(shuō)明蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系?10用你學(xué)過(guò)
23、的蛋白質(zhì)理化性質(zhì),設(shè)計(jì)一條由毛發(fā)水解制備胱氨酸的流程圖,并說(shuō)明其原因。III習(xí)題答案一、名詞解端與端:多肽或蛋白質(zhì)分子中含有游離-NH2的一端稱端,含有游離-COOH的一端稱C端。蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu):蛋白質(zhì)分子中氨基酸的排列順序稱蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)。氨基酸殘基:蛋白質(zhì)分子中的氨基酸組成單位稱氨基酸殘基,由于氨基酸在形成肽鍵的過(guò)程失去了一些基團(tuán),已經(jīng)不是完成的分子故名。n=3.613:該式是典型右手-螺旋結(jié)構(gòu)的表達(dá)式,式中3.6表示每螺旋上升一圈需要的氨基酸殘基數(shù),下標(biāo)13表示由氫鍵形成的封閉體系中的主鏈原子數(shù)。肽單位、肽平面:構(gòu)成肽鏈骨架的結(jié)構(gòu)重復(fù)單位稱肽單位,組成肽單位的六個(gè)原子組成一個(gè)平面,該平面
24、稱肽平面。寡聚蛋白:由二個(gè)或二個(gè)以上具有三級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽鏈構(gòu)成的蛋白質(zhì)分子稱寡聚蛋白。蛋白質(zhì)變性:由于酸、堿、變性劑或高溫等理化因素影響,使蛋白質(zhì)分子有規(guī)律的空間結(jié)構(gòu)受到破壞的現(xiàn)象稱蛋白質(zhì)變性。8超二級(jí)結(jié)構(gòu)與結(jié)構(gòu)域: 兩個(gè)或多個(gè)二級(jí)結(jié)構(gòu)單元被長(zhǎng)度不等,走向不規(guī)則的連接肽彼此相連,形成的有規(guī)律的、在空間上可以辨認(rèn)二級(jí)結(jié)構(gòu)組合體稱為超二級(jí)結(jié)構(gòu)。結(jié)構(gòu)域也叫轄區(qū),是指存在于球狀蛋白質(zhì)分子內(nèi)部由相鄰的多個(gè)二級(jí)結(jié)構(gòu)單元彼此相連形成的球狀亞單位。二、是非題1.錯(cuò)2.對(duì)3.對(duì)4.錯(cuò)5. 對(duì)6. 錯(cuò)7.對(duì)8.對(duì)9.錯(cuò)10. 對(duì)11.錯(cuò)12.錯(cuò)13.錯(cuò)14.對(duì)15.對(duì)16.錯(cuò)17.對(duì)18.對(duì)19.錯(cuò)20.對(duì)21.對(duì)
25、22.對(duì)23.對(duì)24.對(duì)25.對(duì)三、填空題 8,Thr、Met、Val、Phe、Trp、Lys、Leu、IIeGly;Pro、Hyp;二硫鍵;Phe(1) -氨基酸 ,(2)除Gly外至少含有一個(gè)手性碳原子,(3) 除Gly外都有D、L型立體異構(gòu)體DNFP法,Edman降解法,丹磺酰氯法(DNS-CI法)兩種亞基,由一條多肽鏈構(gòu)成-螺旋,-折疊,-轉(zhuǎn)角,松散片段增加,鹽溶;降低,鹽析3.6,139Lys,Arg102,4二硝基苯氨基酸,DNP11親水基團(tuán),疏水基團(tuán)12Sanger,一級(jí)結(jié)構(gòu),兩,5113高14Phe、Trp、Tyr15牛胰島素16-螺旋超螺旋、X、-迂回、-折疊桶l(fā)7疏水力,范
26、德華力,氫鍵18原膠原蛋白分子,膠原纖維19G1u,Lys、Arg,G1y,A1a,Ser20苯異硫氰酸22疏水力23X-光衍射分析技術(shù)四、選擇題.DC. 、.10C11B12B 13 14B 15D五、問(wèn)答與計(jì)算1答案(略)2答案(略)3答:氨基酸既帶有氨基也有羧基,是兩性電解質(zhì)。當(dāng)固體的氨基酸溶于純水中時(shí),酸性基團(tuán)解離出質(zhì)子使溶液變?yōu)樗嵝?,堿性基團(tuán)接受質(zhì)子使溶液變?yōu)閴A性。在20種通用氨基酸中,一氨基一羧基的氨基酸溶于水后溶液基本為中性,一氨基二羧基的氨基酸溶于水后溶液pH小于7為酸性,二氨基一羧基的氨基酸,如Lys、Arg溶于水后溶液pH大于7為堿性。4答:五肽的氨基酸順序是MetAspP
27、heThrSer。用BrCN處理得到一個(gè)游離的高絲氨酸說(shuō)明N末端是Met。胰凝乳蛋白酶水解得到兩個(gè)片段,酸性強(qiáng)的含有甲硫氨酸表明:MetAspPhe;羧肽酶A作用結(jié)果說(shuō)明C端是ThrSer。所以該五肽氨基酸順序是:MetAsPPheThrSer。5答:電泳分離技術(shù)是根據(jù)物質(zhì)帶電荷的多少達(dá)到分離的目的。待分離的物質(zhì)所帶電荷的差異越大分離效果就越好,所以應(yīng)取兩者pI的中間值,帶正電荷的粒子電泳時(shí)向負(fù)極移動(dòng),帶負(fù)電荷的粒子電泳時(shí)向正極移動(dòng)。(1)在pH5.8;(2)在pH8.2;(3)在pH4.8。 6解:根據(jù)朗伯-比爾定律OD = .L.C該物質(zhì)溶液濃度C = OD/.L = 0.4/1×
28、;104×0.5 = 0.8×10-4(mol/L) = 0.8×10-4×500(g/L) = 4×10-2(g/L)10ml溶液中物質(zhì)含量 = C × V × 稀釋倍數(shù) = 4×10-2(g/L) × 0.01L×10 = 4×10-3(g) = 4(mg)該物質(zhì)純度 = 純物質(zhì)含量/溶液中物質(zhì)總量 ×100= 4/5 ×100= 80%答:此化合物純度是80%。7答:該氨基酸水溶液pH值為6.0,說(shuō)明該氨基酸羧基的解離程度大于氨基,要使氨基酸上的羧基的解離程度
29、與氨基的解離程度相同,只有加酸抑制其水解,故該氨基酸的pI小于6。8答:血紅蛋白是一種由四個(gè)亞基組成的寡聚蛋白,肌紅蛋白只由一條多肽鏈組成;血紅蛋白的和鏈與肌紅蛋白具有相同的三級(jí)結(jié)構(gòu),在與氧的結(jié)合過(guò)程中肌紅蛋白呈飽和曲線,血紅蛋白呈S型曲線。血紅蛋白有兩種不同的構(gòu)象,一種是松弛型構(gòu)象,另一種是緊縮型構(gòu)象,當(dāng)血紅蛋白與氧分子結(jié)合時(shí)呈松弛構(gòu)象,釋放出氧分子時(shí)呈緊縮型構(gòu)象。在去氧血紅蛋白的兩個(gè)亞基之間存在有一個(gè)能夠容納一分子2,3-DPG(2,3二磷酸甘油酸)的凹穴,2,3-DPG可以借自身所帶三個(gè)負(fù)電荷基團(tuán)與每個(gè)-亞基的表面的三個(gè)正電荷基團(tuán)(1位Val的氨基,82位Lys的氨基,43位His的咪唑
30、基)互相吸引形成三個(gè)離子鍵,使血紅蛋白維持緊縮型構(gòu)象,導(dǎo)致它對(duì)氧的親和力下降。在肺部,由于氧分壓高,2,3-DPG也低,血紅蛋白能夠最大限度地與氧結(jié)合,形成氧合血紅蛋白,氧合血紅蛋白隨血液到達(dá)肌肉、腦及其它組織時(shí),由于氧分壓低,迅速釋放出氧分子,較高的2,3-DPG與去氧血紅蛋白結(jié)合,使其維持緊縮型結(jié)構(gòu)。長(zhǎng)期生活在高山缺氧地區(qū)的人群,血液中2,3-DPG的含量明顯高于在平原和沿海地區(qū)生活的人群,有助于血紅蛋白為細(xì)胞、組織提供更多的氧氣。9答:蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)決定蛋白功能,兩者有其嚴(yán)格的對(duì)應(yīng)關(guān)系。蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)信息貯存在特定的蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)之中(蛋白質(zhì)的卷曲密碼),在特定的環(huán)境條件下,蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)
31、由其一級(jí)結(jié)構(gòu)所決定。一級(jí)結(jié)構(gòu)的變化必然導(dǎo)致功能的變化。例如鐮刀形貧血病的產(chǎn)生,由于血紅蛋白分子中-亞基N-端第六個(gè)氨基酸由谷氨基酸變?yōu)槔i氨基酸,在-亞基的表面引入一個(gè)疏水性粘斑,并可以借助于這些粘斑相互連接形成血紅蛋白纖維,使血紅蛋白在紅細(xì)胞中的溶解度下降,攜氧能力降低,并導(dǎo)致紅細(xì)胞形態(tài)發(fā)生變化,脆性加大易于破裂,導(dǎo)致貧血病的發(fā)生。特定的蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)發(fā)揮正常功能的基礎(chǔ),空間結(jié)構(gòu)的變化可以直接導(dǎo)致蛋白質(zhì)功能的改變。例如牛胰核糖核酸酶,含4對(duì)二硫鍵,可以催化RNA的水解,如果將其置于含有-巰基乙醇和8M的尿素溶液,破壞其二硫鍵,使空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,可以導(dǎo)致酶活性的喪失,但如果用透析的方法
32、除去溶液中的尿素和-巰基乙醇,原來(lái)破壞的空間結(jié)構(gòu)又可以得到恢復(fù),酶又可以重新恢復(fù)其活性。10答案(略)第二章 核酸化學(xué)I 主要內(nèi)容一、核酸的種類、分布及主要功能核酸是以核苷酸為基本單位形成的生物大分子。核酸根據(jù)其所含戊糖種類的不同分為核糖核酸(簡(jiǎn)稱RNA)和脫氧核糖核酸(簡(jiǎn)稱DNA)二種類型。DNA是絕大多數(shù)生物體內(nèi)遺傳信息的貯存者和傳遞者,主要在遺傳信息的貯存和傳遞中發(fā)揮作用;大多數(shù)為雙鏈,少數(shù)為單鏈;真核細(xì)胞中分布在細(xì)胞核,原核細(xì)胞中存在于擬核區(qū)。RNA一般是線狀、單鏈,少數(shù)為環(huán)狀雙鏈;主要作用是參與蛋白質(zhì)的生物合成,并根據(jù)其功能不同分為mRNA、tRNA和rRNA;主要分布在細(xì)胞質(zhì)中。另
33、外,RNA在少數(shù)生物體內(nèi)還起著遺傳信息載體的作用。二、核酸的化學(xué)組成核酸是由核苷酸為基本單位構(gòu)成的一類生物大分子。部分分解可以形成多核苷酸、核苷酸、核苷,完全水解可以形成磷酸、戊糖和含氮堿基。參與核酸構(gòu)成的含氮堿基主要有腺嘌呤、鳥(niǎo)嘌呤、胞嘧啶、尿嘧啶和胸腺嘧啶。戊糖與含氮堿基之間通過(guò)C-N相連形成核苷(糖苷),核苷中戊糖基5-OH與磷酸反應(yīng)形成核苷酸。細(xì)胞中存在的核苷酸絕大多數(shù)均為5-核苷酸,以3,5-磷酸二酯鍵形成核酸分子。三、核酸的分子結(jié)構(gòu)(一)1DNA或RNA一級(jí)結(jié)構(gòu) DNA或RNA分子中核苷酸的排列順序稱為DNA或RNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)。核酸分子中遺傳信息就貯存在特定的核苷酸(堿基)排列順序
34、之中。(二)DNA的二、三級(jí)結(jié)構(gòu)1DNA二級(jí)結(jié)構(gòu)特點(diǎn):(1)該結(jié)構(gòu)由兩條反向平行的DNA單鏈圍繞其中心軸向右盤(pán)繞而成,其中一條鏈的方向是從3- 5,而另一條鏈的走向是從5- 3;(2)由磷酸和脫氧核糖交替排列形成雙螺旋結(jié)構(gòu)的主鏈骨架,位于雙螺旋結(jié)構(gòu)的外側(cè),糖環(huán)平面與中心軸的走向相平行,堿基則位于雙螺旋結(jié)構(gòu)的內(nèi)部,其平面與中心軸的走向垂直;(3)每螺旋上升一圈需要10個(gè)堿基對(duì),螺距是3.4nm直徑2.0nm;(4)DNA雙鏈對(duì)應(yīng)位置堿基之間具有嚴(yán)格的規(guī)律性,即A=T,G=C。2. 維持DNA二級(jí)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的因素:(1)互補(bǔ)堿基對(duì)間的氫鍵;(2)堿基堆集力;(3)離子鍵。3. 生物學(xué)意義:(1)揭示
35、了DNA分子上遺傳信息的貯存規(guī)律;(2)揭示了DNA分子的可復(fù)制性以及DNA分子內(nèi)遺傳信息的傳遞方式。DNA的三級(jí)結(jié)構(gòu)是指雙螺旋的卷曲構(gòu)象,最常見(jiàn)的是超螺旋結(jié)構(gòu)。(三)RNA二、三級(jí)結(jié)構(gòu)RNA一般由一條鏈構(gòu)成,二級(jí)結(jié)構(gòu)的最主要特點(diǎn)是“發(fā)夾”結(jié)構(gòu)。tRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)呈三葉草形,三級(jí)結(jié)構(gòu)呈“倒L形。四、核酸的主要性質(zhì)1溶解性和旋光性。2紫外吸收特性:核苷酸定量分析(摩爾消光系數(shù))法。3堿基、核苷和核苷酸的解離;堿基和磷酸上的可解離基團(tuán),核苷和核苷酸的等電點(diǎn)4變性、復(fù)性及DNA的分子雜交。II 習(xí) 題一、 名詞解釋1.稀有核苷:2.DNA二級(jí)結(jié)構(gòu):3.三葉草模型 4.“線團(tuán)”轉(zhuǎn)變: 5.分子雜交:6.
36、 增色效應(yīng): 7 Tm:是非題: 判斷下列各句話意思的正確與否,正確的在題后括號(hào)內(nèi)畫(huà)“”,錯(cuò)誤 的畫(huà)“×”,如果是錯(cuò)誤的,請(qǐng)說(shuō)明其理由。 1核苷由堿基和核糖以-型C-N糖苷鍵相連。2核苷酸是由核苷與磷酸脫水縮合而成,核苷酸是核苷的磷酸酯3DNA與RNA一樣,在1N KOH溶液中不很穩(wěn)定,生成2',3'脫氧核苷酸。4DNA堿基配對(duì)規(guī)律(AT, GC)僅適用于雙鏈DNA而不適用單鏈DNA.5在DNA變性過(guò)程中,總是GC對(duì)豐富的區(qū)段先解鏈分開(kāi)。6DNA是所有生物的遺傳物質(zhì)。7在DNA局部雙螺旋區(qū)內(nèi),兩條鏈之間的方向也是反向平行的。 8不同來(lái)源的DNA單鏈,在一定條件下能進(jìn)行
37、分子雜交,是由于它們有共同的堿基組成。9當(dāng)某DNA溶液溫度升高到一定程度時(shí),OD260提高30,說(shuō)明它是該DNA分子為雙鏈DNA。10DNA分子的可復(fù)制性主要是由DNA雙鏈對(duì)應(yīng)位置之間堿基的互補(bǔ)性所決定的。11DNA變性后由雙螺旋結(jié)構(gòu)變成線團(tuán)結(jié)構(gòu)。12Tm值低的DNA分子中(A-T)高。13雙鏈DNA中,一條鏈上某一區(qū)段的核苷酸順序?yàn)椋?pCpTpGpGpApC,那么另一條鏈上相應(yīng)的區(qū)段的核苷酸順序?yàn)?pGpApCpTpG.14由于RNA不是雙鏈,因此所有的RNA分子中都沒(méi)有雙螺旋結(jié)構(gòu)。15DNA兩條鏈間的堿基配對(duì)原則總是A對(duì)T、C對(duì)G、而DNA與mRNA之間的堿基配對(duì)原則為A對(duì)U、T對(duì)A以及
38、G對(duì)C。16DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄都必須根據(jù)堿基配對(duì)的原則。17某氨基酸t(yī)RNA反密碼子為GUC,在mRNA上相對(duì)應(yīng)的密碼子應(yīng)該是CAG。18細(xì)胞內(nèi)DNA的核苷酸順序都不是隨機(jī)的而是由遺傳性決定的。二、 填空題1核苷酸是由 、 和磷酸基三者組成的。2在各種RNA中 含稀有堿基最多。3DNA雙螺旋的直徑為_(kāi) ,雙螺旋每隔_旋轉(zhuǎn)一圈,約相當(dāng)于_對(duì),核糖磷酸主鏈位于螺旋體_ _側(cè),堿基對(duì)位于螺旋體_側(cè)。4真核生物的DNA存在于 ,其生物學(xué)作用是 。5所有RNA的核苷酸順序都是由它們的 。6將雙鏈DNA放置在pH2以下或pHl2以上,其OD260 ,在同樣條件下單鏈DNA的OD260 。7B型DNA雙螺旋
39、是由兩條鏈?zhǔn)?平行的,螺距 每個(gè)螺旋的堿基對(duì)基數(shù)為 。8DNA抗堿的原因是 決定的。9將A、U、C和G四種核苷酸溶解在pH3.5的緩沖液中,從負(fù)極向正極進(jìn)行電泳, 跑得最快, 跑得最慢。10從E.coli中分離的DNA樣品內(nèi)含有20的腺嘌呤(A),那么T ,G十C 。11某DNA片段的堿基順序?yàn)镚CTACTAAGC,它的互補(bǔ)鏈順序應(yīng)為 。12酵母tRNAAla二級(jí)結(jié)構(gòu)模型呈 _狀;主要包括_ _、_ _ 、_、 和_五部分組成。13當(dāng)溫度逐漸升到一定高度時(shí),DNA雙鏈 稱為變性。當(dāng)溫度逐漸降低時(shí),DNA的兩條鏈 ,稱為 。14DNA的復(fù)性速度與 、 以及DNA片段的大小有關(guān)。15天然DNA的負(fù)
40、超螺旋是由于DNA雙螺旋中兩條鏈 引起的為 手超螺旋,正超螺旋是由于DNA雙螺旋中兩條鏈 引起的為 手超螺旋。16tRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)呈 形,三級(jí)結(jié)構(gòu)的形狀像 。17核酸分子含有_ _和_ _堿,所以對(duì)_nm的波長(zhǎng)有強(qiáng)烈吸收。18維持DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的因素有_ _ _ _、_ _和_。三、 選擇題1在雙鏈DNA中,堿基含量關(guān)系錯(cuò)誤的是: A AT、GC; B A+TGC; C GC+mC; D A+GCT; 2雙鏈DNA的Tm上升是下列哪組堿基高引起的? A A+G; B C+T; C A+T; D G+C. 3Watson-Crick的DNA雙螺旋模型表示: A 一個(gè)三鏈結(jié)構(gòu); B 雙鏈走
41、向是反向平行的; C 堿基A與G配對(duì); D 堿基之間共價(jià)結(jié)合; 4DNA熱變性的顯著變化是: A 磷酸二酯鏈斷裂; B 生成2',3'環(huán)核苷酸; C Tm值與GC含量有關(guān); D 260nm吸收值增加; 5絕大多數(shù)真核生物的mRNA的5'端有: A PolyA; B CCAOH; B 帽子結(jié)構(gòu)、起始密碼; D 終止密碼; 6各類核酸中含稀有核苷最多的是: A tRNA B rRNA; C mRNA; D DNA. 7假尿苷中的糖苷鍵是: A CN連接; B CC連接; C NN連接; D OC連接; 8與DNA序列5'pTpApGpA3'互補(bǔ)的序列是: A
42、 5'pTpCpTpA3' B 5'pApTpCpT3' C 5'pUpCpUpA3' D 5'pGpCpGpA3' 9下列關(guān)于DNA的敘述哪項(xiàng)是錯(cuò)誤的?A 不同生物的DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)不同。B 破壞DNA雙螺旋,260nm光吸收增加。 C 所有生物的DNA都為雙鏈結(jié)構(gòu)。 D 細(xì)胞核DNA與線粒體DNA的三級(jí)結(jié)構(gòu)不同; 10下列哪項(xiàng)可說(shuō)明DNA是生物遺傳信息的攜帶者? A 不同生物的堿基組成應(yīng)該是相同的; B 病毒感染是通過(guò)蛋白質(zhì)侵入宿主細(xì)胞來(lái)完成的; C 同一生物體不同組織的DNA通常具有相同的堿基組成。 D 生物體的DNA堿基組成
43、隨年齡和營(yíng)養(yǎng)狀況的改變而改變。 11存在于DNA中的bp是: A A-T; B U-A; C C-G; D G-A. 12對(duì)于細(xì)胞中RNA來(lái)說(shuō): A 含量最多的是rRNA; B 含修飾核苷最多的是tRNA; C 所有RNA都在于細(xì)胞質(zhì)中; D 壽命最短、含量最少的是mRNA; 13核酸變性時(shí): A 氫鍵斷裂、雙鏈脫解、堿基堆積破壞; B 分子量不變; C 在退火條件下互補(bǔ)單鏈可以重新締合為雙鏈; D 單鏈核酸增色效應(yīng)不顯著。14DNA的Tm與介質(zhì)的離子強(qiáng)度有關(guān),所以DNA制品應(yīng)保存在:A 高濃度的緩沖浪中 B 低濃度的緩沖液中C 純水中 D 有機(jī)試劑中15熱變性后的DNA: A 紫外吸收增加
44、B 磷酸二酯鍵斷裂 C 形成三股螺旋 D (G-C)含量增加16下列過(guò)程中與DNA體外重組無(wú)關(guān)的是: A 用專一性的限制性內(nèi)切酶在特定的互補(bǔ)位點(diǎn)切割載體DNA和供體DNA B 通過(guò)連接酶催化載體DNA與供體DNA接合。 C 將重組后的DNA通過(guò)結(jié)合反應(yīng)引入寄主細(xì)胞。 D 常常根據(jù)載體所具有的抗藥性來(lái)篩選含有重組DNA的細(xì)菌。17核酸分子中的共價(jià)鍵包括: A 嘌呤堿基第9位N與核糖第1位C之間連接的糖苷鍵 B 磷酸與磷酸之間的磷酸酯鍵 C 磷酸與核糖第1位C之間連接的磷酸酯鍵 D 核糖與核糖之間連接的糖苷鍵19下列哪種物質(zhì)不是由核酸與蛋白質(zhì)結(jié)合而成的復(fù)合物: A 病毒 B 核糖體 C 蛋白質(zhì)生物
45、合成70S起始物 D 線粒體內(nèi)膜20下列關(guān)于核糖體的敘述正確的是: A 大小亞基緊密結(jié)合任何時(shí)候都不分開(kāi)。 B 細(xì)胞內(nèi)有游離的也有與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)合的核糖體。 C 核糖體是一個(gè)完整的轉(zhuǎn)錄單位。 D 核糖體由兩個(gè)相同的亞基組成。21Crick的擺動(dòng)假說(shuō)較好的描述了: A 密碼子的第三位變動(dòng)不影響與反密碼子的正確配對(duì) B 新生肽鏈在核糖體上的延長(zhǎng)機(jī)理。 C 由鏈霉素引起的翻譯錯(cuò)誤。 D 溶原性噬菌體經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)可變成烈性噬菌體。22分離出某病毒核酸的堿基組成為:A27,G30,C22,T21,該病毒應(yīng)為:A 單鏈DNA B 雙鏈DNAC 單鏈RNA D 雙鏈RNA四、 問(wèn)答與計(jì)算:1雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的主要內(nèi)容
46、是什么? 生物體內(nèi)遺傳信息的傳遞主要是通過(guò)什么方式實(shí)現(xiàn)的?2簡(jiǎn)要描述酵母tRNAAla的三葉草模型。3有一DNA分子,其(A+G)(T+C)在一單鏈中的比值為0.9,試計(jì)算在另一互補(bǔ)鏈中(A+G)(T+C)的比值。4DNA樣品在水浴中加熱到定溫度,然后冷至室溫測(cè)其OD260,請(qǐng)問(wèn)在下列情況下加熱與退火前后OD260的變化如何?(a)加熱的溫度接近該DNA的Tm值;(b)加熱的溫度遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)該DNA的Tm值。5假定每個(gè)基因有900對(duì)核苷酸,并且有三分之一的DNA不編碼蛋白質(zhì),人的一個(gè)體細(xì)胞(DNA量為6.4×109對(duì)核苷酸),有多少個(gè)基因?(參考答案4.72×106)如果人體有
47、1013個(gè)細(xì)胞,那么人體DNA的總長(zhǎng)度是多少千米? (參考答案2.2×1013千米)等于地球與太陽(yáng)之間距離(2.2×109千米)的多少倍? (參考答案1000倍) (以三個(gè)堿基編碼一個(gè)氨基酸,氨基酸平均分子量為120,核苷酸對(duì)平均分子量為640計(jì)算。)6根據(jù)同源蛋白質(zhì)的知識(shí),說(shuō)明為什么編碼同源蛋白質(zhì)的基因(DNA片段)可以雜交?III習(xí)題答案一、 名詞解釋1.稀有核苷:在核酸分子中含量較少的一類核苷。 2.DNA二級(jí)結(jié)構(gòu):由兩條反向平行的DNA單鏈圍繞其中心軸向右盤(pán)繞而形成的DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)。3.三葉草模型:tRNA分子的二級(jí)結(jié)構(gòu)具有四環(huán)四臂,即氨基酸臂,反密碼環(huán)及臂、D環(huán)及臂、TC環(huán)及臂和額外環(huán),外形呈三葉草形故名。 4.“線團(tuán)”轉(zhuǎn)變:由于酸、堿、變性劑及高溫等理化因素作用,使原有規(guī)則的螺旋結(jié)構(gòu)破壞,形成無(wú)規(guī)則線團(tuán)結(jié)構(gòu)的現(xiàn)象稱核酸變性又名“線團(tuán)”轉(zhuǎn)變。5.分子雜交:具有互補(bǔ)堿基序列的核酸單鏈(DNA或RNA)之間借助于氫鍵,彼此結(jié)合形成DNA-DNA或DNA-RNA雜合雙鏈的現(xiàn)象稱分子雜交。 6. 增色效應(yīng):核酸分子主要是D
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