專(zhuān)題15現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題解析版

1、專(zhuān)題15現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題1.(【百?gòu)?qiáng)?！?016屆遼寧省錦州市錦州中學(xué)高三上期中生物試卷)下圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線。 圖中tet R表示四環(huán)素抗性基因，am6表示氨茉青霉素抗性基因，BamH太Hindlll Sma I直線所示為三種限制酶的酶切位點(diǎn)。據(jù)圖回答：(1)圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用 限制酶同時(shí)酶切載體和人乳鐵蛋白基因。篩選 含有重組載體的大腸卞f菌首先需要在含 的培養(yǎng)基上進(jìn)行。能驅(qū)動(dòng)人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞 中特異性表達(dá)的調(diào)控因子是圖中的 。過(guò)程采用的操作方法通常是 。(2)過(guò)程代表的生物技術(shù)是 。對(duì)早期胚胎進(jìn)行切割，經(jīng)過(guò)程可獲得多個(gè)新個(gè)體。目前最常

2、見(jiàn)的是經(jīng)分割產(chǎn)生的同卵 胎。(3)為檢測(cè)人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)，可采用 技術(shù)。(4)對(duì)代孕牛的要求是 。【答案】(1) Hindin和BamH氨茉青霉素 啟動(dòng)子顯微注射(2)胚胎移植雙(3)抗原一抗體雜交(4)有健康體質(zhì)和正常繁殖能力【解析】1)由圖中信息可知，載體上有HindUI和煦吸,油切位點(diǎn)，目的基因上也有它們的酶切位點(diǎn)， 應(yīng)用此2種酶切.當(dāng)人乳鐵蛋白基因和質(zhì)粒隹接成重蛆質(zhì)粒后，思&基因被人乳鐵蛋白基因隔開(kāi)，不是完 整的，而飄既基因是完整的，所以篩選含有重蛆載體的大朧桿菌首先需要含氨王青毒素的培養(yǎng)基上進(jìn)行， 能讓目的基因開(kāi)始表達(dá)的是啟動(dòng)子，啟動(dòng)子是俄也聚合或特異性識(shí)別和結(jié)合的Dg

3、序列，是基因的一個(gè)組 成部分，控制基因表達(dá)轉(zhuǎn)錄的起始時(shí)間和表達(dá)的程度，過(guò)程將目的基因?qū)氲絼?dòng)物中常用顯微注射 法.(2)過(guò)程早期胚胎移入代孕牛的體內(nèi)利用的是胚胎移植的技術(shù)，對(duì)早期胚胎進(jìn)行切割，經(jīng)過(guò)程胚胎移植 過(guò)程可獲得多個(gè)新個(gè)體都發(fā)育成了個(gè)體，目前最常見(jiàn)的是經(jīng)分割產(chǎn)生的同卵雙胎。(3) 一般檢測(cè)目的基因是否表達(dá)里用抗原-抗體雜交的方法。(4)對(duì)代孕牛的一般要求是有健康的體質(zhì)以及能正常繁殖后代。【考點(diǎn)定位】基因工程的原理及技術(shù)；胚胎分割移植【名師點(diǎn)睛】總結(jié)胚胎分割的相關(guān)知識(shí)點(diǎn)：(1)概念：是指采用機(jī)械方法將早期胚胎切割2等份、4等份等，經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù)。(2)意義：來(lái)自同一胚胎的后

4、代具有相同的遺傳物質(zhì)，屬于無(wú)性繁殖。(3)材料：發(fā)育良好，形態(tài)正常的桑棋胚或囊胚，桑棋胚至囊胚的發(fā)育過(guò)程中，細(xì)胞開(kāi)始分化，但其全能性仍很高，也可用于胚胎分割。(4)操作過(guò)程：對(duì)囊胚階段的胚胎分割時(shí)，要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則會(huì)影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)展。2.(【百?gòu)?qiáng)?！?016屆吉林省長(zhǎng)春外國(guó)語(yǔ)學(xué)校高三上學(xué)期期末生物試卷)轉(zhuǎn)基因生物可用于生產(chǎn)人類(lèi)所需要的藥用蛋白，如激素、抗體、疫苗、酶等。下圖甲是通過(guò)生物工程培育能產(chǎn)生人胰島素的煙草的過(guò)程。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：甲Gene II(1)基因工程的核心步驟是 (填字母)。此過(guò)程所需的工具酶是 (2)下圖乙是載體和反轉(zhuǎn)錄得到的胰島素基因的片段，已

5、知限制酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是一GJ GATC6,限制酶n的識(shí)別序列和切點(diǎn)是一J GATC-oGene I和Gene n為質(zhì)粒上的標(biāo)記基因，根據(jù)圖示分析，應(yīng)用限制酶 切割質(zhì)粒，用限制酶 切割目的基因。構(gòu)建的重組質(zhì)粒中，除含有 外源基因、標(biāo)記基因外，還必須含有 和GGATCC目的基因GATCCCTAGGCTAG注：Gene I和Ge碇U表示兩種標(biāo)記基因;。表示限制醉僅有的識(shí)別序列放大C(3) B過(guò)程中，常用 處理使細(xì)菌成為感受態(tài)細(xì)胞，從而利于重組質(zhì)粒的導(dǎo)入。(4) 如果從分子水平檢測(cè)人胰島素基因是否表達(dá)成功，可以采用 方法。(5) 】(1) A限制酶和DNA1接酶(6) I n啟動(dòng)子終止子(7)

6、Ca2+(8) 抗原一抗體雜交【解析】(1)基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，即A過(guò)程，該過(guò)程首先需要限制酶切割含 有目的基因的外源DNA分子和運(yùn)載體，還需用D貼隹接能將目的基因與運(yùn)載體連接形成重組DNA分子.(2)用限制的II切割質(zhì)粒時(shí)會(huì)符兩個(gè)標(biāo)記基因都破壞，因此只能選用限制酶I切割質(zhì)粒，而切割含有 目的基因的外源及加分子時(shí)，只需用限制施II即可.構(gòu)建的重組質(zhì)粒中，除含有外源基因、標(biāo)記基因外， 還必須含有啟動(dòng)子和終止子.(3)將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞時(shí)，常用感受態(tài)細(xì)胞法，即常用Ca2+理使細(xì)菌成為感受態(tài)細(xì)胞，從而利于重組質(zhì)粒的導(dǎo)入。(4)從分子水平上檢測(cè)目的基因是否表達(dá)成功，可以采用抗

7、原-抗體雜交方法。【考點(diǎn)定位】基因工程的原理及技術(shù)【名師點(diǎn)睛】基因工程的基本工具：1、“分子手術(shù)刀”-限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)(1)來(lái)源：主要是從原核生物中分離純化出來(lái)的。(2)功能：能夠識(shí)別雙鏈 DNA分子的某種特定的核甘酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核昔 酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)，因此具有專(zhuān)一性。(3)結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。2、“分子縫合針” -DNA連接酶(1)兩種DNA!接酶(E?coliDNA連接酶和T4DNA1接酶)的比較：相同點(diǎn)：都縫合磷酸二酯鍵。區(qū)別：E?coliDNA連接酶來(lái)源于大腸桿菌， 只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏

8、性末端之間的磷酸二酯鍵連 接起來(lái)；而T4DNA連接酶來(lái)源于T4噬菌體，可用于連接粘性末端和平末端，但連接效率較低.(2)與DNA聚合酶作用的異同：DNA聚合酶只能將單個(gè)核甘酸加到已有的核甘酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵.DNA1接酶是連接兩個(gè) DNM段的末端，形成磷酸二酯鍵。3、“分子運(yùn)輸車(chē)”-載體(1)載體具備的條件：能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，供外源DNA片段插入。具有標(biāo)記基因，供重組 DNA的鑒定和選擇。(2)最常用的載體是質(zhì)粒，它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的、獨(dú)立于細(xì)菌染色體之外，并具有自我復(fù)制 能力的雙鏈環(huán)狀 DNA子。(3)其它載體：噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。

9、3.(【百?gòu)?qiáng)?！?016屆天津市一中高三上學(xué)期第三次月考生物試卷)GDN陛一種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，對(duì)損傷的神經(jīng)細(xì)胞具有營(yíng)養(yǎng)和保護(hù)作用。研究人員構(gòu)建了含GDN雄因的表達(dá)載體(如圖 1所示)，并導(dǎo)入到大反向連接注:bp表示版基對(duì);載體和基因片段上的小箭號(hào) 表示相關(guān)限制醉的醐切位點(diǎn)圖1(1)構(gòu)建含GDN雄因的表達(dá)載體時(shí)，需選擇圖鼠神經(jīng)干細(xì)胞中，用于干細(xì)胞基因治療的研究。請(qǐng)回答: 6 (XH) hp 6 吧邛 6(NHlbp71M) hp2"!即黑網(wǎng)沏電泳分析圖譜注:一表示電泳條帶1 Y2, 3表示電泳泳道圖21中的 限制酶進(jìn)行酶切。(2)經(jīng)酶切后的載體和 GDNFi因進(jìn)行連接，連接產(chǎn)物經(jīng)篩選得到

10、的載體主要有3種：?jiǎn)蝹€(gè)載體自連、GDNF基因與載體正向連接、GDNFi因與載體反向連接(如圖 1所示)。為鑒定這3種連接方式，選擇 Hpal酶和BamHI酶對(duì)篩選得到的載體進(jìn)行雙酶切，并對(duì)酶切后的DNM段進(jìn)行電泳分析，結(jié)果如圖 2所示。圖中第泳道顯示所鑒定的載體是正向連接的。(3)將正向連接的表達(dá)載體導(dǎo)入神經(jīng)干細(xì)胞后， 為了檢測(cè)GDNF1因是否成功表達(dá)，可用相應(yīng)的 與 提取的蛋白質(zhì)雜交。當(dāng)細(xì)胞培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)產(chǎn)生接觸抑制，換瓶后進(jìn)行 培養(yǎng)以 得到更多數(shù)量的細(xì)胞，用于神經(jīng)干細(xì)胞移植治療實(shí)驗(yàn)。(4)對(duì)于神經(jīng)干細(xì)胞可以來(lái)源于胚胎干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化，胚胎干細(xì)胞來(lái)源于 ,在培養(yǎng)時(shí)可以只分 裂

11、不分化，但是通過(guò)誘導(dǎo)可以分化成各種不同的組織細(xì)胞，胚胎干細(xì)胞的這個(gè)特性稱為 。(5)胚胎干細(xì)胞也可以來(lái)自于核移植的重組細(xì)胞，一般體細(xì)胞核移植要比胚胎細(xì)胞核移植難度大，原因 是,而取自卵巢的卵母細(xì)胞需要培養(yǎng)到 期，才可進(jìn)行核移植?！敬鸢浮?1) Xhol(3)抗體傳代(4)原始性腺和早期胚胎發(fā)育的全能性(5)細(xì)胞分化程度大，細(xì)胞核不易實(shí)現(xiàn)全能性M n中期【解析】根據(jù)題意和圖示分析可知：由于GDUF基因兩邊都有醺限制55識(shí)別序列，所以構(gòu)建含 GCDNF基因的表達(dá)載體時(shí)，需選擇圖1中的馳【限制葩進(jìn)行酶切。(2)選擇瞬工魏E犯II期篩選得到的載體進(jìn)疝型嬲，并對(duì)酶切后的D陋片遨皎電泳分析， 結(jié)果如圖2所

12、示，由于GD蝦基因中有8g乩嬲酶烈，所以圖中第泳道顯示所鑒定的載體是正向連接 的.(3)為了檢測(cè)GDN雄因是否成功表達(dá)，可利用抗原 -抗體雜交技術(shù)，用相應(yīng)的抗體與提取的蛋白質(zhì)雜交，當(dāng)培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)，需進(jìn)行傳代培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細(xì)胞，用于細(xì)胞干細(xì)胞 移植治療實(shí)驗(yàn)。(4)胚胎干細(xì)胞來(lái)源于原始性腺和早期胚胎，在培養(yǎng)時(shí)可以只分裂不分化，但是通過(guò)誘導(dǎo)可以分化成 各種不同的組織細(xì)胞，說(shuō)明細(xì)胞具有全能性。(5)由于體細(xì)胞分化程度高，不容易表達(dá)全能性，因此利用體細(xì)胞進(jìn)行核移植技術(shù)的難度明顯高于利用胚胎細(xì)胞進(jìn)行核移植。采集的卵母細(xì)胞一般要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期，才能具備受精作用的能力，才能用

13、于實(shí)驗(yàn)，核移植實(shí)驗(yàn)中要用微型吸管吸出供體細(xì)胞的細(xì)胞核，植入去核的卵母細(xì)胞中，與之融合形 成重組細(xì)胞?！究键c(diǎn)定位】基因工程的原理及技術(shù)、胚胎干細(xì)胞的研究與應(yīng)用【名師點(diǎn)睛】總結(jié)：1、基因工程技術(shù)的基本步驟：(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成.(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和 標(biāo)記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣.將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞 的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法； 將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法

14、是感受態(tài)細(xì)胞法。(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DN蝠否插入目的基因-DNA分子雜交技術(shù)；檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA-分子雜交技術(shù)；檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)-抗原-抗體雜交技術(shù).個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程：取動(dòng)物組織塊一剪碎組織一用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞一制成細(xì)胞懸液一轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中(原代培養(yǎng))一放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)一貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì) 胞懸液一轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液(傳代培養(yǎng))一放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。)胰島素A、B鏈分別4.(【百?gòu)?qiáng)校】2016屆江蘇常州第一中學(xué)江陰南菁高中高三兩校聯(lián)考

15、生物試卷表達(dá)法是生產(chǎn)胰島素的方法之一。圖1是該方法所用的基因表達(dá)載體，圖2表示利用大腸桿菌作為工程菌生產(chǎn)人胰島素的基本流程(融合蛋白A、B分別表示3-半乳糖昔酶與胰島素A、B鏈融合的蛋白)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：M軻睡點(diǎn)門(mén)動(dòng)腆島素或13進(jìn)端碼區(qū)蟆節(jié)許碓素抗性底因 圖i導(dǎo)入族段 澳化保_ w晚化 "Aw * 3她化大曲桿曲澳化軾_ 獨(dú)化.一中舞一融合蛋白H5 腆用素A施(2)圖1中啟動(dòng)子是(1)圖1基因表達(dá)載體中沒(méi)有標(biāo)注出來(lái)的基本結(jié)構(gòu)是酶識(shí)別和結(jié)合的部位，有了它才能啟動(dòng)目的基因的表達(dá)；氨茉青霉素抗性基因的作用是(3)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)必需的工具酶有(4) 3 -半乳糖甘酶與胰島素 A鏈或B鏈

16、融合表達(dá)，可將胰島素肽鏈上蛋白酶的切割位點(diǎn)隱藏在內(nèi)部,其意義在于(5)澳化鼠能切斷肽鏈中甲硫氨酸竣基端的肽鍵，用澳化氟處理相應(yīng)的融合蛋白能獲得完整的或B鏈，且3 -半乳糖甘酶被切成多個(gè)肽段，這是因?yàn)槟愕耐茰y(cè)結(jié)果(6)根據(jù)圖2中胰島素的結(jié)構(gòu)，請(qǐng)推測(cè)每個(gè)胰島素分子中所含游離氨基的數(shù)量。(1)終止子(2) RNA聚合作為標(biāo)記基因，將含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌篩選出來(lái)(3)限制酶和DNAdI接酶(4)防止胰島素的 A B鏈被菌體內(nèi)蛋白酶降解(5) 3 -半乳糖甘酶中含多個(gè)甲硫氨酸，而胰島素A、B鏈中不含甲硫氨酸(6)至少2個(gè)兩條肽鏈的一端各有一個(gè)游離的氨基，氨基酸的R基中可能還含有游離的氨基【解析】C1)

17、基因表達(dá)載體必須具有啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因、目的基因，在圖中已經(jīng)標(biāo)出來(lái)的有臺(tái)子、 標(biāo)記基因(氨主青霉毒抗性基因)、目的基因f胰島素也或B窿編碼區(qū))，所以圖中沒(méi)有標(biāo)注出來(lái)的基本結(jié) 構(gòu)是終止子；(2)啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，啟動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄，進(jìn)而進(jìn)行目的基因的翻譯，氨茉青霉素抗性基因是標(biāo)記基因，其作用是作為標(biāo)記基因，將含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌篩選出來(lái)；(3)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)先用同種限制酶切割目的基因和載體，再用DNA1接酶使切割下來(lái)的目的基因和載體縫合在一起；(4) 3 -半乳糖甘酶與胰島素 A鏈或B鏈融合表達(dá),可將胰島素肽鏈上蛋白酶的切割位點(diǎn)隱藏在內(nèi)部防止胰島素的 A B鏈暴露，進(jìn)

18、而被菌體內(nèi)蛋白酶降解；(5)澳化鼠能切斷肽鏈中甲硫氨酸竣基端的肽鍵，用澳化氟處理相應(yīng)的融合蛋白能獲得完整的A鏈或B鏈，且3 -半乳糖甘酶被切成多個(gè)肽段 ，這是因?yàn)?-半乳糖甘酶中含多個(gè)甲硫氨酸，而胰島素A、B鏈中不含甲硫氨酸。2個(gè)，可能有其他的氨青蒿素是治療瘧疾的重要藥,并且發(fā)現(xiàn)酵母細(xì)胞也能(6) 一條肽鏈的一端各有一個(gè)游離的氨基，氨基酸的R基中可能還含有游離的氨基，根據(jù)圖 2中胰島素的結(jié)構(gòu)，胰島素含兩條肽鏈，所以每個(gè)胰島素分子中所含游離氨基的數(shù)量至少是 基在R基上?！究键c(diǎn)定位】基因工程5.(【百?gòu)?qiáng)校】2016屆黑龍江省哈爾濱三中高三上第三次檢測(cè)生物試卷)物。研究人員已經(jīng)弄清了青蒿細(xì)胞中青蒿素

19、的合成途徑(如圖中實(shí)線方框內(nèi)所示)夠產(chǎn)生合成青蒿素的中間產(chǎn)物FPP (如圖中虛線方框內(nèi)所示)。結(jié)合所學(xué)知識(shí)回答下列問(wèn)題:酵母細(xì)胞固醇.ERG9.FPP合成能基因 一® mKNAI吉蒿細(xì)胞單糖一 ipp FPP 合叫 FPP小穌音高眼前體一*當(dāng)蒿素(1)瘧疾俗稱“打擺子”，是由瘧原蟲(chóng)引起的寒熱往來(lái)癥狀的疾病。當(dāng)瘧原蟲(chóng)寄生在人體中時(shí)，會(huì)引起人的免疫反應(yīng)，使 細(xì)胞產(chǎn)生淋巴因子。同時(shí) B細(xì)胞在受到刺激后，在淋巴因子的作用下增殖分化成 細(xì)胞，產(chǎn)生抗體。(2)根據(jù)圖示代謝過(guò)程，科學(xué)家在培育能產(chǎn)生青蒿素的酵母細(xì)胞過(guò)程中，要向中導(dǎo)入的基因是,具體操作中可利用 技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的 DNA上是否插入目

20、的基因。(3)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，用不同類(lèi)型的 切割DN所，可能產(chǎn)生 末端，也可能產(chǎn)生 末端。(4)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，酵母細(xì)胞導(dǎo)入相關(guān)基因后，該基因能正常表達(dá)，但酵母菌合成的青蒿素仍很少，根據(jù) 圖解分析原因可能是 ?！敬鸢浮?1) T 漿(2)酵母細(xì)胞 ADS 酶基因 DNA 分子雜交(3)限制酶 黏性 平(4)酵母細(xì)胞中部分 FPP用于合成固醇【解析】(1)當(dāng)瘧原蟲(chóng)寄生在人體中時(shí)，會(huì)引起人的免疫反應(yīng)，使T細(xì)胞產(chǎn)生淋巴因子。同時(shí) B細(xì)胞在受到刺激后，在淋巴因子的作用下增殖分化成漿細(xì)胞，產(chǎn)生抗體。(2)由于酵母細(xì)胞中也能合成 FPP, FPP形成青蒿素過(guò)程還需要 ADSB和CYP71AV11參與，所以需

21、要 導(dǎo)入ADS酶基因、CYP71AV11基因，RNA聚合酶參與 DNA勺轉(zhuǎn)錄過(guò)程。(3)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)， 用不同類(lèi)型的限制酶切割 DNA,可能產(chǎn)生黏性末端， 也可能產(chǎn)生平末端。(4)由圖可知，酵母細(xì)胞中部分 FPP用于合成固醇，使合成青蒿素的量減少。【考點(diǎn)定位】基因工程6.(【百?gòu)?qiáng)?！?016屆海南省海口中學(xué)高三第四次月考生物試卷)基因工程和植物細(xì)胞工程技術(shù)在科 研和生產(chǎn)實(shí)踐中有廣泛應(yīng)用，請(qǐng)據(jù)圖回答:與載體結(jié)合篩選 萌發(fā)獲取目的基因 一重組載體一受體細(xì)胞一*重組體一愈傷組織一胚狀體一植物體(1)圖中過(guò)程是利用了植物的 技術(shù)，其原理是 ,該過(guò)程須在無(wú)菌條件下 進(jìn)行，培養(yǎng)基中除加入營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，

22、還需添加 等物質(zhì)，作用是 。(2)若要獲取轉(zhuǎn)基因植物人工種子，需培養(yǎng)到 階段，再進(jìn)行人工種皮的包裹；如用植物細(xì)胞實(shí)現(xiàn)目的基因所表達(dá)的蛋白質(zhì)類(lèi)藥物的工廠化生產(chǎn)，培養(yǎng)到 階段即可。(3)目前可采用莖尖組織培養(yǎng)技術(shù)來(lái)進(jìn)行作物脫毒，原因是 。【答案】(1)植物組織培養(yǎng)植物細(xì)胞的全能性植物激素(植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑)促進(jìn)細(xì)胞分裂、生長(zhǎng)、分化(2)胚狀體愈傷組織(3)植物分生區(qū)附近(如莖尖)的病毒極少，甚至無(wú)病毒3【解析】(1)圖中表示植物組織培養(yǎng)過(guò)程，其原理是植物細(xì)胞的全能性,該過(guò)程須在無(wú)菌條件下 進(jìn)行，培養(yǎng)基中除加氏營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需添加細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素等物質(zhì)，作用是促進(jìn)細(xì)胞分裂、生長(zhǎng)、 分化.(2)人工種

23、子是指通過(guò)植物組織培養(yǎng)得到的丘狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，通過(guò)人工薄膜包 裝得到的種子.所以要茯取轉(zhuǎn)基因植物人工種子，需培養(yǎng)到跖狀體階殷，再進(jìn)行人工種皮的包裹；如用植 物細(xì)胞實(shí)現(xiàn)目的基因所表達(dá)的蛋白質(zhì)類(lèi)藥物的工廠化生產(chǎn)，培養(yǎng)到愈傷組織階殷即可.(3)植物的莖尖、根尖分生區(qū)附近病毒極少，或無(wú)病毒，切取植物分生區(qū)(莖尖)組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行作物 脫毒?！究键c(diǎn)定位】基因工程的原理及技術(shù)；植物培養(yǎng)的條件及過(guò)程7.(【百?gòu)?qiáng)?！?016屆黑龍江省牡丹江一中高三上學(xué)期期末生物試卷)回答下列問(wèn)題：(1)若想利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得突變體，應(yīng)用物理誘變或化學(xué)誘變的方法處理 (填相應(yīng)結(jié)構(gòu))。若番茄細(xì)胞內(nèi)有 m條

24、染色體，馬鈴薯細(xì)胞含 n條染色體，則植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得的“番茄-馬鈴薯”細(xì)胞內(nèi)含 條染色體(2) SR-PC幅對(duì)移植前的人胚胎進(jìn)行性別鑒定的技術(shù)，需從被測(cè)胚胎的 中取出幾個(gè)細(xì) 胞，以Y染色體上SRY基因(性別決定基因)的一段序列作引物，用被測(cè)胚胎DNA作模板進(jìn)行PCRT增。如果某早期胚胎檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，則可判斷該胚胎發(fā)育成的個(gè)體性別是 。(3)生物技術(shù)是一把雙刃劍，由于科學(xué)發(fā)展水平的限制，在轉(zhuǎn)基因生物中，有時(shí)候會(huì)出現(xiàn)一些人們意想不到的后果，引發(fā)了人們?cè)谑澄锇踩?、生物安全?安全三個(gè)方面發(fā)生了激烈的爭(zhēng)論。2002年，英國(guó)一對(duì)夫婦通過(guò)設(shè)計(jì)試管嬰(4)為解決不孕夫婦的生育問(wèn)題而出現(xiàn)了試管嬰兒技術(shù)

25、，而兒，利用新生兒臍帶血中造血干細(xì)胞，挽救患地中海貧血癥的男孩。這兩項(xiàng)技術(shù)的區(qū)別是設(shè)計(jì)試管嬰兒技 術(shù)。(5)生態(tài)工程所遵循的基本原理有物質(zhì)循環(huán)再生原理、 、物種多樣性原理、整體性原 理及?！敬鸢浮?1)愈傷組織 m+n(2)滋養(yǎng)層 男性(3)環(huán)境(4)胚胎移植前需要進(jìn)行遺傳學(xué)診斷(5)協(xié)調(diào)與平衡原理、系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理【解析】(1)若想利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得突變體，應(yīng)用物理誘變或化學(xué)誘變的方法處理愈傷組織。若番茄細(xì)胞內(nèi)有 m條染色體，馬鈴薯細(xì)胞含 n條染色體，則植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得的“番茄-馬鈴薯”細(xì)胞內(nèi)含m+n條染色體(2) SR-PC幅對(duì)移植前的人胚胎進(jìn)行性別鑒定的技術(shù)，需從被測(cè)胚胎的

26、滋養(yǎng)層中取出幾個(gè)細(xì)胞，以Y染色體上SRY基因(性別決定基因)的一段序列作引物，用被測(cè)胚胎DNA作模板進(jìn)行PCFT增。如果某早期胚胎檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，則可判斷該胚胎發(fā)育成的個(gè)體性別是男性。(3)生物技術(shù)是一把雙刃劍，由于科學(xué)發(fā)展水平的限制，在轉(zhuǎn)基因生物中，有時(shí)候會(huì)出現(xiàn)一些人們意想不到的后果，引發(fā)了人們?cè)谑澄锇踩⑸锇踩铜h(huán)境安全三個(gè)方面發(fā)生了激烈的爭(zhēng)論。(4)為解決不孕夫婦的生育問(wèn)題而出現(xiàn)了試管嬰兒技術(shù)，而 2002年，英國(guó)一對(duì)夫婦通過(guò)設(shè)計(jì)試管嬰兒，利用新生兒臍帶血中造血干細(xì)胞，挽救患地中海貧血癥的男孩。這兩項(xiàng)技術(shù)的區(qū)別是設(shè)計(jì)試管嬰兒技 術(shù)胚胎移植前需要進(jìn)行遺傳學(xué)診斷。(5)生態(tài)工程所遵循的基本

27、原理有物質(zhì)循環(huán)再生原理、協(xié)調(diào)與平衡原理、物種多樣性原理、整體性原理及系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理。【考點(diǎn)定位】植物組織培養(yǎng)；生態(tài)工程；基因工程8.(【百?gòu)?qiáng)校】2016屆湖北省荊門(mén)市高三元月調(diào)考生物試卷)下圖為利用現(xiàn)代生物技術(shù)治療遺傳性糖尿病的流程示意圖，據(jù)圖回答相關(guān)問(wèn)題。去核卵去細(xì)胞*體細(xì)胞重組細(xì)胞A蟲(chóng)組細(xì)悒H述拄艮有1E常曲電出細(xì)胞上空叫白4附的,定向飾號(hào)功能的璃島樣拙胞聯(lián)好任冽掘(1)圖中過(guò)程表示 技術(shù)。(2)圖中過(guò)程核心步驟是 ,需要用到的酶是 （3）重組細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中除了加入誘導(dǎo)物和水、無(wú)機(jī)鹽、維生素、葡萄糖、氨基酸等必需的營(yíng)養(yǎng)成分外，往往需要特別加入 ,同時(shí)在含 的無(wú)菌、恒溫培養(yǎng)箱

28、中進(jìn)行培養(yǎng)。（4）胚胎干細(xì)胞一般是從 中分離出來(lái)的一類(lèi)細(xì)胞，在功能上具有 。（5）定向誘導(dǎo)使重組細(xì)胞 B發(fā)生,從而形成功能專(zhuān)一的胰島樣細(xì)胞。【答案】（1）核移植（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建限制性內(nèi)切酶（或限制酶）、DNA1接酶（3）（動(dòng)物）血清 5% 的CO（4）早期胚胎或原始性腺發(fā)育的全能性（5）細(xì)胞分化（或基因選擇性表達(dá)）【解析】C1）圖中是體細(xì)胞的細(xì)胞核，過(guò)程表示核移植技術(shù)，以形成重蛆細(xì)胞.（2）圖中過(guò)程是基因工程，其核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，需要用到的酶是限制能和D岫連接 時(shí)（3）重組細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中除了加入誘導(dǎo)物和水、無(wú)機(jī)鹽、維生素、葡萄糖、氨基酸等心 需的營(yíng)養(yǎng)成分外，往往

29、需要特別加入動(dòng)物血清等天然成分，同時(shí)在含5%的CO：的無(wú)菌、恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行 培養(yǎng).（4）胚胎干細(xì)胞一般是從早期胚胎或原始性腺中分離出來(lái)的一類(lèi)細(xì)胞，在功能上具有發(fā)育的全能性.<5）定向誘導(dǎo)使重蛆細(xì)胞B發(fā)生細(xì)胞分化（或基因選擇性表達(dá)），從而形成功能專(zhuān)一的胰島樣細(xì)胞.【考點(diǎn)定位】基因工程、細(xì)胞工程、胚胎工程9.（【百?gòu)?qiáng)?！?016屆寧夏銀川市第二中學(xué)高三元月份月考生物試卷）甲型流感（HN）病毒在世界各地大面積蔓延，有些國(guó)家還出現(xiàn)了死亡病例?？茖W(xué)家已分離出甲型H1N1病毒（一種RNA病毒）。某制藥廠根據(jù)下面流程圖生產(chǎn)預(yù)防和治療甲型流感的抗體，請(qǐng)據(jù)圖回答有關(guān)問(wèn)題?，F(xiàn)用甲*細(xì)眼丙細(xì)包乙后定培養(yǎng)基單

30、孑師程（1）進(jìn)行過(guò)程a之前，必須對(duì)小鼠注射 ,使小鼠產(chǎn)生免疫反應(yīng)。 若細(xì)胞甲是小鼠骨髓瘤細(xì)胞，則細(xì)胞乙是從小鼠體內(nèi)提取的 細(xì)胞。（2）促進(jìn)b過(guò)程常用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是 。假設(shè)僅考慮某兩個(gè)細(xì)胞的融合，則可形成 種類(lèi)型的細(xì)胞丙，因此需要特定的選擇培養(yǎng)基篩選出 細(xì)胞用于培養(yǎng)。選出此細(xì)胞后，還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和 檢測(cè)，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。（3）理論上，注射了該抗體的人群不能長(zhǎng)期具有對(duì)甲型流感的免疫能力，試分析原因。 （至少寫(xiě)出兩點(diǎn)）?！敬鸢浮浚?）滅活的甲型流感（HN）病毒B淋巴（2）聚乙二醇 三雜交瘤抗體（3）抗體存留時(shí)間較短、 HN病毒變異【解析】（1）由于本題的目的是

31、制備用于預(yù)防和治療甲型流感的單克隆抗體，B細(xì)胞只能是取自感染HINi病毒的動(dòng)物或人體內(nèi)的 B淋巴細(xì)胞，所以在進(jìn)行過(guò)程 a之前，必須對(duì)小鼠注射滅活的甲型流感（HINi）病毒，使小鼠產(chǎn)生免疫反應(yīng)。（2）促進(jìn)b過(guò)程常用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是聚乙二醇，僅考慮兩個(gè)細(xì)胞的融合，則可形成乙細(xì)胞-乙細(xì)胞、甲細(xì)胞-甲細(xì)胞、乙細(xì)胞-甲細(xì)胞3種類(lèi)型的丙細(xì)胞，為了從中篩選出乙細(xì)胞-甲細(xì)胞即雜交瘤細(xì)胞，必須用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，選出此細(xì)胞后，還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選，就可獲得足 夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞，篩選出的細(xì)胞（雜交瘤細(xì)胞）既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體。（3）理論上，注射了該抗體的人群不能長(zhǎng)期

32、具有對(duì)甲型流感的免疫能力，原因是HINi病毒易發(fā)生變異，而抗原抗體的結(jié)合具有特異性，且抗體的存活有一定的時(shí)間?！究键c(diǎn)定位】本題考查單克隆抗體相關(guān)知識(shí)，意在考查考生識(shí)記所列知識(shí)點(diǎn)，并能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)做出 合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力?！久麕燑c(diǎn)睛】單克隆抗體制備過(guò)程中的兩次篩選第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，即AB型細(xì)胞（A為B淋巴細(xì)胞，B為骨髓瘤細(xì)胞），不需要 A B、AA BB型細(xì)胞。第二次篩選：利用多孔板法和抗原一抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。10.（【百?gòu)?qiáng)校】2016屆山東省濟(jì)南外國(guó)語(yǔ)學(xué)校高三 1月模擬測(cè)試生物試卷） 科學(xué)家通過(guò)誘導(dǎo)黑鼠體細(xì)胞去分化獲得

33、誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞（iPS）,繼而利用iPS細(xì)胞培育出與黑鼠遺傳特性相同的克隆鼠，流程如下:黑鼠（體加曲供體）透導(dǎo)因子LP片細(xì)捌體細(xì)胞特殊處理*2 細(xì)胞胚胎胚胎供體C內(nèi)細(xì)胞團(tuán)不發(fā)育）重組囊胚4代孕母鼠）（1）從黑鼠體內(nèi)獲得體細(xì)胞后，對(duì)其進(jìn)行的初次培養(yǎng)稱為 ,培養(yǎng)的細(xì)胞在貼壁成長(zhǎng)至充鏈滿培養(yǎng)皿底時(shí)停止分裂，這種現(xiàn)象稱為（2）圖中2細(xì)胞胚胎可用人工方法從灰鼠輸卵管內(nèi)獲得，該過(guò)程稱為 ,也可從灰鼠 體內(nèi)取出卵子，通過(guò) 后進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)獲得。（3）圖中重組囊胚通過(guò) 技術(shù)移入白鼠子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育，暫不移入的胚胎可使用 方法保存。（4）小鼠胚胎干細(xì)胞（ES）可由囊胚的 分離培養(yǎng)獲得，iPS與ES細(xì)胞同樣具有

34、發(fā)育全 能性，有望在對(duì)人類(lèi)iPS細(xì)胞進(jìn)行定向 后用于疾病的細(xì)胞治療?！敬鸢浮浚?）原代培養(yǎng)接觸抑制（2）沖卵體外受精（3）胚胎移植 冷凍（或低溫）（4）內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞誘導(dǎo)分化【解析】（1）原代培養(yǎng)指將動(dòng)物組織用能處理成單個(gè)細(xì)胞后進(jìn)行的初次培養(yǎng)，接觸抑制指貼壁的細(xì)胞 分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂噌殖的現(xiàn)家.<2）將早期胚胎從母牛子宮中;1中洗出來(lái)的方法叫沖卵.（3）暫不進(jìn)行胚胎移植的胚胎可放入-196C的液氮中冷凍保存.（4）胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞，是由早期胚胎或原始性腺分離出來(lái)的一類(lèi)細(xì)胞，藏與ES細(xì)胞一 樣，可通過(guò)定向誘導(dǎo)分化修補(bǔ)某些功能異常的細(xì)胞來(lái)治療疾病0【考點(diǎn)定位

35、】動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過(guò)程；胚胎移植；胚胎干細(xì)胞的來(lái)源及分化【名師點(diǎn)睛】原代培養(yǎng)指將動(dòng)物組織用酶處理成單個(gè)細(xì)胞后進(jìn)行的初次培養(yǎng)，接觸抑制指貼壁的細(xì)胞 分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖的現(xiàn)象；將早期胚胎從母牛子宮中沖洗出來(lái)的方法叫 沖卵；暫不進(jìn)行胚胎移植的胚胎可放入-196 C的液氮中冷凍保存；胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞，是由早期胚胎或原始性腺分離出來(lái)的一類(lèi)細(xì)胞，iPS與ES細(xì)胞一樣，可通過(guò)定向誘導(dǎo)分化修補(bǔ)某些功能異常的細(xì)胞來(lái)治療疾病。11.（【百?gòu)?qiáng)?！?016屆西藏自治區(qū)拉薩中學(xué)高三上第四次月考生物試卷）抗凝血酶出蛋白是一種血漿糖蛋白，臨床上主要用于血液性疾病的治療。下圖為培育轉(zhuǎn)

36、基因奶牛獲得抗凝血酶出蛋白的流程?；卮饐?wèn)題:抗凝血酶m蛋白牛奶其他蛋白(i)過(guò)程是,該過(guò)程常用的方法是 。擴(kuò)增抗凝血酶 出蛋白基因經(jīng)常采用 技術(shù)。(2)過(guò)程包括 技術(shù)和 技術(shù)；可用 技術(shù)獲得多只與該轉(zhuǎn)基因奶牛遺傳物質(zhì)相同的牛犢。(3)若要檢測(cè)牛奶中是否含有抗凝血酶出蛋白，可采用 技術(shù)。(4)如果檢測(cè)發(fā)現(xiàn)抗凝血酶出蛋白基因被導(dǎo)入了受精卵，但卻沒(méi)有檢測(cè)到抗凝血酶出蛋白的存在，那應(yīng)該考慮分別位于目的基因首端和末端的 沒(méi)有設(shè)計(jì)好，應(yīng)從這方面考慮改善?！敬鸢浮?1)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞顯微注射法 PCR(2)早期胚胎培養(yǎng)胚胎移植胚胎分割(3)抗原-抗體雜交(4)啟動(dòng)子和終止子【解析】(1)過(guò)程是將目的

37、基因?qū)胧荏w細(xì)胞，常用的方法是顯微注射法.利用PC叱術(shù)能擴(kuò)增抗凝血酶ID蛋白基因。(2)過(guò)程是受精卵需要經(jīng)過(guò)早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)，可用胚胎分割技術(shù)獲得多只與該轉(zhuǎn) 基因奶牛遺傳物質(zhì)相同的牛犢。(3)若要檢測(cè)牛奶中是否含有人血清白蛋白，這屬于翻譯水平的檢測(cè)，可采用抗原-抗體雜交技術(shù)。(4)基因表達(dá)載體由啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因和目的基因組成.啟動(dòng)子位于首端，終止子位于尾端?！究键c(diǎn)定位】胚胎移植；基因工程的原理及技術(shù)【名師點(diǎn)睛】知識(shí)拓展：1、PCFT增技術(shù)與自然條件下的 DN限制相比，不同之處在于，需要引物， 需要耐高溫的熱穩(wěn)定性 DN咪合酶。2、基因工程的操作步驟中，在導(dǎo)入目的基因之前，

38、需要構(gòu)建基因表達(dá) 載體，即將血清白蛋白基因與奶牛乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起。12.(【百?gòu)?qiáng)校】2016屆云南師范大學(xué)附屬實(shí)驗(yàn)中學(xué)高三12月月考生物試卷) 利用胚胎工程培育“試 管?！钡幕具^(guò)程如圖所示。據(jù)圖回答問(wèn)題: 狼差I(lǐng)良林母牛眄細(xì)副-I攜羔. 芬坤4毒 -*受蔣卵 三工 早期胚胎 普福母牛子宮上里) 優(yōu)管牛圍.公牛I旦，器干|-1 (1)受精卵是胚胎發(fā)育的開(kāi)端，圖中的卵細(xì)胞達(dá)到 期，才具備受精的能力，而精子需經(jīng)過(guò) 過(guò)程才能和卵細(xì)胞結(jié)合。(2)在體外培養(yǎng)受精卵時(shí)，除了給予一定量的Q以維持細(xì)胞呼吸外，還需要提供CG氣體以維持(3)圖中過(guò)程 A稱為,它在胚胎工程中的意義在于 。(

39、4)若要獲得遺傳物質(zhì)完全相同的兩個(gè)新個(gè)體，可對(duì)發(fā)育到 階段的早期胚胎進(jìn)行胚胎分割。同時(shí)，可以通過(guò)取樣 進(jìn)行分子水平的早期胚胎性別鑒定；也可以在細(xì)胞水平上通過(guò)對(duì) 的分析進(jìn)行性別鑒定。【答案】(1)減數(shù)第二次分裂中精子獲能(2)培養(yǎng)液(基)的 pH(3)胚胎移植 提高優(yōu)良母畜的繁殖率(4)桑棋胚期或囊胚期DNA染色體(或性染色體)【解析】(1)卵細(xì)胞直到調(diào)教第二次分裂中期時(shí)，才具備受精能力；精子必須經(jīng)過(guò)精子獲能的過(guò)程才 能和卵細(xì)胞結(jié)合.(外二氧化碳的作用是維持培養(yǎng)液的pH.(3)圖中過(guò)程上稱為胚胎移植，它在胚胎工程 中的意義在于提高優(yōu)良母畜的繁殖率.(4)胚胎分割一般選擇桑根胚期或囊胚期階段的早期

40、胚胎二可以通 過(guò)取樣D悔進(jìn)行分子水平的早期胚胎性別鑒定、也可以在細(xì)胞水平上通過(guò)對(duì)染色體的分析進(jìn)行性別鑒定?！究键c(diǎn)定位】胚胎工程【名師點(diǎn)睛】早期胚胎發(fā)育注意的問(wèn)題(1)起點(diǎn)是受精卵分裂，在輸卵管內(nèi)完成受精作用時(shí)即已開(kāi)始，直至發(fā)育成為成熟的胎兒。(2)卵裂期的特點(diǎn)：細(xì)胞有絲分裂使細(xì)胞數(shù)目增加，但胚胎總體積并不增加或略縮小，因此每個(gè)細(xì)胞 的體積會(huì)隨分裂的進(jìn)行不斷縮小，但核內(nèi)遺傳物質(zhì)并未減少。(3)桑棋胚至囊胚的發(fā)育過(guò)程中，細(xì)胞開(kāi)始分化，但其全能性仍很高，也可用于胚胎分割。(4)原腸胚的特點(diǎn)：個(gè)體發(fā)育中分化能力最強(qiáng)，細(xì)胞已分化形成外、中、內(nèi)三個(gè)胚層。(5)個(gè)體發(fā)育過(guò)程中從桑棋胚階段開(kāi)始初步分化，分化出

41、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)層細(xì)胞。13.(【百?gòu)?qiáng)?！?016屆天津南開(kāi)中學(xué)高三第一次月考生物試卷)下面兩幅圖分別是單克隆抗體制備過(guò)程和克隆羊培育過(guò)程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：IB淋巴細(xì)病向 骨筋瘤細(xì)胞廠$)雜交痛細(xì)胞一選出能產(chǎn)生特定抗體 的細(xì)胞群，繼續(xù)培養(yǎng)圖甲黑面綿羊白面綿羊去核卵細(xì)胞乳腺細(xì)胞核，細(xì)細(xì)胞|電腓相朝激期胚胎.儂.另一母綿羊子宮|妊娠、出生克隆羊塞利"(1)圖甲和圖乙所示的過(guò)程中，都必須用到的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段是 。進(jìn)行(2)圖甲中過(guò)程常在促融劑 誘導(dǎo)下完成，過(guò)程中至少涉及兩次篩選：第一次是利用初步篩選，第二次是利用的方法篩選出既能大量增殖，又能產(chǎn)生單一性抗體的雜交瘤細(xì)胞。(3)

42、單克隆抗體結(jié)合上抗癌藥物能定向攻擊癌細(xì)胞，這一應(yīng)用可形象地稱為 。(4)若不考慮環(huán)境因素影響，克隆羊的性狀會(huì)完全像白面綿嗎？ 。原因是。(5)圖乙過(guò)程的技術(shù)具有多種用途，但是不能。A.有選擇地繁殖某一性別的家畜B.繁殖家畜中的優(yōu)良個(gè)體C.用于保存物種D.改變動(dòng)物的核基因(6)在現(xiàn)有技術(shù)條件下，還不能將從動(dòng)物體內(nèi)分離出來(lái)的成熟的體細(xì)胞直接培養(yǎng)成一個(gè)新個(gè)體，而是必須將體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞中才能發(fā)育成新個(gè)體，你認(rèn)為原因最可能是。A.卵細(xì)胞大，便于操作B.卵細(xì)胞含有的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)多C.卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)可使體細(xì)胞核全能性得到表達(dá)D.重組細(xì)胞才具有全能性【答案】(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(2)聚乙二醇(或

43、PEG選擇性培養(yǎng)基抗體檢測(cè)和克隆化培養(yǎng)(3)生物導(dǎo)彈(4)不會(huì)卵細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)的遺傳物質(zhì)也能控制某些性狀(5) D(6) C【解析】（1）圖甲單克隆抗體制備過(guò)程，圖乙克隆羊培育過(guò)程，都必須用到的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段 是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng).（2）語(yǔ)導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合最常用的誘導(dǎo)方法是滅活的病毒:第一次是利用選擇性培養(yǎng)基狂艘篩選，第 二次是利用抗體檢測(cè)的方法篩選.（3）單克隆抗體能定向攻擊癌細(xì)胞，主要是利用其特異性，這一應(yīng)用可形象地稱為生物導(dǎo)彈.（4）若不考慮環(huán)境因素影響，克隆羊的性狀不是全部像白面揭羊，因?yàn)槁鸭?xì)胞細(xì)胞質(zhì)中的線粒體遺傳 物質(zhì)也能控制某些性狀.（5）動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用：加速家畜遺傳改良進(jìn)程

44、，促進(jìn)良畜群繁育；保護(hù)瀕危物種，增大 存活數(shù)量；生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白；作為異種移植的供體；用于組織器官的移植等.只有通過(guò)可遺傳 變異改變動(dòng)物的核基因。（6）由于卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)可使體細(xì)胞胞核全能性得到表達(dá)，所以選擇卵細(xì)胞作為核移植的供體細(xì)胞?！究键c(diǎn)定位】單克隆抗體的制備過(guò)程；動(dòng)物體細(xì)胞克隆14 .（【百?gòu)?qiáng)?！?016屆陜西省西安中學(xué)高三重點(diǎn)班上學(xué)期第四次檢測(cè)生物試卷）單純皰疹病毒I型（HSV-I）可引起水泡性口唇炎。利用雜交瘤技術(shù)制備出抗HSV-1的單克隆抗體可快速檢測(cè) HSV-1。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）在制備抗HSV-I的單克隆抗體的過(guò)程中，先給小鼠注射一種純化的HSV-1蛋白，一段時(shí)間后，若小

45、鼠血清中抗 的抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性，說(shuō)明小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了 （體液免疫/細(xì)胞免疫）反應(yīng)， 再?gòu)男∈蟮?中獲取B淋巴細(xì)胞。將該 B淋巴細(xì)胞與小鼠的 細(xì)胞融合，再經(jīng)過(guò)篩選、檢測(cè)， 最終可獲得所需的雜交瘤細(xì)胞。（2）若要大量制備抗該蛋白的單克隆抗體，可將該雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠的 中使其增殖，再?gòu)?中提取、純化獲得。（3）通過(guò)上述方法得到的單克隆抗體可準(zhǔn)確地識(shí)別這種HSV-I蛋白，其原因是該抗體具有 （至少答出兩點(diǎn)）等特性?！敬鸢浮浚?） HSV-1蛋白體液免疫 脾臟 骨髓瘤（2）腹腔腹水（3）純度高、靈敏度高 特異性強(qiáng)【解析】（1）若小鼠血清中抗 HSV-I的抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性，則小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了相應(yīng)的抗體，而抗體

46、是體 液免疫過(guò)程中產(chǎn)生的，說(shuō)明小鼠發(fā)生了體液免疫反應(yīng)，再?gòu)男∈蟮钠⑴K中獲取B淋巴細(xì)胞.將該 B淋巴細(xì)胞與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，再經(jīng)過(guò)篩選、檢測(cè)，最終可獲得所需的雜交瘤細(xì)胞，該細(xì)胞具有雙親的特點(diǎn),即既能在體外培養(yǎng)條件下無(wú)限增值，又能產(chǎn)生專(zhuān)一抗體。(2)克隆化培養(yǎng)時(shí)，將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠的腹腔中(體內(nèi)培養(yǎng))或培養(yǎng)基中(體外培養(yǎng))使其增 殖，再?gòu)母顾谢蚺囵B(yǎng)液中提取、純化獲得大量制備抗該蛋白的單克隆抗體。(3)單克隆抗體可準(zhǔn)確地識(shí)別這種HSV-I蛋白，其原因是單克隆抗體具有純度高和特異性強(qiáng)等特性?！究键c(diǎn)定位】單克隆抗體的制備過(guò)程【名師點(diǎn)睛】解題方法點(diǎn)撥：HSV-1蛋白作為抗原引起免疫反應(yīng)生成抗HS

47、V-1蛋白的抗體，單克隆抗體的制備過(guò)程是從小鼠的骨髓中取B細(xì)胞，與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生抗體的細(xì)胞，植入小鼠腹腔中增殖，從腹水中提取，單克隆抗體具有特異性強(qiáng)和靈敏度高的特點(diǎn)。人組織纖溶酶原激活物(htPA)15 .(【百?gòu)?qiáng)?！?016屆寧夏固原市一中高三上學(xué)期適應(yīng)性訓(xùn)練生物一卷)是一種重要的藥用蛋白，可在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得。流程如下:(1) htPA基因與載體用 切割后，通過(guò) DNA1接酶連接，以構(gòu)建重組表達(dá)載體。檢測(cè)目的基因是否已插入受體細(xì)胞 DNA可采用 技術(shù)。(2)為獲取更多的卵(母)細(xì)胞，要對(duì)供體母羊注射促性腺激素，使其 。采集的精子需要 經(jīng)過(guò),才具

48、備受精能力。(3)將重組表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵常用的方法是 。為了獲得母羊，移植前需對(duì)已成功轉(zhuǎn)入目 的基因的胚胎進(jìn)行 。利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因個(gè)體，這體現(xiàn)了早期胚胎 細(xì)胞的。(4)若在轉(zhuǎn)ht-PA基因母羊的羊乳中檢測(cè)到 ,說(shuō)明目的基因成功表達(dá)?！敬鸢浮?1)同種限制性核酸內(nèi)切酶(或同種限制酶)；DNA子雜交(或核酸探針)(2)超數(shù)排卵；獲能(處理)(3)顯微注射法； 性別鑒定；全能性(4) htPA (或人組織纖溶酶原激活物)t解析】（1）/地基因與載體需要用同種限制性核酸內(nèi)切酶E或同種限制施）切割，形成相同的黏性 末端，然后再通過(guò)d岫連接的連接，以構(gòu)建重組表達(dá)載體.檢測(cè)目的基

49、因是否已插入受體細(xì)胞Dia可采用 D岫分子雜交（或核酸探畀）技術(shù)，原理是堿基互補(bǔ)配對(duì).（2）為獲取更多的卵（母）細(xì)胞，要對(duì)供體母羊注射促性腺激素，使其超敵排卵口采集的精子需要經(jīng) 過(guò)獲能，才具備受精能力。（3）為獲取更多的卵（母）細(xì)胞，要對(duì)供體母羊注射促性腺激素，使其超數(shù)排卵.采集的精子需要經(jīng)過(guò)獲 能（處理），才具備受精能力.利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因個(gè)體，這體現(xiàn)了早期胚胎細(xì) 胞的全能性。（4）基因表達(dá)成功時(shí)可獲得目的基因的產(chǎn)物，既在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中檢測(cè)到 htPA （或人組織纖溶酶原激活物），說(shuō)明目的基因成功表達(dá)?！究键c(diǎn)定位】基因工程的原理及技術(shù)【名師點(diǎn)睛】知識(shí)拓展：

50、 DNA1組技術(shù)至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA1接酶、運(yùn)載體。目的基因分子水平上的檢測(cè)： 檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的 DNA是否插入目的基因-DNA分子雜交技 術(shù)；檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了 mRNA-分子雜交技術(shù)；檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì) -抗原-抗體雜 交技術(shù)。16.（【百?gòu)?qiáng)?！?016屆黑龍江省大慶實(shí)驗(yàn)中學(xué)高三上學(xué)期期末生物試卷）某研究小組欲將已知抗除草劑基因?qū)嗽|(zhì)體培育抗除草劑大豆。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）為獲得大量抗除草劑基因，可通過(guò) 技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增，也可將其連接到 上，通過(guò)大腸 桿菌培養(yǎng)擴(kuò)增。（2）制備葉片原生質(zhì)體的酶混合液中，一般含較高濃度的甘露醇，其目的是避

51、免制備的原生質(zhì)體。酶混合液需通過(guò) 滅菌，才能用于無(wú)菌原生質(zhì)體的制備，整個(gè)無(wú)菌操作過(guò)程需在 中進(jìn)行。（3）可通過(guò) 方法，直接將抗除草劑基因?qū)朐|(zhì)體的細(xì)胞核。此外，還可用聚乙二醇融合、電擊等方法導(dǎo)入。導(dǎo)入后的原生質(zhì)體需再生出 ,經(jīng)持續(xù)分裂獲得愈傷組織，進(jìn)一步分化 獲得再生植株并擴(kuò)大繁殖。（4）利用帶有標(biāo)記的抗除草劑基因特殊片段與從轉(zhuǎn)基因植株提取的RNAiS行,驗(yàn)證抗除草劑基因是否被整合到受體的細(xì)胞中并轉(zhuǎn)錄?！敬鸢浮浚?） PCR 質(zhì)粒（2）吸水脹破過(guò)濾（G6玻璃砂漏斗） 超凈臺(tái)(3)顯微注射細(xì)胞壁(4)分子雜交【解析】(1)應(yīng)用PCR技術(shù)可以對(duì)除草劑基 因進(jìn)行體外大量擴(kuò)增，并通過(guò)運(yùn)載體質(zhì)粒，轉(zhuǎn)

52、運(yùn) 到大腸桿菌培養(yǎng)擴(kuò)增。(2)含較高濃度的甘露醇，能夠進(jìn)來(lái)到細(xì)胞中，防止細(xì)胞過(guò)度吸水而細(xì)胞破裂。酶是大分子蛋白質(zhì)， 用過(guò)濾方法可以滅菌，整個(gè)無(wú)菌操作過(guò)程需在超凈臺(tái)中進(jìn)行，防止雜菌污染。(3)用顯微注射的方法，可以直接將抗除草劑基因?qū)朐|(zhì)體的細(xì)胞核中，用聚乙二醇和電擊方法 可以增加細(xì)胞膜的通透性，導(dǎo)入后的原生質(zhì)體需再生出細(xì)胞壁。(4)利用帶有標(biāo)記的抗除草劑基因特殊片段與從轉(zhuǎn)基因植株提取的RNA進(jìn)行分 子雜交，可以驗(yàn)證抗除草劑基因是否被整合到受體的細(xì)胞中。【考點(diǎn)定位】基因工程的應(yīng)用17.(【百?gòu)?qiáng)?！?016屆天津南開(kāi)中學(xué)高三第一次月考生物試卷)下圖為植物體細(xì)胞雜交過(guò)程示意圖。據(jù)圖回答：(1)步

53、驟是 ,最常用的方法是 。若將得到的細(xì)胞置于 30%勺蔗糖溶液中， 則會(huì)發(fā)生的現(xiàn)象是 。(2)植物體細(xì)胞雜交的理論基礎(chǔ)是 ,從理論上講，雜種植株是否可育 。若運(yùn)用 傳統(tǒng)有性雜交方法不能得到該雜種植株的原因是 。(3)利用植物體細(xì)胞雜交的方法培育作物新品種過(guò)程中，遺傳物質(zhì)的傳遞是否遵循孟德?tīng)柕倪z傳規(guī)律? 為什么？ ?！敬鸢浮?1)去掉細(xì)胞壁，分離出有活力的原生質(zhì)體酶解法 皺縮(2)細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性可育存在生殖隔離(相關(guān)答案均可)(3)不遵循因?yàn)樵谏镞M(jìn)行有性生殖的過(guò)程中，才遵循孟德?tīng)柕倪z傳定律【解析】fl)步驟是去掉細(xì)胞壁，分離出有活力的原生質(zhì)體.常用酶解法的，即用纖維素酶和果膠

54、 酶處理，細(xì)胞置于前%的蔗糖溶液中會(huì)失水而皺縮，發(fā)生質(zhì)變質(zhì)壁分離現(xiàn)象.(2)植物體細(xì)胞雜交的理論基礎(chǔ)是細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性，雜種植株含有植株A和植株 R的全部遺傳物質(zhì)，從理論上講是可育的，不同種生物之間存在生殖隔離，所以運(yùn)用傳統(tǒng)有性雜交的方法不 能實(shí)現(xiàn).可見(jiàn)，植物體細(xì)胞雜交技術(shù)能克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙.(3)生物在進(jìn)行有性生殖的過(guò)程中才遵循孟德?tīng)柕倪z傳規(guī)律，而植物體細(xì)胞雜交育種的過(guò)程不屬于有性生殖，因此不遵循孟德?tīng)栠z傳規(guī)律?！究键c(diǎn)定位】植物體細(xì)胞雜交的過(guò)程【名師點(diǎn)睛】植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：1、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：就是將不同種的植物體細(xì)胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜 種

55、細(xì)胞培育成完整植物體的技術(shù)。2、過(guò)程：植物細(xì)胞植物細(xì)胞B(1)誘導(dǎo)融合的方法：物理法包括離心、振動(dòng)、電刺激等.化學(xué)法一般是用聚乙二醇(PEG作為誘導(dǎo)劑。(2)細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是新的細(xì)胞壁的生成。(3)植物體細(xì)胞雜交的終點(diǎn)是培育成雜種植株，而不是形成雜種細(xì)胞就結(jié)束。(4)雜種植株的特征：具備兩種植物的遺傳特征，原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質(zhì)。3、意義：克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。18.（【百?gòu)?qiáng)?！?016屆海南海口湖南師大附中?？谥袑W(xué)高三上三次月考生物試卷）已經(jīng)甲種農(nóng)作物因受到乙種昆蟲(chóng)危害而減產(chǎn)，乙種昆蟲(chóng)食用某種原核生物分泌的丙種蛋白質(zhì)后死亡。因此，可將丙種蛋白質(zhì) 基因轉(zhuǎn)入到甲種農(nóng)作物體內(nèi)，使甲種農(nóng)作物獲得抗乙種昆蟲(chóng)危害的能力?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）為了獲得丙種蛋白質(zhì)的基因， 在已知丙種蛋白質(zhì)氨基酸序列的基礎(chǔ)上，推測(cè)出丙種蛋白質(zhì)的 序列，據(jù)此可利用 方法合成目的基因。獲得丙種蛋白質(zhì)的基因還可用 和方法。（2）在利用上述丙種蛋白質(zhì)基因和質(zhì)粒載體構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程中，常需要使用 酶和酶。（3）將含有重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌與甲種農(nóng)作物的愈傷組織共培養(yǎng)，篩選出含有丙種蛋白質(zhì)的愈傷組織