生化分離工程復(fù)習(xí)題2及答案

1、精選生化分離工程復(fù)習(xí)題一、填空題1. 生化分離過(guò)程主要包括四個(gè)方面：預(yù)處理、細(xì)胞分離 、 純化、產(chǎn)品加工。2. 發(fā)酵液常用的固液分離方法有沉淀法 和 結(jié)晶法 等。3. 膜分離過(guò)程中所使用的膜，依據(jù)其膜特性（孔徑）不同可分為微濾膜、超濾膜、納濾膜和反滲透膜 ；4. 離子交換分離操作中，常用的洗脫方法簡(jiǎn)單洗脫 和 梯度洗脫。5. 等電聚焦電泳法分離不同蛋白質(zhì)的原理是依據(jù)其 各種蛋白質(zhì)等電點(diǎn) 的不同。6. 典型的工業(yè)過(guò)濾設(shè)備有板框壓濾機(jī)和轉(zhuǎn)筒真空過(guò)濾機(jī) 。7. 常用的蛋白質(zhì)沉析方法有 _鹽析法_、等電點(diǎn)沉淀_和有機(jī)溶劑沉淀。8. 離子交換樹(shù)脂由載體、活性基團(tuán)和可交換離子組成。9. 超臨界流體的特點(diǎn)是

2、與氣體有相似的擴(kuò)散性能，與液體有相似的 密度。二、單選題1.供生產(chǎn)生物藥物的生物資源不包括（ D ）A.動(dòng)物 B.植物 C.微生物 D.礦物質(zhì)2.下列哪個(gè)不屬于初步純化：（C ）A.沉淀法 B.吸附法 C.親和層析D.萃取法3. HPLC 是哪種色譜的簡(jiǎn)稱(chēng)（ C ）。A.離子交換色譜 B.氣相色譜 C.高效液相色譜 D.凝膠色譜 4其他條件均相同時(shí)，優(yōu)先選用那種固液分離手段（B ）A.離心分離B.過(guò)濾 C.沉降 D.超濾5.適合小量細(xì)胞破碎的方法是（C ）6有機(jī)溶劑沉淀法中可使用的有機(jī)溶劑為（D ）A.乙酸乙酯B.正丁醇 C.苯D.丙酮7 .液-液萃取時(shí)常發(fā)生乳化作用，如何避免（ D ）A.劇

3、烈攪拌B.低溫C.靜止D.加熱&鹽析法與有機(jī)溶劑沉淀法比較，其優(yōu)點(diǎn)是（B ）A 分辨率高B.變性作用小C.雜質(zhì)易除D 沉淀易分離9工業(yè)上常用的過(guò)濾介質(zhì)不包括（D ）A.織物介質(zhì) B.堆積介質(zhì)C.多孔固體介質(zhì) D.真空介質(zhì)10哪一種膜孔徑最?。– ）A.微濾 B.超濾 C.反滲透 D.納米過(guò)濾11用于蛋白質(zhì)分離過(guò)程中的脫鹽和更換緩沖液的色譜是（C ）A.離子交換色譜B.親和色譜C.凝膠過(guò)濾色譜D.反相色譜12. “類(lèi)似物容易吸附類(lèi)似物”的原則，一般極性吸附劑適宜于從何種溶劑中吸附極性物質(zhì)（B ）A 極性溶劑B 非極性溶劑C.水 D 溶劑13.下列細(xì)胞破碎的方法中， 哪個(gè)方法屬于非機(jī)械破碎

4、法（A ）A.化學(xué)法 B.高壓勻漿 C.超聲波破碎 D.高速珠磨14. 離子交換樹(shù)脂適用（ A ）進(jìn)行溶脹A.水 B.乙醇 C.氫氧化鈉 D.鹽酸A.高壓勻漿法B.超聲破碎法C.高速珠磨法D.高壓擠壓法精選15.使蛋白質(zhì)鹽析可加入試劑（D ）精選A. 氯化鈉 B. 硫酸 C. 硝酸汞 D. 硫酸銨 16超臨界流體萃取法適用于提取（B ）A. 極性大的成分 B. 極性小的成分 C. 離子型化合物 D. 能氣化的成分 17最常用的干燥方法有（D ）A. 常壓干燥 B. 減壓干燥 C. 噴霧干燥 D. 以上都是18分子篩層析指的是（C ）A. 吸附層析 B. 分配層析 C. 凝膠過(guò)濾 D. 親和層析

5、A. 光照 B. 待分離生物大分子的性質(zhì) C. 濕度 21發(fā)酵液的預(yù)處理方法不包括（C ）A. 加熱 B. 絮凝 C. 離心 D. 調(diào) pH22哪種細(xì)胞破碎方法適用工業(yè)生產(chǎn)（A ）A. 高壓勻漿 B. 超聲波破碎 C. 滲透壓沖擊法 D. 酶解法23液 -液萃取時(shí)常發(fā)生乳化作用，如何避免（D ）A. 劇烈攪拌 B. 低溫 C. 靜止 D. 加熱 24在葡聚糖與聚乙二醇形成的雙水相體系中，目標(biāo)蛋白質(zhì)存在于（A ）A. 上相 B. 下相 C. 葡聚糖相 D. 以上都有可能 25使蛋白質(zhì)鹽析可加入試劑（D ）A. 氯化鈉 B. 硫酸 C. 硝酸汞 D. 硫酸銨 26超濾技術(shù)常被用作（C ）A. 小分

6、子物質(zhì)的脫鹽和濃縮 B. 小分子物質(zhì)的分級(jí)分離C. 小分子物質(zhì)的純化 D. 固液分離 27吸附色譜分離的依據(jù)是（A ）。A. 固定相對(duì)各物質(zhì)的吸附力不同B. 各物質(zhì)分子大小不同C. 各物質(zhì)在流動(dòng)相和固定相的分配系數(shù)不同D. 各物質(zhì)與專(zhuān)一分子的親和力不同28人血清清蛋白的等電點(diǎn)為4.64，在 pH 為 7 的溶液中將血清蛋白質(zhì)溶液通電，清蛋白質(zhì)分子向 （ A ）A. 正極移動(dòng) B. 負(fù)極移動(dòng) C. 不移動(dòng) D. 不確定。 29蛋白質(zhì)分子量的測(cè)定可采用（C ）方法。A 離子交換層析B. 親和層析 C. 凝膠層析 D. 聚酰胺層析30陰離子交換劑（ C ）。A. 可交換的為陰、陽(yáng)離子B. 可交換的為

7、蛋白質(zhì)C. 可交換的為陰離子D. 可交換的為陽(yáng)離子31下面哪一種是根據(jù)酶分子專(zhuān)一性結(jié)合的純化方法（A ）。A. 親和層析 B. 凝膠層析 C. 離子交換層析 D. 鹽析 32下列哪項(xiàng)不是蛋白質(zhì)的濃度測(cè)定的方法（D ）。A. 凱氏定氮法 B. 考馬斯亮藍(lán)法 C. 福林 -酚法D. 核磁共振33物理萃取即溶質(zhì)根據(jù)（B ）的原理進(jìn)行分離的。A. 吸附 B. 相似相溶 C. 分子篩 D. 親和 34葡聚糖凝膠可使用那種溶劑溶脹（B ）A. 甲醇 B. 乙醇 C. 緩沖液 D. 乙酸乙酯19 為加快過(guò)濾效果通常使用 （ A.電解質(zhì) B. 高分子聚合物 20影響電泳分離的主要因素（C ）C. 惰性助濾劑

8、D. 活性助濾劑 B ）D. 電泳時(shí)間精選35 疏水性相互作用層析通常在 （ A. 酸性 B. 堿性 C. 中性36超臨界流體萃取中，如何降低溶質(zhì)的溶解度達(dá)到分離的目的（C ）A.降溫 B.升高壓力 C.升溫 D.加入夾帶劑37 HPLC 是哪種色譜的簡(jiǎn)稱(chēng)（ C ）。A .離子交換色譜B.氣相色譜38最常用的干燥方法有（DA. 常壓干燥B. 減壓干燥 三、判斷題1 細(xì)胞破碎技術(shù)是生化分離操作中必需的步驟。（X）2板框壓濾機(jī)可過(guò)濾所有菌體。（X）3.冷凍干燥適用于高度熱敏的生物物質(zhì)。（V）4. 鹽析是利用不同物質(zhì)在高濃度的鹽溶液中溶解度的差異，向溶液中加入一定量的中性鹽，使原溶 解的物質(zhì)沉淀析出

9、的分離技術(shù)。 （V）5.要增加目的物的溶解度，往往要在目的物等電點(diǎn)附近進(jìn)行提取。（X）6. 助濾劑是一種可壓縮的多孔微粒。 （X）7. 通過(guò)加入某些反應(yīng)劑是發(fā)酵液進(jìn)行預(yù)處理的方法之一。（V）8. 珠磨法中適當(dāng)?shù)卦黾友心┑难b量可提高細(xì)胞破碎率。（X）9. 冷凍干燥適用于高度熱敏的生物物質(zhì)。 （V）10.氨基酸、蛋白質(zhì)、多肽、酶、核酸等兩性物質(zhì)可用等電點(diǎn)沉析。（V）11.蛋白質(zhì)為兩性電解質(zhì)，改變 pH 可改變其荷電性質(zhì)，pH pl 蛋白質(zhì)帶正電。（X）12.層析分離是一種化學(xué)的分離方法。（X）13層析點(diǎn)樣時(shí)用一根毛細(xì)管，吸取樣品溶液，在距薄層一端1.5-2cm 的起始線(xiàn)上點(diǎn)樣，樣品點(diǎn)直徑小于 3

10、mm。（V）14.凝膠層析會(huì)使得大分子物質(zhì)后流出， 小分子物質(zhì)先流出。（X）15. 蛋白質(zhì)類(lèi)的生物大分子在鹽析過(guò)程中，最好在高溫下進(jìn)行，因?yàn)闇囟雀邥?huì)增加其溶解度。（X）16.溶劑萃取中的乳化現(xiàn)象一定存在。（X）17.要增加目的物的溶解度，往往要在目的物等電點(diǎn)附近進(jìn)行提取。（X）18.應(yīng)用有機(jī)溶劑提取生化成分時(shí)， 一般在較高溫度下進(jìn)行。（X）19.氨基酸、蛋白質(zhì)、多肽、酶、核酸等兩性物質(zhì)可用等電點(diǎn)沉析。（V）20.色譜分離技術(shù)中固定相都是固體。（X） 四、簡(jiǎn)答題1. 生化分離技術(shù)的基本涵義及內(nèi)容？ 生化分離是從生物材料、微生物的發(fā)酵液、生物反應(yīng)液或動(dòng)植細(xì)胞的培養(yǎng)液中分離并純化有關(guān)生化 產(chǎn)品（如具

11、有藥理活性作用的生物藥物等）的過(guò)程，又稱(chēng)下游工程。發(fā)酵液T預(yù)處理T細(xì)胞分離T（細(xì)胞破碎T(mén)細(xì)胞碎片分離初步純化T高度純化T成品加工2. 簡(jiǎn)述生化分離過(guò)程的特點(diǎn) ?D ）的條件下進(jìn)行D. 高濃度鹽溶液C. 高效液相色譜）C. 噴霧干燥D. 凝膠色譜D. 以上都是精選特點(diǎn)： 1、目的產(chǎn)物在初始物料（發(fā)酵液）中的含量低；2、培養(yǎng)液是多組分的混合物，除少量產(chǎn)物外，還有大量的細(xì)胞及碎片、其他代謝物（幾百上千種） 、培養(yǎng)基成分、無(wú)機(jī)鹽等； 3、生化產(chǎn)物的 穩(wěn)定性低，易變質(zhì)、易失活、易變性，對(duì)溫度、 pH 值、重金屬離子、有機(jī)溶劑、剪切力、表面張力等非常敏感； 4、對(duì)最終產(chǎn)品的質(zhì)量要求高3簡(jiǎn)述軟水和無(wú)鹽水的制

12、備方法？1軟水的制備：利用鈉型磺酸樹(shù)脂除去水中的鈣離子和鎂離子等堿金屬后即可制得軟水。2無(wú)鹽水的制備：將原水通過(guò)氫型強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂和羥型強(qiáng)堿或弱堿性陰離子交換樹(shù)脂 的組合，經(jīng)過(guò)離子交換反應(yīng)，將水中所有的陰、陽(yáng)離子除去，從而制得純度很高的無(wú)鹽純水。4. 試述柱層析的基本操作過(guò)程。答：1、裝柱： 干法裝柱濕法裝柱 注意：濕法裝柱中柱內(nèi)預(yù)留一部分水，防止氣泡的產(chǎn)生，裝柱過(guò)程要連貫。平衡。2、加樣： 干法加樣濕法加樣 注意：加樣過(guò)程中，要防止產(chǎn)生飛濺，量要適中。3、 洗脫：以設(shè)定好的流速加入洗脫劑，可以是單一溶劑，也可以梯度洗脫。注意：不使柱表面 的溶液流干，柱上端保留一層溶液。4、 收集：每隔 10mL 收集一試管，使用層析的手段或紫外檢測(cè)器進(jìn)行實(shí)時(shí)的檢測(cè)，合并具有相 同物質(zhì)的流份。5. 簡(jiǎn)述凝膠層析有哪些用途？1、脫鹽 2、用于分離提純 3、測(cè)定高分子物質(zhì)的分子量 4、高峰自溶液的濃縮6. 簡(jiǎn)述膜分離技術(shù)的類(lèi)型？ 微濾、納濾、超濾、反滲透、電滲析7. 木瓜蛋白酶是一種來(lái)源廣泛的植物蛋白酶，它對(duì)蛋白質(zhì)、短肽化合物、氨基酸酯以及酰胺等多類(lèi) 化合物的水解反應(yīng)都具有良好的催化活性。被廣泛應(yīng)用于肉類(lèi)嫩化、啤酒澄清、明膠制造、蠶繭脫 膠、皮革脫毛等工業(yè) ,在醫(yī)療衛(wèi)生方面用途前景更為廣闊。木瓜蛋白酶的生產(chǎn)以番木瓜未成熟果實(shí) 的新鮮乳汁為原料 ,如何改進(jìn)生產(chǎn)工藝、提高產(chǎn)品質(zhì)量已成為當(dāng)前