2022年免疫毒理-第五版

1、免疫免疫(miny)毒理學(xué)毒理學(xué) 第一頁，共五十三頁。 免疫毒理學(xué)（immunotoxicology）是研究外源化學(xué)物和物理(wl)因素等對機(jī)體免疫系統(tǒng)的損害作用、生物學(xué)機(jī)制及其危險度評價與管理，在免疫學(xué)和毒理學(xué)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一門毒理學(xué)分支學(xué)科。定義的提出 1984年，國際化學(xué)品安全規(guī)劃署（IPCS）和歐共體委員會（CEC）共同組織了“免疫系統(tǒng)是毒物損傷的靶”的研討會，會議對免疫毒理學(xué)進(jìn)行了上述定義，并達(dá)成共識。會議提出了免疫毒性評價必不可少的兩個步驟： 藥物(yow)和化學(xué)物對免疫系統(tǒng)毒性的鑒定 免疫毒性的危險度評價第二頁，共五十三頁。 各種免疫器官和組織、免疫細(xì)胞及免疫分子(fnz)共同

2、構(gòu)成了復(fù)雜的免疫系統(tǒng)，這是機(jī)體免疫功能正常發(fā)揮的物質(zhì)基礎(chǔ) 第一節(jié) 免疫生物學(xué)基礎(chǔ)(jch)概述第三頁，共五十三頁。一、免疫系統(tǒng)的組成(z chn)及其功能粘膜(zhn m)相關(guān)淋巴組織 完整的免疫系統(tǒng)由免疫器官(qgun)和組織、免疫細(xì)胞及免疫分子所組成。 第四頁，共五十三頁。免疫系統(tǒng)可以識別自身(zshn)和非己抗原，對自身(zshn)耐受，且清除非己，維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，表現(xiàn)為免疫防御、免疫自穩(wěn)和免疫監(jiān)視三大功能。 第五頁，共五十三頁。（一）免疫器官（一）免疫器官(qgun)和組織和組織第六頁，共五十三頁。骨髓：B淋巴細(xì)胞發(fā)育成熟的場所。胸腺：由胸腺基質(zhì)細(xì)胞(xbo)和胸腺細(xì)胞(xbo)組成

3、。是T淋巴細(xì)胞尤其是+T細(xì)胞發(fā)育的場所。胸腺基質(zhì)細(xì)胞與胸腺細(xì)胞的相互作用，對T細(xì)胞的發(fā)育是至關(guān)重要的。第七頁，共五十三頁。脾臟(pzng) T：35%、B：55%M：10%淋巴結(jié) T：75%、B：25%第八頁，共五十三頁。粘膜相關(guān)淋巴組織粘膜相關(guān)淋巴組織 在呼吸道、腸道及泌尿生殖道的黏膜上皮細(xì)胞下，均聚集有無包膜的淋巴組織。在小腸黏膜上皮細(xì)胞間存在(cnzi)一類T細(xì)胞稱上皮淋巴細(xì)胞。即： +T +T細(xì)胞細(xì)胞特異免疫應(yīng)答；特異免疫應(yīng)答； +T+T細(xì)胞細(xì)胞固有免疫應(yīng)答固有免疫應(yīng)答第九頁，共五十三頁。（二）免疫（二）免疫(miny)細(xì)胞細(xì)胞 免疫細(xì)胞（immunocyte）廣義地指對抗原物質(zhì)(wz

4、h)產(chǎn)生特異性和非特異性免疫應(yīng)答的各種細(xì)胞。大體上分為免疫活性細(xì)胞、輔佐細(xì)胞和其它細(xì)胞三類。 第十頁，共五十三頁。1免疫(miny)活性細(xì)胞（immunoconpetent cell, ICC）指能識別特異性抗原以及受抗原刺激后向母細(xì)胞轉(zhuǎn)化、分裂增殖并分化為能產(chǎn)生免疫效應(yīng)(xioyng)物質(zhì)（如抗體、淋巴因子）的淋巴細(xì)胞群，包括T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞。第十一頁，共五十三頁。淋巴細(xì)胞（淋巴細(xì)胞（Lymphocyte） 分B細(xì)胞和T細(xì)胞，分別來源于骨髓和胸腺。在機(jī)體(jt)免疫應(yīng)答中起核心作用。B淋巴細(xì)胞：表面的BCR及分泌的抗體均為免疫球蛋白。由B細(xì)胞介導(dǎo)的免疫稱為體液免疫。T淋巴細(xì)胞：TCR為

5、雙鏈分子。細(xì)胞毒性T細(xì)胞、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（輔助性T細(xì)胞和抑制性T細(xì)胞）第十二頁，共五十三頁。第十三頁，共五十三頁。人類人類T細(xì)胞細(xì)胞(xbo)亞群及其功能亞群及其功能亞群MHC限制表面標(biāo)記主要功能TH1MHC-II類限制TCR+、CD3+、CD4+分泌以IL-2、 IFN-和TNF-為主的細(xì)胞因子，引起炎癥反應(yīng)或遲發(fā)行超敏反應(yīng)TH2MHC-II類限制TCR+、CD3+、CD4+分泌以IL-4、5、6、10等為主的細(xì)胞因子，誘導(dǎo)B細(xì)胞增殖、分化、合成、分泌抗體，引起體液免疫反應(yīng)。TcMHC-I類限制TCR+、CD3+、CD8+可特異性的殺死帶有致敏抗原的腫瘤或病毒感染的細(xì)胞，發(fā)揮細(xì)胞免疫效應(yīng)。Ts

6、MHC-I類限制TCR+、CD3+、CD8+釋放抑制性細(xì)胞因子(如IL-4、IL-10等)和IFN- ，抑制體液和細(xì)胞免疫發(fā)生和發(fā)展.第十四頁，共五十三頁。B 淋淋 巴巴 細(xì)細(xì) 胞胞始祖(shz)B細(xì)胞前B細(xì)胞(xbo)不成熟(chngsh)B細(xì)胞成熟B細(xì)胞來于骨髓淋巴樣干細(xì)胞，無smIg表達(dá)， CD19+無smIg表達(dá)，但胞漿中出現(xiàn)鏈，同時有MHC-II表達(dá)，CD19+、20+膜表面出現(xiàn)單體IgM，開始表達(dá)CD21，CD19、20、MHC-II類分子表達(dá)量增多表達(dá)smIgM、 smIgD、IgGFc-R、C3bR、絲裂原受體及CD19、20、21等無免疫應(yīng)答功能smIgM同自身抗原結(jié)合可產(chǎn)生

7、抑制信號，導(dǎo)致自身反應(yīng)性B細(xì)胞處于無功能抑制狀態(tài)，產(chǎn)生自身耐受具有接受抗原的刺激并發(fā)生增殖分化的能力，是抗體產(chǎn)生的源泉細(xì)胞；其中部分可成為記憶性B細(xì)胞第十五頁，共五十三頁。第十六頁，共五十三頁。主要(zhyo)抗原呈遞細(xì)胞的比較APC主要(zhyo)特征分布分布(fnb)簡稱簡稱C3bRFcRMHC分子吞噬B細(xì)胞朗罕氏細(xì)胞并指狀細(xì)胞樹突狀細(xì)胞巨噬細(xì)胞BCLCIDCDCM外周血、淋巴結(jié)、脾表皮組織某些上皮層淋巴組織、胸腺依賴區(qū)淋巴濾泡全身細(xì)胞和組織+-+-2輔佐細(xì)胞（accessory cell，A細(xì)胞） 在免疫應(yīng)答中呈遞抗原，又稱抗原呈遞細(xì)胞（antigen presenting cell；A

8、PC），主要有樹突細(xì)胞（DC）、單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。B細(xì)胞是抗原特異性呈遞細(xì)胞。 第十七頁，共五十三頁。 掃描電鏡顯示：在掃描電鏡顯示：在感染早期，感染早期，M 伸出伸出長長的偽足長長的偽足(wiz)去捕獲細(xì)菌去捕獲細(xì)菌M 吞噬處理入侵細(xì)菌吞噬處理入侵細(xì)菌(xjn)及提呈抗原的機(jī)制及提呈抗原的機(jī)制第十八頁，共五十三頁。 來源來源：骨髓。 分布分布：外周血和淋巴組織。 標(biāo)志標(biāo)志：CD16、CD56。 特征特征：胞漿中含豐富的嗜天青顆粒(kl)，又稱大顆粒(kl)細(xì)胞。 功能功能：非特異性殺傷某些腫瘤細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞，在早期抗病毒感染、清除突變細(xì)胞的免疫監(jiān)視和免疫調(diào)節(jié)過程中發(fā)揮作用。其殺傷作用無

9、需抗原致敏，不受MHC限制。3其他(qt)免疫細(xì)胞NK細(xì)胞(xbo) LAK細(xì)胞 在IL-2的作用下，體外培養(yǎng)的淋巴細(xì)胞才能發(fā)揮強(qiáng)烈的殺傷功能，也叫淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞。能殺傷Tc、NK不敏感的腫瘤細(xì)胞第十九頁，共五十三頁。單 核 吞 噬 細(xì) 胞 包括骨髓中的前單核細(xì)胞、外周血中的單核細(xì)胞和組織內(nèi)的巨噬細(xì)胞，具有重要的抗感染、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)的作用。（一）表面標(biāo)志：表面抗原：高表達(dá)MHC-I/II類分子表面受體：IgG Fc受體，包括高親和力的FcRI、中親和力的FcRII和低親和力的FcRIII。作用：參與調(diào)理和ADCC。補(bǔ)體受體（CRI），為C3b受體，與吞噬和免疫黏附(ninf)作用有

10、關(guān)。第二十頁，共五十三頁。單核吞噬細(xì)胞(tn sh x bo)生物學(xué)功能 1、吞噬殺傷作用：直接吞噬、調(diào)理吞噬作用2、抗原提呈作用：即外來的抗原性異物通過巨噬細(xì)胞的捕獲、加工和處理后，與胞內(nèi)合成的MHC-1/II類分子形成抗原肽MHC分子復(fù)合物，并被呈遞到細(xì)胞膜表面，被TCR識別的作用。具有此作用的細(xì)胞叫抗原呈遞細(xì)胞（antigen presenting cell,APC）。 巨噬細(xì)胞表面還表達(dá)多種共刺激分子，如B7、ICAM-1、LFA-1,3等分別與T細(xì)胞上的CD28、LFA-1(CD11)、LFA-2(CD2)等相互作用，為T細(xì)胞的活化提供第二信號。3、抗腫瘤作用：M被某些細(xì)胞因子如IF

11、N-激活后能有效殺傷腫瘤等靶細(xì)胞，其吞噬殺菌能力(nngl)也顯著提高。4、分泌生物活性介質(zhì)，產(chǎn)生免疫應(yīng)答和其它免疫效應(yīng)：如IL-1,12、IFN、TNF、PGE等;以及某些補(bǔ)體成份和凝血因子、組織修復(fù)因子等。第二十一頁，共五十三頁。（三）免疫（三）免疫(miny)分子分子免疫(miny)球蛋白（immunoglobulin；Ig）補(bǔ)體（complement；C）細(xì)胞因子（cytokine；CK）HLA分子第二十二頁，共五十三頁。二、免疫應(yīng)答二、免疫應(yīng)答(yngd)過程及其病理反應(yīng)過程及其病理反應(yīng)免疫應(yīng)答（immune response）是機(jī)體非特異性和特異性的識別并排除異己成分以維持自身穩(wěn)定

12、的全過程，因而免疫應(yīng)答是整個免疫學(xué)的核心。非特異性免疫應(yīng)答指吞噬作用和炎癥(ynzhng)反應(yīng)，特異性免疫應(yīng)答是指細(xì)胞免疫應(yīng)答和體液免疫應(yīng)答?？乖碳B細(xì)胞產(chǎn)生致敏T細(xì)胞和或抗體稱正應(yīng)答，未產(chǎn)生致敏T細(xì)胞或抗體的為負(fù)應(yīng)答即耐受，抗原還可誘導(dǎo)TB細(xì)胞凋亡。免疫應(yīng)答維護(hù)了內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，因而是保護(hù)性的，但不適當(dāng)?shù)膽?yīng)答也會導(dǎo)致病理性損傷。第二十三頁，共五十三頁。（一）免疫應(yīng)答(yngd)的三個階段 1.啟動階段 指T細(xì)胞或B細(xì)胞對APC呈遞的抗原識別階段。主要包括抗原呈遞、T細(xì)胞對抗原和MHC的識別、B細(xì)胞雙識別、T細(xì)胞活化的雙信號和B細(xì)胞活化的雙信號等重要環(huán)節(jié)。2.誘導(dǎo)階段（1）T細(xì)胞活化、增殖和

13、分化 （2）B細(xì)胞活化、增殖和分化 3.效應(yīng)階段（1）T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫(miny)效應(yīng) （2）抗體介導(dǎo)的免疫效應(yīng) 第二十四頁，共五十三頁。（二）免疫應(yīng)答（二）免疫應(yīng)答(yngd)的病理反應(yīng)的病理反應(yīng)異常的免疫反應(yīng)主要包括(boku)免疫抑制與免疫增強(qiáng)兩種情況。免疫增強(qiáng)是指機(jī)體過度的或不適當(dāng)?shù)拿庖叻磻?yīng)狀態(tài)。過度的或不適當(dāng)?shù)拿庖邞?yīng)答可導(dǎo)致機(jī)體各種病理損害，有關(guān)的疾病主要有超敏反應(yīng)和自身免疫性疾病等。第二十五頁，共五十三頁。1.超敏反應(yīng)指機(jī)體再次接觸同一抗原時所發(fā)生的不同形式的免疫病理損害過程。超敏反應(yīng)的發(fā)生往往取決于外來物質(zhì)作為(zuwi)抗原的特異性和機(jī)體反應(yīng)的特性兩大因素。超敏反應(yīng)的類型(

14、lixng)第二十六頁，共五十三頁。Comparison of hypersensitivity reactions第二十七頁，共五十三頁。第二十八頁，共五十三頁。I型超敏反應(yīng)的基本(jbn)過程第二十九頁，共五十三頁。第三十頁，共五十三頁。第三十一頁，共五十三頁。第三十二頁，共五十三頁。第三十三頁，共五十三頁。Type IV hypersensitivity the three forms第三十四頁，共五十三頁。2.自身免疫(miny)反應(yīng)自身免疫反應(yīng)是指機(jī)體免疫系統(tǒng)對自身抗原發(fā)生免疫應(yīng)答(yngd)，產(chǎn)生自身抗體或/和自身致敏淋巴細(xì)胞，引起機(jī)體病理損害甚至導(dǎo)致疾病的過程。器官特異性自身免疫

15、性疾病 器官非特異性自身免疫性疾病又叫全身性或系統(tǒng)性自身免疫性疾病 第三十五頁，共五十三頁。第二節(jié)第二節(jié) 免疫毒性作用免疫毒性作用(zuyng)及其機(jī)制及其機(jī)制 外源化學(xué)物和物理因素可以直接損傷免疫器官和組織、免疫細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能，影響免疫分子的合成、釋放和生物活性，或通過干擾神經(jīng)內(nèi)分泌網(wǎng)絡(luò)等間接作用，使免疫系統(tǒng)對抗原產(chǎn)生不適當(dāng)?shù)膽?yīng)答，即過高或過低的應(yīng)答，或?qū)ψ陨?zshn)抗原的應(yīng)答，都會導(dǎo)致免疫病理過程，發(fā)展為免疫性疾病。應(yīng)答過低可引起免疫抑制(immunosuppression)，使宿主對病原體或腫瘤的易感性增加，嚴(yán)重時表現(xiàn)為免疫缺陷；應(yīng)答過高則表現(xiàn)為超敏反應(yīng)（hypersensitiv

16、ity）；自身抗原應(yīng)答細(xì)胞被激活則引起自身免疫(autoimmunity)外源化學(xué)物對免疫系統(tǒng)的影響常常是復(fù)雜的。 第三十六頁，共五十三頁。一、免疫抑制免疫抑制 免疫抑制的結(jié)果是機(jī)體抵抗力降低，主要表現(xiàn)為抗感染能力降低和腫瘤易感性增加。 具免疫抑制作用的外源化學(xué)(huxu)物種類繁多 外源化學(xué)物引起免疫抑制的機(jī)制較為復(fù)雜，僅就其作用方式而言，通常分為直接作用和間接作用兩大類。第三十七頁，共五十三頁。 外源化學(xué)物對神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫系統(tǒng)網(wǎng)絡(luò)某一環(huán)節(jié)的損害，都可能影響正常的免疫功能。 外源化學(xué)物免疫損傷的分子機(jī)制(jzh): 轉(zhuǎn)錄核因子（NF-B）或活化的T細(xì)胞核因子（NF-AT）是免疫應(yīng)答過程中

17、重要的免疫調(diào)節(jié)因子。 外源化學(xué)物還可以通過氧化應(yīng)激反應(yīng)、破壞細(xì)胞內(nèi)鈣穩(wěn)態(tài)、抑制cAMP等機(jī)制影響淋巴細(xì)胞的正常功能，引起免疫抑制 第三十八頁，共五十三頁。二、超敏反應(yīng)二、超敏反應(yīng)外源化學(xué)物引起的超敏反應(yīng)同樣涉及、和型反應(yīng)類型。能引起超敏反應(yīng)的外源化學(xué)物或混合物有數(shù)百種，可來自食物、藥物，也可以從職業(yè)或生活環(huán)境中接觸?；瘜W(xué)物引起超敏反應(yīng)機(jī)制 外源性化學(xué)物本身作為抗原(kngyun)或半抗原(kngyun)引發(fā)超敏反應(yīng) 改變抗體免疫應(yīng)答的敏感性或強(qiáng)度而導(dǎo)致超敏反應(yīng) 第三十九頁，共五十三頁。三、自身三、自身(zshn)免疫免疫很多能誘發(fā)型、型和型超敏反應(yīng)的外源化學(xué)物都可以引起自身免疫，尤以藥物多見。

18、 外源化學(xué)物引起自身免疫的機(jī)制 （1）引發(fā)機(jī)體針對自身抗原產(chǎn)生自身抗體進(jìn)行免疫應(yīng)答 （2）引發(fā)機(jī)體產(chǎn)生針對自身抗原的自身應(yīng)答性T細(xì)胞進(jìn)行免疫應(yīng)答 （3）造成自身隱蔽抗原的暴露或釋放、改變自身抗原或形成新的自身抗原，從而引起自身免疫。 （4）改變血細(xì)胞或其他組織細(xì)胞的抗原性，這種改變了的抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生自身抗體。 （5）影響正常免疫調(diào)節(jié)功能，如激活對自身抗原處于耐受態(tài)的T細(xì)胞，或通過APC表面(biomin)輔助刺激因子異常表達(dá)，或引起Th1和Th2功能失衡，引起自身免疫 第四十頁，共五十三頁。免疫缺陷（immunodeficiency, ID），是指因先天性或繼發(fā)性免疫系統(tǒng)功能不全的疾病。這主

19、要源于抗體缺陷、細(xì)胞免疫缺陷、巨噬細(xì)胞缺陷或補(bǔ)體系統(tǒng)缺陷。發(fā)生免疫缺陷的主要原因是先天性免疫系統(tǒng)遺傳基因異常 能引起(ynq)免疫抑制作用的外源化學(xué)物多數(shù)可能導(dǎo)致機(jī)體免疫缺陷的發(fā)生。影響其發(fā)生的主要因素是化學(xué)毒物作用的劑量、持續(xù)時間和機(jī)體免疫應(yīng)答狀況等。妊娠期或圍生期接觸外源化學(xué)物會嚴(yán)重影響胎兒出生后T細(xì)胞、B細(xì)胞、吞噬細(xì)胞的發(fā)育、遷移、歸巢及其功能，可能暫時或永久性地?fù)p傷機(jī)體的免疫系統(tǒng)。 第四十一頁，共五十三頁。第三節(jié)第三節(jié) 免疫毒性作用的試驗方法免疫毒性作用的試驗方法(fngf)與評價與評價一、檢測一、檢測(jin c)方方案案（一）美國（一）美國NTP推薦的嚙齒類動物（多用雌性小鼠）推薦

20、的嚙齒類動物（多用雌性小鼠）免疫毒性檢測方案免疫毒性檢測方案（二）（二）WHO推薦的人群免疫毒性檢測方案推薦的人群免疫毒性檢測方案（三）美國（三）美國FDA/ CDER的新藥免疫毒理學(xué)評價的新藥免疫毒理學(xué)評價(pngji)規(guī)范規(guī)范第四十二頁，共五十三頁。美國NTP推薦的小鼠免疫(miny)毒性檢測方案（USNTP,1988） 檢 測 項 目檢 測 內(nèi) 容篩選（一級） 免疫病理血液學(xué)白細(xì)胞總數(shù)及分類臟器重量體重、脾臟、胸腺、腎臟、肝臟細(xì)胞學(xué)脾臟組織學(xué)脾臟、胸腺、淋巴結(jié) 體液免疫對T淋巴細(xì)胞依賴抗原（RBC）IgM抗體生成細(xì)胞數(shù)對有絲分裂原LPS的反應(yīng) 細(xì)胞免疫對有絲分裂原ConA的反應(yīng)及混合淋巴

21、細(xì)胞反應(yīng) 非特異性免疫NK細(xì)胞活性全面試驗（二級） 免疫病理脾臟T、B淋巴細(xì)胞數(shù)體液免疫對T淋巴細(xì)胞依賴抗原（SRBC）IgG抗體生成細(xì)胞數(shù)細(xì)胞免疫細(xì)胞毒T細(xì)胞的溶細(xì)胞作用（CTL）遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)（DTH）非特異性免疫巨噬細(xì)胞功能宿主抵抗力對不同腫瘤和感染因子的抗性（選擇23種）第四十三頁，共五十三頁。WHO推薦的人群免疫毒性檢測(jin c)方案（WHO，1992） 檢 測 項 目檢 測 內(nèi) 容全血細(xì)胞計數(shù)及分類 體液介導(dǎo)免疫（檢測一項或多項） 對蛋白抗原的初次抗體反應(yīng)；血清中免疫球蛋白水平（IgM、IgA、IgG、IgE）對蛋白抗原的二次抗體反應(yīng)（白喉、破傷風(fēng)或脊髓灰質(zhì)炎）對回憶抗原的增殖

22、反應(yīng)。細(xì)胞免疫 用試劑盒檢測皮膚遲發(fā)型過敏反應(yīng)對蛋白抗原（KLH）的初次DTH反應(yīng)對血型抗原的天然免疫（如抗A、抗B）自身抗體和炎癥C-反應(yīng)蛋白自身抗體滴度對過敏原產(chǎn)生的IgE水平流式細(xì)胞儀分析淋巴細(xì)胞表型 分析淋巴細(xì)胞表面標(biāo)記CD3、CD4、CD8、CD20 非特異性免疫的檢測 NK細(xì)胞數(shù)（CD56或CD60）或?qū)52細(xì)胞的溶解活性吞噬作用（NBT或化學(xué)發(fā)光）臨床化學(xué)指標(biāo)檢測 第四十四頁，共五十三頁。美國(mi u)FDA/ CDER的新藥免疫毒理學(xué)評價規(guī)范(2002) 提出要考慮藥物對免疫系統(tǒng)五個方面(fngmin)的影響，除了免疫抑制、超敏反應(yīng)和自身免疫外，還有免疫原性（immunog

23、enecity）和不良免疫刺激（adverse immunostimulation）。前者指藥物及其代謝產(chǎn)物引起免疫反應(yīng)的能力，后者指藥物對免疫系統(tǒng)某些成分的任何抗原非特異性的、不適當(dāng)?shù)幕螂y以控制的活化作用，并指出可根據(jù)不同藥物的特點(diǎn)和具體情況靈活選擇合適的參數(shù)項目和評價。 第四十五頁，共五十三頁。二、檢測二、檢測(jin c)方法方法 （一）免疫病理學(xué)檢查（一）免疫病理學(xué)檢查 觀察免疫器官的大?。ㄖ亓浚┖痛篌w形態(tài)，然后進(jìn)行組織病理學(xué)檢查 主要觀察胸腺、脾臟、淋巴結(jié)和骨髓的組織結(jié)構(gòu)(jigu)和細(xì)胞類型，同時要注意檢查局部粘膜相關(guān)淋巴組織一般先用常規(guī)染色法染色，根據(jù)需要再選擇免疫組化等特異性方

24、法利用熒光標(biāo)記單克隆抗體和流式細(xì)胞儀觀察淋巴細(xì)胞表面標(biāo)記是目前檢查淋巴細(xì)胞表型的可靠方法，而以往多采用直接或間接免疫熒光法第四十六頁，共五十三頁。（二）免疫功能（二）免疫功能(gngnng)檢測檢測固有性免疫應(yīng)答評價固有性免疫應(yīng)答評價 1NK細(xì)胞活性測定細(xì)胞活性測定 觀察NK細(xì)胞對敏感的腫瘤細(xì)胞的溶解作用 LDH釋放法 2巨噬細(xì)胞功能檢測巨噬細(xì)胞功能檢測 同位素鉻標(biāo)記雞紅細(xì)胞（51Cr-cRBCs）吞噬法 炭粒廓清試驗(shyn)、巨噬細(xì)胞溶酶體酶測定、巨噬細(xì)胞促凝血活性測定、巨噬細(xì)胞表面受體檢測 第四十七頁，共五十三頁。適應(yīng)性或獲得性免疫應(yīng)答評價3體液免疫功能檢測體液免疫功能檢測 用特異性抗原免疫動物(dngw)，刺激脾B細(xì)胞活化并分泌抗體，然后觀察抗體生成量或抗體形成細(xì)胞數(shù) 前者可用ELISA、免疫電泳法、血凝法等直接測定血清抗體濃度，后者常用空斑形成細(xì)胞（PFC）試驗 4細(xì)胞免疫功能檢測細(xì)胞免疫功能檢測 細(xì)胞毒性T細(xì)胞殺傷試驗（CTL） T淋巴細(xì)胞增殖試驗 遲發(fā)型超敏反應(yīng)（DHR） 宿主抵抗力試驗宿主抵抗力試驗第四十八頁，共五十三頁。（三）免疫（三）免疫(miny)細(xì)胞因子的檢測細(xì)胞因子的檢測各種( zhn)細(xì)胞因子（受體）檢測方法的比較 第四十九頁，共五十三頁。（四）超敏反應(yīng)和自身（四）超敏反應(yīng)和自身(zshn)免疫反應(yīng)檢測免疫反應(yīng)檢測型