2014年高考生物一輪復(fù)習(xí)微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用專題演練(含(精)

1、微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用(限時 30 分鐘 滿分 60 分)、非選擇題(共 60 分)1. (15 分)下面是分離分解尿素的細菌所用的培養(yǎng)基，據(jù)表回答下列問題:KH2PQNazHPQMgSO-7H2Q葡萄糖尿素瓊脂自來水1.4 g2.1 g0.3 g10.0 g1.0 g15.0 g定容至 1000 mL(1)_ 該培養(yǎng)基中含有的最主要碳源是。2該培養(yǎng)基按物理性質(zhì)劃分，屬于 _培養(yǎng)基。(3) 在該培養(yǎng)基中，可以通過檢測pH 的變化來判斷尿素是否被分解，所依據(jù)的原理是_ ，所用方法是在培養(yǎng)基中加入 _，若尿素被分解，則 培養(yǎng)基變成_ 色。(4) 如果將此培養(yǎng)基改為用來分離分解纖維素的微生物的培養(yǎng)基，則

2、主要提供碳元素的物質(zhì)應(yīng)改為_ 。2. (15 分)某學(xué)校打算開辟一塊食用菌栽培基地，以豐富學(xué)生的勞動技術(shù)課內(nèi)容。首先 對食用菌實驗室進行清掃和消毒處理，準(zhǔn)備食用菌栽培所需的各種原料和用具，然后從菌種站購來各種食用菌菌種。請回答下列問題：(1) 對買回來的菌種進行擴大培養(yǎng)，首先制備試管培養(yǎng)基，寫出制備固體牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基所需的原料： _、_、_ 、_、_ 。其中提供氮源的是_ ;提供碳源的主要物質(zhì)是 _ 。(2) 微生物在生長過程中對各種成分所需量不同，配制培養(yǎng)基時各成分要有合適的_。在燒杯中加入瓊脂后要不停地 _ ,防止_ 。(3) 將配制好的培養(yǎng)基分裝到試管中，加棉塞后若干個試管一捆，包上

3、牛皮紙并用皮筋勒緊放入_中滅菌，壓力 _ kPa,溫度_，時間_ 。滅菌完畢拔掉電源，待鍋內(nèi)壓力自然降到0 時，將試管取出。如果棉塞上沾有培養(yǎng)基，此試管應(yīng)使用高壓蒸汽滅菌鍋時注意，先向鍋內(nèi)倒入 _ 。把鍋內(nèi)水加熱煮沸并將其中原有冷空氣徹底排出后將鍋密閉。(5)_ 從一支試管向另一支試管接種時注意，接種環(huán)要在酒精燈 _ ( “內(nèi)”或外”)焰滅菌，并且待接種環(huán) _ 后蘸取菌種，試管口不能離開酒精燈火焰附近,將接種的試管在適溫下培養(yǎng)，長成菌落后放入 _C冰箱中保藏。3.(15 分)(2013 青島質(zhì)檢)微生物與人類關(guān)系密切。 雖然有些微生物能使動植物患病， 但多數(shù)微生物對人類是有益的。請回答下列問題

4、：(1) 培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基配方中一般含有水、碳源、氮源和無機鹽。從土壤中分離分解尿素的細菌時，培養(yǎng)基中加的唯一氮源為 _ ，這種培養(yǎng)基稱為_ 培養(yǎng)基。(2) 在制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的倒平板操作時，平板冷凝后，為什么要將平板倒置？ _(3) 微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線法和 _ 法。在用平板劃線法接種時，為什么在操作的第 一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？1.解析：培養(yǎng)基中葡萄糖、尿素和瓊脂都含有碳元素，其中葡萄糖是最主要的碳源，尿素主要提供氮元素，瓊脂是凝固劑。由于瓊脂的存在，該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基；尿素分解會產(chǎn)生氨，氨能使

5、酚紅指示劑變紅色，據(jù)此可以推測培養(yǎng)基中的尿素是否被分解。若該培養(yǎng)基改為用來分離分解纖維素的微生物的培養(yǎng)基，纖維素應(yīng)作為唯一碳源，因為只有這樣才具有選擇作用。答案：（1）葡萄糖（2）固體（3）微生物產(chǎn)生的脲酶能將尿素分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的 pH 升高酚紅指示劑 紅（4）纖維素2解析：（1）牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基配方如下：牛肉膏蛋白胨NaCI瓊脂蒸餾水5.0 g10.0 g5.0 g20.0 g定容至 1 000 mL由配方可知所需的原料；凡能提供所需氮元素的物質(zhì)為氮源，牛肉膏、蛋白胨均含氮元素。（2）在配制培養(yǎng)基時營養(yǎng)要按所培養(yǎng)微生物對各種成分的需求確定；在加入瓊脂后，要 不斷攪拌，防止瓊脂糊

6、底而導(dǎo)致燒杯破裂。（3）玻璃器皿的滅菌應(yīng)用高壓蒸汽滅菌鍋，在壓力為100 kPa、溫度為 121C條件下，滅菌 1530 min。若棉塞上沾有培養(yǎng)基，易被雜菌污染，應(yīng)作廢。（4）不加水，無從談起高壓蒸汽，還有可能損壞設(shè)備。（5）酒精燈外焰溫度高，滅菌效果好。灼燒后待冷卻再蘸取菌種，否則會燙死菌種造成實驗失??；菌落長成后，將試管放入4C水箱中保藏。答案：（1）牛肉膏 蛋白胨 水 無機鹽 瓊脂 蛋白胨、牛肉膏牛肉膏（2）比例 攪拌 瓊脂糊底引起燒杯破裂（3）高壓蒸汽滅菌鍋 100 121C1530 min 廢棄（4）適量水（5）外 冷卻 43解析：從土壤中分離出分解尿素的細菌，需用選擇性培養(yǎng)基，唯

7、一的氮源是尿素。接種過程中，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法兩種方法。每次劃線前都要灼燒接種環(huán)的目的是殺死上次接種時留下的菌種，使下一次劃線時接種環(huán)上的菌種直接來自上次劃線的末端，以便通過多次劃線后，得到單個的菌落。操作的第一步和最后一步需灼燒接種環(huán)的 目的分別是防止接種環(huán)上有其他微生物而污染培養(yǎng)基、以免菌種對環(huán)境造成污染和感染操作者。答案：（1）尿素 選擇（2）防止皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)皿造成污染，還可使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)（3）稀釋涂布平板第一步灼燒接種環(huán)是防止接種環(huán)上有其他微生物而污染培養(yǎng)基，每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次接種時留下的菌種，使下一次劃線時接種環(huán)上的菌種直接

8、來自上次劃線的末端，以便通過多次劃線后，得到單個的菌落需要 目的是防止菌種對環(huán)境造成污染和感染操作者4解析：分離自生固氮微生物，應(yīng)用無氮培養(yǎng)基，因為氮是生物必需的元素，只有具 有固氮能力的自生固氮微生物才能在無氮培養(yǎng)基上生長。 而營養(yǎng)全面的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 則允許多種微生物生長。答案：330300 5X107(3) 無氮培養(yǎng)基上能生存繁殖的僅是土壤中的固氮菌，而牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上幾乎允 許土壤中所有菌類生存。4.(15 分)下面是探究如何從土壤中分離自生固氮菌與計數(shù)的實驗，完成下列問題：(1) 實驗原理：農(nóng)田的表層土壤中，自生固氮菌的含量比較多。將用表層土制成的稀泥 漿，接種到無氮培養(yǎng)基上

9、進行培養(yǎng)。 在這種情況下，只有自生固氮菌才能生長繁殖。用這種 方法，可以將自生固氮菌與其他細菌分離開來。材料用具：農(nóng)田的表層土壤、無氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，盛 9 mL 無菌水的試管、無菌吸管、無菌涂布器、無菌培養(yǎng)皿、盛90mL 無菌水的錐形瓶、恒溫箱。(2) 方法步驟：1倒平板：分別將無菌培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基倒平板，操作過程應(yīng)在火焰旁。2制備土壤稀釋液：取土樣 10 g 加入盛有 90 mL 無菌水的錐形瓶中，充分搖勻。用無菌吸管吸取上清液 1 mL,轉(zhuǎn)至 9 mL 的無菌水的大試管中，依次稀釋到107稀釋度。3涂布：按照由 10710* 1 2 3 *稀釋度的順序分別吸取 0.1 mL 進行平板涂布，每個稀釋度下，無氮培養(yǎng)基應(yīng)至少涂布 _ 個平板,牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基涂布 1 個平板。4培養(yǎng)：放入恒溫