世紀(jì)金榜2017版生物PPT課件必修3選修1選修1.2

1、專題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用考點(diǎn)一考點(diǎn)一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)【核心知識(shí)通關(guān)【核心知識(shí)通關(guān)】1.1.無(wú)菌技術(shù)的主要方法及適用對(duì)象無(wú)菌技術(shù)的主要方法及適用對(duì)象( (連一連連一連) )：2.2.制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基：制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基：一定體積一定體積稱量紙稱量紙稱量紙稱量紙蛋白胨蛋白胨瓊脂瓊脂pHpH高壓蒸汽高壓蒸汽1211211515303050503.3.純化大腸桿菌：純化大腸桿菌：(1)(1)原理：在培養(yǎng)基上將細(xì)菌稀釋或分散成原理：在培養(yǎng)基上將細(xì)菌稀釋或分散成_細(xì)胞，細(xì)胞，使其長(zhǎng)成單個(gè)的菌落，這個(gè)菌落就是純化的細(xì)菌菌落。使其長(zhǎng)成單個(gè)的菌落，這個(gè)菌落就是純化的細(xì)菌菌落

2、。單個(gè)單個(gè)(2)(2)主要方法：下圖甲可表示用主要方法：下圖甲可表示用_法接種獲得法接種獲得的平板；下圖乙可表示用的平板；下圖乙可表示用_法接種獲得的法接種獲得的平板。平板。(3)(3)純化原理：上圖甲菌體的分散是通過(guò)一系列的純化原理：上圖甲菌體的分散是通過(guò)一系列的_操作實(shí)現(xiàn)的；上圖乙菌體的分散是通過(guò)一系列的操作實(shí)現(xiàn)的；上圖乙菌體的分散是通過(guò)一系列的_和和_操作實(shí)現(xiàn)的。操作實(shí)現(xiàn)的。平板劃線平板劃線稀釋涂布平板稀釋涂布平板連續(xù)連續(xù)劃線劃線梯度稀釋梯度稀釋涂布平板涂布平板4.4.菌種的保存方法：菌種的保存方法：(1)(1)對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用_的方的方法。法。(

3、2)(2)對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用_的的方法。方法。臨時(shí)保藏臨時(shí)保藏甘油管藏甘油管藏【特別提醒【特別提醒】(1)(1)培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的確定方法。培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的確定方法。自養(yǎng)型微生物所需的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是無(wú)機(jī)物，碳源自養(yǎng)型微生物所需的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是無(wú)機(jī)物，碳源可來(lái)自大氣中的可來(lái)自大氣中的COCO2 2，氮源可由含氮無(wú)機(jī)鹽提供。，氮源可由含氮無(wú)機(jī)鹽提供。異養(yǎng)型微生物所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要是有機(jī)物，即碳異養(yǎng)型微生物所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要是有機(jī)物，即碳源必須由含碳有機(jī)物提供，氮源也主要由有機(jī)物提供，源必須由含碳有機(jī)物提供，氮源也主要由有機(jī)物提供，部分異養(yǎng)型微生物也可

4、以利用無(wú)機(jī)氮源。部分異養(yǎng)型微生物也可以利用無(wú)機(jī)氮源。(2)(2)選擇無(wú)菌技術(shù)的原則。選擇無(wú)菌技術(shù)的原則。考慮無(wú)菌技術(shù)的效果：滅菌的效果比消毒要好?？紤]無(wú)菌技術(shù)的效果：滅菌的效果比消毒要好?？紤]操作對(duì)象的承受能力：活體生物材料、操作者考慮操作對(duì)象的承受能力：活體生物材料、操作者的手等只能采用消毒，而不能用滅菌。的手等只能采用消毒，而不能用滅菌。(3)(3)純化大腸桿菌的兩種方法的異同。純化大腸桿菌的兩種方法的異同。相同點(diǎn)：平板劃線法和稀釋涂布平板法都能獲得單相同點(diǎn)：平板劃線法和稀釋涂布平板法都能獲得單細(xì)胞菌落。細(xì)胞菌落。不同點(diǎn)：平板劃線法不能對(duì)微生物計(jì)數(shù)，而稀釋涂不同點(diǎn)：平板劃線法不能對(duì)微生物計(jì)

5、數(shù)，而稀釋涂布平板法能對(duì)微生物計(jì)數(shù)。布平板法能對(duì)微生物計(jì)數(shù)?！舅季S拓展【思維拓展】培養(yǎng)基的培養(yǎng)基的“三大成分三大成分”與與“三種分類三種分類”(1)(1)培養(yǎng)基的培養(yǎng)基的“三大成分三大成分”：營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)成分成分作用作用來(lái)源來(lái)源碳源碳源能為微生物提供能為微生物提供所需碳元素的營(yíng)所需碳元素的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)養(yǎng)物質(zhì)無(wú)機(jī)碳源：無(wú)機(jī)碳源：COCO2 2、NaHCONaHCO3 3等等有機(jī)碳源：糖類、脂肪酸、有機(jī)碳源：糖類、脂肪酸、花生粉餅、石油等花生粉餅、石油等營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)成分成分作用作用來(lái)源來(lái)源氮源氮源能為微生物提供能為微生物提供所需氮元素的營(yíng)所需氮元素的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)養(yǎng)物質(zhì)無(wú)機(jī)氮源：無(wú)機(jī)氮源：N N2 2、氨、銨鹽、氨

6、、銨鹽、硝酸鹽等硝酸鹽等有機(jī)氮源：尿素、牛肉膏、有機(jī)氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等蛋白胨、氨基酸等特殊營(yíng)特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)養(yǎng)物質(zhì)微生物生長(zhǎng)不可微生物生長(zhǎng)不可缺少的微量有機(jī)缺少的微量有機(jī)物物牛肉膏、蛋白胨、動(dòng)植物組牛肉膏、蛋白胨、動(dòng)植物組織提取液等織提取液等(2)(2)培養(yǎng)基的培養(yǎng)基的“三種分類三種分類”：分類分類依據(jù)依據(jù)種類種類特點(diǎn)特點(diǎn)應(yīng)用應(yīng)用物理物理性質(zhì)性質(zhì)液體液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基不加凝固劑不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)工業(yè)生產(chǎn)半固體半固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基加凝固劑加凝固劑( (少少) )觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、分觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、分離、鑒定離、鑒定固體固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基加凝固劑加凝固劑( (多多) )微生物的分離、鑒定

7、，微生物的分離、鑒定，活菌計(jì)數(shù)、保藏活菌計(jì)數(shù)、保藏分類分類依據(jù)依據(jù)種類種類特點(diǎn)特點(diǎn)應(yīng)用應(yīng)用化學(xué)化學(xué)成分成分天然天然培養(yǎng)基培養(yǎng)基含化學(xué)成分不明的天然物含化學(xué)成分不明的天然物質(zhì)質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)工業(yè)生產(chǎn)合成合成培養(yǎng)基培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分明確或用一定培養(yǎng)基成分明確或用一定化學(xué)物質(zhì)配制化學(xué)物質(zhì)配制分類、鑒定分類、鑒定用途用途選擇選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基添加某物質(zhì)，抑制雜菌生添加某物質(zhì)，抑制雜菌生長(zhǎng)，促進(jìn)所需微生物生長(zhǎng)長(zhǎng)，促進(jìn)所需微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)分離出培養(yǎng)分離出特定微生物特定微生物鑒別鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示在培養(yǎng)基中加入某種指示劑劑鑒別微生物鑒別微生物【高考模擬精練

8、【高考模擬精練】1.(20131.(2013全國(guó)卷全國(guó)卷)臨床使用抗生素前，有時(shí)需要做臨床使用抗生素前，有時(shí)需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時(shí)，首先要從病人身上獲取少量細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時(shí)，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作，以確定某致病樣本，然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作，以確定某致病菌對(duì)不同抗生素的敏感性。菌對(duì)不同抗生素的敏感性?；卮鹣铝袉?wèn)題：回答下列問(wèn)題：(1)(1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用_法或法或_法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。(2)(2)取

9、該單菌落適當(dāng)稀釋，用取該單菌落適當(dāng)稀釋，用_法接種于固體法接種于固體培養(yǎng)基表面，在培養(yǎng)基表面，在3737培養(yǎng)箱中培養(yǎng)培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h24 h，使其均勻生，使其均勻生長(zhǎng)，布滿平板。長(zhǎng)，布滿平板。(3)(3)為了檢測(cè)該致病菌對(duì)于抗生素的敏感性，將分別含為了檢測(cè)該致病菌對(duì)于抗生素的敏感性，將分別含有有A A、B B、C C、D D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時(shí)間后，含的不同位置，培養(yǎng)一段時(shí)間后，含A A的濾紙片周圍出現(xiàn)的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素A_A_；含；含B B的的濾紙片周圍沒(méi)有出現(xiàn)透明

10、圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素濾紙片周圍沒(méi)有出現(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素B_B_；含；含C C的濾紙片周圍的透明圈比含的濾紙片周圍的透明圈比含A A的的小，說(shuō)明小，說(shuō)明_；含；含D D的濾紙的濾紙片周圍的透明圈也比含片周圍的透明圈也比含A A的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素生素D D的的_。(4)(4)根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為達(dá)到抗菌目的，最好應(yīng)選用根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為達(dá)到抗菌目的，最好應(yīng)選用抗生素抗生素_?！窘忸}指南【解題指南】本題主要考查微生物培養(yǎng)，解答本題可本題主要考查微生物培養(yǎng)

11、，解答本題可從以下兩個(gè)方面著手：從以下兩個(gè)方面著手：(1)(1)分離微生物方法：平板劃線法和稀釋涂布分離微生物方法：平板劃線法和稀釋涂布( (平板平板) )法。法。(2)(2)透明圈的大小表示此種抗生素抗菌能力的強(qiáng)弱。透明圈的大小表示此種抗生素抗菌能力的強(qiáng)弱?！窘馕觥窘馕觥勘绢}考查微生物接種和抗生素抗菌能力判斷。本題考查微生物接種和抗生素抗菌能力判斷。(1)(1)在微生物的培養(yǎng)過(guò)程中，常用來(lái)分離微生物的方法在微生物的培養(yǎng)過(guò)程中，常用來(lái)分離微生物的方法是稀釋涂布是稀釋涂布( (平板平板) )法或平板劃線法。法或平板劃線法。(2)(2)為了使微生物在培養(yǎng)基上能夠均勻分布，一般用涂為了使微生物在培養(yǎng)

12、基上能夠均勻分布，一般用涂布法將微生物接種在培養(yǎng)基上。布法將微生物接種在培養(yǎng)基上。(3)(3)在抗藥性檢驗(yàn)過(guò)程中，如果在抗生素周圍出現(xiàn)透明在抗藥性檢驗(yàn)過(guò)程中，如果在抗生素周圍出現(xiàn)透明的圓圈，說(shuō)明此種抗生素可抑制該細(xì)菌生長(zhǎng)；透明圈的圓圈，說(shuō)明此種抗生素可抑制該細(xì)菌生長(zhǎng)；透明圈的大小表示此種抗生素抗菌能力的強(qiáng)弱，據(jù)此可判斷的大小表示此種抗生素抗菌能力的強(qiáng)弱，據(jù)此可判斷A A、B B、C C抗菌能力強(qiáng)弱依次是抗菌能力強(qiáng)弱依次是A A、C C、B B；D D的透明圈中出現(xiàn)的透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落，說(shuō)明該菌落對(duì)此種抗生素具有耐藥性。了一個(gè)菌落，說(shuō)明該菌落對(duì)此種抗生素具有耐藥性。(4)(4)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明抗

13、生素實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明抗生素A A對(duì)該致病菌的抗菌效果最好。對(duì)該致病菌的抗菌效果最好。答案：答案：(1)(1)劃線稀釋涂布劃線稀釋涂布( (平板平板)()(或涂布或涂布) )(2)(2)涂布涂布(3)(3)敏感不敏感該致病菌對(duì)敏感不敏感該致病菌對(duì)C C的敏感性比對(duì)的敏感性比對(duì)A A的弱的弱耐藥菌耐藥菌(4)A(4)A2.(20162.(2016西安模擬西安模擬) )某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計(jì)數(shù)。請(qǐng)回答與此實(shí)驗(yàn)相菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計(jì)數(shù)。請(qǐng)回答與此實(shí)驗(yàn)

14、相關(guān)的問(wèn)題。關(guān)的問(wèn)題。(1)(1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉為細(xì)菌培養(yǎng)提供了碳培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉為細(xì)菌培養(yǎng)提供了碳源和氮源。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分源和氮源。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是是_和和_。(2)(2)為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)將接種了為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于湖水樣品的平板置于_中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在定在3737。要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時(shí)在。要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種另一平板上接種_作為對(duì)照實(shí)驗(yàn)。作為對(duì)照實(shí)驗(yàn)。(3)(3)培養(yǎng)培養(yǎng)2020小時(shí)后，觀察到平

15、板上有形態(tài)和顏色不同的小時(shí)后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的_，這說(shuō)明湖水樣品中有多種細(xì)菌。一般來(lái)，這說(shuō)明湖水樣品中有多種細(xì)菌。一般來(lái)說(shuō)，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細(xì)菌污染的程度越說(shuō)，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細(xì)菌污染的程度越_(_(填填“高高”或或“低低”) )。(4)(4)某同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌某同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是落連成一片，最可能的原因是_，應(yīng)當(dāng)怎樣操作？應(yīng)當(dāng)怎樣操作？_?！窘忸}指南【解題指南】(1)(1)題干關(guān)鍵詞：培養(yǎng)基的題干關(guān)鍵詞：培養(yǎng)基的“基本成基本成分分”“”“形態(tài)和顏色形態(tài)和顏色”。(2)(2)關(guān)鍵方法：接種無(wú)菌

16、水的空白對(duì)照可以判斷培養(yǎng)基關(guān)鍵方法：接種無(wú)菌水的空白對(duì)照可以判斷培養(yǎng)基制作是否合格。制作是否合格?！窘馕觥窘馕觥?1)(1)蛋白胨富含蛋白質(zhì)，主要為微生物提供氮蛋白胨富含蛋白質(zhì)，主要為微生物提供氮源；淀粉作為微生物的碳源，培養(yǎng)基中還應(yīng)含有水和源；淀粉作為微生物的碳源，培養(yǎng)基中還應(yīng)含有水和無(wú)機(jī)鹽。無(wú)機(jī)鹽。(2)(2)微生物的培養(yǎng)在恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行。要使該實(shí)驗(yàn)所微生物的培養(yǎng)在恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行。要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還應(yīng)設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)，即同時(shí)在另一平板得結(jié)果可靠，還應(yīng)設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)，即同時(shí)在另一平板上接種無(wú)菌水作為對(duì)照實(shí)驗(yàn)，以判斷培養(yǎng)基制作是否上接種無(wú)菌水作為對(duì)照實(shí)驗(yàn)，以判斷培養(yǎng)基制作是否合格。合格。

17、(3)(3)培養(yǎng)培養(yǎng)2020小時(shí)后，不同微生物在平板培養(yǎng)基上會(huì)形成小時(shí)后，不同微生物在平板培養(yǎng)基上會(huì)形成形態(tài)和顏色不同的菌落。菌落總數(shù)越多，說(shuō)明湖水中形態(tài)和顏色不同的菌落。菌落總數(shù)越多，說(shuō)明湖水中的微生物數(shù)量越多，即湖水遭受細(xì)菌污染的程度越高。的微生物數(shù)量越多，即湖水遭受細(xì)菌污染的程度越高。(4)(4)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過(guò)高或培養(yǎng)過(guò)程被雜菌污染，可以通過(guò)增大稀釋倍度過(guò)高或培養(yǎng)過(guò)程被雜菌污染，可以通過(guò)增大稀釋倍數(shù)或嚴(yán)格無(wú)菌操作的方法解決。數(shù)或嚴(yán)格無(wú)菌操作的方法解決。答案：答案：(1)(1)無(wú)機(jī)鹽水無(wú)機(jī)鹽水(2)(2)恒溫培養(yǎng)

18、箱無(wú)菌水恒溫培養(yǎng)箱無(wú)菌水(3)(3)菌落高菌落高(4)(4)菌液濃度過(guò)高菌液濃度過(guò)高( (或培養(yǎng)過(guò)程被雜菌污染或培養(yǎng)過(guò)程被雜菌污染) )增大稀釋增大稀釋倍數(shù)倍數(shù)( (或嚴(yán)格無(wú)菌操作，原因與操作要對(duì)應(yīng)或嚴(yán)格無(wú)菌操作，原因與操作要對(duì)應(yīng)) )3.(20163.(2016安慶模擬安慶模擬) )據(jù)報(bào)道，從部分企業(yè)生產(chǎn)的速凍據(jù)報(bào)道，從部分企業(yè)生產(chǎn)的速凍食品中檢出葡萄球菌超標(biāo)，食品中檢出葡萄球菌超標(biāo)，“細(xì)菌門細(xì)菌門”事件引起公眾事件引起公眾普遍關(guān)注。葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂，在含卵普遍關(guān)注。葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂，在含卵黃的固體培養(yǎng)基上形成的菌落周圍會(huì)出現(xiàn)特有的乳白黃的固體培養(yǎng)基上形成的菌落周圍會(huì)

19、出現(xiàn)特有的乳白色的乳濁環(huán)。某興趣小組欲檢測(cè)某果汁類食品中是否色的乳濁環(huán)。某興趣小組欲檢測(cè)某果汁類食品中是否含有葡萄球菌，進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)?；卮鹣铝袉?wèn)題：含有葡萄球菌，進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)。回答下列問(wèn)題：(1)(1)配制培養(yǎng)基：稱取適量的牛肉膏、蛋白胨、配制培養(yǎng)基：稱取適量的牛肉膏、蛋白胨、NaClNaCl、瓊脂等，加入蒸餾水，攪拌加熱至完全溶解后調(diào)節(jié)瓊脂等，加入蒸餾水，攪拌加熱至完全溶解后調(diào)節(jié)pHpH，分裝到錐形瓶后進(jìn)行分裝到錐形瓶后進(jìn)行_，在無(wú)菌狀態(tài)下加，在無(wú)菌狀態(tài)下加入卵黃液搖勻后立即倒平板。培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋入卵黃液搖勻后立即倒平板。培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨為葡萄球菌生長(zhǎng)和繁殖提供白胨為葡萄球

20、菌生長(zhǎng)和繁殖提供_。葡萄。葡萄球菌能耐受高濃度的球菌能耐受高濃度的NaClNaCl溶液，所以在配制培養(yǎng)基時(shí)溶液，所以在配制培養(yǎng)基時(shí)加入高濃度的加入高濃度的NaClNaCl溶液可以將它分離出來(lái)，此培養(yǎng)基溶液可以將它分離出來(lái)，此培養(yǎng)基屬于屬于_培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。(2)(2)接種：取待檢測(cè)果汁接種：取待檢測(cè)果汁2.5 mL2.5 mL加入加入22.5 mL22.5 mL滅菌生理滅菌生理鹽水中，制成接種樣液。鹽水中，制成接種樣液。實(shí)驗(yàn)組：將接種樣液用平板劃線法接種在含卵黃的實(shí)驗(yàn)組：將接種樣液用平板劃線法接種在含卵黃的固體培養(yǎng)基上。固體培養(yǎng)基上。對(duì)照組：將對(duì)照組：將_用平板劃線法接種在用平板劃線法接種在含

21、卵黃的固體培養(yǎng)基上或不接種作為含卵黃的固體培養(yǎng)基上或不接種作為_對(duì)照。對(duì)照。(3)(3)培養(yǎng)：將上述接種后的培養(yǎng)皿同時(shí)放在培養(yǎng)：將上述接種后的培養(yǎng)皿同時(shí)放在3636的恒溫的恒溫箱中培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h48 h。(4)(4)觀察：培養(yǎng)基表面觀察：培養(yǎng)基表面_。(5)(5)結(jié)論。結(jié)論。若培養(yǎng)基上若培養(yǎng)基上_，則該果汁類食品，則該果汁類食品中含有葡萄球菌。中含有葡萄球菌。若培養(yǎng)基上若培養(yǎng)基上_，則該果汁類食品，則該果汁類食品中不含有葡萄球菌。中不含有葡萄球菌?！窘忸}指南【解題指南】(1)(1)關(guān)鍵信息：關(guān)鍵信息：葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂，在含卵黃的固體葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂，在含卵黃的固體

22、培養(yǎng)基上形成的菌落周圍會(huì)出現(xiàn)特有的乳白色的乳濁培養(yǎng)基上形成的菌落周圍會(huì)出現(xiàn)特有的乳白色的乳濁環(huán)。環(huán)。接種樣液是用滅菌生理鹽水稀釋的。接種樣液是用滅菌生理鹽水稀釋的。對(duì)照組用平板劃線法接種。對(duì)照組用平板劃線法接種。(2)(2)必備知識(shí)：對(duì)照實(shí)驗(yàn)除自變量不同，其他均相同。必備知識(shí)：對(duì)照實(shí)驗(yàn)除自變量不同，其他均相同。【解析【解析】(1)(1)培養(yǎng)基的制備流程：計(jì)算培養(yǎng)基的制備流程：計(jì)算稱量稱量溶化溶化滅菌滅菌倒平板。培養(yǎng)基中的牛肉膏可以為葡萄球菌生倒平板。培養(yǎng)基中的牛肉膏可以為葡萄球菌生長(zhǎng)和繁殖提供氮源、磷酸鹽和維生素，蛋白胨可以為長(zhǎng)和繁殖提供氮源、磷酸鹽和維生素，蛋白胨可以為葡萄球菌生長(zhǎng)和繁殖提供

23、碳源、氮源和維生素。加入葡萄球菌生長(zhǎng)和繁殖提供碳源、氮源和維生素。加入高濃度的高濃度的NaClNaCl溶液的培養(yǎng)基可以抑制大多數(shù)微生物的溶液的培養(yǎng)基可以抑制大多數(shù)微生物的生長(zhǎng)繁殖，因此該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。生長(zhǎng)繁殖，因此該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(2)(2)比較實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組可知，實(shí)驗(yàn)的自變量為是否接比較實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組可知，實(shí)驗(yàn)的自變量為是否接種接種樣液。對(duì)照組接種無(wú)菌生理鹽水，或不接種，種接種樣液。對(duì)照組接種無(wú)菌生理鹽水，或不接種，為空白對(duì)照。為空白對(duì)照。(4)(4)根據(jù)題干關(guān)鍵信息根據(jù)題干關(guān)鍵信息“葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂，在含卵黃的固體培養(yǎng)基上形成的菌落周圍

24、會(huì)出現(xiàn)脂，在含卵黃的固體培養(yǎng)基上形成的菌落周圍會(huì)出現(xiàn)特有的乳白色的乳濁環(huán)特有的乳白色的乳濁環(huán)”可知，觀察是否出現(xiàn)周圍有可知，觀察是否出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落可以判斷果汁中是否含有葡萄球菌。乳濁環(huán)的菌落可以判斷果汁中是否含有葡萄球菌。(5)(5)果汁中存在葡萄球菌時(shí)，培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)周圍有乳果汁中存在葡萄球菌時(shí)，培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落；果汁中不存在葡萄球菌時(shí)，培養(yǎng)基上不濁環(huán)的菌落；果汁中不存在葡萄球菌時(shí)，培養(yǎng)基上不會(huì)出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落，因此可以根據(jù)是否出現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落，因此可以根據(jù)是否出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落判斷是否存在葡萄球菌。周圍有乳濁環(huán)的菌落判斷是否存在葡萄球菌。答案：

25、答案：(1)(1)滅菌滅菌( (高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌) )碳源、氮源、磷酸鹽碳源、氮源、磷酸鹽和維生素選擇和維生素選擇(2)(2)無(wú)菌生理鹽水空白無(wú)菌生理鹽水空白(4)(4)是否出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落是否出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落(5)(5)出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落不出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落不出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落【方法規(guī)律【方法規(guī)律】正確判斷培養(yǎng)基制作與接種操作是否合正確判斷培養(yǎng)基制作與接種操作是否合格的方法格的方法(1)(1)從培養(yǎng)基制作是否合格上判斷：如果未接種的培養(yǎng)從培養(yǎng)基制作是否合格上判斷：如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫基在恒溫箱中保溫1 12 d2 d后無(wú)菌落生

26、長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基后無(wú)菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。的制備是成功的，否則需要重新制備。(2)(2)從接種操作是否符合無(wú)菌要求上判斷：從接種操作是否符合無(wú)菌要求上判斷：如果培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落的顏色、形狀、大小基本如果培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落的顏色、形狀、大小基本一致，并符合接種菌菌落的特點(diǎn)，說(shuō)明接種操作是符一致，并符合接種菌菌落的特點(diǎn)，說(shuō)明接種操作是符合要求的；合要求的；如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說(shuō)明接種過(guò)程中，如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說(shuō)明接種過(guò)程中，無(wú)菌操作還未達(dá)到要求，需要分析原因，重新操作。無(wú)菌操作還未達(dá)到要求，需要分析原因，重新操作?？键c(diǎn)二考點(diǎn)二土壤中分解尿素的細(xì)

27、菌的分離與計(jì)數(shù)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)【核心知識(shí)通關(guān)【核心知識(shí)通關(guān)】1.1.篩選菌株：篩選菌株：(1)(1)尋找目的菌株的原則尋找目的菌株的原則：根據(jù)它對(duì)：根據(jù)它對(duì)_的要求，的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。(2)(2)實(shí)驗(yàn)室篩選尿素分解菌的方法：使用以實(shí)驗(yàn)室篩選尿素分解菌的方法：使用以_為唯為唯一氮源的一氮源的_培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。生存環(huán)境生存環(huán)境尿素尿素選擇選擇(3)(3)選擇培養(yǎng)基：在微生物學(xué)中，將允許選擇培養(yǎng)基：在微生物學(xué)中，將允許_的的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)微生物生長(zhǎng)，同時(shí)_其他種類微生物生長(zhǎng)的其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。特定種類特定種類抑制或

28、阻止抑制或阻止2.2.微生物的計(jì)數(shù)：常用的方法有顯微計(jì)數(shù)法和微生物的計(jì)數(shù)：常用的方法有顯微計(jì)數(shù)法和_。稀釋稀釋涂布平板法涂布平板法表層表層 3030300300稀釋涂布平板稀釋涂布平板303037375 57 7252528283 34 4菌落菌落(7)(7)計(jì)算：根據(jù)公式計(jì)算：根據(jù)公式“每克樣品中的菌落數(shù)每克樣品中的菌落數(shù)=(C=(CV)V) MCMC代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V V代代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL(mL) )，M M代表稀釋倍代表稀釋倍數(shù)數(shù)”進(jìn)行計(jì)算進(jìn)行計(jì)算4.4.分解尿素的細(xì)菌的鑒

29、定：分解尿素的細(xì)菌的鑒定：(1)(1)方法：在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入方法：在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入_指示劑培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌。指示劑培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌。酚紅酚紅(2)(2)原理：原理：脲酶脲酶2NH2NH3 35.5.設(shè)置對(duì)照和重復(fù)：設(shè)置對(duì)照和重復(fù)：比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目對(duì)照對(duì)照重復(fù)重復(fù)目的目的排除非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)排除非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響結(jié)果的影響排除偶然因素對(duì)實(shí)排除偶然因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響驗(yàn)結(jié)果的影響實(shí)例實(shí)例空白對(duì)照：確定培養(yǎng)基空白對(duì)照：確定培養(yǎng)基制作是否合格制作是否合格同一稀釋度涂布至同一稀釋度涂布至少少3 3個(gè)平板個(gè)平板【特別提醒【特別提醒】“選擇菌落數(shù)在選擇菌落數(shù)在30

30、30300300的平板的平板”的兩個(gè)提醒的兩個(gè)提醒(1)(1)只得到只得到1 1個(gè)菌落數(shù)在個(gè)菌落數(shù)在3030300300的平板是錯(cuò)誤的，原因的平板是錯(cuò)誤的，原因是不符合實(shí)驗(yàn)的重復(fù)原則，易受到偶然因素的影響。是不符合實(shí)驗(yàn)的重復(fù)原則，易受到偶然因素的影響。(2)(2)得到得到3 3個(gè)或個(gè)或3 3個(gè)以上菌落數(shù)在個(gè)以上菌落數(shù)在3030300300的平板，也不的平板，也不一定正確，原因是如果不同平板間差異較大，如得到一定正確，原因是如果不同平板間差異較大，如得到3 3個(gè)平板，菌落數(shù)分別為個(gè)平板，菌落數(shù)分別為230230、3434、240240，雖然菌落數(shù)均，雖然菌落數(shù)均在在“3030300”300”，但

31、由于，但由于3434與另外兩個(gè)平板差異較大，與另外兩個(gè)平板差異較大，應(yīng)找出原因并重新實(shí)驗(yàn)。應(yīng)找出原因并重新實(shí)驗(yàn)?！舅季S拓展【思維拓展】微生物計(jì)數(shù)的兩種方法微生物計(jì)數(shù)的兩種方法比較比較項(xiàng)目項(xiàng)目間接計(jì)數(shù)法間接計(jì)數(shù)法( (稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法) )直接計(jì)數(shù)法直接計(jì)數(shù)法( (顯微計(jì)數(shù)法顯微計(jì)數(shù)法) )原理原理當(dāng)樣品的稀釋度足夠高當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，稀釋液中的一個(gè)活菌，通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌大約含有多少活菌利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板

32、或利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量品中微生物的數(shù)量比較比較項(xiàng)目項(xiàng)目間接計(jì)數(shù)法間接計(jì)數(shù)法( (稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法) )直接計(jì)數(shù)法直接計(jì)數(shù)法( (顯微計(jì)數(shù)法顯微計(jì)數(shù)法) )公式公式每克樣品中的菌落數(shù)：每克樣品中的菌落數(shù)：(C(CV)V)M MC C：某稀釋度下平板上生：某稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)；長(zhǎng)的平均菌落數(shù)；V V：涂：涂布平板時(shí)所用的稀釋液的布平板時(shí)所用的稀釋液的體積體積(mL(mL) )；M M：稀釋倍數(shù)：稀釋倍數(shù)每毫升原液所含細(xì)菌每毫升原液所含細(xì)菌數(shù)：每小格平均細(xì)菌數(shù)：每小格平均細(xì)菌數(shù)數(shù)4

33、0040010 00010 000稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù)比較比較項(xiàng)目項(xiàng)目間接計(jì)數(shù)法間接計(jì)數(shù)法( (稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法) )直接計(jì)數(shù)法直接計(jì)數(shù)法( (顯微計(jì)數(shù)法顯微計(jì)數(shù)法) )缺點(diǎn)缺點(diǎn)當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)菌體連在一當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)菌體連在一起時(shí)，平板上觀察到的只起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落是一個(gè)菌落不能區(qū)分細(xì)胞死活不能區(qū)分細(xì)胞死活結(jié)果結(jié)果比實(shí)際值偏小比實(shí)際值偏小比實(shí)際值偏大比實(shí)際值偏大【高考模擬精練【高考模擬精練】1.(20151.(2015全國(guó)卷全國(guó)卷節(jié)選節(jié)選) )已知微生物已知微生物A A可以產(chǎn)生油脂，可以產(chǎn)生油脂，微生物微生物B B可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶

34、和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)。回答有關(guān)問(wèn)題：油的生產(chǎn)。回答有關(guān)問(wèn)題：(1)(1)顯微觀察時(shí)，微生物顯微觀察時(shí)，微生物A A菌體中的油脂通常可用菌體中的油脂通?？捎胈染色。微生物染色。微生物A A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，可產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，可選用選用_(_(填填“萃取法萃取法”或或“水蒸氣蒸餾法水蒸氣蒸餾法”) )從菌體中提取。從菌體中提取。(2)(2)為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B B的單的單菌落，可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣，菌落，可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣，并應(yīng)選用以并應(yīng)選用以_為碳源的固體培養(yǎng)基進(jìn)行培為碳源的固體培養(yǎng)基進(jìn)行

35、培養(yǎng)。養(yǎng)。(3)(3)為了確定微生物為了確定微生物B B產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度，某同產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度，某同學(xué)測(cè)得相同時(shí)間內(nèi)，在學(xué)測(cè)得相同時(shí)間內(nèi)，在3535、4040、4545溫度下降解溫度下降解10 g10 g油脂所需酶量依次為油脂所需酶量依次為4 mg4 mg、1 mg1 mg、6 mg6 mg，則上述，則上述三個(gè)溫度中，三個(gè)溫度中，_條件下該酶活力最小。為了條件下該酶活力最小。為了進(jìn)一步確定該酶的最適溫度，應(yīng)圍繞進(jìn)一步確定該酶的最適溫度，應(yīng)圍繞_設(shè)計(jì)設(shè)計(jì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)。后續(xù)實(shí)驗(yàn)?！窘忸}指南【解題指南】(1)(1)題干關(guān)鍵詞：不易揮發(fā)。題干關(guān)鍵詞：不易揮發(fā)。(2)(2)關(guān)鍵知識(shí)：提取油脂的方

36、法、分解油脂的微生物的關(guān)鍵知識(shí)：提取油脂的方法、分解油脂的微生物的分離、測(cè)定微生物數(shù)量的方法和探究酶的最適溫度的分離、測(cè)定微生物數(shù)量的方法和探究酶的最適溫度的方法。方法?！窘馕觥窘馕觥?1)(1)脂肪可被蘇丹脂肪可被蘇丹( () )染液染成橘黃色染液染成橘黃色( (紅紅色色) )，題干中說(shuō)明微生物，題干中說(shuō)明微生物A A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，則可產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，則可以采用萃取法提取微生物以采用萃取法提取微生物A A中的油脂。中的油脂。(2)(2)油脂為有機(jī)化合物，富含碳元素，故為了從自然界油脂為有機(jī)化合物，富含碳元素，故為了從自然界獲得能夠分解油脂的單菌落，應(yīng)以油脂為唯一碳源來(lái)獲得能夠分解油

37、脂的單菌落，應(yīng)以油脂為唯一碳源來(lái)配制培養(yǎng)基。在該培養(yǎng)基上，能分解油脂的微生物可配制培養(yǎng)基。在該培養(yǎng)基上，能分解油脂的微生物可以正常生長(zhǎng)，其他微生物不能正常生長(zhǎng)。以正常生長(zhǎng)，其他微生物不能正常生長(zhǎng)。(3)(3)在在4545下，降解下，降解10 g10 g油脂所需酶量最多，則該溫度油脂所需酶量最多，則該溫度下酶活性最低；由題干信息可知，下酶活性最低；由題干信息可知，4040下降解下降解10 g10 g油油脂所需的酶量最少。應(yīng)圍繞脂所需的酶量最少。應(yīng)圍繞4040設(shè)置不同溫度梯度來(lái)設(shè)置不同溫度梯度來(lái)探究酶的最適溫度。探究酶的最適溫度。答案：答案：(1)(1)蘇丹蘇丹(或蘇丹或蘇丹)萃取法萃取法(2)(

38、2)油脂油脂( (其他合理答案也可其他合理答案也可) )(3)45(3)4540402.(20142.(2014全國(guó)卷全國(guó)卷)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作?；卮鹣铝袉?wèn)題：細(xì)菌分離等工作?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中細(xì)菌含量。該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是_；然后，將然后，

39、將1 mL1 mL水樣稀釋水樣稀釋100100倍，在倍，在3 3個(gè)平板上用涂布法個(gè)平板上用涂布法分別接入分別接入0.1 mL0.1 mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3 3個(gè)平板上的個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為菌落數(shù)分別為3939、3838和和3737，據(jù)此可得出每升水樣中的，據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為活菌數(shù)為_。(2)(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌。操作時(shí)，該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌。操作時(shí)，接種環(huán)通過(guò)接種環(huán)通過(guò)_滅菌，在第二次及以后的劃線滅菌，在第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目的

40、是的是_。(3)(3)示意圖示意圖A A和和B B中，中，_表示的是用稀釋涂布平板表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中_的含的含量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高_(dá)

41、的利用率。的利用率?！窘忸}指南【解題指南】(1)(1)題干關(guān)鍵詞：題干關(guān)鍵詞：“先行培養(yǎng)先行培養(yǎng)”“”“振蕩培振蕩培養(yǎng)養(yǎng)”。(2)(2)隱含信息：隱含信息：A A圖中菌落是采用平板劃線法培養(yǎng)的結(jié)圖中菌落是采用平板劃線法培養(yǎng)的結(jié)果，果，B B圖中菌落分布相對(duì)均勻，為稀釋涂布平板法接種圖中菌落分布相對(duì)均勻，為稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)的結(jié)果。培養(yǎng)的結(jié)果。(3)(3)關(guān)鍵知識(shí)：稀釋涂布平板法檢測(cè)細(xì)菌含量、平板劃關(guān)鍵知識(shí)：稀釋涂布平板法檢測(cè)細(xì)菌含量、平板劃線法分離細(xì)菌。線法分離細(xì)菌。【解析【解析】本題考查微生物培養(yǎng)、細(xì)菌分離的相關(guān)知識(shí)。本題考查微生物培養(yǎng)、細(xì)菌分離的相關(guān)知識(shí)。(1)(1)為了確定培養(yǎng)基的滅

42、菌是否合格，微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)一為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格，微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)一般會(huì)設(shè)置空白對(duì)照：隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板培般會(huì)設(shè)置空白對(duì)照：隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成；利用平養(yǎng)一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成；利用平板菌落計(jì)數(shù)法的計(jì)算公式估算水樣中的活菌數(shù)：板菌落計(jì)數(shù)法的計(jì)算公式估算水樣中的活菌數(shù)：7C38M()1003.8 10 / LV0.1 mL接種計(jì)數(shù)結(jié)果平均值稀釋倍數(shù)接種體積(2)(2)接種時(shí)接種環(huán)需要灼燒滅菌；在第二次及以后劃線接種時(shí)接種環(huán)需要灼燒滅菌；在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目時(shí)，總是從上一次劃線的末端開

43、始劃線，這樣做的目的是通過(guò)劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌體的數(shù)目的是通過(guò)劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌體的數(shù)目逐漸減少，以便得到單個(gè)菌落。逐漸減少，以便得到單個(gè)菌落。(3)(3)根據(jù)示意圖根據(jù)示意圖A A和和B B中生長(zhǎng)出的菌落形態(tài)，判定中生長(zhǎng)出的菌落形態(tài)，判定B B圖中圖中為稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)的結(jié)果為稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)的結(jié)果( (菌落分布相對(duì)均菌落分布相對(duì)均勻勻) )。(4)(4)振蕩培養(yǎng)可以增加液體培養(yǎng)基溶解氧的含量，促進(jìn)振蕩培養(yǎng)可以增加液體培養(yǎng)基溶解氧的含量，促進(jìn)好氧型微生物的生長(zhǎng)；另外振蕩培養(yǎng)還可以使菌體與好氧型微生物的生長(zhǎng)；另外振蕩培養(yǎng)還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營(yíng)養(yǎng)物

44、質(zhì)的利用率。培養(yǎng)液充分接觸，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率。答案：答案：(1)(1)檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3.83.810107 7(2)(2)灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落(3)B(3)B(4)(4)溶解氧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)溶解氧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)【易錯(cuò)提醒【易錯(cuò)提醒】本題第本題第(1)(1)題第題第2 2空易錯(cuò)答為空易錯(cuò)答為3.83.810104 4。出錯(cuò)原因是忽視了單位，課本計(jì)算公式是每克樣品中出錯(cuò)原因是忽視了單位，課本計(jì)算公式是每克樣品中的細(xì)菌數(shù)，而本題要計(jì)算每升水樣中的活菌數(shù)，應(yīng)再的細(xì)菌數(shù)，而本題要計(jì)算每升水樣中的活菌數(shù)，應(yīng)再乘以乘以

45、10103 3。3.(20163.(2016石家莊模擬石家莊模擬) )同學(xué)們?yōu)榱颂骄客寥乐械奈⑸瑢W(xué)們?yōu)榱颂骄客寥乐械奈⑸飳?duì)尿素是否有分解作用，設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)，并成功物對(duì)尿素是否有分解作用，設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)，并成功篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌( (目的菌目的菌) )。培養(yǎng)基成分。培養(yǎng)基成分如下表所示，實(shí)驗(yàn)步驟如下圖所示。請(qǐng)分析回答問(wèn)題：如下表所示，實(shí)驗(yàn)步驟如下圖所示。請(qǐng)分析回答問(wèn)題：KHKH2 2POPO4 41.4 g1.4 gNaNa2 2HPOHPO4 42.1 g2.1 gMgSOMgSO4 47H7H2 2O O0.2 g0.2 g葡萄糖葡萄糖10.0 g10

46、.0 g尿素尿素1.0 g1.0 g瓊脂瓊脂15.0 g15.0 g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL1 000 mL(1)(1)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選目的菌，這種培養(yǎng)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選目的菌，這種培養(yǎng)基屬于基屬于_培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。(2)(2)目的菌生長(zhǎng)所需的氮源和碳源分別來(lái)自培養(yǎng)基中的目的菌生長(zhǎng)所需的氮源和碳源分別來(lái)自培養(yǎng)基中的_和和_，實(shí)驗(yàn)中需要振蕩培養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)中需要振蕩培養(yǎng)，原因是原因是_。(3)(3)關(guān)于下圖的操作方法和結(jié)果，敘述正確的是關(guān)于下圖的操作方法和結(jié)果，敘述正確的是_。A.A.操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌操作前

47、要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌B.B.劃線操作必須在火焰上進(jìn)行劃線操作必須在火焰上進(jìn)行C.C.在在5 5區(qū)域中才可以得到所需菌落區(qū)域中才可以得到所需菌落D.D.在在1 1、2 2、3 3、4 4、5 5區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌【解析【解析】(1)(1)培養(yǎng)基中加入尿素形成以尿素為唯一氮源培養(yǎng)基中加入尿素形成以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基，只有尿素分解菌能夠以尿素為氮源進(jìn)行生的培養(yǎng)基，只有尿素分解菌能夠以尿素為氮源進(jìn)行生活，而其他微生物不能生活，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)活，而其他微生物不能生活，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基?；?。(2)(2)尿素分解菌所需要的氮源是尿素，碳源是培

48、養(yǎng)基中尿素分解菌所需要的氮源是尿素，碳源是培養(yǎng)基中的葡萄糖，尿素分解菌的代謝類型是異養(yǎng)需氧型，所的葡萄糖，尿素分解菌的代謝類型是異養(yǎng)需氧型，所以實(shí)驗(yàn)中需要振蕩培養(yǎng)為其提供更多的氧氣。以實(shí)驗(yàn)中需要振蕩培養(yǎng)為其提供更多的氧氣。(3)(3)操作前要將接種環(huán)放在火焰上灼燒滅菌，操作前要將接種環(huán)放在火焰上灼燒滅菌，A A項(xiàng)錯(cuò)誤。項(xiàng)錯(cuò)誤。劃線操作必須在火焰附近進(jìn)行，劃線操作必須在火焰附近進(jìn)行，B B項(xiàng)錯(cuò)誤。經(jīng)劃線操作項(xiàng)錯(cuò)誤。經(jīng)劃線操作后，出現(xiàn)單細(xì)胞菌落的區(qū)域不一定只是后，出現(xiàn)單細(xì)胞菌落的區(qū)域不一定只是5 5區(qū)域，如果第區(qū)域，如果第一次挑取菌種時(shí)接種環(huán)上菌體較少，可能在一次挑取菌種時(shí)接種環(huán)上菌體較少，可能在

49、3 3、4 4區(qū)域區(qū)域就出現(xiàn)單細(xì)胞菌落，就出現(xiàn)單細(xì)胞菌落，C C項(xiàng)錯(cuò)誤。每次劃線前后均要對(duì)接項(xiàng)錯(cuò)誤。每次劃線前后均要對(duì)接種環(huán)滅菌，種環(huán)滅菌，D D項(xiàng)正確。項(xiàng)正確。答案：答案：(1)(1)選擇選擇(2)(2)尿素葡萄糖為目的菌提供氧氣尿素葡萄糖為目的菌提供氧氣(3)D(3)D【方法技巧【方法技巧】選擇培養(yǎng)基的設(shè)計(jì)方法選擇培養(yǎng)基的設(shè)計(jì)方法(1)(1)營(yíng)養(yǎng)缺陷型選擇培養(yǎng)基：通過(guò)控制培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成營(yíng)養(yǎng)缺陷型選擇培養(yǎng)基：通過(guò)控制培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分，使?fàn)I養(yǎng)缺陷型微生物不能正常生長(zhǎng)。分，使?fàn)I養(yǎng)缺陷型微生物不能正常生長(zhǎng)。(2)(2)添加抑菌物質(zhì)的選擇培養(yǎng)基：在完全培養(yǎng)基中加入添加抑菌物質(zhì)的選擇培養(yǎng)基：在完全培養(yǎng)

50、基中加入某些化學(xué)物質(zhì)，利用加入的化學(xué)物質(zhì)對(duì)非目的微生物某些化學(xué)物質(zhì)，利用加入的化學(xué)物質(zhì)對(duì)非目的微生物產(chǎn)生的抑制作用選擇目的菌。產(chǎn)生的抑制作用選擇目的菌。(3)(3)特殊培養(yǎng)條件的選擇培養(yǎng)基：改變微生物的培養(yǎng)條特殊培養(yǎng)條件的選擇培養(yǎng)基：改變微生物的培養(yǎng)條件件( (如高溫、特殊如高溫、特殊pHpH等等) )。【加固訓(xùn)練【加固訓(xùn)練】 尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細(xì)菌的分尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細(xì)菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多，某同學(xué)試圖從土壤中篩選出能高物種類和數(shù)量繁多，某同學(xué)試圖從土壤中篩選出能高效

51、降解尿素的細(xì)菌效降解尿素的細(xì)菌( (目的菌目的菌) )，表中所示是該同學(xué)配制，表中所示是該同學(xué)配制的培養(yǎng)基成分：的培養(yǎng)基成分：成分成分含量含量成分成分含量含量KHKH2 2POPO4 41.4 g1.4 gNaNa2 2HPOHPO4 42.1 g2.1 gMgSOMgSO4 47H7H2 2O O0.2 g0.2 g葡萄糖葡萄糖10.0 g10.0 g(NH(NH4 4) )2 2SOSO4 41.0 g1.0 g瓊脂瓊脂15.0 g15.0 g蒸餾水蒸餾水定容到定容到1 000 mL1 000 mL(1)(1)該培養(yǎng)基中的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括該培養(yǎng)基中的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括_。從。從物理性質(zhì)上看，

52、該培養(yǎng)基屬于物理性質(zhì)上看，該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。(2)(2)在微生物的培養(yǎng)中，一般要對(duì)配制的培養(yǎng)基采用高在微生物的培養(yǎng)中，一般要對(duì)配制的培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌，其中壓蒸汽滅菌，其中“高壓高壓”是為了是為了_。(3)(3)若培養(yǎng)從土壤中分離出來(lái)的目的菌，該培養(yǎng)基成分若培養(yǎng)從土壤中分離出來(lái)的目的菌，該培養(yǎng)基成分如何調(diào)整？如何調(diào)整？_，依據(jù)是，依據(jù)是_。【解析【解析】(1)(1)從培養(yǎng)基的成分看，該培養(yǎng)基中包含微生從培養(yǎng)基的成分看，該培養(yǎng)基中包含微生物生長(zhǎng)所需的氮源物生長(zhǎng)所需的氮源(NH(NH4 4) )2 2SOSO4 4 、碳源、碳源( (葡萄糖葡萄糖) )、水和、水和多種無(wú)機(jī)鹽，并且培

53、養(yǎng)基中還有瓊脂作為凝固劑，因多種無(wú)機(jī)鹽，并且培養(yǎng)基中還有瓊脂作為凝固劑，因此從物理性質(zhì)上看，該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基。此從物理性質(zhì)上看，該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基。(2)(2)微生物的芽孢耐受性強(qiáng)，高壓可以殺死培養(yǎng)基中的微生物的芽孢耐受性強(qiáng)，高壓可以殺死培養(yǎng)基中的細(xì)菌芽孢。細(xì)菌芽孢。(3)(3)從土壤中分離降解尿素的細(xì)菌，應(yīng)用以尿素為唯一從土壤中分離降解尿素的細(xì)菌，應(yīng)用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，因此應(yīng)將該培養(yǎng)基中的氮源的選擇培養(yǎng)基，因此應(yīng)將該培養(yǎng)基中的(NH(NH4 4) )2 2SOSO4 4換成尿素。換成尿素。答案：答案：(1)(1)氮源、碳源、無(wú)機(jī)鹽和水固體氮源、碳源、無(wú)機(jī)鹽和水固體(2)

54、(2)殺死培養(yǎng)基中的細(xì)菌芽孢殺死培養(yǎng)基中的細(xì)菌芽孢(3)(3)將將(NH(NH4 4) )2 2SOSO4 4換成尿素要篩選出降解尿素的細(xì)菌，換成尿素要篩選出降解尿素的細(xì)菌，只能以尿素作為唯一的氮源只能以尿素作為唯一的氮源考點(diǎn)三考點(diǎn)三分解纖維素的微生物的分離分解纖維素的微生物的分離【核心知識(shí)通關(guān)【核心知識(shí)通關(guān)】1.1.纖維素酶：纖維素酶：(1)(1)組成：組成：纖維素酶是一種纖維素酶是一種_，一般認(rèn)為它至少，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即包括三種組分，即_。復(fù)合酶復(fù)合酶C C1 1酶、酶、C CX X酶和葡萄糖苷酶酶和葡萄糖苷酶(2)(2)作用：作用：纖維二糖纖維二糖葡萄糖葡萄糖2.2.纖維素

55、分解菌的篩選：纖維素分解菌的篩選：(1)(1)培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：_的選擇培養(yǎng)基。的選擇培養(yǎng)基。(2)(2)篩選原理：篩選原理：(3)(3)篩選方法：挑選菌落周圍出現(xiàn)篩選方法：挑選菌落周圍出現(xiàn)_的的菌落。菌落。 富含纖維素富含纖維素紅色復(fù)合物紅色復(fù)合物透明圈透明圈不變紅的透明圈不變紅的透明圈3.3.實(shí)驗(yàn)流程：實(shí)驗(yàn)流程：(1)(1)土壤取樣：富含土壤取樣：富含_的環(huán)境的環(huán)境(2)(2)選擇培養(yǎng)：用選擇培養(yǎng)：用_的選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，以的選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌的濃度增加纖維素分解菌的濃度纖維素纖維素富含纖維素富含纖維素(3)(3)梯度稀釋：制備系列稀釋液，目的是使纖維素分解梯度稀釋：制備系列稀

56、釋液，目的是使纖維素分解菌的細(xì)胞分散開，以獲得菌的細(xì)胞分散開，以獲得_的菌落的菌落(4)(4)涂布平板：將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)涂布平板：將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上基上(5)(5)挑選產(chǎn)生挑選產(chǎn)生_的菌落的菌落單個(gè)單個(gè)透明圈透明圈【特別提醒【特別提醒】(1)(1)纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基中并不只有纖維素一種纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基中并不只有纖維素一種碳源。碳源。(2)(2)纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的并不只是纖維纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的并不只是纖維素分解菌。素分解菌。(3)(3)纖維素分解菌菌落周圍的透明圈的大小與纖維素分纖維素分解菌菌落周圍的透明圈的大小與纖

57、維素分解菌分解纖維素的能力呈正相關(guān)。解菌分解纖維素的能力呈正相關(guān)?！舅季S拓展【思維拓展】篩選微生物的三種方法篩選微生物的三種方法(1)(1)單菌落挑取法：利用平板劃線法或稀釋涂布平板法單菌落挑取法：利用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種到固體平板培養(yǎng)基表面，直接根據(jù)微生物菌落的接種到固體平板培養(yǎng)基表面，直接根據(jù)微生物菌落的特征利用單菌落挑取的方法獲得目的微生物。特征利用單菌落挑取的方法獲得目的微生物。(2)(2)選擇培養(yǎng)法：利用選擇培養(yǎng)基對(duì)微生物進(jìn)行選擇培選擇培養(yǎng)法：利用選擇培養(yǎng)基對(duì)微生物進(jìn)行選擇培養(yǎng)，直接獲得目的微生物。養(yǎng)，直接獲得目的微生物。(3)(3)鑒定培養(yǎng)法：利用鑒別培養(yǎng)基使目的微生物菌

58、落呈鑒定培養(yǎng)法：利用鑒別培養(yǎng)基使目的微生物菌落呈現(xiàn)特有的特征，然后篩選目的微生物。現(xiàn)特有的特征，然后篩選目的微生物?！靖呖寄M精練【高考模擬精練】1.(20141.(2014全國(guó)卷全國(guó)卷)植物秸稈中的纖維素可被某些微植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉?wèn)題：生物分解。回答下列問(wèn)題：(1)(1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由是由3 3種組分組成的復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可將種組分組成的復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可將_分解成分解成_。(2)(2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)(CR)時(shí)，時(shí)，

59、CRCR可與可與纖維素形成纖維素形成_色復(fù)合物。用含有色復(fù)合物。用含有CRCR的該種培的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí)，培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)以該菌的養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí)，培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的菌落為中心的_。(3)(3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基( (成分見(jiàn)下成分見(jiàn)下表表) )：注：注：“+”+”表示有，表示有，“-”-”表示無(wú)。表示無(wú)。酵母酵母膏膏無(wú)機(jī)鹽無(wú)機(jī)鹽 淀粉淀粉纖維纖維素粉素粉瓊脂瓊脂CRCR溶液溶液水水培養(yǎng)基甲培養(yǎng)基甲+ + + + +- -+

60、 + +培養(yǎng)基乙培養(yǎng)基乙+ + + +- -+ + + +據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲_(_(填填“能能”或或“不能不能”) )用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是_；培養(yǎng)基乙；培養(yǎng)基乙_(_(填填“能能”或或“不能不能”) )用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是_?！窘忸}指南【解題指南】(1)(1)題干關(guān)鍵詞：題干關(guān)鍵詞：“纖維素酶纖維素酶”“”“剛果剛果紅紅”。(2)(2)隱含信息：兩種培養(yǎng)基中有瓊脂的為固體培養(yǎng)基，隱含信息：兩種培養(yǎng)基中有瓊脂的為固體培養(yǎng)基，無(wú)瓊脂的為液體培養(yǎng)基；淀粉是微生物的碳源，不含無(wú)瓊脂的為液體