植物果實(shí)中有機(jī)農(nóng)藥的殘留測(cè)定(精)課件

1、植物果實(shí)中有機(jī)農(nóng)藥的殘留測(cè)定(精)植物果實(shí)中有機(jī)植物果實(shí)中有機(jī)(yuj)農(nóng)藥的殘農(nóng)藥的殘留測(cè)定留測(cè)定 大連理工大學(xué)環(huán)境與生命大連理工大學(xué)環(huán)境與生命(shngmng)學(xué)學(xué)院院第一頁，共二十一頁。一、實(shí)驗(yàn)一、實(shí)驗(yàn)(shyn)(shyn)簡介簡介 有機(jī)氯、有機(jī)磷、菊酯類農(nóng)藥經(jīng)常在蔬菜、水果、稻米、中草藥等植有機(jī)氯、有機(jī)磷、菊酯類農(nóng)藥經(jīng)常在蔬菜、水果、稻米、中草藥等植物果實(shí)中被檢測(cè)到，這些殘留農(nóng)藥將直接威脅到人體的健康，給生態(tài)系統(tǒng)物果實(shí)中被檢測(cè)到，這些殘留農(nóng)藥將直接威脅到人體的健康，給生態(tài)系統(tǒng)(shn ti x tn)(shn ti x tn)的穩(wěn)定和安全也構(gòu)成潛在的危害。因此，提取與檢測(cè)植物的穩(wěn)定和

2、安全也構(gòu)成潛在的危害。因此，提取與檢測(cè)植物果實(shí)中有機(jī)氯、有機(jī)磷和菊酯類農(nóng)藥具有極其重要的意義。果實(shí)中有機(jī)氯、有機(jī)磷和菊酯類農(nóng)藥具有極其重要的意義。 本實(shí)驗(yàn)選擇三種代表性農(nóng)藥本實(shí)驗(yàn)選擇三種代表性農(nóng)藥三唑磷、甲氰菊酯和六六六異三唑磷、甲氰菊酯和六六六異構(gòu)體，測(cè)定它們?cè)谌N典型植物果實(shí)中的殘留量。構(gòu)體，測(cè)定它們?cè)谌N典型植物果實(shí)中的殘留量。第二頁，共二十一頁。1. 理解從植物果實(shí)中提取有機(jī)農(nóng)藥的原理和方法理解從植物果實(shí)中提取有機(jī)農(nóng)藥的原理和方法2. 掌握氣相色譜掌握氣相色譜(GC)法的定性、定量測(cè)定方法法的定性、定量測(cè)定方法3. 初步了解氣相色譜儀的結(jié)構(gòu)初步了解氣相色譜儀的結(jié)構(gòu)(jigu)及操作技術(shù)

3、及操作技術(shù)目目的的(md)內(nèi)內(nèi)容容(nirng)1. GC測(cè)定糙米中有機(jī)磷農(nóng)藥三唑磷的殘留量測(cè)定糙米中有機(jī)磷農(nóng)藥三唑磷的殘留量 2. GC測(cè)定蘋果中擬除蟲菊酯類殺蟲劑甲氰菊酯的殘留測(cè)定蘋果中擬除蟲菊酯類殺蟲劑甲氰菊酯的殘留 3. GC測(cè)定東北人參中有機(jī)氯農(nóng)藥六六六異構(gòu)體殘留測(cè)定東北人參中有機(jī)氯農(nóng)藥六六六異構(gòu)體殘留 第三頁，共二十一頁。 選擇三種有代表性的農(nóng)藥，運(yùn)用氣相色譜進(jìn)行植物果實(shí)中選擇三種有代表性的農(nóng)藥，運(yùn)用氣相色譜進(jìn)行植物果實(shí)中有機(jī)有機(jī)(yuj)農(nóng)藥的殘留測(cè)定農(nóng)藥的殘留測(cè)定二、實(shí)驗(yàn)二、實(shí)驗(yàn)(shyn)(shyn)原理原理NNNO POOC2H5OC2H5OCHCNO2CHH3CH3CCH

4、3CH3ClClClClClCl三唑磷三唑磷(Triazophos) 甲氰菊酯甲氰菊酯(Fenpropathrin) 六六六六六六(Benzene hexachloride) 特點(diǎn)：水溶性低、脂溶性高、在有機(jī)溶劑中分配特點(diǎn)：水溶性低、脂溶性高、在有機(jī)溶劑中分配(fnpi)(fnpi)系數(shù)大系數(shù)大第四頁，共二十一頁。有機(jī)溶劑提取有機(jī)溶劑提取(tq)凈化凈化 用標(biāo)準(zhǔn)化合物的保留用標(biāo)準(zhǔn)化合物的保留時(shí)間定性時(shí)間定性(dng xng)，用，用峰面積外標(biāo)法定量。峰面積外標(biāo)法定量。氮磷檢測(cè)器氮磷檢測(cè)器(NPD) 電子電子(dinz)捕獲檢測(cè)器捕獲檢測(cè)器(Ni63 ECD) H2, N2, 或或Ar 氣路系統(tǒng)

5、氣路系統(tǒng) 進(jìn)樣系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng) 分離系統(tǒng)分離系統(tǒng) 溫控系統(tǒng)溫控系統(tǒng) 檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)系統(tǒng) 第五頁，共二十一頁。實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)(shyn)儀器儀器6890N/GC 化學(xué)化學(xué)(huxu)工作站工作站氣相色譜儀氣相色譜儀(附有附有NPD、Ni63 ECD和氣相色譜和氣相色譜工作站工作站)；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；K-D濃縮器；萬分之一濃縮器；萬分之一精確電子天平；回旋式振蕩器；旋片式真空泵；精確電子天平；回旋式振蕩器；旋片式真空泵；電熱恒溫水浴鍋；超聲波儀；組織電熱恒溫水浴鍋；超聲波儀；組織(zzh)搗碎機(jī)；搗碎機(jī)；抽濾裝置；馬弗爐；玻璃層析柱抽濾裝置；馬弗爐；玻璃層析柱(8 mm18 cm)；250 mL脂肪提

6、取器脂肪提取器第六頁，共二十一頁。實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)(shyn)試劑試劑丙酮，二氯甲烷，石油醚，乙醇丙酮，二氯甲烷，石油醚，乙醇(y chn)，乙酸乙酯，正己烷，乙酸乙酯，正己烷，濃硫酸，均為分析純?；罨幚淼臒o水硫酸鈉，中性氧化鋁，濃硫酸，均為分析純?；罨幚淼臒o水硫酸鈉，中性氧化鋁，弗羅里硅土。弗羅里硅土。三種實(shí)驗(yàn)三種實(shí)驗(yàn)(shyn)用農(nóng)藥：三唑磷，甲氰菊酯和六六六用農(nóng)藥：三唑磷，甲氰菊酯和六六六(、-BHC單組分標(biāo)樣或混標(biāo)單組分標(biāo)樣或混標(biāo))。第七頁，共二十一頁。1. GC測(cè)定測(cè)定(cdng)糙米中三唑磷的殘留量糙米中三唑磷的殘留量三、實(shí)驗(yàn)三、實(shí)驗(yàn)(shyn)(shyn)步步驟驟(1) 對(duì)照對(duì)照(d

7、uzho)品標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備品標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 準(zhǔn)確稱取三唑磷標(biāo)準(zhǔn)品，配制準(zhǔn)確稱取三唑磷標(biāo)準(zhǔn)品，配制0.05、0.1、0.2、0.5、1、2.5、5和和10 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)液。的標(biāo)準(zhǔn)液。氣相色譜法測(cè)定，以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪氣相色譜法測(cè)定，以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。制標(biāo)準(zhǔn)曲線。Area m .第八頁，共二十一頁。糙米樣品糙米樣品(yngpn)中三唑磷的提取與純化中三唑磷的提取與純化 糙米糙米 振蕩提取振蕩提取 粉碎粉碎 丙酮丙酮 抽濾抽濾 濾液濾液 CH2Cl2萃取萃取 靜置靜置 下層有機(jī)相下層有機(jī)相 Na2SO4 過濾過濾 旋轉(zhuǎn)濃縮旋轉(zhuǎn)濃縮 層層析析柱柱CH2

8、Cl2淋洗淋洗淋洗液淋洗液 濃縮近干濃縮近干 石油醚定容石油醚定容 GC 第九頁，共二十一頁。氣相色譜測(cè)定氣相色譜測(cè)定(cdng) DB-17毛細(xì)管色譜毛細(xì)管色譜(s p)柱柱(15 m 0.53 mm)；溫度：柱箱；溫度：柱箱230 、氣化室、氣化室260 、檢測(cè)室、檢測(cè)室260；氣體流速：載；氣體流速：載氣氣(高純氮高純氮 99.99%) = 10 mL/min、氫氣、氫氣 = 6 mL/min、尾、尾吹氣吹氣40 mL/min；進(jìn)樣量；進(jìn)樣量1 L，NPD檢測(cè)。檢測(cè)。第十頁，共二十一頁。方法方法(fngf)評(píng)價(jià)評(píng)價(jià) 方法方法(fngf)精密度測(cè)定精密度測(cè)定 添加回收率添加回收率 方法檢測(cè)

9、限的測(cè)定方法檢測(cè)限的測(cè)定 第十一頁，共二十一頁。2. GC測(cè)定測(cè)定(cdng)蘋果中甲氰菊酯的殘留量蘋果中甲氰菊酯的殘留量對(duì)照對(duì)照(duzho)品標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備品標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 準(zhǔn)確稱取微量甲氰菊酯標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)確稱取微量甲氰菊酯標(biāo)準(zhǔn)(biozhn)品，加入乙酸乙酯品，加入乙酸乙酯:石油石油醚醚5:95 (V/V)混合液配成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)液：混合液配成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)液：0.05、0.1、0.2、0.5、1、2.5、5和和10 mg/L，氣相色譜法測(cè)定。，氣相色譜法測(cè)定。 第十二頁，共二十一頁。蘋果蘋果(pnggu)樣品中甲氰菊酯的提取與純化樣品中甲氰菊酯的提取與純化蘋果蘋果 振蕩提取振蕩提取 丙酮丙酮

10、 石油醚石油醚 抽濾抽濾 濾液濾液 2Na2SO4 萃取萃取 靜置靜置 上層有機(jī)相上層有機(jī)相 Na2SO4 過濾過濾 旋轉(zhuǎn)濃縮旋轉(zhuǎn)濃縮 層層析析柱柱乙酸乙酯乙酸乙酯 石油醚石油醚淋洗液淋洗液 濃縮定容濃縮定容 GC 第十三頁，共二十一頁。氣相色譜測(cè)定氣相色譜測(cè)定(cdng) 色譜柱：色譜柱：0.3 cm 60 cm 玻璃色譜柱；固定相：玻璃色譜柱；固定相：3 %OV - 101/Gas Chrom Q 60 80目；操作溫度：氣化室目；操作溫度：氣化室240 、柱室、柱室210 、檢測(cè)器、檢測(cè)器220 ；氣體；氣體(qt)流量：流量：N2 = 120 mL/min；ECD檢測(cè)；進(jìn)樣量為檢測(cè)；進(jìn)

11、樣量為1 L。方法方法(fngf)評(píng)價(jià)評(píng)價(jià)(同三唑磷的殘留測(cè)定同三唑磷的殘留測(cè)定)第十四頁，共二十一頁。3. 東北人參東北人參(rnshn)中六六六異構(gòu)體殘留的氣相色譜法中六六六異構(gòu)體殘留的氣相色譜法監(jiān)測(cè)監(jiān)測(cè)對(duì)照對(duì)照(duzho)品標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備品標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備標(biāo)準(zhǔn)使用液：在分別配制標(biāo)準(zhǔn)使用液：在分別配制BHC四個(gè)組分單樣儲(chǔ)備液和單樣標(biāo)準(zhǔn)四個(gè)組分單樣儲(chǔ)備液和單樣標(biāo)準(zhǔn)中間液的基礎(chǔ)上，再配制中間液的基礎(chǔ)上，再配制BHC四組分混合標(biāo)準(zhǔn)使用液，四組分混合標(biāo)準(zhǔn)使用液，BHC各異構(gòu)體濃度各異構(gòu)體濃度(含量含量(hnling)分別為：分別為： 、 、 、 -BHC為為0.01、0.02、0.05、0.1、0

12、.2、0.5和和1 mg/L。溶劑為石油醚。溶劑為石油醚。 第十五頁，共二十一頁。人參樣品中六六六的提取人參樣品中六六六的提取(tq)與純化與純化 人參人參 濾紙筒濾紙筒水水硅藻土硅藻土浸泡回流提取浸泡回流提取 上層上層 溶劑溶劑 2% Na2SO4 上層提取液上層提取液定容定容 GC 石油醚石油醚丙酮丙酮振搖分層振搖分層 2% Na2SO4 濃硫酸濃硫酸 上層石油醚上層石油醚提取液提取液 第十六頁，共二十一頁。氣相色譜測(cè)定氣相色譜測(cè)定(cdng) 色譜柱為色譜柱為DB-5毛細(xì)管柱，長毛細(xì)管柱，長30 m。柱箱溫度初始。柱箱溫度初始(ch sh)為為60 ，以以20 /min升溫速率升至升溫速

13、率升至180 ，再以，再以10 /min升溫速率升至升溫速率升至240 。氣化室溫度。氣化室溫度250 。檢測(cè)器溫度。檢測(cè)器溫度300 。載氣。載氣(高純高純N2)：2.0 kg/cm2；尾吹氣；尾吹氣(高純高純N2)：40 mL/min。進(jìn)樣。進(jìn)樣2 L。ECD檢測(cè)。檢測(cè)。方法評(píng)價(jià)方法評(píng)價(jià)(同三唑磷的殘留同三唑磷的殘留(cnli)測(cè)定測(cè)定) 第十七頁，共二十一頁。對(duì)于上述三種農(nóng)藥在樣本中的殘留對(duì)于上述三種農(nóng)藥在樣本中的殘留(cnli)測(cè)定：測(cè)定：1. 以表格形式記錄色譜的操作條件和標(biāo)樣測(cè)試結(jié)果；2. 以表格形式記錄樣品測(cè)定結(jié)果，并計(jì)算目標(biāo)化合物在樣品中的含量；3. 處理測(cè)定結(jié)果，評(píng)價(jià)本實(shí)驗(yàn)方

14、法。四、結(jié)果四、結(jié)果(ji gu)(ji gu)與討與討論論第十八頁，共二十一頁。1. 人參中含有一定量的脂肪，加濃H2SO4振搖后，正己烷與濃H2SO4合為乳膠液，看上去很難分層，應(yīng)靜止10 30min就會(huì)完全(wnqun)分層，若分層不完全(wnqun)會(huì)影響測(cè)定結(jié)果。2. 如果人參樣品中六六六異構(gòu)體濃度較低，則純化的正己烷提取液用K-D液濃縮器濃縮至相應(yīng)體積。五、注意事項(xiàng)五、注意事項(xiàng)第十九頁，共二十一頁。1.本實(shí)驗(yàn)中純化法的原理是什么？2.實(shí)驗(yàn)中，你遇到的主要實(shí)驗(yàn)問題(如濃硫酸純化時(shí)不分層)有哪些，如何解決(jiju)？3.本實(shí)驗(yàn)中分析誤差的主要來源有哪些？六、思考六、思考(sko)(sko)與討與討論論 第二十頁，共二十一頁。植物果實(shí)中有機(jī)農(nóng)藥的殘留測(cè)定(精)內(nèi)容(nir