HPVL1殼蛋白檢測(cè)聯(lián)合細(xì)胞學(xué)、HPV檢測(cè)診治宮頸病變的臨床價(jià)值

1、HPVL1殼蛋白檢測(cè)聯(lián)合細(xì)胞學(xué)、HPV僉測(cè)診治宮頸病變的臨床價(jià)值【摘要】：目的：探討HPVL1殼蛋白檢測(cè)聯(lián)合細(xì)胞學(xué)檢查、HPV僉測(cè)在宮頸病變?cè)\治中的臨床價(jià)值。方法：收集2014年7月2015年6月期間，在新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院婦科門診因體檢或發(fā)現(xiàn)宮頸異常就診的1052例符合入組條件的女性，進(jìn)行TCT篩查、HPS型才測(cè)，對(duì)一項(xiàng)或兩項(xiàng)結(jié)果異常者進(jìn)行子宮頸組織活檢術(shù)，并對(duì)TCT結(jié)果異?；颊卟捎妹庖呒?xì)胞化學(xué)的方法檢測(cè)HPVL1殼蛋白的表達(dá)。結(jié)果：156例TCT結(jié)果異常中，意義未明確的非典型鱗狀上皮細(xì)胞（ASCUS、低度鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）、高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）、鱗狀細(xì)胞癌（SCC）的H

2、R-HPVTO性率，分別為19.1%（13/68）、35.3%（18/51）、77.8%（21/27）、100%（10/10）。各組之間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。TCT異常結(jié)果中ASCUSLSIL、HSIL、SCCfeW理組織學(xué)CIN及以上陽(yáng)性率分別為54.4%（37/68）,60.8%（31/51）,85.2%（23/27）,10/10。各組之間的比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。隨著組織病理學(xué)診斷病變級(jí)別越高，HPVL1殼蛋白陽(yáng)性表達(dá)率逐漸下降。結(jié)論：TCTffiHP8型檢測(cè)在宮頸癌篩查中必不可少。HPVL1殼蛋白檢測(cè)可以預(yù)測(cè)宮頸癌前病變的進(jìn)展趨勢(shì)。三者聯(lián)合應(yīng)

3、用可以及早發(fā)現(xiàn)宮頸癌前病變，并對(duì)病變進(jìn)展風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行合理的評(píng)估?！娟P(guān)鍵詞】：人乳頭瘤病毒；HPVL1殼蛋白；TCT檢測(cè)；宮頸上皮內(nèi)瘤變宮頸癌是女性最常見的惡性月中瘤之一，人乳頭瘤病毒（HPV是宮頸癌的主要致病因子。HPV寺續(xù)性感染是宮頸癌發(fā)生的必要前提。宮頸癌是由宮頸上皮內(nèi)瘤變-早期浸潤(rùn)癌-浸潤(rùn)癌這個(gè)量變到質(zhì)變過(guò)程發(fā)展而來(lái)。因此，早期檢查發(fā)現(xiàn)宮頸癌前病變并早期干預(yù)可以明顯降低宮頸癌的發(fā)病率和病死率。TCTffiHP型聯(lián)合檢測(cè)能夠有效提高宮頸病變的檢出率及準(zhǔn)確率1。近幾年相關(guān)研究表明，HPVL1殼蛋白檢測(cè)可以預(yù)測(cè)宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）的發(fā)展趨勢(shì)2o本研究將薄層細(xì)胞學(xué)檢查、HPS型及HPVL1殼蛋白

4、檢測(cè)三者聯(lián)合應(yīng)用，將其結(jié)果對(duì)比分析，探討其在宮頸病變?cè)\治中的臨床應(yīng)用價(jià)值。1資料與方法1.1一般資料：選取新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院婦科門診2014年7月-2015年6月因體檢或發(fā)現(xiàn)宮頸異常的1052例女性患者。入選標(biāo)準(zhǔn)：懷疑宮頸癌病變者；性生活史3年；排除有宮頸術(shù)史者、子宮切除者、月中瘤者、妊娠婦女和產(chǎn)后06月者?；颊吣挲g2562歲，平均（41.7±10.7）歲。1.2. 研究方法：1.2.1 薄層細(xì)胞學(xué)檢查：常規(guī)收集宮頸口及頸管的脫落上皮細(xì)胞送檢，制作液基薄層細(xì)胞片2張。1張采用全自動(dòng)超薄液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。另一張用于HPVL1殼蛋白檢測(cè)。細(xì)胞學(xué)診斷采用2001年國(guó)際癌癥協(xié)會(huì)

5、（NCI）推薦的TBS分級(jí)系統(tǒng)進(jìn)行診斷分為：正常細(xì)胞（NILN）,意義未明確的非典型鱗狀上皮細(xì)胞（ASC-US）,低度鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）,高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）,鱗狀細(xì)胞癌（SCC）。由兩名資深病理科專家讀片。1.2.2 HPV分型檢測(cè)：采用深圳亞能生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的人乳頭瘤病毒基因分型（23型）檢測(cè)試劑盒，可以檢測(cè)出23種HPV1型（包才S18種高危型及5種低危型）。確定能穩(wěn)定檢出的HPVW原體最低檢測(cè)限為1.0*103copies/ml.結(jié)果按膜條上HPV亞型分布的相應(yīng)著色位點(diǎn)進(jìn)行判讀。操作步驟由檢驗(yàn)科醫(yī)師嚴(yán)格指導(dǎo)下完成。1.2.3 HPVL1殼蛋白檢測(cè)：先將液基薄層細(xì)

6、胞片放入96%乙醇中固定，然后采用美國(guó)Advance公司生產(chǎn)的賽泰-細(xì)胞/組織人乳頭瘤病毒檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，此檢測(cè)以免疫組織細(xì)胞化學(xué)和非同位素標(biāo)記核酸分子雜交技術(shù)為基礎(chǔ)，能識(shí)別HPVW毒28種亞型的殼蛋白。具體操作嚴(yán)格按公司提供的操作指南進(jìn)行。HPVL1殼蛋白為核蛋白質(zhì)，細(xì)胞核呈紅色染色為特異性陽(yáng)性染色，如出現(xiàn)1個(gè)被紅染的細(xì)胞核即可診斷HPVL1殼蛋白陽(yáng)性。1.2.4 病理組織學(xué)診斷：經(jīng)患者知情同意，至少1項(xiàng)結(jié)果異常者行子宮頸活檢術(shù)。根據(jù)細(xì)胞異型性的程度和范圍分為：正?；蚵匝装Y、輕度不典型增生(CINI)、中度不典型增生(CINII)、重度不典型增生及原位癌(CINm)、宮頸鱗癌(SCC)

7、。1.2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：對(duì)本組研究的數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料以率(。%表示，采用x2檢驗(yàn)比較，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2.1 細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果與HPV分型比較156例TCT結(jié)果異?；颊咧?，其中ASCUSLSIL、HSIL、SCC的HR-HP邛日性率，分別為19.1%(13/68)、35.3%(18/51)、77.8%(21/27)、100%(10/10)。隨著TCT級(jí)別越高，HR-HPM日性率越高。各組之間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。LR-HPVW性主要見于低度宮頸病變。如表1所示。表1TCT檢測(cè)結(jié)果與HPV分型比較PV分型HTCT

8、例數(shù)HR-HPW日性LR-HPVffl性HPV昆合陽(yáng)性HPVW生NILN89655(6.1%)49(5.5%)51(5.7%)741(82.7%)ASCUS6813(19.1%)16(23.5%)31(45.6%)8(11.8%)LSIL5118(35.3%)21(41.2%)12(23.5%)0(0.0%)HSIL2721(77.8%)0(0.0%)6(22.2%)0(0%)SCC1010(100%)0(0%)0(0%)0(0%)合計(jì)1052117861007492.2細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果與組織病理學(xué)比較受檢婦女共1052例，其中896例患者檢查結(jié)果為無(wú)宮頸上皮內(nèi)瘤變及良性病變，占85.2%;15

9、6例患者為TCT結(jié)果異常，占14.8%。在TCT異常結(jié)果中ASCUSLSIL、HSIL、SCCfeW理組織學(xué)CIN及以上陽(yáng)性率分別為54.4%(37/68),60.8%(31/51),85.2%(23/27),10/10。各組之間的比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。隨著細(xì)胞學(xué)級(jí)別越高，TCT結(jié)果與病理組織學(xué)結(jié)果越符合。如表2所示。表2TCT檢測(cè)結(jié)果與病理組織學(xué)比較TCT例數(shù)組織病理學(xué)炎性反應(yīng)CINICINIICINIIISCCASCUS6831221320LSIL512024430HSIL27431820SCC1000019合計(jì)156554935892.3HPVL1殼蛋白表達(dá)情況與

10、組織病理學(xué)比較在不同病理組織學(xué)結(jié)果中，HPVL1殼蛋白的陽(yáng)性率分別為58.2%(32/55)、61.2%(30/49)、25.7%(9/35)、12.5%(1/8)、0(0/9).其中正常/炎癥組與CINI組、SCC&之間比較，HPVL1殼蛋白陽(yáng)性表達(dá)率均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),CINI組與CINII/III組、SCC&之間的HPVL1殼蛋白陽(yáng)性表達(dá)率比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）,SCC&無(wú)HPVL1殼蛋白表達(dá)。隨著組織病理學(xué)診斷病變級(jí)別越高，HPVL1殼蛋白陽(yáng)性表達(dá)率逐漸下降,如表3所示。表3HPVL1殼蛋白在各級(jí)別宮頸病變中的表達(dá)情況病理組織

11、學(xué)例數(shù)HPVL1殼蛋白陽(yáng)性陰性正常/炎癥5532(58.2%)23(41.8%)CINI4930(61.2%)19(38.8%)CINII359(25.7%)26(74.3%)CINIII81(12.5%)7(87.5%)SCC90(0%)9(100%合計(jì)15672(46.2%)84(53.8%)3.討論宮頸癌是女性僅次于乳腺癌的第二大惡性月中瘤3。人乳頭瘤病毒（HPV）是導(dǎo)致宮頸癌主要的致病因子。1628歲年輕性活躍婦女HPV感染率最高（20%40%）4，但大多為一過(guò)性感染。在HPV感染后8-12月后可發(fā)展為CIN,在經(jīng)過(guò)8-10年可發(fā)展為宮頸癌5。國(guó)際上公認(rèn)的宮頸癌篩查有兩種方法，即宮頸薄

12、層細(xì)胞學(xué)檢查（TCT）和HPV僉測(cè)。本研究中，156例TCT異常結(jié)果中ASCUSLSIL在病理組織學(xué)CIN及以上陽(yáng)性率分別為54.4%、60.8%,HSIL、SC3另1J為85.2%、10/10?？梢?，TCT檢查可以作為宮頸癌初篩方法。但其在宮頸低度病變中仍然存在一定的假陽(yáng)性率及假陰性率。HPVW毒感染，可分為高危型（HR-HPV和低危型（LR-HPV。HR-HPVt要有HPV-16、18、31、33型等，LR-HPVi要有HPV-6、11、34、42型等。本組資料中顯示，隨著TCT級(jí)別越高，HR-HPVH性率越高。這說(shuō)明，在TCT檢查基礎(chǔ)上，同時(shí)進(jìn)行HP防型檢測(cè)，能夠濃縮高風(fēng)險(xiǎn)人群，并可根據(jù)

13、分型檢測(cè)結(jié)果預(yù)測(cè)受檢者的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，在宮頸疾病篩查中必不可少，具有重要的指導(dǎo)意義。HPV病毒屬于乳頭瘤病毒科，是由DNA核心和蛋白衣殼組成，衣殼由主要(L1)和次要(L2)衣殼蛋白組成。HPVL1殼蛋白是HPV要的衣殼蛋白。在宿主體內(nèi)，HPVg染分為兩個(gè)階段，即復(fù)制和轉(zhuǎn)化階段。HPVL1殼蛋白陽(yáng)性表明HPVW毒處于早期復(fù)制狀態(tài)，同時(shí)可以誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答，清除感染。當(dāng)病毒整合到宿主DNAS因中，即處于轉(zhuǎn)化階段時(shí)，HPVL1殼蛋白表達(dá)呈陰性，此時(shí)機(jī)體免疫應(yīng)答被減弱，異常細(xì)胞大量增殖導(dǎo)致未經(jīng)治療的病變進(jìn)展到微浸潤(rùn)和浸潤(rùn)癌6。在本組資料中，HPVL1殼蛋白表達(dá)陽(yáng)性率隨著組織病理學(xué)診斷級(jí)別加重而呈下降

14、趨勢(shì)，各組級(jí)別之間HPVL1殼蛋白陽(yáng)性表達(dá)率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01).這與王偉7等研究結(jié)果一致。這表明檢測(cè)HPVL1殼蛋白表達(dá)可以預(yù)測(cè)宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)惡性發(fā)展的趨勢(shì)及病變嚴(yán)重程度。因此，在TCT結(jié)果異常的基礎(chǔ)上檢測(cè)HPVL1殼蛋白，可以用于指導(dǎo)宮頸病變患者的分流管理及個(gè)體化治療。綜上所述，TCT檢查聯(lián)合HPV型檢測(cè)能夠濃縮高風(fēng)險(xiǎn)人群，HPVL1殼蛋白檢測(cè)可以預(yù)測(cè)宮頸病變發(fā)展趨勢(shì)和HPVW毒感染狀態(tài)。三者聯(lián)合應(yīng)用，對(duì)于宮頸病變患者，可以依據(jù)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行更加合理的分流管理和個(gè)體化治療。參考文獻(xiàn) 1DayPM，KinesRC，ThompsonCD，eta1Invivome

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