實驗基礎(chǔ)知識基本技能培訓課件

1、實驗基礎(chǔ)知識基本技能培訓課件目目 錄錄前言：分子生物學實驗規(guī)程前言：分子生物學實驗規(guī)程第一節(jié)：分子生物學實驗設(shè)備第一節(jié)：分子生物學實驗設(shè)備第二節(jié)：分子生物學根本技術(shù)第二節(jié)：分子生物學根本技術(shù)第三節(jié)：實驗安排第三節(jié)：實驗安排實驗規(guī)程實驗規(guī)程 嚴格遵守生命科學中心制定的平安規(guī)那么。嚴格遵守生命科學中心制定的平安規(guī)那么。 發(fā)現(xiàn)實驗室發(fā)現(xiàn)實驗室/樓內(nèi)任何地方有危害平安之人、事、物等，樓內(nèi)任何地方有危害平安之人、事、物等，必須立即向有關(guān)人員反映并作緊急處理。必須立即向有關(guān)人員反映并作緊急處理。 1) 穿著規(guī)定穿著規(guī)定 必須按規(guī)定穿戴工作服。必須按規(guī)定穿戴工作服。 進行危害物質(zhì)、揮發(fā)性有機溶機、特定化學物

2、質(zhì)等化學進行危害物質(zhì)、揮發(fā)性有機溶機、特定化學物質(zhì)等化學藥品操作實驗，必須要穿戴防護具防護口罩、防護手藥品操作實驗，必須要穿戴防護具防護口罩、防護手套、防護眼鏡。套、防護眼鏡。 長發(fā)及松散衣服妥善固定。長發(fā)及松散衣服妥善固定。實驗規(guī)程實驗規(guī)程2) 飲食規(guī)定飲食規(guī)定 禁止在實驗室吃喝食物且使用化學藥品后禁止在實驗室吃喝食物且使用化學藥品后需先洗凈雙手方能進食。需先洗凈雙手方能進食。 嚴禁在實驗室內(nèi)吃口香糖。嚴禁在實驗室內(nèi)吃口香糖。 禁止使用實驗室儀器冷藏禁止使用實驗室儀器冷藏/加熱食物。加熱食物。 實驗規(guī)程實驗規(guī)程3) 藥品操作相關(guān)規(guī)定：藥品操作相關(guān)規(guī)定：操作危險性藥品請務必遵守操作守那么或遵操

3、作危險性藥品請務必遵守操作守那么或遵照老師操作流程進行實驗，勿自行更換實照老師操作流程進行實驗，勿自行更換實驗流程。驗流程。 識記清楚藥品危害性，防止危害發(fā)生。識記清楚藥品危害性，防止危害發(fā)生。實驗規(guī)程實驗規(guī)程4) 用電平安相關(guān)規(guī)定：用電平安相關(guān)規(guī)定：按照規(guī)定電壓、功率合理用電。按照規(guī)定電壓、功率合理用電。手上有水或潮濕請勿接觸電器用品或電器設(shè)備。手上有水或潮濕請勿接觸電器用品或電器設(shè)備。 掌握主要儀器、設(shè)備的性能和操作方法，嚴格按操作掌握主要儀器、設(shè)備的性能和操作方法，嚴格按操作規(guī)程操作。規(guī)程操作。 最后離開實驗室務必隨手將不用的水、電等開關(guān)關(guān)閉。最后離開實驗室務必隨手將不用的水、電等開關(guān)關(guān)

4、閉。如：擦拭、維修過程中要關(guān)閉電源如：擦拭、維修過程中要關(guān)閉電源實驗規(guī)程實驗規(guī)程5) 環(huán)境衛(wèi)生相關(guān)規(guī)定：環(huán)境衛(wèi)生相關(guān)規(guī)定：注重環(huán)境衛(wèi)生，并須保持整潔。注重環(huán)境衛(wèi)生，并須保持整潔。化學物溢滿地面或工作臺時應立即選用適宜的方法擦拭化學物溢滿地面或工作臺時應立即選用適宜的方法擦拭沖洗干凈。沖洗干凈。 嚴格區(qū)分開污染區(qū)和潔凈區(qū)。嚴格區(qū)分開污染區(qū)和潔凈區(qū)。 污染區(qū)：戴手套操作。污染區(qū)：戴手套操作。潔凈區(qū)：徒手操作。潔凈區(qū)：徒手操作。實驗要求實驗要求 1) 詳細記錄和分析實驗結(jié)果，并按時提交詳細記錄和分析實驗結(jié)果，并按時提交實驗報告；實驗報告； 2) 實驗中一定要處處用心、勤動手，多問實驗中一定要處處用心

5、、勤動手，多問為什么；為什么； 3) 仔細操作和觀察；仔細操作和觀察； 4) 保存好每一步的實驗樣品，在確準的情保存好每一步的實驗樣品，在確準的情況下才能當廢液扔掉。況下才能當廢液扔掉。分子生物學實驗設(shè)備分子生物學實驗設(shè)備1) 溫度控制系統(tǒng)溫度控制系統(tǒng) 2) 實驗用水處理系統(tǒng)實驗用水處理系統(tǒng) 3) 消毒系統(tǒng)消毒系統(tǒng)4) 計量系統(tǒng)計量系統(tǒng)5) 離心設(shè)備離心設(shè)備 6) 電泳裝置電泳裝置 7) 凝膠成像系統(tǒng)凝膠成像系統(tǒng)8) PCR儀儀9) 生物培養(yǎng)設(shè)施生物培養(yǎng)設(shè)施 10) 蛋白質(zhì)檢測設(shè)備蛋白質(zhì)檢測設(shè)備11) 其他設(shè)備其他設(shè)備溫度控制系統(tǒng)溫度控制系統(tǒng) 環(huán)境溫控：大局部的分子生物學實驗都要求在一定的環(huán)境

6、溫控：大局部的分子生物學實驗都要求在一定的溫度下進行操作，為了保持這些條件，實驗室應裝備空調(diào)溫度下進行操作，為了保持這些條件，實驗室應裝備空調(diào)等。等。 藥品、試劑、樣品等的保存：不同藥品、試劑、樣品要藥品、試劑、樣品等的保存：不同藥品、試劑、樣品要求在不同的溫度下保存，實驗室必須備有求在不同的溫度下保存，實驗室必須備有44、2020、8080的冰柜的冰柜/ /箱，需要在更低溫度下保存的樣品，那么須使箱，需要在更低溫度下保存的樣品，那么須使用液氮罐。用液氮罐。 藥品、試劑、樣藥品、試劑、樣品等的取放品等的取放溫度控制系統(tǒng)溫度控制系統(tǒng) 低溫操作可以用制冰機制冰塊降溫；低溫操作可以用制冰機制冰塊降溫

7、； 對于需在較高溫度下進行的操作，那么可對于需在較高溫度下進行的操作，那么可使用烘箱、微波爐、恒溫水浴鍋、恒溫空氣搖使用烘箱、微波爐、恒溫水浴鍋、恒溫空氣搖床等。床等。實驗用水實驗用水 一次蒸餾水：水經(jīng)過一次蒸餾，不揮發(fā)的組分殘留在容一次蒸餾水：水經(jīng)過一次蒸餾，不揮發(fā)的組分殘留在容器中被除去，揮發(fā)的組分氨、二氧化碳、有機物進入蒸器中被除去，揮發(fā)的組分氨、二氧化碳、有機物進入蒸餾水的初始餾分中，通常只收集餾分的中間局部，約占餾水的初始餾分中，通常只收集餾分的中間局部，約占6060。 屢次蒸餾水：在一次蒸餾水中參加堿性高錳酸鉀溶液，屢次蒸餾水：在一次蒸餾水中參加堿性高錳酸鉀溶液，除去有機物和二氧化

8、碳；參加非揮發(fā)性的酸硫酸或磷酸，除去有機物和二氧化碳；參加非揮發(fā)性的酸硫酸或磷酸，使氨成為不揮發(fā)的銨鹽。使氨成為不揮發(fā)的銨鹽。 無去離子水：指除去了呈離子形式雜質(zhì)后的純水。無去離子水：指除去了呈離子形式雜質(zhì)后的純水。主要指采用離子交換樹脂處理方法，應用離子交換樹脂去主要指采用離子交換樹脂處理方法，應用離子交換樹脂去除水中的陰離子和陽離子，但水中仍然存在可溶性的有機除水中的陰離子和陽離子，但水中仍然存在可溶性的有機物。物。實驗用水處理系統(tǒng)實驗用水處理系統(tǒng)實驗用水實驗用水 超純水：既將水中的導電介質(zhì)幾乎完全去除，又將水超純水：既將水中的導電介質(zhì)幾乎完全去除，又將水中不離解的膠體物質(zhì)、氣體及有機物均

9、去除至很低程度的中不離解的膠體物質(zhì)、氣體及有機物均去除至很低程度的水。水。 超純水中除了水分子超純水中除了水分子(H20)(H20)外，幾乎沒有什么雜質(zhì)。外，幾乎沒有什么雜質(zhì)。 各種用水，在貯存中都會被污染：各種用水，在貯存中都會被污染： 塑料容器會產(chǎn)生有紫外吸收的有機物；塑料容器會產(chǎn)生有紫外吸收的有機物； 玻璃和金屬容器會產(chǎn)生金屬離子的污染；玻璃和金屬容器會產(chǎn)生金屬離子的污染； 長時間放置更會使水長菌，空氣中長時間放置更會使水長菌，空氣中CO2CO2會溶入水中。會溶入水中。 所以貯存一定要隔絕空氣，密封蓋嚴，必要時貯存在所以貯存一定要隔絕空氣，密封蓋嚴，必要時貯存在冰箱的冷藏室中；最好使用冰

10、箱的冷藏室中；最好使用“新鮮的水。新鮮的水。實驗用水處理系統(tǒng)實驗用水處理系統(tǒng)分子生物學實驗用水分子生物學實驗用水 普通蒸餾水、二次蒸餾水、無普通蒸餾水、二次蒸餾水、無/ /去離子水、超純水。去離子水、超純水。實驗用水處理系統(tǒng)實驗用水處理系統(tǒng) 常用的滅菌方法：高溫、高壓滅菌、紫外線照射、火常用的滅菌方法：高溫、高壓滅菌、紫外線照射、火焰燃燒、過濾除菌、酒精等試劑浸泡消毒等，因此實驗室焰燃燒、過濾除菌、酒精等試劑浸泡消毒等，因此實驗室必須配備各種無菌處理設(shè)備。必須配備各種無菌處理設(shè)備。 常用的滅菌儀器設(shè)備：高壓滅菌鍋、紫外燈、常用的滅菌儀器設(shè)備：高壓滅菌鍋、紫外燈、酒精燈、濾膜等。酒精燈、濾膜等。

11、消毒系統(tǒng)消毒系統(tǒng) 常用的定量系統(tǒng)有：稱量系統(tǒng)、液體體積度量系統(tǒng)、常用的定量系統(tǒng)有：稱量系統(tǒng)、液體體積度量系統(tǒng)、pHpH測定系統(tǒng)、液體溶質(zhì)定量系統(tǒng)等。測定系統(tǒng)、液體溶質(zhì)定量系統(tǒng)等。 稱量儀器：最常用的是電子天平。稱量儀器：最常用的是電子天平。 酸堿度酸堿度pHpH測量儀器：最常用的是測量儀器：最常用的是pHpH試紙和試紙和pHpH計。計。計量系統(tǒng)計量系統(tǒng)液體體積度量儀器：常用的有各種量筒、移液管、液體體積度量儀器：常用的有各種量筒、移液管、容量瓶、容量瓶、移液器移液器。計量系統(tǒng)計量系統(tǒng) 液體溶質(zhì)定量儀器：主要有紫外分光光度計和液體溶質(zhì)定量儀器：主要有紫外分光光度計和可見分光光度計等?？梢姺止夤舛?/p>

12、計等。 計量系統(tǒng)計量系統(tǒng)實驗用離心機分為制備性離心機和分析性離心機。實驗用離心機分為制備性離心機和分析性離心機。制備性離心機主要用于別離各種生物材料。制備性離心機主要用于別離各種生物材料。離心方法是別離和制備生物大分子最常用的手段。離心方法是別離和制備生物大分子最常用的手段。制備性離心機可分為三類制備性離心機可分為三類: :低速、高速冷凍、超速低速、高速冷凍、超速離心機。離心機。離心設(shè)備離心設(shè)備 電泳是生化實驗中最常用最重要的實驗技術(shù)之一，主電泳是生化實驗中最常用最重要的實驗技術(shù)之一，主要用于分析、鑒定，也可用于制備。要用于分析、鑒定，也可用于制備。 電泳裝置由電泳儀和電泳槽兩局部組成。電泳裝

13、置由電泳儀和電泳槽兩局部組成。 電泳儀：電泳時提供一定的電壓和電流電泳儀：電泳時提供一定的電壓和電流 電泳槽：凝膠電泳系統(tǒng)的核心局部，根據(jù)電泳的原電泳槽：凝膠電泳系統(tǒng)的核心局部，根據(jù)電泳的原理，凝膠都是放在兩個緩沖腔之間，電場通過凝膠連接理，凝膠都是放在兩個緩沖腔之間，電場通過凝膠連接兩個緩沖腔。兩個緩沖腔。電泳裝置電泳裝置 電泳槽：核酸或蛋白質(zhì)的電泳定性電泳槽：核酸或蛋白質(zhì)的電泳定性/ /定量分析時的定量分析時的凝膠支架。凝膠支架。 電泳槽又分為水平電泳槽和垂直電泳槽。電泳槽又分為水平電泳槽和垂直電泳槽。電泳裝置電泳裝置 是分子生物學實驗中的重要觀測儀器，幾乎全部的實是分子生物學實驗中的重要

14、觀測儀器，幾乎全部的實驗結(jié)果都需要經(jīng)由凝膠成像系統(tǒng)來觀察。驗結(jié)果都需要經(jīng)由凝膠成像系統(tǒng)來觀察。 可用于觀察分析各種透明或不透明的電泳圖像，可用于觀察分析各種透明或不透明的電泳圖像，包括瓊脂糖凝膠電泳檢測包括瓊脂糖凝膠電泳檢測DNADNA結(jié)果的觀察、結(jié)果的觀察、PCRPCR產(chǎn)物的產(chǎn)物的檢測觀察，垂直板凝膠電泳檢測基因多態(tài)性的銀染膠、檢測觀察，垂直板凝膠電泳檢測基因多態(tài)性的銀染膠、蛋白膠、斑點印跡蛋白膠、斑點印跡RNA/RNA/蛋白質(zhì)檢測結(jié)果的觀察等。蛋白質(zhì)檢測結(jié)果的觀察等。凝膠成像系統(tǒng)凝膠成像系統(tǒng)紫外分析儀紫外分析儀 用于檢測許多主要生物大分子物質(zhì)如蛋用于檢測許多主要生物大分子物質(zhì)如蛋白質(zhì)、核苷

15、酸等。白質(zhì)、核苷酸等。 PCR(Polymerase Chain Reaction) PCR(Polymerase Chain Reaction)是指聚合酶是指聚合酶鏈式反響。其反響是用鏈式反響。其反響是用DNADNA聚合酶在體外大量擴增聚合酶在體外大量擴增DNADNA片段的一種方法。片段的一種方法。 PCR PCR儀就是將此方法實現(xiàn)了自動化操作的一種儀就是將此方法實現(xiàn)了自動化操作的一種儀器，是分子生物學實驗常用和必備的設(shè)備。儀器，是分子生物學實驗常用和必備的設(shè)備。 PCR PCR儀包括普通儀包括普通PCRPCR儀、梯度儀、梯度PCRPCR儀、熒光定量儀、熒光定量PCRPCR儀。儀。PCR儀儀

16、 超凈工作臺超凈工作臺 恒溫培養(yǎng)箱恒溫培養(yǎng)箱生物培養(yǎng)設(shè)施生物培養(yǎng)設(shè)施 蛋白電泳槽和轉(zhuǎn)印槽蛋白電泳槽和轉(zhuǎn)印槽- -用于用于western-blottingwestern-blotting實驗實驗蛋白質(zhì)檢測設(shè)備蛋白質(zhì)檢測設(shè)備 酶標儀酶標儀- -用于用于ELISA ELISA 酶聯(lián)免疫吸附實驗實驗。酶聯(lián)免疫吸附實驗實驗。蛋白質(zhì)檢測設(shè)備蛋白質(zhì)檢測設(shè)備 實驗室除以上常規(guī)設(shè)備和設(shè)施外，還必須裝備以下一實驗室除以上常規(guī)設(shè)備和設(shè)施外，還必須裝備以下一些常用設(shè)備：些常用設(shè)備：A.A.通風柜：用于有害和有毒氣體的操作。通風柜：用于有害和有毒氣體的操作。 B.B.組織打碎機和勻漿器：用于各種生物材料、動植組織打碎機

17、和勻漿器：用于各種生物材料、動植物組織和細胞的破碎。研缽物組織和細胞的破碎。研缽C. C. 超聲清洗機：用于各種器皿、移液管和自動取液器吸超聲清洗機：用于各種器皿、移液管和自動取液器吸頭的清洗和高效液相色譜儀所用流動相的脫氣等。頭的清洗和高效液相色譜儀所用流動相的脫氣等。其它設(shè)備其它設(shè)備 其它設(shè)備其它設(shè)備 D.D.冰凍枯燥機：用于生物大分子水溶液的冰凍枯燥，冰凍枯燥機：用于生物大分子水溶液的冰凍枯燥，可由其水溶液直接制得固體干粉?？捎善渌芤褐苯又频霉腆w干粉。E.E.機械和水環(huán)式真空泵：用于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器和各種真空抽機械和水環(huán)式真空泵：用于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器和各種真空抽氣操作。氣操作。F.F.冷室冷室:

18、4-10: 4-10的冷室，工作人員可以在其中進行各種柱的冷室，工作人員可以在其中進行各種柱層析、各種電泳、生物大分子的提取和別離、透析等操作，層析、各種電泳、生物大分子的提取和別離、透析等操作，并可以貯存各種生物制品和生化試劑。并可以貯存各種生物制品和生化試劑。G.G.暗室暗室: :主要用于一些避光的實驗，如顯影。主要用于一些避光的實驗，如顯影。H.H.基因?qū)雰x：用于向受體生物細胞中導入基因?；?qū)雰x：用于向受體生物細胞中導入基因。常用的導入儀有：電導入儀、基因槍、激光和超常用的導入儀有：電導入儀、基因槍、激光和超聲導入儀、原生質(zhì)體融合儀等。聲導入儀、原生質(zhì)體融合儀等。I.I.高效液相色

19、譜儀和毛細管電泳儀：用于各種生物高效液相色譜儀和毛細管電泳儀：用于各種生物大分子的分析與鑒定。大分子的分析與鑒定。其它設(shè)備其它設(shè)備 分子生物學根本技術(shù)分子生物學根本技術(shù)-使用方法及本卷須知使用方法及本卷須知 1) 溫度控制系統(tǒng)溫度控制系統(tǒng) 2) 實驗用水處理系統(tǒng)實驗用水處理系統(tǒng) 3) 消毒系統(tǒng)消毒系統(tǒng) 4) 計量系統(tǒng)計量系統(tǒng) 5) 離心設(shè)備離心設(shè)備 6) 電泳裝置電泳裝置 7) 凝膠成像系統(tǒng)凝膠成像系統(tǒng)1) 溫度控制系統(tǒng)溫度控制系統(tǒng) 冰箱冰箱/柜的使用：柜的使用： 門隨手關(guān)，關(guān)嚴門隨手關(guān)，關(guān)嚴 電源防止不小心關(guān)閉電源防止不小心關(guān)閉 微波爐：微波爐： 要用微波爐專用容器不能加熱金屬、密封物；要用

20、微波爐專用容器不能加熱金屬、密封物； 不要讓微波爐空轉(zhuǎn)；不要讓微波爐空轉(zhuǎn)； 微波爐工作時微波爐工作時不要將眼睛緊靠微波爐不要將眼睛緊靠微波爐5厘米之內(nèi)厘米之內(nèi)去觀看微波爐工作去觀看微波爐工作-眼睛對微波最敏感，以免受到不必眼睛對微波最敏感，以免受到不必要的傷害；要的傷害； 防灼傷！不要徒手拿容器、不要把容器口沖著人！防灼傷！不要徒手拿容器、不要把容器口沖著人！1) 溫度控制系統(tǒng)溫度控制系統(tǒng) 制冰機的使用：水制冰機的使用：水-進水、排水；電進水、排水；電 1不管何種原因停機時，不得連續(xù)啟動，要每隔不管何種原因停機時，不得連續(xù)啟動，要每隔5分分鐘再啟動，以免損壞壓縮機！鐘再啟動，以免損壞壓縮機！

21、2定時檢查進、出水管接頭，以便處理可能泄露定時檢查進、出水管接頭，以便處理可能泄露的少量余水！的少量余水！ 3不用時，應排掉內(nèi)膽內(nèi)余水，用干凈的布擦干不用時，應排掉內(nèi)膽內(nèi)余水，用干凈的布擦干儲冰箱內(nèi)膽！儲冰箱內(nèi)膽！ 5在對制冰機進行清潔、檢查及一周以上不用時，請在對制冰機進行清潔、檢查及一周以上不用時，請拔掉電源插頭。拔掉電源插頭。1) 溫度控制系統(tǒng)溫度控制系統(tǒng) 液氮罐液氮生物容器液氮罐液氮生物容器 的使用：的使用： 液氮是一種超低溫液體液氮是一種超低溫液體(-196)，如濺到皮膚上會引，如濺到皮膚上會引起類似燒傷一樣的凍傷，在灌充和取出液氮時應特別起類似燒傷一樣的凍傷，在灌充和取出液氮時應特

22、別注意。注意。 液氮罐主要結(jié)構(gòu)：內(nèi)膽、真空夾層容器真空封口接頭、液氮罐主要結(jié)構(gòu)：內(nèi)膽、真空夾層容器真空封口接頭、外殼、頸管、專用罐蓋。外殼、頸管、專用罐蓋。 注意：注意：1、液氮罐只用于盛裝液氮，不允許盛裝其他、液氮罐只用于盛裝液氮，不允許盛裝其他液體；液體； 2、嚴防沖擊和碰撞；、嚴防沖擊和碰撞； 3、操作及取放冷凍物品時，請注意要輕拿輕放；、操作及取放冷凍物品時，請注意要輕拿輕放； 4、長期貯存時，需要定期補充液氮。、長期貯存時，需要定期補充液氮。保持容器夾層真空的關(guān)鍵部件，保持容器夾層真空的關(guān)鍵部件，用戶不得擅自翻開容器真空封用戶不得擅自翻開容器真空封口接頭口接頭 1) 溫度控制系統(tǒng)溫度

23、控制系統(tǒng) 烘箱的使用：烘箱的使用：是利用電熱絲隔層加熱使物體枯燥的設(shè)備。是利用電熱絲隔層加熱使物體枯燥的設(shè)備。適用于比室溫度高適用于比室溫度高5300有的高有的高200范圍的烘培、枯燥、熱范圍的烘培、枯燥、熱處理等，靈敏度通常為處理等，靈敏度通常為1。 根本結(jié)構(gòu)一般由箱體、電熱系統(tǒng)和自動控溫系統(tǒng)三局部組成。根本結(jié)構(gòu)一般由箱體、電熱系統(tǒng)和自動控溫系統(tǒng)三局部組成。 注意：注意：1、每次使用前要根據(jù)烘干物品要求確定適宜的溫度；、每次使用前要根據(jù)烘干物品要求確定適宜的溫度； 2、物品不能排列太密，以免影響熱氣流動、散熱；、物品不能排列太密，以免影響熱氣流動、散熱； 3、保證鼓風機正常運轉(zhuǎn)；、保證鼓風機

24、正常運轉(zhuǎn)； 4、需要觀察工作室內(nèi)樣品情況時，可透過玻璃門觀察。、需要觀察工作室內(nèi)樣品情況時，可透過玻璃門觀察。但箱門以少開為好，以免影響恒溫。特別是但箱門以少開為好，以免影響恒溫。特別是200以上時，開箱以上時，開箱門可能使玻璃門驟冷而破裂。門可能使玻璃門驟冷而破裂。不允許整夜使用！不允許整夜使用！1) 溫度控制系統(tǒng)溫度控制系統(tǒng) 恒溫水浴鍋、恒溫空氣搖床：恒溫水浴鍋、恒溫空氣搖床： 根據(jù)需要設(shè)置溫度；根據(jù)需要設(shè)置溫度； 恒溫水浴鍋中要保持足夠的水量。恒溫水浴鍋中要保持足夠的水量。分子生物學根本技術(shù)分子生物學根本技術(shù) 1) 溫度控制系統(tǒng)溫度控制系統(tǒng) 2) 實驗用水處理系統(tǒng)實驗用水處理系統(tǒng) 3)

25、消毒系統(tǒng)消毒系統(tǒng) 4) 計量系統(tǒng)計量系統(tǒng) 5) 離心設(shè)備離心設(shè)備 6) 電泳裝置電泳裝置 7) 凝膠成像系統(tǒng)凝膠成像系統(tǒng)防污染防污染3) 消毒系統(tǒng)消毒系統(tǒng) 高壓滅菌鍋高壓滅菌鍋1 在主體腔內(nèi)參加適量的清水，將滅菌物品放入滅菌器內(nèi)；在主體腔內(nèi)參加適量的清水，將滅菌物品放入滅菌器內(nèi)；2 蓋好注意密封膠圈頂蓋后必須擰緊頂蓋；蓋好注意密封膠圈頂蓋后必須擰緊頂蓋；3 翻開滅菌器的熱源，開啟排氣閥排完空氣后約在水沸翻開滅菌器的熱源，開啟排氣閥排完空氣后約在水沸騰后騰后10 min15 min 關(guān)閉排氣閥；關(guān)閉排氣閥；4 將壓力升至將壓力升至102.9 kPa(1.05 kg/),溫度要求達溫度要求達121

26、,維持到規(guī)定時間根據(jù)物品性質(zhì)以及有關(guān)情況確維持到規(guī)定時間根據(jù)物品性質(zhì)以及有關(guān)情況確定定,一般一般20 min30 min;5 滅菌結(jié)束后滅菌結(jié)束后,要待壓力恢復到零位后開蓋取物。要待壓力恢復到零位后開蓋取物。對液體進行滅菌，容器不能密封、體積不能超過容積的對液體進行滅菌，容器不能密封、體積不能超過容積的2/3；滅菌結(jié)束后不能翻開排氣閥尤其是上排氣閥。；滅菌結(jié)束后不能翻開排氣閥尤其是上排氣閥。分子生物學根本技術(shù)分子生物學根本技術(shù) 1) 溫度控制系統(tǒng)溫度控制系統(tǒng) 2) 實驗用水處理系統(tǒng)實驗用水處理系統(tǒng) 3) 消毒系統(tǒng)消毒系統(tǒng) 4) 計量系統(tǒng)計量系統(tǒng) 5) 離心設(shè)備離心設(shè)備 6) 電泳裝置電泳裝置

27、7) 凝膠成像系統(tǒng)凝膠成像系統(tǒng)4) 計量系統(tǒng)計量系統(tǒng)-質(zhì)量質(zhì)量電子天平電子天平對環(huán)境高度敏感的精密電子測量儀器對環(huán)境高度敏感的精密電子測量儀器, 使用時應小心操作使用時應小心操作, 臺面應無明顯振動臺面應無明顯振動, 不要放在空調(diào)口。不要放在空調(diào)口。注意：注意：1 調(diào)整底角螺絲使水平指示器的氣泡居中。調(diào)整底角螺絲使水平指示器的氣泡居中。 2 使用精密電子天平前最好熱機使用精密電子天平前最好熱機1520分鐘，以確保分鐘，以確保正確讀取電子天平的數(shù)值。正確讀取電子天平的數(shù)值。 3 稱量物品前先按歸零鍵；稱樣時關(guān)上天平小門。稱量物品前先按歸零鍵；稱樣時關(guān)上天平小門。 4 稱物品時，勿超過精密電子天平

28、的最大稱量，且需將物品稱物品時，勿超過精密電子天平的最大稱量，且需將物品放于稱盤中心，需輕拿輕放，不要沖擊稱盤。放于稱盤中心，需輕拿輕放，不要沖擊稱盤。5 嚴禁有腐蝕性的稱物直接接觸稱盤與天平面板。嚴禁有腐蝕性的稱物直接接觸稱盤與天平面板。6 使用完畢后，要清理稱盤、面板，保持儀器清潔。使用完畢后，要清理稱盤、面板，保持儀器清潔。4) 計量系統(tǒng)計量系統(tǒng)-體積體積依稱量需要選擇適宜的器皿依稱量需要選擇適宜的器皿-各種量筒、移液管、容量瓶。各種量筒、移液管、容量瓶。 移液器：移液器：量程包括：量程包括：0.1-2.5 ul，0.5-10 ul，10-100 ul，20-200ul，100-1000

29、 ul，500-5000 ul。單道可調(diào)移液器、多道可調(diào)移液器、單道可調(diào)移液器、多道可調(diào)移液器、 電子調(diào)節(jié)電子調(diào)節(jié)/顯示移液器。顯示移液器。 Tip頭頭/吸頭吸頭/槍頭：槍頭：10 ul白，白，200 ul黃，黃， 1 000 ul藍，藍， 5 000 ul白。白。移液器使用方法及本卷須知移液器使用方法及本卷須知:1.設(shè)定移液體積設(shè)定移液體積 從小量程調(diào)節(jié)至大量程時，逆時針旋轉(zhuǎn)刻度；從小量程調(diào)節(jié)至大量程時，逆時針旋轉(zhuǎn)刻度； 應先調(diào)至超過設(shè)定體積刻度，再回調(diào)至設(shè)定體積，這樣可以保應先調(diào)至超過設(shè)定體積刻度，再回調(diào)至設(shè)定體積，這樣可以保證移液器的精確度。證移液器的精確度。2裝配移液槍頭裝配移液槍頭將

30、移液槍垂直插入吸頭，左右旋轉(zhuǎn)半圈，上緊即可。將移液槍垂直插入吸頭，左右旋轉(zhuǎn)半圈，上緊即可。忌忌用移液器撞擊吸頭的方法是非常不可取的，長期這樣用移液器撞擊吸頭的方法是非常不可取的，長期這樣 操作會導致移液器的零件因撞擊而松散。操作會導致移液器的零件因撞擊而松散。移液器使用方法及本卷須知移液器使用方法及本卷須知:3吸液及放液吸液及放液垂直吸液：吸液前排空氣體，吸頭尖端浸入液面垂直吸液：吸液前排空氣體，吸頭尖端浸入液面3mm以下慢吸慢以下慢吸慢放；放；放液時如果量很小那么應吸頭尖端可靠容器內(nèi)壁。放液時如果量很小那么應吸頭尖端可靠容器內(nèi)壁。絕不允許突然松開，以防溶液吸入過快而沖入移液器內(nèi)腐蝕柱塞。絕不

31、允許突然松開，以防溶液吸入過快而沖入移液器內(nèi)腐蝕柱塞。4吸有液體的移液槍不應平放，槍頭內(nèi)的液體很容易污染槍內(nèi)部而可吸有液體的移液槍不應平放，槍頭內(nèi)的液體很容易污染槍內(nèi)部而可能導致槍的彈簧生銹。能導致槍的彈簧生銹。5移液槍在每次實驗后應將刻度調(diào)至最大，讓彈簧回復原型以延移液槍在每次實驗后應將刻度調(diào)至最大，讓彈簧回復原型以延長移液槍的使用壽命。長移液槍的使用壽命。移液器使用方法及本卷須知移液器使用方法及本卷須知:6切忌切忌吸液時突然松開；吸液時突然松開；吸有液體的移液槍平放；吸有液體的移液槍平放；所設(shè)量程不在移液器量程范圍內(nèi)會卡住機械裝置，損壞所設(shè)量程不在移液器量程范圍內(nèi)會卡住機械裝置，損壞了移液

32、器；了移液器；嚴禁吸取有強揮發(fā)性、強腐蝕性的液體如濃酸、濃堿、嚴禁吸取有強揮發(fā)性、強腐蝕性的液體如濃酸、濃堿、有機物等；有機物等；使用完沒有將刻度調(diào)至最大量程。使用完沒有將刻度調(diào)至最大量程。分子生物學根本技術(shù)分子生物學根本技術(shù) 1) 溫度控制系統(tǒng)溫度控制系統(tǒng) 2) 實驗用水處理系統(tǒng)實驗用水處理系統(tǒng) 3) 消毒系統(tǒng)消毒系統(tǒng) 4) 計量系統(tǒng)計量系統(tǒng) 5) 離心設(shè)備離心設(shè)備 6) 電泳裝置電泳裝置 7) 凝膠成像系統(tǒng)凝膠成像系統(tǒng) 一般在低速離心時轉(zhuǎn)速小一般在低速離心時轉(zhuǎn)速小于于5000 r/min5000 r/min，離心力的大小，離心力的大小常用轉(zhuǎn)速常用轉(zhuǎn)速r/minr/minrpmrpm來表示，

33、來表示，而超速離心時那么用離心力而超速離心時那么用離心力g g或或g g來表示。來表示。 由于離心管從管口到旋轉(zhuǎn)由于離心管從管口到旋轉(zhuǎn)中心的距離是不同的，所以在中心的距離是不同的，所以在同樣轉(zhuǎn)速時，管口和管底所受同樣轉(zhuǎn)速時，管口和管底所受到的離心力也有差異。到的離心力也有差異。 科技文獻中離心力的數(shù)據(jù)通科技文獻中離心力的數(shù)據(jù)通常是指其平均值，即離心管中點常是指其平均值，即離心管中點的離心力。的離心力。旋轉(zhuǎn)軸旋轉(zhuǎn)軸34340 0rminravrmax5) 5) 離心設(shè)備離心設(shè)備 低速離心機低速離心機: :最大轉(zhuǎn)速最大轉(zhuǎn)速6000 rpm6000 rpm左右，最大相對離心左右，最大相對離心力近力近

34、60006000g g，通常不帶冷凍系統(tǒng)。，通常不帶冷凍系統(tǒng)。 超速離心機：大于超速離心機：大于303010 000 r/min10 000 r/min，最大離心力，最大離心力600,000g600,000g，有驅(qū)動和速度控制系統(tǒng)，溫度控制系統(tǒng)，有驅(qū)動和速度控制系統(tǒng)，溫度控制系統(tǒng)，真空系統(tǒng)減少摩擦。真空系統(tǒng)減少摩擦。 超速離心機的出現(xiàn)，使生物科學的研究領(lǐng)域有了超速離心機的出現(xiàn)，使生物科學的研究領(lǐng)域有了新的擴展，它能使過去僅僅在電子顯微鏡觀察到的亞新的擴展，它能使過去僅僅在電子顯微鏡觀察到的亞細胞器得到分級別離，還可以別離病毒、核酸、蛋白細胞器得到分級別離，還可以別離病毒、核酸、蛋白質(zhì)和多糖等。

35、質(zhì)和多糖等。5) 5) 離心設(shè)備離心設(shè)備 高速冷凍離心機：最大轉(zhuǎn)速為高速冷凍離心機：最大轉(zhuǎn)速為20 000-25 20 000-25 000rpm000rpmr/minr/min，最大相對離心力為，最大相對離心力為89 00089 000g g。 通常配有各種角式轉(zhuǎn)頭、蕩平式轉(zhuǎn)頭、微孔板轉(zhuǎn)頭通常配有各種角式轉(zhuǎn)頭、蕩平式轉(zhuǎn)頭、微孔板轉(zhuǎn)頭等，一般都有制冷系統(tǒng)，以消除高速旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)頭與空氣之等，一般都有制冷系統(tǒng)，以消除高速旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)頭與空氣之間摩擦而產(chǎn)生的熱量，轉(zhuǎn)速、溫度和時間都可以嚴格準間摩擦而產(chǎn)生的熱量，轉(zhuǎn)速、溫度和時間都可以嚴格準確地控制，并有數(shù)字顯示。確地控制，并有數(shù)字顯示。 一般分子實驗室必備的設(shè)

36、備。一般分子實驗室必備的設(shè)備。5) 5) 離心設(shè)備離心設(shè)備 角式轉(zhuǎn)頭是指離心管腔與轉(zhuǎn)軸成一定傾角的轉(zhuǎn)頭。離心管腔的中角式轉(zhuǎn)頭是指離心管腔與轉(zhuǎn)軸成一定傾角的轉(zhuǎn)頭。離心管腔的中心軸與旋轉(zhuǎn)軸之間的角度在心軸與旋轉(zhuǎn)軸之間的角度在20-4020-40度之間，角度越大別離效果越好。度之間，角度越大別離效果越好。 離心過程中，重心低，運轉(zhuǎn)平衡，顆粒在沉降時先沿離心力方向撞向離心過程中，重心低，運轉(zhuǎn)平衡，顆粒在沉降時先沿離心力方向撞向離心管壁，然后再沿管壁滑向管底，因此管的一側(cè)就會出現(xiàn)顆粒沉積，此離心管壁，然后再沿管壁滑向管底，因此管的一側(cè)就會出現(xiàn)顆粒沉積，此現(xiàn)象稱為現(xiàn)象稱為“壁效應。壁效應。 壁效應容易使沉

37、降顆粒受突然變速所產(chǎn)生的對流擾亂，影響別離效果。壁效應容易使沉降顆粒受突然變速所產(chǎn)生的對流擾亂，影響別離效果。角式轉(zhuǎn)頭角式轉(zhuǎn)頭蕩平式轉(zhuǎn)頭：蕩平式轉(zhuǎn)頭： 這種轉(zhuǎn)頭有這種轉(zhuǎn)頭有4 4或或6 6個自由活動的吊桶離心個自由活動的吊桶離心套管，當轉(zhuǎn)頭靜止時，吊桶垂直懸掛，當轉(zhuǎn)套管，當轉(zhuǎn)頭靜止時，吊桶垂直懸掛，當轉(zhuǎn)頭轉(zhuǎn)速到達每分鐘頭轉(zhuǎn)速到達每分鐘200200到到800800轉(zhuǎn)時，吊桶蕩至水轉(zhuǎn)時，吊桶蕩至水平位置。平位置。微孔板轉(zhuǎn)頭：微孔板轉(zhuǎn)頭： 這種轉(zhuǎn)頭可離心高達這種轉(zhuǎn)頭可離心高達 96 96孔微孔板、標準酶標板、孔微孔板、標準酶標板、PCRPCR板等。板等。 離心管主要用塑料和不銹鋼制成：離心管主要用塑

38、料和不銹鋼制成： 塑料離心管常用材料有聚乙烯塑料離心管常用材料有聚乙烯PEPE，聚碳酸酯，聚碳酸酯PCPC，聚丙烯，聚丙烯PPPP等，其中等，其中PPPP管性能較好。管性能較好。 塑料離心管的優(yōu)點是透明或半透明，硬度小，可塑料離心管的優(yōu)點是透明或半透明，硬度小，可用穿刺法取出梯度。缺點是易變形，抗有機溶劑腐蝕性差，用穿刺法取出梯度。缺點是易變形，抗有機溶劑腐蝕性差，使用壽命短。使用壽命短。 塑料離心管都有管蓋，離心前管蓋必須蓋嚴，倒置不塑料離心管都有管蓋，離心前管蓋必須蓋嚴，倒置不漏液。管蓋有三種作用：防止樣品外泄。用于有放射性漏液。管蓋有三種作用：防止樣品外泄。用于有放射性或強腐蝕性的樣品時

39、，這點尤其重要。防止樣品揮發(fā)。或強腐蝕性的樣品時，這點尤其重要。防止樣品揮發(fā)。支持離心管，防止離心管變形。支持離心管，防止離心管變形。5) 5) 離心設(shè)備耗材離心設(shè)備耗材- -離心管離心管5) 5) 離心設(shè)備離心設(shè)備- -使用本卷須知使用本卷須知 1. 1.離心機應放置在穩(wěn)定的臺面上，以防離心機滑動或離心機應放置在穩(wěn)定的臺面上，以防離心機滑動或振動，出現(xiàn)事故；振動，出現(xiàn)事故； 2. 2.離心前必須仔細檢查轉(zhuǎn)頭各孔內(nèi)有無異物、轉(zhuǎn)頭安裝離心前必須仔細檢查轉(zhuǎn)頭各孔內(nèi)有無異物、轉(zhuǎn)頭安裝是否緊固。是否緊固。 3. 3.樣品的裝載和平衡：使用離心機時，必須事先樣品的裝載和平衡：使用離心機時，必須事先在天平

40、上精密地平衡離心管和其內(nèi)容物；當轉(zhuǎn)頭只是在天平上精密地平衡離心管和其內(nèi)容物；當轉(zhuǎn)頭只是局部裝載時，管子必須互相對稱保證平衡地放在局部裝載時，管子必須互相對稱保證平衡地放在轉(zhuǎn)頭中，以便使負載均勻地分布在轉(zhuǎn)頭的周圍。轉(zhuǎn)頭中，以便使負載均勻地分布在轉(zhuǎn)頭的周圍。5) 5) 離心設(shè)備離心設(shè)備- -使用本卷須知使用本卷須知 4. 4.低溫離心時，轉(zhuǎn)頭及離心機要預冷后再使用。低溫離心時，轉(zhuǎn)頭及離心機要預冷后再使用。 5. 5.裝載溶液時，要根據(jù)待離心液體的性質(zhì)及體積選用裝載溶液時，要根據(jù)待離心液體的性質(zhì)及體積選用適合的離心管，液體不得裝得過多，以防離心時甩出，適合的離心管，液體不得裝得過多，以防離心時甩出，造成轉(zhuǎn)頭不平衡、