高考生物 專題八 現(xiàn)代生物科技專題二輪復(fù)習(xí)

1、專題八現(xiàn)代生物科技專題直擊考綱1.基因工程的誕生()。2.基因工程的原理及技術(shù)()。3.基因工程的應(yīng)用()。4.植物的組織培養(yǎng)()。5.動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆()。6.細(xì)胞融合與單克隆抗體()。7.動(dòng)物胚胎發(fā)育的基本過(guò)程與胚胎工程的理論基礎(chǔ)()。8.胚胎干細(xì)胞的移植()。9.胚胎工程的應(yīng)用()。1判斷下列有關(guān)基因工程的敘述(1)生長(zhǎng)激素基因在轉(zhuǎn)錄時(shí)需要解旋酶和DNA連接酶(2012·四川，2D)(×)(2)一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識(shí)別一種特定的脫氧核苷酸序列(經(jīng)典高考題)()(3)每個(gè)重組質(zhì)粒至少含一個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)(2011·浙江，6B)()(4)

2、應(yīng)用DNA探針技術(shù)可以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達(dá)(2011·四川，5D)(×)(5)用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草花葉病毒的核酸(2010·浙江，2A)(×)(6)自然界中天然存在的噬菌體自行感染細(xì)菌后其DNA整合到細(xì)菌DNA上，屬于基因工程(2010·大綱全國(guó)，5D)(×)(7)轉(zhuǎn)抗蟲(chóng)基因的植物，不會(huì)導(dǎo)致昆蟲(chóng)群體抗性基因頻率增加(2010·江蘇，18B)(×)(8)限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶(2009·浙江，3B)()2判斷下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述(1)培養(yǎng)基中添

3、加蔗糖的目的是提供營(yíng)養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓(2008·江蘇，20A)()(2)去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁和將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞均需酶處理(2008·全國(guó)，5B)()(3)不同種植物原生質(zhì)體融合的過(guò)程屬于植物體細(xì)胞雜交過(guò)程(2009·全國(guó)，4B)()(4)利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可克服生殖隔離的限制，培育遠(yuǎn)緣雜種(2009·全國(guó)，4A)()(5)培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞(2010·浙江，4A)(×)(6)克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過(guò)程中多數(shù)細(xì)胞的基因型會(huì)發(fā)生改變(2010·浙江，4B)(×)(7)二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)

4、次數(shù)通常是無(wú)限的(2010·浙江，4C)(×)(8)惡性細(xì)胞系的細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng)(2010·浙江，4D)()3判斷下列有關(guān)胚胎工程及其應(yīng)用的敘述(1)絕大多數(shù)精卵細(xì)胞的識(shí)別具有物種特異性(2012·浙江，2A)()(2)卵裂期胚胎中細(xì)胞數(shù)目和有機(jī)物總量在不斷增加(2009·江蘇，8A)(×)(3)早期胚胎培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液通常都需加入血清(2011·江蘇，18C)()(4)受精卵發(fā)育到原腸胚階段才能進(jìn)行胚胎移植(2011·江蘇，18B)(×)(5)試管嬰兒技術(shù)主要包括體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎

5、移植技術(shù)(2011·江蘇，18D)()(6)胚胎分割時(shí)需將原腸胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割(2009·江蘇，8B)(×)(7)利用胚胎分割技術(shù)可以獲得兩個(gè)基因型完全相同的胚胎(2010·江蘇，16C)()(8)胚胎干細(xì)胞具有細(xì)胞核大、核仁小和蛋白質(zhì)合成旺盛等特點(diǎn)(2009·江蘇，8C)(×)重點(diǎn)一基因工程1完善如下基因工程的主干知識(shí)圖解(1)目的基因的獲取(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建(目的基因啟動(dòng)子終止子標(biāo)記基因)(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞導(dǎo)入植物：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法導(dǎo)入動(dòng)物：顯微注射法導(dǎo)入微生物：感受態(tài)細(xì)胞法(用Ca2處理(

6、4) 目的基因的檢測(cè)與鑒定插入檢測(cè)：DNA分子雜交,轉(zhuǎn)錄檢測(cè)：DNARNA分子雜交翻譯檢測(cè)：抗原抗體雜交),個(gè)體水平檢測(cè)抗性接種實(shí)驗(yàn)2基本工具限制酶DNA連接酶載體作用切割目的基因和載體拼接DNA片段，形成重組DNA攜帶目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞作用部位兩個(gè)核苷酸的脫氧核糖與磷酸間形成的磷酸二酯鍵作用特點(diǎn)(條件)識(shí)別特定的核苷酸序列；在特定位點(diǎn)上切割E·coliDNA連接酶只能連接黏性末端；T4DNA連接酶能連接黏性末端和平末端能在宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并大量復(fù)制；有多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)；具有特殊的標(biāo)記基因3.基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程技能點(diǎn)撥1區(qū)分DNA連接酶和DNA聚合酶、限制性核酸內(nèi)切酶和解旋

7、酶(1)DNA連接酶連接兩個(gè)DNA片段，而DNA聚合酶只能將單個(gè)脫氧核苷酸添加到脫氧核苷酸鏈上。(2)限制性核酸內(nèi)切酶是切割某種特定的脫氧核苷酸序列，并使兩條鏈在特定的位置斷開(kāi)，而解旋酶是將DNA的兩條鏈間的氫鍵打開(kāi)形成兩條單鏈。2啟動(dòng)子和終止子啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄；終止子是終止轉(zhuǎn)錄的位點(diǎn)。插入的目的基因只是結(jié)構(gòu)基因部分，其表達(dá)需要調(diào)控序列，因而用作載體的質(zhì)粒的插入部位前需要有啟動(dòng)子，后需要有終止子。3區(qū)分一個(gè)至多個(gè)限制酶切點(diǎn)與每種酶一個(gè)切點(diǎn)(1)一個(gè)至多個(gè)限制酶切點(diǎn)：作為載體必須具有一個(gè)至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，以便與外源基因連接。(2)每種酶一個(gè)切點(diǎn)：每種酶的切點(diǎn)最好只有

8、一個(gè)。因?yàn)槟撤N限制酶只能識(shí)別單一切點(diǎn)，若載體上有一個(gè)以上的酶切點(diǎn)，則切割重組后可能會(huì)丟失某些片段，若丟失的片段含復(fù)制起點(diǎn)區(qū)，則進(jìn)入受體細(xì)胞后便不能自主復(fù)制。一個(gè)載體若只有某種限制酶的一個(gè)切點(diǎn)，則酶切后既能把環(huán)打開(kāi)接納外源DNA片段，又不會(huì)丟失自己的片段。4根據(jù)受體種類確定基因工程的受體細(xì)胞受體種類不同，所用的受體細(xì)胞種類也不相同。(1)植物：由于植物細(xì)胞具有全能性，植物體細(xì)胞經(jīng)過(guò)植物組織培養(yǎng)能夠形成植物體，所以植物的受體細(xì)胞一般是體細(xì)胞。(2)動(dòng)物：由于動(dòng)物細(xì)胞沒(méi)有全能性，不能由一個(gè)體細(xì)胞培養(yǎng)成一個(gè)個(gè)體，所以動(dòng)物基因工程的受體細(xì)胞不是體細(xì)胞，而是受精卵。(3)微生物：多用原核生物細(xì)胞，因?yàn)樵?/p>

9、生物繁殖快，多為單細(xì)胞，遺傳物質(zhì)相對(duì)較少。對(duì)位訓(xùn)練1某質(zhì)粒上有Sal、Hind、BamH三種限制酶切割位點(diǎn)，同時(shí)還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因。利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過(guò)程如圖所示，請(qǐng)回答下列問(wèn)題。(1)將抗鹽基因?qū)霟煵菁?xì)胞內(nèi)，使煙草植株產(chǎn)生抗鹽性狀，這種新性狀(變異性狀)的來(lái)源屬于_。(2)如果將抗鹽基因直接導(dǎo)入煙草細(xì)胞，一般情況下，煙草不會(huì)具有抗鹽特性，原因是抗鹽基因在煙草細(xì)胞中不能_，也不能_。(3)在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，應(yīng)選用_和_兩種酶對(duì)_和_進(jìn)行切割，以保證重組DNA序列的唯一性。(4)基因工程中的檢測(cè)篩選是一個(gè)重要的步驟。為篩選出導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，下圖表示運(yùn)用影印

10、培養(yǎng)法(使一系列培養(yǎng)皿的相同位置上能出現(xiàn)相同菌落的一種接種培養(yǎng)方法)檢測(cè)基因表達(dá)載體是否導(dǎo)入了農(nóng)桿菌。培養(yǎng)基除了含有細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖必需的成分外，培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B分別還含有_、_。從檢測(cè)篩選的結(jié)果分析，含有目的基因的是_菌落中的細(xì)菌。為了確定抗鹽煙草是否培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)記的_作探針進(jìn)行分子雜交檢測(cè)，又要用_方法從個(gè)體水平鑒定煙草植株的耐鹽性。(5)將轉(zhuǎn)入抗鹽基因的煙草細(xì)胞培育成完整的植株需要用_技術(shù)，愈傷組織經(jīng)_進(jìn)而形成完整植株，此過(guò)程除營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外還必須向培養(yǎng)基中添加_。答案(1)基因重組(2)復(fù)制表達(dá)(合成抗鹽基因的mRNA)(3)SalHind 抗鹽基因的DNA質(zhì)粒(4)氨芐青

11、霉素四環(huán)素(氨芐青霉素和四環(huán)素)4和6抗鹽基因一定濃度的鹽水澆灌煙草植株(將煙草植株移栽到鹽堿地中)(5)植物組織培養(yǎng)細(xì)胞增殖和分化植物激素(生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素)解析(1)基因工程利用的原理是基因重組，題中煙草植物產(chǎn)生的抗鹽性狀的來(lái)源是基因重組。(2)若把抗鹽基因直接導(dǎo)入煙草細(xì)胞中，抗鹽基因易被煙草細(xì)胞內(nèi)的酶破壞，而不能進(jìn)一步復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯成相關(guān)的蛋白質(zhì)。(3)根據(jù)題圖中三種酶作用的部位，可確定在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，應(yīng)選用Sal和Hind 酶對(duì)質(zhì)粒和抗鹽基因的DNA進(jìn)行切割。(4)檢測(cè)基因表達(dá)載體是否導(dǎo)入了農(nóng)桿菌，依據(jù)基因表達(dá)載體中的抗性基因的作用配制培養(yǎng)基；從檢測(cè)篩選的結(jié)果分析，培養(yǎng)基B中沒(méi)有

12、4和6菌落，再結(jié)合構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，目的基因插入的位置，可推測(cè)4和6菌落的細(xì)胞中質(zhì)粒被插入了目的基因，四環(huán)素抗性基因被破壞，這樣的農(nóng)桿菌不能在其上生長(zhǎng)繁殖；為了確定抗鹽煙草是否培育成功，可進(jìn)行分子檢測(cè)和個(gè)體檢測(cè)。(5)將“細(xì)胞”培養(yǎng)成“完整個(gè)體”需采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)；愈傷組織經(jīng)細(xì)胞增殖和分化，在生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的調(diào)節(jié)下可培育成完整個(gè)體。2浙江大學(xué)農(nóng)學(xué)院喻景權(quán)教授課題組研究發(fā)現(xiàn)，一種植物激素油菜素內(nèi)酯能促進(jìn)農(nóng)藥在植物體內(nèi)的降解和代謝。用油菜素內(nèi)酯處理后，許多參與農(nóng)藥降解的基因(如P450基因和紅霉素抗性基因)的表達(dá)和酶活性都得到提高，在這些基因“指導(dǎo)”下合成的蛋白酶能把農(nóng)藥逐漸轉(zhuǎn)化為水溶性

13、物質(zhì)或低毒甚至無(wú)毒物質(zhì)，有的則被直接排出體外。某課題組進(jìn)一步進(jìn)行了如下的實(shí)驗(yàn)操作，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)獲得油菜素內(nèi)酯合成酶基因的方法有_。步驟用PCR技術(shù)擴(kuò)增基因時(shí)用到的耐高溫酶通常是指_；步驟用到的酶有_。(2)圖中導(dǎo)入重組質(zhì)粒的方法是_，在導(dǎo)入之前應(yīng)用一定濃度的_處理受體細(xì)菌。(3)導(dǎo)入重組質(zhì)粒2以后，往往還需要進(jìn)行檢測(cè)和篩選，可用_制成探針，檢測(cè)是否導(dǎo)入了重組基因，在培養(yǎng)基中加入_可將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。(4)請(qǐng)你為該課題命名：_。答案(1)從cDNA文庫(kù)中獲取、從基因組文庫(kù)中獲取、人工合成目的基因或PCR擴(kuò)增(任選其中兩項(xiàng)即可)TaqDNA聚合酶限制酶和DNA連接酶(2)轉(zhuǎn)化

14、法氯化鈣溶液(3)紅霉素抗性基因紅霉素(4)探究油菜素內(nèi)酯能否促進(jìn)土壤中農(nóng)藥的分解解析進(jìn)行基因工程操作時(shí)，首先要獲取目的基因，其方法有多種：從cDNA文庫(kù)中獲取、從基因組文庫(kù)中獲取、人工合成目的基因或PCR擴(kuò)增等。在構(gòu)建基因表達(dá)載體的過(guò)程中，用到的工具酶有限制酶和DNA連接酶。圖中的受體細(xì)胞是細(xì)菌，故用轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入基因表達(dá)載體，導(dǎo)入后，需檢驗(yàn)和篩選。從圖中可以看出，最終是通過(guò)對(duì)照實(shí)驗(yàn)來(lái)檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因細(xì)菌對(duì)土壤中殘留農(nóng)藥的分解能力。重點(diǎn)二克隆技術(shù)1植物體細(xì)胞雜交與單克隆抗體制備過(guò)程比較步驟植物體細(xì)胞雜交過(guò)程單克隆抗體制備過(guò)程第一步原生質(zhì)體的制備(酶解法)正常小鼠免疫處理第二步原生質(zhì)體融合(物、化法)動(dòng)

15、物細(xì)胞融合(物、化、生物法) 第三步雜種植株的篩選與培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞篩選與培養(yǎng)第四步雜種植株的誘導(dǎo)與鑒定單克隆抗體的提純深度思考(1)誘導(dǎo)融合的方法分別有哪些？融合的細(xì)胞類型有哪幾種？提示誘導(dǎo)植物體細(xì)胞的原生質(zhì)體融合的方法主要有離心、振動(dòng)、電激或用聚乙二醇作為誘導(dǎo)劑。動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的病毒(誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的特有因素)、電激等。融合的細(xì)胞類型：前者AA、BB、AB。后者瘤瘤、B瘤、BB。(2)各自的原理分別有哪些？提示前者有細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性，后者有細(xì)胞膜的流動(dòng)性和細(xì)胞增殖。2植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較3.完善如下克隆動(dòng)物培育流程圖深度思考D個(gè)體的性

16、別和性狀和哪個(gè)個(gè)體相同？提示根據(jù)發(fā)育成新個(gè)體D的重組細(xì)胞核由動(dòng)物B提供，而性別及大多數(shù)遺傳性狀是由核內(nèi)遺傳物質(zhì)決定的，故B、D兩者的性別及大多數(shù)遺傳性狀相同。技能點(diǎn)撥1容易混淆的三種細(xì)胞雜種細(xì)胞、重組細(xì)胞和雜交細(xì)胞(1)雜種細(xì)胞：植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中，兩種細(xì)胞去掉細(xì)胞壁之后形成的原生質(zhì)體融合，融合的原生質(zhì)體出現(xiàn)細(xì)胞壁之后形成的細(xì)胞叫雜種細(xì)胞。(2)重組細(xì)胞：體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核卵母細(xì)胞之后形成的細(xì)胞叫重組細(xì)胞。(3)雜交細(xì)胞：動(dòng)物細(xì)胞融合形成的細(xì)胞常稱為雜交細(xì)胞。2克隆動(dòng)物與試管動(dòng)物認(rèn)識(shí)的誤區(qū)(1)誤區(qū)一：試管動(dòng)物與克隆動(dòng)物的產(chǎn)生都是無(wú)性生殖。糾正：試管動(dòng)物的產(chǎn)生是有性生殖，克隆動(dòng)物的產(chǎn)生

17、是無(wú)性生殖。(2)誤區(qū)二：試管動(dòng)物(哺乳類)的產(chǎn)生是在體外進(jìn)行的，克隆動(dòng)物(哺乳類)的產(chǎn)生是在體內(nèi)進(jìn)行的。糾正：試管動(dòng)物(哺乳類)和克隆動(dòng)物(哺乳類)早期胚胎之前都是在體外進(jìn)行的，早期胚胎經(jīng)過(guò)胚胎移植之后是在體內(nèi)進(jìn)行的。(3)誤區(qū)三：胚胎移植的優(yōu)勢(shì)是充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖潛力，因此胚胎移植的胚胎只能來(lái)自體內(nèi)受精的胚胎。糾正：胚胎移植的胚胎有三個(gè)來(lái)源：體內(nèi)正常受精產(chǎn)生的胚胎、核移植產(chǎn)生的重組細(xì)胞培養(yǎng)而來(lái)的胚胎、體外受精產(chǎn)生的早期胚胎。對(duì)位訓(xùn)練3如圖為某二倍體植株花藥中未成熟花粉在適宜培養(yǎng)基上形成完整植株的過(guò)程。下列有關(guān)敘述正確的是()A過(guò)程表示脫分化，過(guò)程表示再分化B過(guò)程需要避光，過(guò)程需要照

18、光C過(guò)程說(shuō)明花粉細(xì)胞具有全能性D過(guò)程獲得的完整植株自交后代不會(huì)發(fā)生性狀分離答案C解析圖中過(guò)程分別表示脫分化、再分化、發(fā)育過(guò)程。過(guò)程不需光照，過(guò)程需要適宜光照。將花粉細(xì)胞培育成完整植株，體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性?；ㄋ庪x體培養(yǎng)獲得的為單倍體植株，高度不育。4(2013·海南卷，31)單純皰疹病毒型(HSV1)可引起水泡性口唇炎。利用雜交瘤技術(shù)制備出抗HSV1的單克隆抗體可快速檢測(cè)HSV1?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)在制備抗HSV1的單克隆抗體的過(guò)程中，先給小鼠注射一種純化的HSV1蛋白，一段時(shí)間后，若小鼠血清中抗_的抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性，說(shuō)明小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了_反應(yīng)，再?gòu)男∈蟮腳中獲取B淋巴細(xì)胞。將該B淋巴細(xì)

19、胞與小鼠的_細(xì)胞融合，再經(jīng)過(guò)篩選、檢測(cè)，最終可獲得所需的雜交瘤細(xì)胞，該細(xì)胞具有的特點(diǎn)是_。(2)若要大量制備抗該蛋白的單克隆抗體，可將該雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠的_中使其增殖，再?gòu)腳中提取、純化獲得。(3)通過(guò)上述方法得到的單克隆抗體可準(zhǔn)確地識(shí)別這種HSV1蛋白，其原因是該抗體具有_和_等特性。答案(1)HSV1蛋白體液免疫脾臟骨髓瘤無(wú)限增殖且產(chǎn)生專一性抗體(2)腹腔腹水(3)純度高特異性強(qiáng)解析(1)單克隆抗體制備的第一步是獲得免疫動(dòng)物。先給小鼠注射一種純化的HSV1蛋白，這就得到了免疫小鼠。一段時(shí)間后，若小鼠血清中抗HSV1蛋白的抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性，說(shuō)明小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了體液免疫反應(yīng)，小鼠體內(nèi)已經(jīng)有了該

20、抗體，而抗體就是通過(guò)體液免疫產(chǎn)生的。第二步是制備雜交瘤細(xì)胞。從小鼠的淋巴器官中(如脾、骨髓、扁桃體、胸腺等)獲取B淋巴細(xì)胞，與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，再經(jīng)過(guò)篩選檢測(cè)，最終可獲得所需的雜交瘤細(xì)胞(只產(chǎn)生抗HSV1蛋白抗體的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞)，雜交瘤細(xì)胞具有兩個(gè)親本細(xì)胞的特性(既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生專一性抗體)。(2)要想獲得大量單克隆抗體，通常有兩種方法：一是將雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中，然后從動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中分離出單克隆抗體；二是將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠的腹腔中使其增殖，然后從小鼠的腹水中提取純化獲得。(3)單克隆抗體具有：特異性強(qiáng)，靈敏度高的特點(diǎn)(特異性強(qiáng)：因?yàn)樗会槍?duì)一種

21、蛋白質(zhì)如HSV1蛋白；靈敏度高：因?yàn)榭贵w的純度高，濃度高，能迅速和抗原結(jié)合，發(fā)生抗原抗體反應(yīng))。重點(diǎn)三胚胎工程1完善下面的早期胚胎發(fā)育過(guò)程受精卵卵裂桑椹胚：卵裂形成的包括32個(gè)細(xì)胞左右的胚，每個(gè)細(xì)胞都屬于全能細(xì)胞幼體2胚胎工程操作流程分析(以牛為例)深度思考(1)上述圖示中幾次用到了激素？分別是什么作用？提示兩次；第一次用激素對(duì)受體和供體母牛進(jìn)行同期發(fā)情處理；第二次用促性腺激素對(duì)供體做超數(shù)排卵處理。(2)胚胎移植過(guò)程進(jìn)行哪兩次檢查？提示第一次是對(duì)收集的胚胎進(jìn)行檢查；第二次是對(duì)受體母畜是否妊娠進(jìn)行檢查。(3)胚胎移植所用胚胎是有性生殖還是無(wú)性生殖產(chǎn)生的？提示是有性生殖還是無(wú)性生殖，取決于胚胎是由

22、受精卵形成，還是通過(guò)核移植技術(shù)形成重組細(xì)胞發(fā)育而成或胚胎分割形成。其中通過(guò)核移植技術(shù)和胚胎分割形成的胚胎是無(wú)性生殖產(chǎn)生的。(4)胚胎移植(胚胎能夠移入受體、胚胎收集、胚胎在受體能夠存活、胚胎能夠正常生長(zhǎng)發(fā)育)的幾個(gè)生理學(xué)基礎(chǔ)是什么？提示哺乳動(dòng)物排卵后，同種供受體生殖器官的生理變化是相同的，這是胚胎能夠移入受體的生理基礎(chǔ)。早期胚胎形成后，未與母體子宮建立聯(lián)系，而是處于游離狀態(tài)，這是胚胎收集的生理基礎(chǔ)。受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎基本不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這是胚胎在受體內(nèi)能夠存活的生理基礎(chǔ)。供體胚胎可與受體子宮建立聯(lián)系，且不影響供體胚胎的遺傳特性，這是供體胚胎正常發(fā)育的生理基礎(chǔ)。3胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)流程對(duì)

23、位訓(xùn)練5牛胚胎移植的基本程序如圖，請(qǐng)據(jù)圖回答：(1)圖中a、b、c過(guò)程分別是指_、_、_。(2)在胚胎移植過(guò)程中，供、受體母牛選擇好后，要用動(dòng)物激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，這樣處理的原因是_，以保證移植的胚胎能夠繼續(xù)正常發(fā)育。(3)為了提高牛胚胎的利用率，常采取的方法是_；處理的時(shí)期是_。(4)從哺乳動(dòng)物早期胚胎或原始性腺中分離出來(lái)的細(xì)胞，稱為ES或EK細(xì)胞。這類細(xì)胞的形態(tài)特征有_。(5)下圖是利用胚胎工程技術(shù)培育優(yōu)質(zhì)奶牛的主要步驟。下列敘述正確的是()A胚胎移植可以定向改造動(dòng)物遺傳性狀，需移植到發(fā)情的母牛子宮內(nèi)發(fā)育BA細(xì)胞不一定是受精卵細(xì)胞C兩個(gè)胚胎具有不同遺傳物質(zhì)D圖中a過(guò)程包括卵裂、囊胚和原腸

24、胚等階段答案(1)超數(shù)排卵處理胚胎的收集胚胎移植(2)使供、受體母牛處于相同的生理狀態(tài)(3)胚胎分割移植囊胚期或桑椹胚期(4)體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯(5)B解析(1)圖示a、b、c過(guò)程依次為對(duì)供體母牛進(jìn)行超數(shù)排卵處理、配種后胚胎的收集和向受體母牛的胚胎移植。(2)為使受體接受胚胎應(yīng)對(duì)供受體進(jìn)行同期發(fā)情處理。(3)為提高胚胎利用率宜采取胚胎分割移植技術(shù)。(4)胚胎干細(xì)胞的形態(tài)特征包括體積小、核大、核仁明顯等。(5)胚胎移植不能定向改造動(dòng)物的遺傳性狀；和兩個(gè)胚胎是由同一胚胎分割而來(lái)的，其遺傳物質(zhì)相同；在胚胎分割移植時(shí)，胚胎未發(fā)育到原腸胚階段；A細(xì)胞也可以為核移植的重組細(xì)胞。6(2013

25、3;江蘇卷，13)軟骨發(fā)育不全為常染色體顯性遺傳病，基因型為HH的個(gè)體早期死亡。一對(duì)夫妻均為該病患者，希望通過(guò)胚胎工程技術(shù)輔助生育一個(gè)健康的孩子。下列做法錯(cuò)誤的是()A首先經(jīng)超數(shù)排卵處理后進(jìn)行體外受精B從囊胚中分離細(xì)胞，培養(yǎng)后檢測(cè)基因型C根據(jù)檢測(cè)結(jié)果篩選基因型為hh的胚胎D將胚胎培養(yǎng)至原腸胚期后移植到子宮答案D解析胚胎移植的時(shí)期是桑椹胚或囊胚，D錯(cuò)誤。網(wǎng)絡(luò)小結(jié)1轉(zhuǎn)基因生物可用于生產(chǎn)人類所需要的藥用蛋白，如激素、抗體、疫苗、酶等。下圖甲是通過(guò)生物工程培育能產(chǎn)生人胰島素的煙草的過(guò)程。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：(1)基因工程的核心步驟是_(填字母)。此過(guò)程所需的工具酶是_。(2)下圖乙是載體和反轉(zhuǎn)錄得到的

26、胰島素基因的片段，已知限制酶的識(shí)別序列和切點(diǎn)是GGATCC，限制酶的識(shí)別序列和切點(diǎn)是GATC。Gene和Gene為質(zhì)粒上的標(biāo)記基因，根據(jù)圖示分析，應(yīng)用限制酶_切割質(zhì)粒，用限制酶_切割目的基因。構(gòu)建的重組質(zhì)粒中，除含有外源基因、標(biāo)記基因外，還必須含有_和_。(3)B過(guò)程中，常用_處理使細(xì)菌成為感受態(tài)細(xì)胞，從而利于重組質(zhì)粒的導(dǎo)入。(4)如果從分子水平檢測(cè)人胰島素基因是否表達(dá)成功，可以采用_方法。答案(1)A限制酶和DNA連接酶(2)啟動(dòng)子終止子(3)Ca2(4)抗原抗體雜交解析(1)基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，即圖甲中的A過(guò)程，此過(guò)程所需的工具酶是限制酶和DNA連接酶。(2)若用限制酶

27、切割質(zhì)粒，則只破壞一個(gè)標(biāo)記基因，若用限制酶切割質(zhì)粒，則質(zhì)粒上的兩個(gè)標(biāo)記基因均被破壞，所以應(yīng)選用限制酶切割質(zhì)粒；用限制酶切割目的基因；構(gòu)建的重組質(zhì)粒中，除含有外源基因、標(biāo)記基因外，還必須含有啟動(dòng)子和終止子。(3)B過(guò)程是將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞中，常用Ca2處理使細(xì)菌成為感受態(tài)細(xì)胞，從而利于重組質(zhì)粒的導(dǎo)入。(4)如果從分子水平檢測(cè)人胰島素基因是否表達(dá)成功，可以采用抗原抗體雜交方法。2(2013·福建卷，33)克隆豬成功率較低，與早期胚胎細(xì)胞的異常凋亡有關(guān)。Bcl­2基因是細(xì)胞凋亡抑制基因，用PCR技術(shù)可以檢測(cè)該基因轉(zhuǎn)錄水平，進(jìn)而了解該基因與不同胚胎時(shí)期細(xì)胞凋亡的關(guān)系?？寺∝i的培

28、育及該基因轉(zhuǎn)錄水平檢測(cè)流程如圖。請(qǐng)回答：(1)圖中重組細(xì)胞的細(xì)胞核來(lái)自_細(xì)胞，早期胚胎移入受體子宮后繼續(xù)發(fā)育，經(jīng)桑椹胚、囊胚和_胚最終發(fā)育為克隆豬。(2)在PCR過(guò)程中可檢測(cè)出cDNA中Bcl­2 cDNA的分子數(shù)，進(jìn)而計(jì)算總mRNA中Bcl­2 mRNA的分子數(shù)，從而反映出Bcl­2基因的轉(zhuǎn)錄水平。圖中X表示_過(guò)程。從基因組數(shù)據(jù)庫(kù)中查詢Bcl­2 mRNA的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列設(shè)計(jì)合成_用于PCR擴(kuò)增，PCR過(guò)程第一輪循環(huán)的模板是_。答案(1)體原腸(2)反轉(zhuǎn)錄引物Bcl­2 cDNA解析(1)重組細(xì)胞的細(xì)胞核來(lái)自優(yōu)良性狀的親本，據(jù)圖

29、可知，應(yīng)由良種豬提供細(xì)胞核，所以細(xì)胞核來(lái)自良種豬的體細(xì)胞；早期胚胎發(fā)育過(guò)程經(jīng)歷了桑椹胚、囊胚和原腸胚等階段。(2)由圖可知，X過(guò)程是由總mRNA到cDNA的過(guò)程，此過(guò)程屬于中心法則中的反轉(zhuǎn)錄過(guò)程。PCR擴(kuò)增需要的條件是模板、原料、能量、酶和引物，而查詢Bcl­2 mRNA的核苷酸序列的目的是合成相關(guān)的引物用于PCR擴(kuò)增，模板就是Bcl­2 cDNA。3(2013·新課標(biāo)全國(guó)卷，40)甲、乙是染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小組擬培育同時(shí)含有A和B的新型藥用植物。回答下列問(wèn)題：(1)為了培育該新型藥用植物，可取甲和乙的葉片，

30、先用_酶和_酶去除細(xì)胞壁，獲得具有活力的_，再用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)二者融合。形成的融合細(xì)胞進(jìn)一步培養(yǎng)形成_組織，然后經(jīng)過(guò)_形成完整的雜種植株。這種培育技術(shù)稱為_(kāi)。(2)上述雜種植株屬于多倍體，多倍體是指_。假設(shè)甲與乙有性雜交的后代是不育的，而上述雜種植株是可育的，造成這種差異的原因是_。(3)這種雜種植株可通過(guò)制作人工種子的方法來(lái)大量繁殖。經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的_等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。答案(1)纖維素果膠原生質(zhì)體愈傷再分化(或分化)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(2)體細(xì)胞中含有三個(gè)或三個(gè)以上染色體組的個(gè)體(其他合理答案亦可)在減數(shù)分裂過(guò)程中，前者染色體聯(lián)會(huì)異常，而后者染色體聯(lián)會(huì)正常(其他合理答

31、案亦可)(3)胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽解析(1)該新型藥用植物是通過(guò)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得的。要獲得有活力的原生質(zhì)體才能進(jìn)行體細(xì)胞雜交，因此首先用纖維素酶和果膠酶去掉植物的細(xì)胞壁，然后用PEG化學(xué)誘導(dǎo)劑(物理方法：離心、振動(dòng)等)誘導(dǎo)二者的原生質(zhì)體融合。然后采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得雜種植株，植物組織培養(yǎng)的主要過(guò)程是：先脫分化形成愈傷組織，然后再分化形成植物體，利用了植物細(xì)胞的全能性。(2)如果植物甲、乙是兩個(gè)物種，二者不能通過(guò)有性雜交產(chǎn)生可育后代，原因是甲、乙有性雜交所產(chǎn)生的后代在減數(shù)分裂過(guò)程中同源染色體聯(lián)會(huì)異常，也就是存在著生殖隔離。但植物甲、乙通過(guò)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)產(chǎn)生的后代卻是可育的，因

32、為在減數(shù)分裂過(guò)程中同源染色體能完成正常的聯(lián)會(huì)，產(chǎn)生正常的配子。由于甲、乙都是二倍體，因此，植物體細(xì)胞雜交得到的后代是異源多倍體(四倍體)。(3)人工種子具有生產(chǎn)不受氣候、季節(jié)和地域等因素限制，而且可以避免后代發(fā)生性狀分離等優(yōu)點(diǎn)，因此，植物細(xì)胞工程重要的應(yīng)用之一是制備人工種子，用到的核心技術(shù)是植物組織培養(yǎng)技術(shù)。將植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。4如圖是制備乙肝病毒表面抗體的流程，該抗體是乙肝病毒免疫的保護(hù)性抗體。回答以下問(wèn)題：(1)圖中抗原特指_抗原，細(xì)胞是指_。培養(yǎng)基中含有的某種天然成分是_。(2)不考慮多細(xì)胞融合，那么第一次篩選淘汰的細(xì)胞有_

33、，而第二次篩選得到的目的細(xì)胞是_。(3)從圖中可知，培養(yǎng)目的細(xì)胞有兩種途徑，即_。與普通抗體比較，得到的單克隆抗體具有_等優(yōu)點(diǎn)。(4)該技術(shù)制備的單克隆抗體可用于基因工程的第四步工作，而該步工作中使用單克隆抗體的目的是_。答案(1)乙肝病毒表面骨髓瘤細(xì)胞動(dòng)物血清(2)未融合的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞間融合的細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞間融合的細(xì)胞能產(chǎn)生乙肝病毒表面抗體的雜交瘤細(xì)胞(3)體外培養(yǎng)和體內(nèi)培養(yǎng)特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可以大量制備(4)檢測(cè)目的基因是否成功表達(dá)5(2013·山東卷，35)科學(xué)家通過(guò)誘導(dǎo)黑鼠體細(xì)胞去分化獲得誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞(iPS)，繼而利用iPS細(xì)胞培養(yǎng)出與黑鼠遺

34、傳特性相同的克隆鼠，流程如下：(1)從黑鼠體內(nèi)獲得體細(xì)胞后，對(duì)其進(jìn)行的初次培養(yǎng)稱為_(kāi)，培養(yǎng)的細(xì)胞在貼壁生長(zhǎng)至鋪滿培養(yǎng)皿底時(shí)停止分裂，這種現(xiàn)象稱為_(kāi)。(2)圖中2­細(xì)胞胚胎可用人工方法從灰鼠輸卵管內(nèi)獲得，這過(guò)程稱為_(kāi)，也可以從灰鼠體內(nèi)取出卵子，通過(guò)_后進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)獲得。(3)圖中重組囊胚通過(guò)_技術(shù)移入白鼠子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育，暫不移入的胚胎可使用_方法保存。(4)小鼠胚胎干細(xì)胞(ES)可由囊胚的_分離培養(yǎng)獲得。iPS與ES細(xì)胞同樣具有發(fā)育的全能性，有望在對(duì)人類iPS細(xì)胞進(jìn)行定向_后用于疾病的細(xì)胞治療。答案(1)原代培養(yǎng)接觸抑制(2)沖卵體外受精(3)胚胎移植(或核移植)冷凍(或低溫)(4

35、)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分化解析從黑鼠體內(nèi)獲得體細(xì)胞后，對(duì)其進(jìn)行的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)，分瓶后的為傳代培養(yǎng)；培養(yǎng)的細(xì)胞在貼壁生長(zhǎng)至鋪滿培養(yǎng)皿底時(shí)停止分裂，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制；細(xì)胞胚胎可從灰鼠輸卵管內(nèi)沖卵獲得；重組囊胚通過(guò)胚胎移植技術(shù)移入白鼠子宮內(nèi)，暫不進(jìn)行胚胎移植的胚胎可放入196 的液氮中冷凍保存；胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞，是由早期胚胎或原始性腺分離出來(lái)的一類細(xì)胞。內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織，可以作為干細(xì)胞的來(lái)源，iPS與ES細(xì)胞一樣，可通過(guò)誘導(dǎo)定向分化修補(bǔ)某些功能異常的細(xì)胞來(lái)治療疾病。專題鞏固卷1下圖是利用基因工程方法培育抗蟲(chóng)棉的過(guò)程。請(qǐng)據(jù)圖回答相關(guān)問(wèn)題：(1)從蘇云金芽孢桿菌的DNA

36、上獲取抗蟲(chóng)基因，需要用到的工具是_，此工具主要是從_生物中分離純化出來(lái)的，它能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)脫氧核苷酸之間的_鍵斷開(kāi)。(2)構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，常用Ti質(zhì)粒作為載體，是因?yàn)門i質(zhì)粒上具有_，它能把目的基因整合到受體細(xì)胞_。(3)E過(guò)程是利用_技術(shù)完成的，要確定抗蟲(chóng)基因?qū)朊藁?xì)胞后，是否賦予了棉花抗蟲(chóng)特性，在個(gè)體水平上還需要做_實(shí)驗(yàn)。(4)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞，除采用上圖中的方法外，還可采用_法和花粉管通道法。答案(1)限制酶原核磷酸二酯(2)T­DNA染色體DNA上(3)植物組織培養(yǎng)抗蟲(chóng)接種(4)基因槍解析(1)限制酶用于切割

37、DNA分子，獲取目的基因。限制酶主要從原核生物細(xì)胞中獲取。限制酶可斷裂磷酸二酯鍵，將DNA分子切開(kāi)。(2)Ti質(zhì)粒是可轉(zhuǎn)移DNA，其上的T­DNA可以整合到植物細(xì)胞的染色體DNA上，故將目的基因借助Ti質(zhì)粒導(dǎo)入植物細(xì)胞中。(3)E過(guò)程利用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)?？砂押οx(chóng)接種到轉(zhuǎn)基因植株上，以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因植株的抗蟲(chóng)基因是否正常表達(dá)。2下圖一為含有目的基因的外源DNA，圖二為某一般質(zhì)粒，表中是幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)。用圖中的外源DNA與質(zhì)粒構(gòu)建重組質(zhì)粒。限制酶BamH SmaEcoR Hind 識(shí)別序列及切割位點(diǎn)GGATCC CCTAGGCCCGGG GGGCCCGAATTC CTTA

38、AGAAGCTT TTCGAA請(qǐng)根據(jù)上述信息分析回答：(1)外源DNA、質(zhì)粒分別有_個(gè)游離的磷酸基團(tuán)。(2)用Sma限制酶切割外源DNA，切開(kāi)的是_之間相連的鍵。(3)如果使用EcoR 酶切割外源DNA和質(zhì)粒，將目的基因片段與切割后的質(zhì)?；旌?，加入_酶，獲得的環(huán)狀DNA可能有_種情況。(4)如果使用BamH 和Hind 兩種限制酶同時(shí)處理外源DNA和質(zhì)粒，比用EcoR 酶切割的優(yōu)點(diǎn)是_。(5)經(jīng)上述操作所得基因表達(dá)載體除_外，還必須有_，目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并可以遺傳給下一代，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。(6)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌中，培養(yǎng)基中需加入_進(jìn)行鑒別和篩選含有

39、重組質(zhì)粒的細(xì)胞。答案(1)2、0(2)胞嘧啶脫氧核苷酸和鳥(niǎo)嘌呤脫氧核苷酸(3)DNA連接3(4)避免切割的外源DNA、質(zhì)粒的黏性末端自身環(huán)化(5)目的基因啟動(dòng)子和終止子(6)抗生素3植物組織培養(yǎng)是克隆植物的一種方法，過(guò)程如圖所示，回答相應(yīng)的問(wèn)題。(1)為了獲得脫毒植株，外植體往往取自植物的花芽、葉芽等處的分生組織，其原因是_。(2)培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基除添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需要添加植物激素，其目的是誘導(dǎo)外植體_。(3)在生產(chǎn)實(shí)踐中為獲得大量的細(xì)胞產(chǎn)物，如紫杉醇，可將_放入液體培養(yǎng)基中，經(jīng)機(jī)械作用分散成單個(gè)細(xì)胞，制備成細(xì)胞懸液，再經(jīng)過(guò)_即可獲得大量細(xì)胞。(4)組織培養(yǎng)過(guò)程需要提供植物生長(zhǎng)和繁殖的最適條

40、件，否則在光學(xué)顯微鏡下可能觀察到發(fā)生_異常，進(jìn)而使植物出現(xiàn)遺傳不穩(wěn)定甚至不育等。(5)植物組織培養(yǎng)技術(shù)不僅應(yīng)用于花卉和果樹(shù)的快速大量繁殖以及脫毒植株的獲取，還廣泛用于_、_、_等育種過(guò)程中。答案(1)這些部位還未受到病毒等病原體的侵害(2)脫分化和再分化(3)愈傷組織細(xì)胞分裂(4)染色體結(jié)構(gòu)與數(shù)目(5)植物體細(xì)胞雜交育種基因工程育種單倍體育種解析(1)剛長(zhǎng)出的芽尖還沒(méi)有受到病毒的侵染，因此用這些部位的細(xì)胞做植物組織培養(yǎng)的材料，可以獲得脫毒植株。(2)在植物組織培養(yǎng)時(shí)，常用生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素來(lái)誘導(dǎo)外植體形成愈傷組織，生根、發(fā)芽，從而形成新的植物體。(3)一般利用外植體脫分化形成的愈傷組織獲得細(xì)胞

41、產(chǎn)物，愈傷組織有很強(qiáng)的分裂能力，通過(guò)培養(yǎng)愈傷組織細(xì)胞可獲得大量細(xì)胞產(chǎn)物。(4)愈傷組織細(xì)胞分裂時(shí)易受環(huán)境條件影響而發(fā)生染色體結(jié)構(gòu)或數(shù)目的異常，故需要在適宜的條件下進(jìn)行組織培養(yǎng)。(5)植物體細(xì)胞雜交育種、基因工程育種、單倍體育種等育種過(guò)程均需要用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)。42006年，我國(guó)培育出首例含綠色熒光蛋白基因(GFP)的克隆豬，它標(biāo)志著我國(guó)在轉(zhuǎn)基因克隆豬技術(shù)領(lǐng)域已達(dá)到世界領(lǐng)先水平。如圖為該綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過(guò)程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：(1)過(guò)程將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時(shí)，采用最多也最有效的方法是_。然后，還要通過(guò)_技術(shù)來(lái)檢測(cè)綠色熒光蛋白基因是否已重組到豬胎兒成纖維細(xì)胞的染

42、色體DNA上。(2)豬胎兒成纖維細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，數(shù)量不斷增多，往往會(huì)發(fā)生_現(xiàn)象，此時(shí)，需要用_等處理分散成細(xì)胞懸液。為了防止培養(yǎng)過(guò)程中的污染，通常還要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的_。(3)過(guò)程實(shí)現(xiàn)的關(guān)鍵是對(duì)母豬進(jìn)行_處理。除此方法之外，還可從已處死的雌豬_中獲取卵母細(xì)胞，采集到的卵母細(xì)胞需培養(yǎng)到_期才可以進(jìn)行過(guò)程。(4)過(guò)程表示_，過(guò)程表示_。答案(1)顯微注射法DNA分子雜交(2)接觸抑制胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)抗生素(3)注射促性腺激素卵巢減數(shù)第二次分裂中(M中)(4)核移植胚胎移植解析(1)過(guò)程將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時(shí)，采用最多也最有效的方法是顯微注射法；要檢測(cè)綠色熒

43、光蛋白基因是否已經(jīng)重組到豬胎兒成纖維細(xì)胞的染色體DNA上，可以采用DNA分子雜交技術(shù)。(2)豬胎兒成纖維細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，數(shù)量不斷增多，往往會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象，此時(shí)，需要用胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)處理使之分散成細(xì)胞懸液；為了防止培養(yǎng)過(guò)程中的污染，通常還需要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素。(3)過(guò)程是超數(shù)排卵過(guò)程，其實(shí)現(xiàn)的關(guān)鍵是對(duì)母豬注射促性腺激素；除此方法之外，還可以從已處死的雌豬卵巢中獲取卵母細(xì)胞，采集到的卵母細(xì)胞需培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期(M中期)才可以進(jìn)行過(guò)程(核移植)。(4)過(guò)程表示核移植，過(guò)程表示胚胎移植。5如圖是某實(shí)驗(yàn)室做的通過(guò)動(dòng)物纖維母細(xì)胞等獲得單抗的實(shí)驗(yàn)研究。據(jù)圖

44、回答下列問(wèn)題：(1)X、Y、Z細(xì)胞的名稱分別是_、_、_。(2)過(guò)程類似于植物組織培養(yǎng)技術(shù)中的_過(guò)程。與纖維母細(xì)胞相比，誘導(dǎo)干細(xì)胞的全能性較_。過(guò)程的實(shí)質(zhì)是_。(3)生產(chǎn)單克隆抗體一般不直接培養(yǎng)B淋巴細(xì)胞，主要原因是_。(4)處需要篩選，從而得到_細(xì)胞，且培養(yǎng)該細(xì)胞的氣體環(huán)境為_(kāi)。答案(1)骨髓瘤細(xì)胞抗原刺激過(guò)的B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞(2)脫分化高基因的選擇性表達(dá)(3)B淋巴細(xì)胞高度分化，不能無(wú)限(或大量)增殖(4)能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤95%的空氣5%的CO2解析(1)圖示過(guò)程為利用動(dòng)物細(xì)胞工程獲得單克隆抗體的過(guò)程，其中X細(xì)胞為骨髓瘤細(xì)胞，Y細(xì)胞為抗原刺激過(guò)的B淋巴細(xì)胞，Z細(xì)胞為X、Y兩細(xì)胞

45、雜交形成的雜交瘤細(xì)胞。(2)過(guò)程是把小鼠的纖維母細(xì)胞誘導(dǎo)成為干細(xì)胞的過(guò)程，該過(guò)程類似于植物組織培養(yǎng)技術(shù)中的脫分化過(guò)程；纖維母細(xì)胞為分化的體細(xì)胞，其全能性低于誘導(dǎo)干細(xì)胞；過(guò)程表示由誘導(dǎo)干細(xì)胞分化成為體細(xì)胞的過(guò)程，其實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)。(3)因?yàn)锽淋巴細(xì)胞高度分化，不能無(wú)限(或大量)增殖，故一般不選用B淋巴細(xì)胞直接進(jìn)行單克隆抗體的制備。(4)因過(guò)程細(xì)胞雜交，可以形成骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞，B細(xì)胞B細(xì)胞，B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞三種雜交細(xì)胞，故需要經(jīng)過(guò)篩選以獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，培養(yǎng)該細(xì)胞的氣體環(huán)境為95%的空氣5%的CO2。6下圖表示不同生物工程的操作過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：(1)若圖為純

46、種荷斯坦奶牛的繁殖過(guò)程，A為良種公牛，B為雌性純種荷斯坦奶牛，a需要經(jīng)過(guò)_處理，才能完成過(guò)程。在操作前，通過(guò)_技術(shù)可獲得較多胚胎。(2)若圖為培育轉(zhuǎn)基因奶牛的過(guò)程，a表示人胰島素基因，b表示載體，則過(guò)程表示_，它是基因工程的核心；過(guò)程中常用_法將C導(dǎo)入細(xì)胞D；在過(guò)程中，將細(xì)胞D置于5%的CO2的氣體環(huán)境中，CO2的作用是_。(3)若C表示通過(guò)植物細(xì)胞工程獲得的細(xì)胞，E表示試管苗，D表示_，過(guò)程應(yīng)轉(zhuǎn)接到_培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。整個(gè)過(guò)程必須在_條件下培養(yǎng)。答案(1)獲能胚胎分割(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建顯微注射維持培養(yǎng)基(液)的pH(2)愈傷組織、叢芽分化無(wú)菌和人工控制7下圖表示利用胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞

47、)所作的一系列研究，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：(1)上圖中的胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)可以從_或_中分離獲取。(2)過(guò)程將胚胎干細(xì)胞置于射線滅活的鼠胎兒成纖維細(xì)胞的飼養(yǎng)層上，并加入動(dòng)物血清、抗生素等物質(zhì)，維持細(xì)胞不分化的狀態(tài)。在此過(guò)程中，飼養(yǎng)層提供干細(xì)胞增殖所需的_，加入抗生素是為了_，該過(guò)程對(duì)于研究細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡的機(jī)理具有重要意義。(3)過(guò)程將帶有遺傳標(biāo)記的ES細(xì)胞注入早期胚胎的囊胚腔，通過(guò)組織化學(xué)染色，用于研究動(dòng)物體器官形成的時(shí)間、發(fā)育過(guò)程以及影響因素，這項(xiàng)研究利用了胚胎干細(xì)胞具有_的特點(diǎn)。在哺乳動(dòng)物早期發(fā)育過(guò)程中，囊胚的后一個(gè)階段是_。(4)過(guò)程是培育轉(zhuǎn)基因小鼠，將獲得的目的基因?qū)肱咛ジ杉?xì)胞

48、之前需構(gòu)建基因表達(dá)載體，目的是_。將構(gòu)建好的表達(dá)載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞最常用的方法是_。(5)過(guò)程得到的小鼠畸胎瘤里面全是軟骨、神經(jīng)管、橫紋肌和骨骼等人類組織和器官。實(shí)驗(yàn)時(shí)，必須去除小鼠的胸腺，使其存在免疫缺陷，其目的是_，該過(guò)程研究的意義在于解決_問(wèn)題。(6)該研究中，包含的生物技術(shù)有_(至少寫(xiě)出兩種)。答案(1)早期胚胎原始性腺(2)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)防止雜菌污染(3)發(fā)育的全能性原腸胚(4)使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以傳給下一代，同時(shí)，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用顯微注射法(5)使移植組織細(xì)胞不會(huì)被排斥臨床上供體器官不足或器官移植后的免疫排斥等(6)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、基因工程、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植解析(1)胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)可以從早期胚胎或原始性腺中分離獲取。(2)胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)所用的飼養(yǎng)層細(xì)胞可以供給干細(xì)胞增殖所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，加入抗生素是為了防止雜菌污染。(3)胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性，通過(guò)組織化學(xué)染色，用于研究動(dòng)物體器官形成的時(shí)間、發(fā)育過(guò)程以及影響