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1、頁(yè)眉內(nèi)容來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)細(xì) 胞 模 擬 試 題 及 答 案一、填空(每空一分,共 25 分)1. 實(shí)驗(yàn)室的物理防護(hù)是由隔離的設(shè)備、實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)實(shí)施等三個(gè)方面組成,根據(jù)其密封程度的不同,分為 P1、P2、P3 P4 四個(gè)生物安全等級(jí)。典型的 P4 實(shí)驗(yàn)室由更衣區(qū)、過(guò)濾區(qū)、建 沖區(qū)、消毒區(qū)、核心區(qū)組成。2. 細(xì)胞系是原代培養(yǎng)經(jīng)初步純化獲得的以一種細(xì)胞為主的、能在體外長(zhǎng)期生存的不均一細(xì)胞群體。3. 細(xì)胞株是指從一個(gè)經(jīng)過(guò)生物學(xué)鑒定的細(xì)胞系用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過(guò)篩選的方法,由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。4. 干細(xì)胞是一類具有自我更新和分化潛能的細(xì)胞。干細(xì)胞的增殖特性為緩慢性和自穩(wěn)性。5. 培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)特點(diǎn)
2、為貼附、接觸抑制和密度抑制。6. 植物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是基于_動(dòng)物細(xì)胞的全能性。7. 植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的方法為分批培養(yǎng)法、連續(xù)培養(yǎng)法和半連續(xù)培養(yǎng)。8. 植物組織培養(yǎng)中培養(yǎng)材料的消毒過(guò)程中,消毒的基本原則是既要?dú)⑺栏街渖系奈⑸镉植粨p傷材料。9. 細(xì)胞生長(zhǎng)測(cè)定的一般方法為:細(xì)胞計(jì)數(shù)、測(cè)定細(xì)胞密實(shí)體積、細(xì)胞鮮重或干重。10. 體外培養(yǎng)的細(xì)胞根據(jù)其生長(zhǎng)方式主要分為貼附型細(xì)胞和非貼附型細(xì)胞。11. 人工種子的組分包括胚狀體、人工胚乳和人工種皮。12. 細(xì)胞融合主要經(jīng)過(guò)了兩原生質(zhì)體或細(xì)胞互相靠近、細(xì)胞橋形成、胞質(zhì)滲透、細(xì)胞核融合幾個(gè)步 驟。其中細(xì)胞橋形成是最關(guān)鍵的一步。13. 花粉單倍體植株的鑒定方法有
3、形態(tài)鑒定、細(xì)胞學(xué)鑒定、雜交鑒定、分子標(biāo)記鑒定。I.J九J 護(hù)14. 胚胎工程主要是對(duì)哺乳類動(dòng)物的胚胎進(jìn)行某種人為的工程技術(shù)操作,然后讓它繼續(xù)發(fā)育,獲得 人們所需要的成體動(dòng)物。15. 人工誘導(dǎo)單倍體形成的方法包括:遠(yuǎn)緣雜交、延遲授粉、核置換、射線照射、花藥培養(yǎng)等。二、單項(xiàng)選擇題(每題 1 分,共 10 分)1.人參皂甙粉是人參中重要的藥用成分,以前只能從人參中提取產(chǎn)量極低,因而價(jià)格昂貴。目前 人參皂甙粉可以通過(guò)下列哪項(xiàng)技術(shù)迅速大量獲?。˙)頁(yè)眉內(nèi)容來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)A .基因工程 B .植物組織培養(yǎng)C .植物體細(xì)胞雜交D .發(fā)酵工程2.下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述不正確的是(C)頁(yè)眉內(nèi)容來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)A 通過(guò)
4、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可獲得大量的細(xì)胞分泌蛋白B 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶處理,以使細(xì)胞分散C 細(xì)胞癌變都發(fā)生于原代培養(yǎng)過(guò)程中D 目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為10 代以內(nèi)的,以保持其正常核型3.盡管各種合成培養(yǎng)基給動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)帶來(lái)極大方便,但許多實(shí)驗(yàn)表明,單純使用合成培養(yǎng)基 細(xì)胞的貼壁增殖效果常常不理想。因此,在使用時(shí)通常仍然需要加入一定量的?(C)A.平衡鹽溶液???B.瓊脂糖??C.動(dòng)物血清???D.甘露醇4. 制備人工種子的關(guān)鍵是控制(A)A.胚狀體的同步發(fā)育B.人工種皮的同步發(fā)育C.胚狀體的單獨(dú)發(fā)育D.人工種皮的單獨(dú)發(fā)育5. 細(xì)胞融合中使用(C)方法可以在顯微鏡下直接定向誘導(dǎo)細(xì)胞融合。
5、A.仙臺(tái)病毒法B.PEG誘導(dǎo)C.電融合誘導(dǎo)法D.高 Ca+和 pH 誘導(dǎo)法6. 中胚層來(lái)源的細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)一般表現(xiàn)為哪種形態(tài)(A)? A.成纖維細(xì)胞型細(xì)胞?B.多形型細(xì)胞?IC.上皮型細(xì)胞?D.游走型細(xì)胞???,哪一個(gè)時(shí)期的細(xì)胞數(shù)隨時(shí)間變化成倍增長(zhǎng),活力最佳,最適合進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究(D) ?8.以下哪種方法或技術(shù)適合進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)? (D)C.旋轉(zhuǎn)管培養(yǎng)法?D.多孔載體培養(yǎng)技術(shù)9.單克隆抗體制備選擇親本時(shí)應(yīng)選擇(A)A. 骨髓瘤細(xì)胞系和免疫動(dòng)物屬于同一品系7.在每一代貼附生長(zhǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)過(guò)程中A.穩(wěn)定期?? B.衰亡期??C.潛伏期??D.對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期?? A.懸滴培養(yǎng)法??B.培養(yǎng)瓶培養(yǎng)
6、法?頁(yè)眉內(nèi)容來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)B. 骨髓瘤細(xì)胞系和免疫動(dòng)物屬于不同品系C. B 淋巴細(xì)胞和骨髓瘤屬細(xì)胞屬于不同品系D. B 淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞無(wú)親緣關(guān)系10.下列關(guān)于哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育和胚胎工程的敘述,正確的是(D) ?頁(yè)眉內(nèi)容來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)A.卵裂期胚胎中細(xì)胞數(shù)目和有機(jī)物總量在不斷增加?B.胚胎分割時(shí)需將原腸胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割???C胚胎干細(xì)胞具有細(xì)胞核大、核仁小和蛋白質(zhì)合成旺盛等特點(diǎn)D.胚胎干細(xì)胞是一類未分化細(xì)胞,可從早期胚胎中分離獲取三、多項(xiàng)選擇(每題 3 份,共 15 分)1. 由外植體或單個(gè)細(xì)胞形成愈傷組織一般要經(jīng)過(guò)三個(gè)步驟(ABDA.啟動(dòng)期B.生長(zhǎng)期C.分裂期D.分化期2.植物單細(xì)胞培養(yǎng)方法
7、有(ABCD3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)室,無(wú)論細(xì)胞種類和供體的年齡如何,在細(xì)胞的全生長(zhǎng)過(guò)程中大致都要經(jīng)過(guò)三個(gè)主要階段(ABCA.原代培養(yǎng)期B.傳代期C.衰退期D.穩(wěn)定期4. 干細(xì)胞從所具有的分化功能上分為(ABCIA.單能干細(xì)胞B.多能干細(xì)胞C.全能干細(xì)胞D.胚胎干細(xì)胞5. 動(dòng)物多倍體育種的方法有(ABCA.溫度休克法B.水靜壓法C.細(xì)胞松弛素 BD.秋水仙素四、簡(jiǎn)答題(共 35 分)1. 二級(jí)生物安全適用于處理什么材料,具體要求有哪些(8 分) 答:適用于:(1)來(lái)自于來(lái)自于靈長(zhǎng)類動(dòng)物的材料和細(xì)胞系(2)接觸過(guò)靈長(zhǎng)類的病毒或被其轉(zhuǎn)化了的細(xì)胞系(3)含有支原體的細(xì)胞系。A.平板培養(yǎng)法B.看護(hù)培養(yǎng)與飼養(yǎng)層
8、培養(yǎng)法C.液體淺層靜置培養(yǎng)法D.細(xì)胞懸浮培養(yǎng)法頁(yè)眉內(nèi)容來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)要求:(1)所有可能產(chǎn)生氣溶膠的操作都應(yīng)使用垂直層流生物安全小室;(2)所有污染物都應(yīng)放入裝滿蒸餾水的防漏的不銹鋼桶中;(3)大的塑料器皿蓋緊后放入高壓消毒袋中進(jìn)行高壓消毒;(4)在處理或沖洗用過(guò)的器皿前,應(yīng)先進(jìn)行高壓消毒;(5)進(jìn)行操作時(shí)要帶乳膠手套。2. 原生質(zhì)體分離的方法有哪些,各有何優(yōu)缺點(diǎn)(6 分)答:(1)機(jī)械法優(yōu)點(diǎn):可避免酶制劑對(duì)原生質(zhì)體的破壞。缺點(diǎn):獲得完整原生質(zhì)體的數(shù)量少,使用此法的植物種類有限。(2)酶解法優(yōu)點(diǎn):可獲得大量原生質(zhì)體,條件溫和,原生質(zhì)體完整性好,幾乎所有植物都可 用此法。缺點(diǎn):影響原生質(zhì)體的活力。3
9、. 植物組織培養(yǎng)的基本步驟(6 分)答:(1)培養(yǎng)材料的采集(2)培養(yǎng)材料的消毒(3)制備外植體(4)接種和培養(yǎng)(5)根的誘導(dǎo)i(6)組織苗的練苗移栽4. 細(xì)胞系和細(xì)胞株的鑒定指標(biāo)及方法(8 分)答:鑒定指標(biāo):(1)純度:分析以何種細(xì)胞為主,所占比例為多少,混雜有哪些其他細(xì)胞。(2) 細(xì)胞生物學(xué)特征:細(xì)胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)、染色體組型、生長(zhǎng)曲線、分裂指數(shù)、 倍增時(shí)間是否與來(lái)源細(xì)胞一致。(3) 穩(wěn)定性:傳代過(guò)程中細(xì)胞學(xué)特征是否發(fā)生變化。(4) 污染情況:檢查是否有微生物或其他細(xì)胞系的污染。頁(yè)眉內(nèi)容來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)鑒定方法:細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察;繪制生長(zhǎng)曲線,計(jì)算分裂指數(shù);染色體組型和帶型分析;同 工酶譜檢測(cè)4.植物
10、細(xì)胞固定化的方法及特點(diǎn)答:吸附法:利用固體吸附劑將細(xì)胞吸附在其表面而使細(xì)胞固定化的方法。包埋法:將細(xì)胞包埋在多孔載體內(nèi)部而制成固定化細(xì)胞的方法。特點(diǎn):(1)由于載體的保護(hù)作用,減小剪切力作用,提高細(xì)胞存活率和穩(wěn)定性。(2)細(xì)胞束縛在一定空間內(nèi),不易聚集成團(tuán),促進(jìn)代謝產(chǎn)物的分散。(3)可簡(jiǎn)便地在不同培養(yǎng)階段更換不同的培養(yǎng)液。(4)固定化植物細(xì)胞可連續(xù)反復(fù)使用,可縮短生產(chǎn)周期,提高生產(chǎn)效率。(5)容易與培養(yǎng)液分離,有利于產(chǎn)品的分離純化,提高產(chǎn)品的質(zhì)量。五、綜合分析題(15 分)植物單細(xì)胞培養(yǎng)的程序及各步中應(yīng)注意的事項(xiàng)答:1.建立細(xì)胞株(1) 材料準(zhǔn)備a. 確定植物種類品種b. 選擇單細(xì)胞或愈傷組織或葉肉、下胚軸等c.借助酶處理:酶的種類、濃度、處理時(shí)間都對(duì)材料有一定影響(2) 制備細(xì)胞懸浮液a. 培養(yǎng)基成分篩選b. 懸浮培養(yǎng),振蕩次數(shù)為 8090 次/minc.用 200300 目鋼網(wǎng)過(guò)濾盒離心沉降2. 選擇細(xì)胞株平板篩選ia. 細(xì)胞起始密度
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