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1、階段質(zhì)量檢測(二)微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用(A 卷學(xué)業(yè)水平達標(biāo))(滿分:100 分時間:40 分鐘)一、選擇題(每小題 4 分,共 48 分)1 平板冷凝后,要將平板倒置,其原因是()A. 接種時再拿起來方便B. 在皿底上標(biāo)記日期等方便C. 正著放置容易破碎D. 防止皿蓋上的冷凝水珠落入培養(yǎng)基造成污染解析:選 D 平板冷凝后,皿蓋上會凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面濕度也比較高。將 平板倒置,可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),防止皿蓋上水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。2.產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)菌落的細(xì)菌的最初數(shù)目和培養(yǎng)基分別是()A. 個細(xì)菌、液體培養(yǎng)基B. 許多細(xì)菌、液體培養(yǎng)基C. 一個細(xì)菌、固體培養(yǎng)基D. 許多細(xì)菌
2、、固體培養(yǎng)基解析:選 C 菌落是一個或幾個細(xì)菌的子細(xì)胞群體,在固體培養(yǎng)基上有一定的形態(tài),肉 眼可見,而液體培養(yǎng)基不具備該條件。3. 需要在火焰旁操作的有()1土壤取樣 稱取土壤稀釋土壤溶液涂布平板 微生物的培養(yǎng)A.B.C.D.解析:選 D 為了防止雜菌污染,稱取土壤、稀釋土壤和涂布平板均應(yīng)在酒精燈火焰旁 進行,土壤取樣不用在火焰旁進行,但所用器具均應(yīng)先滅菌再使用;微生物的培養(yǎng)在恒溫箱中進行,無需滅菌。4.下列關(guān)于微生物培養(yǎng)的敘述,錯誤的是()A. 獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌入侵B. 高溫滅菌的目的是殺死微生物的細(xì)胞、孢子、芽孢C. 劃線分離可在培養(yǎng)基上獲得均勻分布的單菌落D. 稀釋涂布
3、平板法易獲得單菌落和計數(shù)活菌數(shù)目解析:選 C 獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌入侵;高溫滅菌的目的是殺死微生 物的細(xì)胞、孢子、芽孢;稀釋涂布平板法易獲得單菌落和計數(shù)活菌數(shù)目;劃線分離可在培養(yǎng)2基上獲得單菌落,但不是均勻分布的。35下列有關(guān)平板劃線接種法的操作錯誤的是()A. 將接種環(huán)放在火焰上灼燒B. 將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液C. 在挑取菌種前和接種完畢后均要將試管口通過酒精燈火焰D. 劃線時要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連解析:選 D 劃線時最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線不能相連。6.制備各種牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基,倒平板的具體描述正確的是()1待培養(yǎng)基冷卻至 40 C 左
4、右時,在酒精燈火焰附近倒平板2將滅過菌的培養(yǎng)皿放在桌面上,左手拔出棉塞3右手拿錐形瓶,使瓶口迅速通過火焰4用左手的拇指和食指打開皿蓋5右手將錐形瓶中培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿,左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋等待平板冷卻510 s,將平板倒過來放置,使皿蓋在下,皿底在上A.B.C.D.解析:選 C 待培養(yǎng)基冷卻至 50 C 左右,在酒精燈火焰附近倒平板;將滅過菌的培養(yǎng) 皿放在火焰旁的桌面上, 左手拔出棉塞,用左手將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,等待平板冷卻凝固 510 min 后,將平板倒過來放置。7.在農(nóng)田土壤的表層自生固氮菌較多。將用表層土制成的稀泥漿接種到特制的培養(yǎng)基 上培養(yǎng),可將自生固氮菌與其他細(xì)菌分
5、開,對培養(yǎng)基的要求是()加抗生素 不加抗生素 加氮素 不加氮素 加葡萄糖 不加葡萄糖 37 C 恒溫箱中培養(yǎng)2830 C 溫度下培養(yǎng)A.B.C.D.解析:選 C 自生固氮菌有固氮功能, 因此培養(yǎng)基中不需要加氮素;細(xì)菌對抗生素敏感,因此,不能加抗生素;自生固氮菌是異養(yǎng)型的, 應(yīng)加葡萄糖;其生長繁殖的適宜溫度是 28 30 C。&若將酵母菌和圓褐固氮菌混合在一起,可采用下列哪組培養(yǎng)基將它們分開()A. 加食鹽的培養(yǎng)基和牛肉膏、蛋白胨培養(yǎng)基B. 固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基C. 加伊紅一美藍的培養(yǎng)基和含硝酸鹽的培 養(yǎng)基D.加青霉素的培養(yǎng)基和無氮培養(yǎng)基4解析:選 D 青霉素可殺死原核生物如細(xì)菌,酵母
6、菌為真菌,因而不會被殺死。圓褐固 氮菌是固氮菌,無氮源也能存活,但酵母菌無法存活,借此可分離兩種微生物。59.細(xì)菌分離與計數(shù)實驗操作過程應(yīng)注意()無菌操作做好標(biāo)記規(guī)劃時間土樣滅菌A.B.C.D.解析:選 C由于本實驗操作復(fù)雜,目的是對細(xì)菌進行分離和計數(shù),整個過程需要無菌操作,如取土樣時用到的小鐵鏟和盛土樣的信封及容器等均需滅菌,土樣稱量、樣品稀釋及涂布平板等操作均在火焰旁進行;本實驗用到的平板和試管比較多,為避免混淆,最好在使用前就做好標(biāo)記;本實驗耗時較長,需事先規(guī)劃好時間, 以便提高工作效率,在操作時更加有條不紊。10.在涂布有大腸桿菌的培養(yǎng)基上進行抑菌實驗,在a、b、c 處分別貼浸有不同抗
7、生素(濃度相同)的無菌濾紙片,d 處濾紙片浸有無菌水。培養(yǎng)后的結(jié)果如圖所示。以下判斷錯誤的是()A. a 處抑菌效果小于 b 處B. b 處的濾紙片沒有瀝干C. c 處抗生素?zé)o效D. d 為對照解析:選 A 培養(yǎng)皿中不同濾紙片四周透明圈的大小不同,透明圈越大,說明浸有的抗 生素抑菌效果越好。a 處的透明圈并不小于 b 處;b 處不是圓形的透明圈,可能是濾紙片沒 有瀝干,抗生素流出濾紙片;c 處無透明圈,說明 c 處抗生素對大腸桿菌無效; d 為空白對照。11.做“微生物的分離與培養(yǎng)”實驗時,下列敘述正確的是()A. 高壓滅菌加熱結(jié)束時,打開放氣閥使壓力表指針回到零后,開啟鍋蓋B. 倒平板時,應(yīng)
8、將打開的皿蓋放到一邊,以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C. 為了防止污染,接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落D. 用記號筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時,應(yīng)標(biāo)記在皿底上解析:選 D 在高壓滅菌的操作過程中,加熱結(jié)束后應(yīng)讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降,待壓 力表的指針指到零時,打開放氣閥,旋松螺栓,打開蓋子。倒平板時,用左手將培養(yǎng)皿打開 一條稍大于瓶口的縫隙, 而不是完全取下放到一邊。 接種環(huán)經(jīng)火焰灼燒滅菌后應(yīng)在火焰旁冷 卻后,再用其挑取菌落。在微生物的培養(yǎng)中,一般將培養(yǎng)皿倒置, 在皿底上用記號筆做標(biāo)記。12.漆酶屬于木質(zhì)素降解酶類,在環(huán)境修復(fù)、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域有著廣泛用途。下圖是分 離、純化和保存漆酶菌株的過程,相關(guān)敘述錯誤
9、的是()67A. 生活污水中含有大量微生物,是分離產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品B. 篩選培養(yǎng)基中需要加入漆酶的底物,通過菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落C. 在涂布平板上長出的菌落,再通過劃線進一步純化D. 若要長期保存菌株可采用甘油管藏的方法解析:選 A 生活污水中含木質(zhì)素的物質(zhì)相對較少,產(chǎn)漆酶菌株也較少,不宜作為分離 產(chǎn)漆酶菌株的樣品;產(chǎn)漆酶菌株可降解木質(zhì)素,在篩選培養(yǎng)基中加入木質(zhì)素可篩選產(chǎn)漆酶的菌株,篩選時可通過菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落;在涂布平板上生長的菌落可能還有其他雜 菌,可再通過平板劃線法進一步純化; 對于需要長期保存的菌種, 可以采用甘油管藏的方法, 即在一 20 C的冷凍箱中保存。二、非選擇
10、題(共 52 分)(J13.(16 分)莠去津是一種含氮農(nóng)藥,在土壤中不易降解,為修復(fù)被其污染的土壤,可 按下面程序選育能降解莠去津的細(xì)菌(目的菌)。請據(jù)圖回答(已知莠去津在水中溶解度低,固體培養(yǎng)基的方法有平板劃線法和A_(填“前者”或“后者”)(3) 一段時間后,培養(yǎng)基出現(xiàn)無透明圈和有透明圈兩種菌落,我們篩選的目的菌是菌落 中 的細(xì)菌,該菌落生長所需的氮元素主要來自(4)為弄清固體培養(yǎng)基中的非目的菌落來自C 瓶菌種還是培養(yǎng)基,應(yīng)如何設(shè)置對照組?解析:(1)圖中從 A 瓶到 C 瓶液體培養(yǎng)的過程稱為選擇培養(yǎng),目的是初步選擇能降解莠去津的細(xì)菌(目的菌)并提高其密度。(2)將菌種接種到固體培養(yǎng)基的
11、方法有平板劃線法和稀 釋涂布平板法兩種,由圖中固體培養(yǎng)基上的菌落分布可知,該接種方法是稀釋涂布平板法,包括梯度稀釋操作和涂布平板操作。(3)根據(jù)題目信息“莠去津在水中溶解度低,含過量莠去津的固體培養(yǎng)基不透明”可知,能夠降解莠去津的目的菌會使菌落周圍出現(xiàn)透明圈,因此可以選擇菌落周圍存在透明圈的細(xì)菌。由于培養(yǎng)基中只有莠去津一種氮源,因此分解莠去津含過量莠去津的固體培養(yǎng)基不透明十無透明圈 七壤 七埋沒出液 適宜條榊下掘蕩血伙抽蛙畀賂培郭適當(dāng)時間周粋域界基I 7(1)由圖推斷,從 A 瓶到 C 瓶液體培養(yǎng)的過程稱為_,目的是(2) 在將 C 瓶菌種接種到固體培養(yǎng)基之前通常要進行,將菌種接種到法,從圖中
12、看本實驗采用的是上清浪UO iikL無區(qū)饒養(yǎng)湫+過M莠去津1 mL8的微生物所需的氮元素主要由莠去津提供。(4)為弄清固體培養(yǎng)基中的非目的菌落來自C 瓶菌種還是培養(yǎng)基, 應(yīng)設(shè)置滅菌后不接種菌種的培養(yǎng)基, 與實驗組放在相同條件下培養(yǎng), 若培 養(yǎng)基上無菌落出現(xiàn),則非目的菌落一定來自C 瓶菌種,若培養(yǎng)基上出現(xiàn)菌落,則說明非目的菌落可能來自培養(yǎng)基。答案:(1) 選擇培養(yǎng) 初步選擇能降解莠去津的細(xì)菌 (目的菌 )并提高其密度 (2) 梯度稀 釋 稀釋涂布平板 后者 (3) 有透明圈 莠去津 (4) 配制的培養(yǎng)基滅菌后不接種菌種, 與 實驗組放在相同條件下培養(yǎng)14(16 分) 臨床使用抗生素前,有時需要做
13、細(xì)菌耐藥實驗。實驗時,首先要從病人身 上獲取少量樣本,然后按照一定的實驗步驟操作,以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性。 回答下列問題:(1)為 了 從 樣 本 中 獲 取 致 病 菌 單 菌 落 , 可用_ 法 或_ 法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面, 經(jīng)過選擇培養(yǎng)、 鑒 別等步驟獲得。(2) 取該單菌落適當(dāng)稀釋,用 _ 法接種于固體培養(yǎng)基表面,在37 C 培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24 h ,使其均勻生長,布滿平板。(3) 為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性,將分別含有A B、C、D 四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板的不同位置上,培養(yǎng)一段時間后,含 A 的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對抗生素 A_ ;
14、含 B 的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對抗生素B_ ; 含 C 的 濾 紙 片 周 圍 的 透 明 圈 比 含 A 的 小 , 說 明_;含 D 的濾紙片周圍的透明圈也比含 A 的小,且透明圈 中出現(xiàn)了一個菌落,在排除雜菌污染的情況下,此菌落很可能是抗生素D 的_。(4) 根據(jù)上述實驗結(jié)果,為達到抗菌目的,最好選用抗生素 _ 。解析:(1) 微生物的常用分離方法為劃線法和稀釋涂布平板法。(2) 能夠使菌落均勻生長、布滿平板的接種方法為涂布法。(3)(4)含 A 的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對抗生素 A 敏感;含 B 的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對抗生素B 不敏感;
15、含 C 的濾紙片周圍的透明圈比含 A 的小,說明該致病菌對 C 的敏感性比對 A 的弱;含 D 的濾紙片周圍 的透明圈比含 A 的小,且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落(排除雜菌污染),說明該致病菌可能對抗 生素 D 產(chǎn)生了抗藥性。答案: (1) 劃線 稀釋涂布平板 ( 或涂布 )(2) 涂布 (3) 敏感 不敏感 該致病菌對 C的敏感性比對 A 弱 耐藥菌 (4)A15 (20 分)人工瘤胃模仿了牛羊等反芻動物的胃, 可用來發(fā)酵處理秸稈, 提高秸稈的 營養(yǎng)價值。為9了增強發(fā)酵效果, 研究人員從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株, 并對其降解纖維 素能力進行了研究。請回答下列問題:(1) 在樣品稀釋和涂布平板步
16、驟中,下列選項不需要的是 _ (填序號) 。酒精燈 培養(yǎng)皿 顯微鏡 無菌水10 在涂布平板時,滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多的原因是O(3)向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時,若試管口粘附有培養(yǎng)基,需要用酒精棉球擦凈的原因是_(4)剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物,但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。研究人員在剛果紅 培養(yǎng)基平板上,篩到了幾株有透明降解圈的菌落(見右圖)。圖中降解圈大小與纖維素酶的 _有關(guān)。圖中降解纖維素能力最強的菌株是 _ (填圖中序號)。(5)研究人員用篩選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株Ji和 J4,在不同溫度和 pH 條件下進行發(fā)酵,測得發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果見下圖,推測菌株 _更適合用于人工瘤胃發(fā)酵,理由是解析:(1)在樣品稀釋和涂布平板過程中,需要在酒精燈火焰附近進行操作,培養(yǎng)皿用于盛放培養(yǎng)基并培養(yǎng)細(xì)菌,無菌水做稀釋的溶劑,此處唯一用不到的是顯微鏡。(2)在涂布平板時,要取少量菌懸液滴加到培養(yǎng)基表面,因為如果滴加菌懸液量過多,菌懸液就會堆積在培養(yǎng)基表面,影響分離效果。(3)在向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時,如果試管口粘附有培養(yǎng)基,就很容易使棉塞受到污染,因此,需要用無菌的酒精棉球?qū)⒃嚬芸诓潦酶蓛?。?)因為剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物,且不與纖維素降解產(chǎn)物反應(yīng)。所以在剛果紅培養(yǎng)基平板上,菌落周圍有透明降解圈是纖維素被降解的結(jié)果,降
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