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文檔簡介

1、 實驗三、氨基酸、蛋白質(zhì)的性質(zhì)鑒定實驗三、氨基酸、蛋白質(zhì)的性質(zhì)鑒定一、目的要求一、目的要求 了解氨基酸及蛋白質(zhì)的主要化學(xué)性質(zhì)及檢驗方法了解氨基酸及蛋白質(zhì)的主要化學(xué)性質(zhì)及檢驗方法二、實驗原理二、實驗原理 氨基酸與蛋白質(zhì)分子組成中的某些特殊結(jié)構(gòu)與某氨基酸與蛋白質(zhì)分子組成中的某些特殊結(jié)構(gòu)與某些試劑作用可以表現(xiàn)出特殊的顏色反應(yīng),利用此性些試劑作用可以表現(xiàn)出特殊的顏色反應(yīng),利用此性質(zhì),可檢驗出氨基酸及蛋白質(zhì)。質(zhì),可檢驗出氨基酸及蛋白質(zhì)。三、試劑三、試劑 甘氨酸(甘氨酸(1%)、雞蛋白、茚三酮()、雞蛋白、茚三酮(0.2%) 氫氧化鈉(氫氧化鈉(5%)、硫酸銅()、硫酸銅(1%)、谷氨酸()、谷氨酸(1%

2、)濃硝酸、濃氨水、飽和硫酸銨、氯化汞(濃硝酸、濃氨水、飽和硫酸銨、氯化汞(0.5%)注:注:1、雞蛋白制備:取雞蛋打一小孔,吸取、雞蛋白制備:取雞蛋打一小孔,吸取 2.5ml蛋清,放入燒杯,加蛋清,放入燒杯,加100120ml蒸蒸 餾水,攪拌過濾,濾液備用。餾水,攪拌過濾,濾液備用。 2、茚三酮試劑制備:、茚三酮試劑制備:0.1g茚三酮溶茚三酮溶50ml 蒸餾水中,兩天內(nèi)用完,否則失效。蒸餾水中,兩天內(nèi)用完,否則失效。1、茚三酮反應(yīng)、茚三酮反應(yīng) 于二支試管中分別加入于二支試管中分別加入1%甘氨酸、雞蛋白溶液甘氨酸、雞蛋白溶液各各2ml,再加,再加0.2%茚三酮溶液茚三酮溶液34滴,然后將兩支滴

3、,然后將兩支試管放在沸水浴中加熱試管放在沸水浴中加熱810分鐘,觀察兩支試管分鐘,觀察兩支試管有什么現(xiàn)象發(fā)生?有什么現(xiàn)象發(fā)生?解釋:解釋:茚三酮反應(yīng):茚三酮反應(yīng):aa和和Pr都顯藍(lán)色都顯藍(lán)色2、縮二脲反應(yīng)、縮二脲反應(yīng) 于一支試管中加入雞蛋白溶液于一支試管中加入雞蛋白溶液2ml,再滴加,再滴加5%氫氧化鈉溶液至呈堿性,再加氫氧化鈉溶液至呈堿性,再加35滴滴1%硫酸銅溶硫酸銅溶液,觀察有何顏色?液,觀察有何顏色? 另取另取1%谷氨酸谷氨酸2ml按上法加入同樣試劑作對照實按上法加入同樣試劑作對照實驗,比較反應(yīng)結(jié)果。驗,比較反應(yīng)結(jié)果。 解釋:解釋:縮二脲反應(yīng):凡含有兩個縮二脲反應(yīng):凡含有兩個- CON

4、H2基團(tuán)和基團(tuán)和 縮二脲反應(yīng)呈紫色縮二脲反應(yīng)呈紫色3、黃蛋白反應(yīng)、黃蛋白反應(yīng) 一支試管中加入雞蛋白溶液一支試管中加入雞蛋白溶液2ml和濃硝酸和濃硝酸0.5ml,加熱煮沸加熱煮沸12min,觀察呈什么現(xiàn)象?溶液冷卻后,觀察呈什么現(xiàn)象?溶液冷卻后,加入過量濃氨水,又呈什么顏色?加入過量濃氨水,又呈什么顏色?解釋:解釋:黃蛋白反應(yīng):黃色沉淀,這一反應(yīng)為苯丙氨黃蛋白反應(yīng):黃色沉淀,這一反應(yīng)為苯丙氨 酸、酪氨酸、色氨酸等苯環(huán)酸、酪氨酸、色氨酸等苯環(huán)aa特有。特有。4、蛋白質(zhì)鹽析、蛋白質(zhì)鹽析 取取2ml雞蛋白溶液于試管中,慢慢加入等量硫酸雞蛋白溶液于試管中,慢慢加入等量硫酸銨飽和溶液,混合均勻,即成不飽和硫酸銨溶液,銨飽和溶液,混合均勻,即成不飽和硫酸銨溶液,靜置數(shù)分鐘,則析出球蛋白,濾出沉淀,向濾液中靜置數(shù)分鐘,則析出球蛋白,濾出沉淀,向濾液中加入結(jié)晶硫酸銨,使其飽和(硫酸銨不再溶解為加入結(jié)晶硫酸銨,使其飽和(硫酸銨不再溶解為止),此時析出清蛋白。止),此時析出清蛋白。解釋:解釋:不同不同Pr硫酸銨沉淀飽和度不同硫酸銨沉淀飽和度不同5、重金屬鹽對蛋白質(zhì)作用、重金屬鹽對蛋白質(zhì)作用 兩支試管中,各加入蛋白質(zhì)溶液兩支試管中,各加入蛋白質(zhì)溶液1ml,然后一支,然后一支試管中慢慢加入試管中慢慢加入1%硫酸銅溶液幾滴,另一支試管硫酸銅溶液幾滴,另一支試管中加入中加入0.5%氯化汞(劇毒)氯化汞(劇毒

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