分光光度法測量溶液色素含量實驗方案設計報告

1、一、實驗目的使用分光光度計測出飲料中檸檬黃、日落黃、和胭脂紅的濃度。二、實驗條件儀器：紫外可見分光光度計，電子天平；容量瓶、移液管、燒杯等玻璃儀器。試劑：檸檬黃、日落黃、胭脂紅（試劑說明見附錄 2）；乙酸銨；光學純水；三、實驗方案（方法、步驟）一、先各稱取 2.5mg 的檸檬黃、日落黃、胭脂紅，用三個 50ml 容量瓶配置成 0.05mg/ml（50ug/ml）的母液，在分別將每種母液用量筒量取 4ml、6ml、8ml、12ml、16ml 到 50ml 容量瓶稀釋成 4ug/ml、6ug/ml、8ug/ml、12ug/ml、16ug/ml 的子溶液，則有 15 瓶標準溶液。二、分別測量 8ug

2、/ml（中間濃度）的檸檬黃、日落黃、胭脂紅標準溶液的吸光度曲線，記錄三者吸光度最大時的波長 、。123123426 nm482 nm508 nm三、分別測量 15 瓶標準溶液和待測溶液在波長1、時的吸光度。2314ug/ml檸6ug/ml檬8ug/ml1230.1190.0360.0030.1990.0610.0060.2850.0870.0080.4820.1460.0120.6750.2040.0150.0500.1140.0980.0800.1850.1600.1210.2820.2430.2220.5120.4410.3200.7390.6340.0350.0940.1160.0560

3、.1530.1880.0910.2310.2810.1390.3660.4470.1950.5260.6450.5930.7130.624黃12ug/ml 16ug/ml4ug/ml日6ug/ml落8ug/ml黃12ug/ml 16ug/ml4ug/ml胭6ug/ml脂8ug/ml紅12ug/ml 16ug/ml待測溶液四、數據處理方法（擬采用的計算方法、程序、軟件）將所測得的數據用 excel繪制出折線圖，再繪制出趨勢線，則趨勢線的斜率即為2該波長下物質的摩爾吸光系數，如下圖所示：0.80. 7擰檬畝0. 6 IV=0 . 004 7x-·0 . 0785( 426M0.50.40

4、.30.2哼=0 溫 0 01 4x -0. 023( 482nm )0.1 。r-, “V1 E- 0 4x-0,. 0002( 508nm)4060801001201401600.80.1日落苗y:=0 . 00.53x-4060801001201401600. 70 - 60. 5o. 40 _ 30 . 2。0 . 140朋脂紅y=0. 0044x-0. 0706( 508ny=y=0. 0013x O 6 0a -0:aOO2 044ll16-0由圖可得123=0.004711=0.001421=0.000131=0.002312=0.005322=0.004632=0.001313=0.003623=0.004433nii根據朗伯-比耳定律有： AbCi由測得數據可列方程組3AbC111bC112bC2133AbC221bC122bC2233AbCbCbC3311322333將 b=1，A =0.593，A =0.713，A =0.624 以及的值代入方程組用軟件（如下圖）可解123得C =73.68，C =68.56，C =68.47；123結論：該溶液由 73.68ug/ml 的檸檬黃、68.56ug/ml 的日落黃和 68.47ug/ml 的胭脂紅組成。