鈣、磷、鎂,微量元素檢驗

1、鈣、磷、鎂和微量元素檢驗鈣、磷、鎂和微量元素檢驗l第一節(jié)第一節(jié) 概概 述述l一、鈣、磷、鎂的代謝及調(diào)節(jié)一、鈣、磷、鎂的代謝及調(diào)節(jié)l二、鈣、磷、鎂的生理功能二、鈣、磷、鎂的生理功能l三、微量元素與疾病三、微量元素與疾病l第二節(jié)第二節(jié) 鈣、磷、鎂鈣、磷、鎂和微量元素和微量元素測定測定 l（一）鈣、磷、鎂的代謝（一）鈣、磷、鎂的代謝1.鈣：鈣：（1）吸收）吸收:吸收部位吸收部位:十二指腸，是在活性十二指腸，是在活性D3調(diào)節(jié)下的調(diào)節(jié)下的主動吸收，主動吸收，影響吸收的因素影響吸收的因素:腸管的腸管的pH:偏酸時促進吸收偏酸時促進吸收食物成分食物成分:食物中草酸和植酸可以和鈣形成食物中草酸和植酸可以和鈣形

2、成不溶性鹽，影響吸收不溶性鹽，影響吸收l（2）排泄）排泄:80%腸道排出腸道排出,20%腎臟排出。腎臟排出。腎小球濾過鈣約腎小球濾過鈣約10g/天，由尿中排出天，由尿中排出的僅約的僅約150mg/天天,大部分被腎小管重吸收了。大部分被腎小管重吸收了。尿鈣排出量直接受血鈣濃度影響，血尿鈣排出量直接受血鈣濃度影響，血鈣低于鈣低于2.4mmolL時，尿中幾無鈣排出。時，尿中幾無鈣排出。l2.磷：磷：食物中磷以有機磷酸酯和磷脂為主，在腸管食物中磷以有機磷酸酯和磷脂為主，在腸管內(nèi)磷酸酶的作用下被分解為無機磷被吸收。內(nèi)磷酸酶的作用下被分解為無機磷被吸收。由于磷的吸收不良引起的缺磷現(xiàn)象較少見。由于磷的吸收不

3、良引起的缺磷現(xiàn)象較少見。磷主要由腎排泄，其排出量約占總排出量的磷主要由腎排泄，其排出量約占總排出量的70%，每天經(jīng)腎小球濾過磷約每天經(jīng)腎小球濾過磷約5g，但，但85%95%被腎小管回吸收。被腎小管回吸收。l3.鎂：鎂：鎂的日攝入量約鎂的日攝入量約250mg，其中，其中23來自于谷來自于谷物和蔬菜。物和蔬菜。吸收吸收: 部位主要在回腸部位主要在回腸,是主動運轉(zhuǎn)過程。是主動運轉(zhuǎn)過程。消化液中也有多量鎂，消化液中也有多量鎂，長期丟失消化液（如長期丟失消化液（如消化道造瘺）是缺鎂的主要原因。消化道造瘺）是缺鎂的主要原因。排泄排泄: 主要是腎主要是腎經(jīng)腎小球濾過的鎂大量被腎小管回吸收，僅經(jīng)腎小球濾過的鎂

4、大量被腎小管回吸收，僅2%5%由尿排出，每日排出約由尿排出，每日排出約100mg。l（二）鈣磷代謝的調(diào)節(jié)（二）鈣磷代謝的調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)鈣磷代謝的因素有三個調(diào)節(jié)鈣磷代謝的因素有三個:甲狀旁腺甲狀旁腺激素、降鈣素和活性維生素激素、降鈣素和活性維生素D。1.甲狀旁腺激素（甲狀旁腺激素（PTH）是維持血鈣正常水平最重要的調(diào)節(jié)因是維持血鈣正常水平最重要的調(diào)節(jié)因素，有升高血鈣、降低血磷和酸化血液等素，有升高血鈣、降低血磷和酸化血液等作用。作用。l作用機制：作用機制：l腸腸:促進活性維生素促進活性維生素D的形成，間接促進小的形成，間接促進小腸對鈣的吸收腸對鈣的吸收l腎：促進腎小管對鈣的重吸收，抑制對磷腎：促進腎小

5、管對鈣的重吸收，抑制對磷的重吸收（作用強）的重吸收（作用強）l骨：具有溶骨、成骨雙重作用和骨：具有溶骨、成骨雙重作用和1-25-1-25-（OHOH）2 2-D-D3 3 協(xié)同作用促進骨代謝協(xié)同作用促進骨代謝l總結(jié)果：血鈣升高、血磷下降。（升鈣總結(jié)果：血鈣升高、血磷下降。（升鈣降磷）降磷）血鈣降低刺激血鈣降低刺激PTH分泌。分泌。2.降鈣素（降鈣素（CT）：）：由甲狀腺濾泡旁細胞合成、分泌，其由甲狀腺濾泡旁細胞合成、分泌，其主要功能是降低血鈣和血磷。主要功能是降低血鈣和血磷。 l作用機制：作用機制：l腸腸:抑制活性維生素抑制活性維生素D的形成，間接抑制小腸對鈣的形成，間接抑制小腸對鈣的吸收的吸

6、收l腎：抑制腎小管對鈣、磷的重吸收腎：抑制腎小管對鈣、磷的重吸收l骨：抑制溶骨、骨：抑制溶骨、促進促進成骨成骨l總結(jié)果：降低血鈣、降低血磷。（降鈣降磷）總結(jié)果：降低血鈣、降低血磷。（降鈣降磷）血鈣升高能刺激降鈣素的分泌，血鈣升高能刺激降鈣素的分泌，二者呈正比關系。二者呈正比關系。 l3.活性維生素活性維生素D (1-25-(1-25-（OHOH）2 2-D-D3 3) )： l在肝和腎的作用下，維生素在肝和腎的作用下，維生素D3轉(zhuǎn)變成轉(zhuǎn)變成1-25-1-25-（OHOH）2 2-D-D3 3l作用機制：作用機制：l腸腸: 促進小腸對鈣、磷的吸收和轉(zhuǎn)運促進小腸對鈣、磷的吸收和轉(zhuǎn)運l腎：促進腎小管

7、對鈣、磷的重吸收腎：促進腎小管對鈣、磷的重吸收l骨：具有溶骨、成骨雙重作用有利于骨的更新和骨：具有溶骨、成骨雙重作用有利于骨的更新和生長生長l總結(jié)果：升高血鈣、升高血磷。（升鈣升磷）總結(jié)果：升高血鈣、升高血磷。（升鈣升磷）l血鈣血鈣 PTH PTH 1-25-1-25-（OHOH）2 2-D-D3 3 血鈣血鈣 l CTCT l一、鈣、磷、鎂的生理功能一、鈣、磷、鎂的生理功能（一）鈣的生理功能（一）鈣的生理功能1.血漿鈣可降低毛細血管和細胞膜的通透性，血漿鈣可降低毛細血管和細胞膜的通透性，降低神經(jīng)、肌肉的興奮性降低神經(jīng)、肌肉的興奮性。2.血漿鈣參與血漿鈣參與凝血凝血過程。過程。3.骨骼肌中的鈣

8、可引起肌肉收縮。骨骼肌中的鈣可引起肌肉收縮。4.是重要的是重要的調(diào)節(jié)物質(zhì)調(diào)節(jié)物質(zhì)：（1）作用于細胞膜，影響膜的通透性；）作用于細胞膜，影響膜的通透性；（2）在細胞內(nèi)作為）在細胞內(nèi)作為第二信使第二信使，起著重要的，起著重要的代謝調(diào)節(jié)作用；代謝調(diào)節(jié)作用；（3）是許多）是許多酶的激活劑酶的激活劑； l（二）磷的生理功能（二）磷的生理功能（1）構成血液的磷酸鹽）構成血液的磷酸鹽緩沖體系緩沖體系（2）細胞內(nèi)的磷酸鹽參與許多）細胞內(nèi)的磷酸鹽參與許多酶促反酶促反應應（3）構成核苷酸輔酶類的輔酶構成核苷酸輔酶類的輔酶（4）細胞膜）細胞膜磷脂磷脂在構成生物膜結(jié)構、在構成生物膜結(jié)構、維持膜的功能維持膜的功能（5）

9、通過化學修飾起）通過化學修飾起代謝調(diào)控代謝調(diào)控作用。作用。l（三）鎂的生理功能（三）鎂的生理功能鎂一半以上沉積在骨中。鎂一半以上沉積在骨中。1.Mg2+對神經(jīng)、肌肉的興奮性有鎮(zhèn)靜作用對神經(jīng)、肌肉的興奮性有鎮(zhèn)靜作用；2.Mg2+是近是近300種種酶的輔助因子酶的輔助因子。與體內(nèi)重要的生物高分子并且和與體內(nèi)重要的生物高分子并且和ATP、DNA、tRNA、mRNA的生化反應有關系，參與氨基酸的的生化反應有關系，參與氨基酸的活化等，在維持機體內(nèi)環(huán)境相對穩(wěn)定和維持機體活化等，在維持機體內(nèi)環(huán)境相對穩(wěn)定和維持機體的正常生命活動中起著重要的作用。的正常生命活動中起著重要的作用。l二、微量元素與疾病的關系二、微

10、量元素與疾病的關系微量元素過多或缺乏，可導致某些地微量元素過多或缺乏，可導致某些地方病的發(fā)生。方病的發(fā)生。如缺碘與地方性甲狀腺腫及呆小癥有如缺碘與地方性甲狀腺腫及呆小癥有關；低硒與克山病和骨節(jié)病有關；鐵過剩關；低硒與克山病和骨節(jié)病有關；鐵過剩致血紅蛋白沉著病、汞中毒時發(fā)生致血紅蛋白沉著病、汞中毒時發(fā)生“水俁水俁病病”、先天性銅代謝異常引起、先天性銅代謝異常引起Wilson病等。病等。l（一）鐵（一）鐵1.鐵的生理功能：鐵的生理功能：鐵是體內(nèi)含量最豐富的微量元素。鐵是體內(nèi)含量最豐富的微量元素。1.維持正常造血功能維持正常造血功能鐵是血紅蛋白的主要成分鐵是血紅蛋白的主要成分由于由于鐵缺乏鐵缺乏，使

11、血紅蛋白合成障礙引起的貧血稱為，使血紅蛋白合成障礙引起的貧血稱為缺缺鐵性貧血鐵性貧血。血紅蛋白中鐵對氧攝取、釋放、運輸起重要作用。血紅蛋白中鐵對氧攝取、釋放、運輸起重要作用。2.參與體內(nèi)氧的轉(zhuǎn)運、交換和組織呼吸過程參與體內(nèi)氧的轉(zhuǎn)運、交換和組織呼吸過程3.對其他微量元素代謝的影響：缺鐵可致鋅、鈷、鎂、對其他微量元素代謝的影響：缺鐵可致鋅、鈷、鎂、鉛的代謝障礙鉛的代謝障礙 血樣中的鐵常用血清鐵和血清總鐵結(jié)合力來表示血樣中的鐵常用血清鐵和血清總鐵結(jié)合力來表示。l（二）鋅（二）鋅1.含量分布：含量分布：鋅是體內(nèi)含量僅次于鐵的微量元素。鋅在在正常成人鋅是體內(nèi)含量僅次于鐵的微量元素。鋅在在正常成人體內(nèi)含量

12、為體內(nèi)含量為22.5g，男性略高于女性，視網(wǎng)膜、前列腺、，男性略高于女性，視網(wǎng)膜、前列腺、胰腺濃度最高；肌肉內(nèi)儲鋅占全身鋅的胰腺濃度最高；肌肉內(nèi)儲鋅占全身鋅的62%，骨占，骨占28%。血鋅：血鋅：80%存在于紅細胞，約存在于紅細胞，約18%的鋅分布于血漿。的鋅分布于血漿。2.吸收排泄：吸收排泄：鋅在小腸上皮細胞內(nèi)吸收，運送至肝和全身。鋅在小腸上皮細胞內(nèi)吸收，運送至肝和全身。從糞便、尿、汗、頭發(fā)、及乳汁排泄。從糞便、尿、汗、頭發(fā)、及乳汁排泄?？梢詼y定血鋅或發(fā)鋅判斷體內(nèi)含鋅情況?？梢詼y定血鋅或發(fā)鋅判斷體內(nèi)含鋅情況。l3.生理功能生理功能（1）鋅可以作為）鋅可以作為多種酶的功能成分或多種酶的功能成分

13、或激活劑激活劑；（2）促進生長發(fā)育，）促進生長發(fā)育，促進核酸及蛋白促進核酸及蛋白質(zhì)的生物合成質(zhì)的生物合成；（3）增強免疫及吞噬細胞的功能；）增強免疫及吞噬細胞的功能；（4）有抗氧化、抗衰老、抗癌的作用。）有抗氧化、抗衰老、抗癌的作用。l（三）銅（三）銅正常人體內(nèi)含銅正常人體內(nèi)含銅100200mg，約，約50%70%存于骨存于骨骼和肌肉內(nèi)；骼和肌肉內(nèi)；20%存于肝。存于肝。成年人每日攝取銅成年人每日攝取銅2毫克可滿足生理需要。毫克可滿足生理需要。銅的生物學作用有：銅的生物學作用有：1.參與造血和鐵的代謝參與造血和鐵的代謝，影響鐵的吸收和儲存；，影響鐵的吸收和儲存；2.構成許多構成許多含銅酶及含銅

14、生物活性蛋白質(zhì)含銅酶及含銅生物活性蛋白質(zhì)；3.與與DNA結(jié)合，與維持核酸結(jié)構的穩(wěn)定性有關；結(jié)合，與維持核酸結(jié)構的穩(wěn)定性有關；4.許多氧化酶含有銅。許多氧化酶含有銅。Wilson病時血清銅明顯降低。病時血清銅明顯降低。 l（四）硒（四）硒人體內(nèi)含硒量約人體內(nèi)含硒量約1421mg，以肝、胰、腎，以肝、胰、腎中含量較多。人體對硒的攝入量受食含硒量影響，中含量較多。人體對硒的攝入量受食含硒量影響，體內(nèi)硒由尿、糞、汗排泄。體內(nèi)硒由尿、糞、汗排泄。硒的生物學作用：硒的生物學作用：1.硒是硒是谷胱甘肽過氧化物酶谷胱甘肽過氧化物酶的必須組成成分；的必須組成成分；2.參與輔酶參與輔酶A和輔酶和輔酶Q的合成；的合

15、成；3.和視力及神經(jīng)傳導有密切關系；和視力及神經(jīng)傳導有密切關系；4.對某些有毒元素和物質(zhì)的毒性有拮抗性刺對某些有毒元素和物質(zhì)的毒性有拮抗性刺激免疫球蛋白和抗體的產(chǎn)生；激免疫球蛋白和抗體的產(chǎn)生；l5.可以保護心肌的正常結(jié)構、代謝和功能；可以保護心肌的正常結(jié)構、代謝和功能；6.調(diào)節(jié)維生素調(diào)節(jié)維生素A、C、E、K的代謝；的代謝；7.具有抗腫瘤作用。具有抗腫瘤作用?？松讲　⑿募∪毖?、癌、多發(fā)性硬化克山病、心肌缺血、癌、多發(fā)性硬化癥、肌營養(yǎng)不良等時血硒降低癥、肌營養(yǎng)不良等時血硒降低。l(五五)鉻鉻成人體內(nèi)含鉻成人體內(nèi)含鉻6mg，日攝入量，日攝入量5150pg。進。進入血漿的鉻與運鐵蛋白結(jié)合運至肝及全身。

16、鉻主入血漿的鉻與運鐵蛋白結(jié)合運至肝及全身。鉻主要隨尿排出。要隨尿排出。鉻的生物學作用：鉻的生物學作用：1.形成葡萄糖耐量因子，協(xié)助胰島素發(fā)揮作形成葡萄糖耐量因子，協(xié)助胰島素發(fā)揮作用；用；2.降低血漿膽固醇及調(diào)節(jié)血糖；降低血漿膽固醇及調(diào)節(jié)血糖；3.促進血紅蛋白的合成及造血功能。促進血紅蛋白的合成及造血功能。糖尿病時可降低，接觸鉻可引起急、慢性鉻糖尿病時可降低，接觸鉻可引起急、慢性鉻中毒。中毒。l(六六)鈷鈷正常人體內(nèi)含鈷正常人體內(nèi)含鈷1.11.5mg，食物中鈷在小腸內(nèi)吸，食物中鈷在小腸內(nèi)吸收入血漿后，與三種運鈷蛋白結(jié)合，運至肝及全身，主要收入血漿后，與三種運鈷蛋白結(jié)合，運至肝及全身，主要由尿排出

17、。由尿排出。維生素維生素B12重要的輔因子，因此也是重要的營養(yǎng)素重要的輔因子，因此也是重要的營養(yǎng)素。維生素維生素B12有復雜的生理功能，其缺乏可導致葉酸的有復雜的生理功能，其缺乏可導致葉酸的利用率下降，造成巨紅細胞性貧血。利用率下降，造成巨紅細胞性貧血。當內(nèi)因子、運鈷蛋白缺乏，鈷攝入量不足或因消化系當內(nèi)因子、運鈷蛋白缺乏，鈷攝入量不足或因消化系統(tǒng)疾病而干擾吸收時，可引起鈷及維生素統(tǒng)疾病而干擾吸收時，可引起鈷及維生素B12。缺乏。缺乏。惡惡性貧血、急性白血病時血清鈷降低性貧血、急性白血病時血清鈷降低，慢性粒細胞白血病時，慢性粒細胞白血病時血鈷升高。血鈷升高。l(七七)錳錳正常人體內(nèi)含錳正常人體內(nèi)

18、含錳1220mg，分布于體內(nèi)各，分布于體內(nèi)各組織。食物中錳經(jīng)小腸吸收人血與運錳蛋白結(jié)后組織。食物中錳經(jīng)小腸吸收人血與運錳蛋白結(jié)后迅速運至富含線粒體的細胞。體內(nèi)錳主要由腸道、迅速運至富含線粒體的細胞。體內(nèi)錳主要由腸道、膽汁、尿液排出。膽汁、尿液排出。錳的生物學作用：錳的生物學作用：1.錳是錳是多種酶的組成成分和激活劑多種酶的組成成分和激活劑，與蛋白，與蛋白質(zhì)合成及生長、發(fā)育有密切關系；質(zhì)合成及生長、發(fā)育有密切關系；2.參與造血及卟林合成；參與造血及卟林合成；3. 有抗衰老作用。有抗衰老作用。l(八八)氟氟成人體內(nèi)含氟量約成人體內(nèi)含氟量約2.6g，主要分布在骨骼、，主要分布在骨骼、牙齒、指甲、毛發(fā)

19、中。大部由尿中排出。牙齒、指甲、毛發(fā)中。大部由尿中排出。氟為牙齒和骨骼的必須成分氟為牙齒和骨骼的必須成分，與牙齒和骨骼，與牙齒和骨骼的形成有關，可增加骨硬度和牙的耐酸蝕能力。的形成有關，可增加骨硬度和牙的耐酸蝕能力。缺少氟易生齲齒，氟多可增加斑釉齒及骨密缺少氟易生齲齒，氟多可增加斑釉齒及骨密度增加。度增加。l(九九)碘碘人體含碘量約人體含碘量約11毫克。毫克。碘是構成甲狀腺激素的必需成分碘是構成甲狀腺激素的必需成分。甲狀腺素的功能是維持生長及智力發(fā)育和調(diào)節(jié)能量代甲狀腺素的功能是維持生長及智力發(fā)育和調(diào)節(jié)能量代謝。謝。缺碘可發(fā)生地方性甲狀腺腫及呆小癥。缺碘可發(fā)生地方性甲狀腺腫及呆小癥。地方性甲狀腺

20、腫：甲狀腺代謝性腫大，不伴有明顯甲地方性甲狀腺腫：甲狀腺代謝性腫大，不伴有明顯甲狀腺功能改變。狀腺功能改變。地方性克汀?。喝硇缘馊狈膊?，生長發(fā)育遲緩、地方性克汀?。喝硇缘馊狈膊?，生長發(fā)育遲緩、身材矮小、智力低下、聾啞、神經(jīng)運動障礙及甲狀腺功能身材矮小、智力低下、聾啞、神經(jīng)運動障礙及甲狀腺功能低下等。低下等。為防治地方性甲狀腺腫，應食用加碘鹽。為防治地方性甲狀腺腫，應食用加碘鹽。一、鈣的測定一、鈣的測定 血鈣測定方法很多。血鈣測定方法很多?；瘜W法化學法滴定法（氧化還原滴定，絡合滴定）；滴定法（氧化還原滴定，絡合滴定）；比色法（鄰甲酚酞絡合法，甲基麝香比色法（鄰甲酚酞絡合法，甲基麝香草酚藍

21、法）。草酚藍法）。物理法物理法火焰光度法；火焰光度法；ISE法；法；原子吸收分原子吸收分光光度法；光光度法；同位素稀釋質(zhì)譜法。同位素稀釋質(zhì)譜法。血鈣測定血鈣測定第二節(jié)第二節(jié) 鈣、磷、鎂和微量元素測定鈣、磷、鎂和微量元素測定1.EDTA-Na2絡合滴定法絡合滴定法在堿性溶液中，血清在堿性溶液中，血清鈣與鈣紅指示劑結(jié)合成可溶性的復合物，使溶液呈鈣與鈣紅指示劑結(jié)合成可溶性的復合物，使溶液呈淡紅色，淡紅色，EDTA-Na2對鈣有很大的親和力，能與復對鈣有很大的親和力，能與復合物中的鈣絡合，使鈣紅指示劑重新游離，溶液變合物中的鈣絡合，使鈣紅指示劑重新游離，溶液變藍色，根據(jù)藍色，根據(jù)EDTA-Na2滴定用

22、量可計算出血清鈣含滴定用量可計算出血清鈣含量。量。鈣鈣鈣紅鈣紅鈣鈣-鈣紅復合物鈣紅復合物淡紅色淡紅色鈣鈣-鈣紅復合物鈣紅復合物EDTA-Na2EDTACa鈣紅鈣紅藍色藍色鈣指示劑除鈣指示劑除鈣紅鈣紅外，還有外，還有依地鉻黑依地鉻黑T（紅（紅藍），藍），鈣黃綠素鈣黃綠素（黃（黃綠），綠），紫紅酸紫紅酸銨銨（紅（紅紫）。鈣紅指示劑終點明顯，不受紫）。鈣紅指示劑終點明顯，不受血清鎂干擾，鎂在強堿性條件下生成血清鎂干擾，鎂在強堿性條件下生成Mg（OH）2，指示劑在強堿性條件下不穩(wěn)定，指示劑在強堿性條件下不穩(wěn)定，加指示劑后應立即滴定。加指示劑后應立即滴定。操作簡便，無需特殊儀器設備，適合于操作簡便，無需

23、特殊儀器設備，適合于基層醫(yī)院，但終點判斷人為誤差較大，溶血、基層醫(yī)院，但終點判斷人為誤差較大，溶血、黃疸影響終點判斷。黃疸影響終點判斷。2.鄰甲酚酞絡合酮法（鄰甲酚酞絡合酮法（O-CPC）鄰甲鄰甲酚酞絡合酮是一種金屬絡合染料，也是一種酚酞絡合酮是一種金屬絡合染料，也是一種酸堿指示劑，在堿性溶液中能與鈣和鎂螯合，酸堿指示劑，在堿性溶液中能與鈣和鎂螯合，生成紫紅色螯合物（吸收峰生成紫紅色螯合物（吸收峰575nm），作鈣），作鈣測定時，加入測定時，加入8-羥基喹啉羥基喹啉消除鎂的干擾。消除鎂的干擾。Mg2+8-羥基喹啉羥基喹啉可溶性絡合物可溶性絡合物Ca2+鄰甲酚酞絡合酮鄰甲酚酞絡合酮紫紅色螯合物紫

24、紅色螯合物靈敏度很高，靈敏度很高，方法簡便、快速、穩(wěn)方法簡便、快速、穩(wěn)定，同時適于手工檢測和自動化分定，同時適于手工檢測和自動化分析儀。析儀。試管、器皿如有微量的鈣污染亦會試管、器皿如有微量的鈣污染亦會引起誤差，最好使用一次性試管，所有試劑引起誤差，最好使用一次性試管，所有試劑置塑料瓶中保存。置塑料瓶中保存。3.甲基麝香草酚藍法（甲基麝香草酚藍法（MTB）血清血清鈣在堿性溶液中與甲基麝香草酚藍（鈣在堿性溶液中與甲基麝香草酚藍（MTB）結(jié)合，生成一種藍色絡合物，加入結(jié)合，生成一種藍色絡合物，加入8-羥基羥基喹啉消除鎂干擾。喹啉消除鎂干擾。顯色穩(wěn)定，線性范圍大，溶血、黃疸顯色穩(wěn)定，線性范圍大，溶血

25、、黃疸無干擾無干擾。4.離子選擇電極法（離子選擇電極法（ISE）此法迅速、此法迅速、簡便、靈敏度高、重復性好，并可同時測定簡便、靈敏度高、重復性好，并可同時測定總鈣和離子鈣，離子鈣測定最好用血清，不總鈣和離子鈣，離子鈣測定最好用血清，不用抗凝劑，在急需檢測結(jié)果時可用肝素抗凝。用抗凝劑，在急需檢測結(jié)果時可用肝素抗凝?！菊⒖贾怠俊菊⒖贾怠砍扇丝傗}成人總鈣2.252.75mmol/L離子鈣離子鈣1.151.42mmol/L磷鉬酸還原法磷鉬酸還原法 我國推薦的常規(guī)方法我國推薦的常規(guī)方法非還原法非還原法染料結(jié)合法染料結(jié)合法紫外分光光度法紫外分光光度法黃嘌呤氧化酶比色測定法黃嘌呤氧化酶比色測定法

26、WHOWHO推薦的常規(guī)方法推薦的常規(guī)方法CVCV多元絡合超微量測定法多元絡合超微量測定法同位素稀釋質(zhì)譜法同位素稀釋質(zhì)譜法 決定性方法決定性方法原子吸收分光光度法等原子吸收分光光度法等二、血清磷測定二、血清磷測定 在強酸條件下，無機磷酸鹽與鉬酸鹽反應，在強酸條件下，無機磷酸鹽與鉬酸鹽反應，形成非還原性磷鉬酸復合物。在形成非還原性磷鉬酸復合物。在340/480nm340/480nm的吸光度與標本中無機磷的濃度成正比。的吸光度與標本中無機磷的濃度成正比。O23612)3(MoO4PO37H726)247(12437HHOMoPOH1.磷鉬酸法磷鉬酸法以三氯醋酸沉淀蛋白，在以三氯醋酸沉淀蛋白，在無蛋白

27、濾液中加入鉬酸銨試劑，與無機磷結(jié)無蛋白濾液中加入鉬酸銨試劑，與無機磷結(jié)合成磷鉬酸，再以硫酸亞鐵為還原劑，還原合成磷鉬酸，再以硫酸亞鐵為還原劑，還原成鉬藍。成鉬藍。（NH4）6Mo7O243H2SO44H2O7H2MoO43（NH4）2SO412H2MoO4H3PO412MoO3H3PO412H2O12MoO3H3PO4還原劑還原劑鉬藍鉬藍還原劑有很多種，還原劑有很多種，1-氨基氨基-2-萘酚萘酚-4-磺酸，應用歷史較久，試劑不太穩(wěn)定，磺酸，應用歷史較久，試劑不太穩(wěn)定，顯色時間長，靈敏度不高。氯化亞錫，顯色時間長，靈敏度不高。氯化亞錫，靈敏度較高，顏色強度隨顯色時間時間靈敏度較高，顏色強度隨顯色

28、時間時間而改變，偏離而改變，偏離Beer定律。硫酸亞鐵，顯定律。硫酸亞鐵，顯色較穩(wěn)定。色較穩(wěn)定。2.孔雀綠直接顯色法孔雀綠直接顯色法血清經(jīng)濃尿素溶血清經(jīng)濃尿素溶液稀釋后，用孔雀綠液稀釋后，用孔雀綠-鉬酸試劑顯色，加入鉬酸試劑顯色，加入吐溫吐溫-20使標準液與血清標本顯色反應速度使標準液與血清標本顯色反應速度接近。接近。靈敏度較高，但影響因素多，重復性靈敏度較高，但影響因素多，重復性差，顯色不穩(wěn)定差，顯色不穩(wěn)定。3.酶法酶法GnH3PO4Gn1G-1-PG-1-PG-6-PG-6-PNADP+6-磷酸葡萄糖酸磷酸葡萄糖酸NADPH次黃苷次黃苷H3PO4次黃嘌呤次黃嘌呤R-1-P次黃嘌呤次黃嘌呤H

29、2OO2尿酸尿酸H2O2H2O2N-乙基乙基-N-（3-甲基苯基）甲基苯基）-N-乙酰乙胺乙酰乙胺紫紅色復合物紫紅色復合物發(fā)色底物發(fā)色底物555nm糖原磷酸化酶糖原磷酸化酶葡萄糖磷酸變位酶葡萄糖磷酸變位酶 6-磷酸葡萄糖脫氫酶磷酸葡萄糖脫氫酶 嘌呤核苷磷酸化酶嘌呤核苷磷酸化酶黃嘌呤氧化酶黃嘌呤氧化酶 POD比色法比色法 我國推薦我國推薦MTBMTB法鈣鎂試劑法作為常規(guī)方法法鈣鎂試劑法作為常規(guī)方法熒光法熒光法離子層析法離子層析法離子選擇性電極法離子選擇性電極法(ISE)(ISE)酶法酶法原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法(AAS) (AAS) 參考方法參考方法同位素稀釋質(zhì)譜法同位素稀釋質(zhì)譜法(

30、ID-MS)(ID-MS)等等 決定性方法決定性方法三、血清鎂測定三、血清鎂測定 1. 1.鈣鎂試劑鈣鎂試劑(Calmagite)是一種金屬色原指示劑，在是一種金屬色原指示劑，在 堿性溶液中與鎂結(jié)合形成紫色復合物檢測。堿性溶液中與鎂結(jié)合形成紫色復合物檢測。加入鈣螯合劑加入鈣螯合劑EGTAEGTA可減少鈣的干擾，減少蛋白可減少鈣的干擾，減少蛋白 質(zhì)及血脂的干擾。質(zhì)及血脂的干擾。2.2.甲基麝香草酚藍法甲基麝香草酚藍法 MTBMTB與鎂形成藍色復合物，與鎂形成藍色復合物， 加入加入EGTAEGTA可減少鈣的干擾。可減少鈣的干擾。 3.3.二甲苯胺藍二甲苯胺藍（一）分光光度（比色）（一）分光光度（比

31、色）法法1.鈣鎂試劑（鈣鎂試劑（Calmagite）比色法）比色法血血清鎂在堿性條件下與鈣鎂試劑生成紫紅色清鎂在堿性條件下與鈣鎂試劑生成紫紅色絡合物，顏色深淺與鎂濃度成正比。加入絡合物，顏色深淺與鎂濃度成正比。加入EGTA乙二醇雙（乙二醇雙（-氨基乙醚）氨基乙醚）-N，N，N，N-四乙酸，可消除鈣的干擾。吸收峰四乙酸，可消除鈣的干擾。吸收峰520nm。顯色穩(wěn)定，操作簡便，快速，可手工顯色穩(wěn)定，操作簡便，快速，可手工操作，也可用于自動化分析。操作，也可用于自動化分析。紫色復合物二甲苯胺藍 pH11.42 Mg （二）酶法（二）酶法葡萄糖激酶和葡萄糖激酶和6 6磷酸葡萄糖脫氫酶偶聯(lián)法。磷酸葡萄糖脫氫酶偶聯(lián)法。己糖激酶和己糖激酶和6 6磷酸葡萄糖脫氫酶偶聯(lián)法。磷酸葡萄糖脫氫酶偶聯(lián)法。磷酸葡萄糖變位酶和磷酸葡萄糖變位酶和6 6磷酸葡萄糖脫氫酶偶聯(lián)法。磷酸葡萄糖脫氫酶偶聯(lián)法。異檸檬酸脫氫酶法。異檸檬酸脫氫酶法。甘油激酶作用下生成甘油氧化酶和過氧化物酶甘油激酶作用下生成甘油氧化酶和過氧化物酶 偶聯(lián)法。偶聯(lián)法。 特點是干擾小，特異性高，結(jié)果準確。特點是干擾小，特異性高，結(jié)果準確?！?正 常 參 考 值 】【 正 常 參 考 值 】 0 . 6 7 1.23mmol/L四、鐵的測定四、鐵的測定 血清鐵測定血清鐵測定血清鐵測定血清鐵測定血清總鐵結(jié)合力（血清總鐵結(jié)合力