畢業(yè)論文真菌發(fā)酵液對(duì)納塔爾鏈霉菌納他霉素產(chǎn)量的影響

1、安 徽 農(nóng) 業(yè) 大 學(xué)畢 業(yè) 論 文（設(shè)計(jì)）論文題目 真菌發(fā)酵液對(duì)納塔爾鏈霉菌納他霉素產(chǎn)量的影響 姓 名學(xué)號(hào)院 系 _生命科學(xué)學(xué)院_ 專 業(yè) 生物技術(shù)_指導(dǎo)教師 職 稱 講師_中國(guó)·合肥二o 13 年 5 月目錄摘要1前言11實(shí)驗(yàn)材料及方法21.1實(shí)驗(yàn)材料 2實(shí)驗(yàn)菌種2培養(yǎng)基21.2實(shí)驗(yàn)方法2納塔爾鏈霉菌的培養(yǎng)2真菌發(fā)酵液的制備 2納他霉素產(chǎn)量的測(cè)定2真菌發(fā)酵液添加時(shí)間對(duì)納他霉素產(chǎn)量的影響2真菌發(fā)酵時(shí)間對(duì)納他霉素產(chǎn)量的影響2真菌發(fā)酵液添加量對(duì)納他霉素產(chǎn)量的影響32結(jié)果與分析32.1納他霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作32.2發(fā)酵液加入時(shí)間對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響3產(chǎn)黃青霉發(fā)酵液加入時(shí)間對(duì)N5菌

2、株納他霉素產(chǎn)量的影響3黑曲霉發(fā)酵液加入時(shí)間對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響4釀酒酵母發(fā)酵液加入時(shí)間對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響52.3真菌培養(yǎng)時(shí)間對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響5 產(chǎn)黃青霉培養(yǎng)時(shí)間對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響5黑曲霉培養(yǎng)時(shí)間對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響6釀酒酵母培養(yǎng)時(shí)間對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響62.4真菌發(fā)酵液添加量對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響7產(chǎn)黃青霉發(fā)酵液添加量對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響7黑曲霉發(fā)酵液添加量對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響8釀酒酵母發(fā)酵液添加量對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響83討論與結(jié)論9參考文獻(xiàn) 9致謝10英文摘要10真菌發(fā)酵液對(duì)納塔爾鏈霉菌納他霉素產(chǎn)量的影響作

3、者：潘 指導(dǎo)教師：曹（安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院2009級(jí)生物技術(shù)1班，學(xué)號(hào)09121012）摘要：納他霉素是由納塔爾鏈霉菌（streptomyces natalensis）、褐黃孢鏈霉菌（streptomyces gilvosporeus）、恰塔努加鏈霉菌（streptomyces chattanoogensis）等菌株發(fā)酵而產(chǎn)生的一種廣譜抗真菌劑。因其低毒和極小改變食物本身味道可作為生物防腐劑。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)在納塔爾鏈霉菌N5菌株中添加真菌發(fā)酵液的方法提高菌株納他霉素的產(chǎn)量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明產(chǎn)黃青霉、黑曲霉、釀酒酵母三種菌的發(fā)酵液均對(duì)納塔爾鏈霉菌N5菌株的納他霉素產(chǎn)量有明顯的促進(jìn)作用。產(chǎn)黃青霉和黑曲

4、霉培養(yǎng)1d時(shí)，其發(fā)酵液對(duì)N5菌株納他霉素的合成促進(jìn)效果最佳，而釀酒酵母在3d時(shí)促進(jìn)效果最好，此時(shí)菌株納他霉素產(chǎn)量較未加真菌發(fā)酵液處理樣品高出約1倍。關(guān)鍵詞：納塔爾鏈霉菌N5菌株 納他霉素 產(chǎn)黃青霉 黑曲霉 釀酒酵母前言1955年struyk等人首次從南非natal州土壤中分離得到納塔爾鏈霉菌（streptomyces natalensis），并發(fā)現(xiàn)該菌種可以產(chǎn)生一種內(nèi)酯類抗生素，strnyk將其命名為匹馬菌素（pimaricin）1，后世界衛(wèi)生組織將其統(tǒng)一命名為納他霉素。該抗生素是一種二十六元多烯大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，主要由納塔爾鏈霉菌（streptomyces natalensis）、褐黃孢鏈霉

5、菌（streptomyces gilvosporeus）、恰塔努加鏈霉菌（streptomyces chattanoogensis）等菌發(fā)酵產(chǎn)生2。納他霉素是一種高效、廣譜的抗真菌劑，能有效抑制霉菌及酵母的生長(zhǎng)，并能有效抑制絲狀真菌中黃曲霉素的形成，可廣泛應(yīng)用于食品保鮮及治療真菌引起的疾病3。由于其分子上的疏水部分可以范德華力與細(xì)胞質(zhì)膜上的甾醇分子結(jié)合，形成抗生素甾醇復(fù)合物，破壞細(xì)胞質(zhì)膜滲透性，引起菌體細(xì)胞內(nèi)電解質(zhì)滲出，因而可導(dǎo)致菌體死亡，起到抑菌作用4。納他霉素在室溫下溶解度僅為30-100mg/L，微溶于甲醇，易溶于稀酸、冰醋酸和二甲基甲酰胺，不溶于非極性溶劑5。一般認(rèn)為，由于納他霉素難溶

6、于水和油脂，所以很難被消化和吸收，因此人體攝入的納他霉素大部分會(huì)隨糞便排出6。因?yàn)榧{他霉素具有毒性低和不會(huì)對(duì)食品天然風(fēng)味有較大改變的性質(zhì)，美國(guó)食品及藥物管理局(FDA)和我國(guó)衛(wèi)生部已經(jīng)先后于1982年與1997正式批準(zhǔn)納他霉素作為食品添加劑。迄今為止納他霉素已經(jīng)在食品工業(yè)中得到廣泛應(yīng)用7。由于各種因素的制約，國(guó)內(nèi)納他霉素的主要來(lái)源至今仍然是從國(guó)外進(jìn)口。限制我國(guó)自主生產(chǎn)納他霉素的主要問題是菌株產(chǎn)量偏低，導(dǎo)致納他霉素的生產(chǎn)成本過(guò)高。這已成為急需解決的問題。提高納他霉素產(chǎn)量可以通過(guò)添加誘導(dǎo)子的方法。已有報(bào)道稱一些微生物的發(fā)酵代謝物可產(chǎn)生某種誘導(dǎo)子調(diào)節(jié)其它微生物的次級(jí)代謝，促進(jìn)其次級(jí)代謝產(chǎn)物的生成8,

7、9,10。本實(shí)驗(yàn)將產(chǎn)黃青霉、黑曲霉、釀酒酵母的發(fā)酵液分別添加入納塔爾鏈霉菌（streptomyces natalensis）發(fā)酵液中，研究不同真菌發(fā)酵液對(duì)該菌株納他霉素產(chǎn)量的影響，以期提高菌株納他霉素產(chǎn)量。1實(shí)驗(yàn)材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)材料菌種納塔爾鏈霉菌N5菌株由中國(guó)科學(xué)院合肥物質(zhì)科學(xué)研究院等離子所提供。黑曲霉、產(chǎn)黃青霉、釀酒酵母由安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室保藏。培養(yǎng)基種子培養(yǎng)基 (g/L)：葡萄糖20、酵母浸膏5、蛋白胨6、氯化鈉10，pH 7.2發(fā)酵培養(yǎng)基 (g/L)：葡萄糖10、酵母浸膏5、大豆蛋白胨20、淀粉40，pH7.21.2實(shí)驗(yàn)方法納塔爾鏈霉菌的培養(yǎng)用接種環(huán)刮取斜面菌種

8、一環(huán)于裝有25mL種子培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，28、 200r/min搖床培養(yǎng)，40h后以9%接種量接種于裝有30mL發(fā)酵培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，28、200r/min搖床培養(yǎng) 4d。真菌發(fā)酵液的制備將產(chǎn)黃青霉、黑曲霉、釀酒酵母分別接種于裝有100mL發(fā)酵培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，28、150r/min搖床培養(yǎng)適當(dāng)時(shí)間，用八層紗布過(guò)濾，再在10000r/min下離心15min，取上清液進(jìn)行微孔濾膜過(guò)濾即可得到無(wú)菌的真菌發(fā)酵液。納他霉素產(chǎn)量的測(cè)定稱取納他霉素標(biāo)準(zhǔn)樣品，溶于5%冰乙酸的甲醇溶液中，使納他霉素濃度分別為1mg/L、2mg/L、3mg/L、4mg/L、5mg/L、6mg/L、

9、7mg/L、8mg/L，用紫外分光光度計(jì)測(cè)其在303nm處的OD值，以納他霉素濃度為橫坐標(biāo)，OD303值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。取N5菌株發(fā)酵液0.8mL于7.2mL 5%冰乙酸的甲醇溶液中。在震蕩器上震蕩5min后10000r/min離心15min。取上清液用紫外分光光度計(jì)測(cè)量303nm波長(zhǎng)下的吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算納他霉素產(chǎn)量。真菌發(fā)酵液添加時(shí)間對(duì)納他霉素產(chǎn)量的影響將產(chǎn)黃青霉、黑曲霉、釀酒酵母培養(yǎng)3d后分別以5%接種量接種于納塔爾鏈霉菌N5菌株發(fā)酵液中，接種時(shí)間分別為0h、12h、24h、36h、48h、60h、72h，每個(gè)處理重復(fù)3次，并以不添加真菌發(fā)酵液的處理為對(duì)照。培養(yǎng)4d后測(cè)定菌

10、株納他霉素產(chǎn)量。確定真菌發(fā)酵液最適添加時(shí)間。真菌發(fā)酵時(shí)間對(duì)納他霉素產(chǎn)量的影響分別在產(chǎn)黃青霉、黑曲霉、釀酒酵母培養(yǎng)1d、2d、3d時(shí)取樣，制備無(wú)菌發(fā)酵液。將培養(yǎng)不同時(shí)間的真菌發(fā)酵液以5%接種量加入培養(yǎng)12h的納塔爾鏈霉菌N5菌株發(fā)酵培養(yǎng)液中，每個(gè)處理重復(fù)3次，并以不添加真菌發(fā)酵液的處理為對(duì)照。繼續(xù)培養(yǎng)84h后測(cè)定菌株納他霉素產(chǎn)量。確定3種真菌的最佳發(fā)酵時(shí)間。真菌發(fā)酵液添加量對(duì)納他霉素產(chǎn)量的影響將產(chǎn)黃青霉、黑曲霉培養(yǎng)1d，釀酒酵母培養(yǎng)3d，制備無(wú)菌發(fā)酵液，并分別以1% 、2% 、5% 、8% 、10% 、15% 、20%的添加量加入到培養(yǎng)12h的納塔爾鏈霉菌N5菌株發(fā)酵培養(yǎng)液中，每個(gè)處理重復(fù)3次并

11、以不添加真菌發(fā)酵液的處理為對(duì)照。培繼續(xù)培養(yǎng)84h后測(cè)定菌株納他霉素產(chǎn)量。確定3種真菌的最佳發(fā)酵時(shí)間。2結(jié)果及分析2.1 納他霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作以納他霉素濃度為橫坐標(biāo)，OD303值為縱坐標(biāo)繪制納他霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線，見圖1。由圖1可看出納他霉素濃度與OD303值呈線性相關(guān)，且R2=0.9988線性較好。因此可通過(guò)此標(biāo)準(zhǔn)曲線方程x=（y0.0065)/0.1489計(jì)算納他霉素產(chǎn)量。圖1 納他霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液曲線Fig1 The standard curve ofnatamyctn2.2 發(fā)酵液加入時(shí)間對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響產(chǎn)黃青霉發(fā)酵液加入時(shí)間對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響將產(chǎn)黃青霉發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行適當(dāng)處

12、理后接種于培養(yǎng)不同時(shí)間的納塔爾鏈霉菌N5菌株發(fā)酵液中，繼續(xù)培養(yǎng)，當(dāng)菌株培養(yǎng)4d時(shí)用紫外分光光度法測(cè)定納他霉素產(chǎn)量，結(jié)果如圖2所示。由圖2可看出產(chǎn)黃青霉發(fā)酵液對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量有明顯的促進(jìn)作用，當(dāng)在發(fā)酵培養(yǎng)12h時(shí)添加效果最佳，此時(shí)菌株納他霉素產(chǎn)量達(dá)1.42g/L，較對(duì)照提高65.96。圖2 產(chǎn)黃青霉發(fā)酵液添加時(shí)間對(duì)納他霉素產(chǎn)量的影響Fig 2 Effects of addition time of fermentation broth ofPenicillium chrysogenumon the natamycin production of N5 strain黑曲霉發(fā)酵液加入時(shí)間對(duì)N5

13、菌株納他霉素產(chǎn)量的影響將培養(yǎng)3d的黑曲霉發(fā)酵培養(yǎng)液適當(dāng)處理后于不同時(shí)間添加入N5菌株發(fā)酵培養(yǎng)液中，繼續(xù)培養(yǎng)，當(dāng)菌株培養(yǎng)4d時(shí)測(cè)定納他霉素產(chǎn)量，結(jié)果見圖3。從圖3中可以看出黑曲霉發(fā)酵液對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的提高有顯著的促進(jìn)作用。當(dāng)在發(fā)酵培養(yǎng)12h時(shí)添加效果最佳，此時(shí)菌株納他霉素產(chǎn)量達(dá)1.44g/L，較對(duì)照提高67.44。圖3黑曲霉發(fā)酵液添加時(shí)間對(duì)納他霉素產(chǎn)量的影響Fig 3 Effects of addition time of fermentation broth ofAspergillus Nigeron the natamycin production of N5 strain釀酒酵母發(fā)

14、酵液加入時(shí)間對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響釀酒酵母發(fā)酵液加入時(shí)間對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響見圖4。由圖可見，釀酒酵母發(fā)酵液也可明顯促進(jìn)N5菌株納他霉素的合成，最適接入時(shí)間也是菌株培養(yǎng)的12h。圖4 釀酒酵母發(fā)酵液添加時(shí)間對(duì)納他霉素產(chǎn)量的影響Fig 4 Effects of addition time of fermentation broth ofSaccharomyces cerevisiaeon the natamycin production of N5 strain2.3 真菌培養(yǎng)時(shí)間對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響產(chǎn)黃青霉培養(yǎng)時(shí)間對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響將分別培養(yǎng)1d、2d、3d的產(chǎn)

15、黃青霉發(fā)酵液進(jìn)行適當(dāng)處理，添加至培養(yǎng)12h的N5菌株發(fā)酵培養(yǎng)液中，繼續(xù)培養(yǎng)84h后測(cè)定菌株納他霉素產(chǎn)量，結(jié)果如圖5所示。由圖5可以看出培養(yǎng)1d的產(chǎn)黃青霉發(fā)酵液對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的促進(jìn)作用最顯著。隨著產(chǎn)黃青霉培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，發(fā)酵液對(duì)N5納他霉素產(chǎn)量的促進(jìn)作用呈下降趨勢(shì)。因此，產(chǎn)黃青霉的最佳培養(yǎng)時(shí)間為1d。圖5產(chǎn)黃青霉培養(yǎng)時(shí)間對(duì)納他霉素產(chǎn)量的影響Fig 5 Effects of culture time of Penicillium chrysogenumon the natamycin production of N5 strain黑曲霉培養(yǎng)時(shí)間對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響 將培養(yǎng)不同時(shí)間的

16、黑曲霉發(fā)酵液添加入N5菌株發(fā)酵液中，培養(yǎng)后測(cè)定納他霉素產(chǎn)量，結(jié)果見圖6。由圖6可以看出當(dāng)在N5菌株發(fā)酵液中添加培養(yǎng)1d的黑曲霉發(fā)酵液時(shí)，納他霉素產(chǎn)量最高，因此，黑曲霉的最佳培養(yǎng)時(shí)間確定為1d。圖6黑曲霉培養(yǎng)時(shí)間對(duì)納他霉素產(chǎn)量的影響Fig 6 Effects of culture time of Aspergillus Nigeron the natamycin production of N5 strain釀酒酵母培養(yǎng)時(shí)間對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響釀酒酵母培養(yǎng)時(shí)間對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響如圖7所示。由圖7可見，當(dāng)在N5菌株發(fā)酵液中添加培養(yǎng)3d的釀酒酵母發(fā)酵液時(shí)，納他霉素產(chǎn)量最高，因此，釀

17、酒酵母的最佳培養(yǎng)時(shí)間確定為3d。圖7釀酒酵母培養(yǎng)時(shí)間對(duì)納他霉素產(chǎn)量的影響Fig 7 Effects of culture time of Saccharomyces cerevisiaeon the natamycin production of N5 strain2.4真菌發(fā)酵液添加量對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響產(chǎn)黃青霉發(fā)酵液添加量對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響將培養(yǎng)1d的產(chǎn)黃青霉發(fā)酵液處理后以不同添加量添加于培養(yǎng)12h的納塔爾鏈霉菌N5菌株發(fā)酵培養(yǎng)液中，于28、200r/min條件下繼續(xù)培養(yǎng)84h，測(cè)定納他霉素產(chǎn)量。以產(chǎn)黃青霉發(fā)酵液添加量為橫坐標(biāo)，納他霉素產(chǎn)量為縱坐標(biāo)做圖，見圖8。從圖8中可

18、以添加5的產(chǎn)黃青霉發(fā)酵液對(duì)N5菌株納他霉素的積累效果最顯著，此時(shí)納他霉素產(chǎn)量達(dá)1.69g/L，較對(duì)照提高94.25%。圖8產(chǎn)黃青霉發(fā)酵液添加量對(duì)納他霉素產(chǎn)量的影響的影響Fig 8 Effects of addition amount of Penicillium chrysogenumfermentation brothon the natamycin production of N5 strain黑曲霉發(fā)酵液添加量對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響將培養(yǎng)1d的黑曲霉發(fā)酵液處理后以不同添加量添加于培養(yǎng)12h的納塔爾鏈霉菌N5菌株發(fā)酵培養(yǎng)液中，于28、200r/min條件下繼續(xù)培養(yǎng)84h，測(cè)定納他霉素

19、產(chǎn)量結(jié)果如圖8所示。由圖可看出5的黑曲霉發(fā)酵液對(duì)N5菌株納他霉素的積累效果最佳，因此，黑曲霉發(fā)酵液的最適添加量確定為5。圖9黑曲霉發(fā)酵液添加量對(duì)納他霉素產(chǎn)量的影響的影響Fig 9 Effects of addition amount of Aspergillus Nigerfermentation brothonthe natamycin production of N5 strain釀酒酵母發(fā)酵液添加量對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響釀酒酵母發(fā)酵液添加量對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響見圖10。從圖10中可以看出5的釀酒酵母發(fā)酵液對(duì)N5菌株納他霉素的積累效果最佳，因此，黑曲霉發(fā)酵液的最適添加量確定為

20、5。圖10釀酒酵母發(fā)酵液添加量對(duì)納他霉素產(chǎn)量的影響的影響Fig 10 Effects of addition amount of Saccharomyces cerevisiae fermentation brothonthe natamycin production of N5 strain3討論與結(jié)論 隨著人們對(duì)健康、安全問題的日益關(guān)注，食品安全問題越來(lái)越受到人們的重視，化學(xué)防腐劑的缺點(diǎn)逐漸暴露，納他霉素受到人們的青睞。納他霉素是和乳酸鏈球菌素并列的僅有的兩種生物防腐劑，其具有毒性低且不會(huì)造成食品風(fēng)味巨大改變的特性，是一種極具有使用、生產(chǎn)價(jià)值的抗生素。但納他霉素產(chǎn)生菌株產(chǎn)量不高一直是我國(guó)納

21、他霉素自主生產(chǎn)的瓶頸，過(guò)低的單株產(chǎn)量會(huì)使生產(chǎn)成本過(guò)高而不利于工廠生產(chǎn)。本實(shí)驗(yàn)將產(chǎn)黃青霉、黑曲霉、釀酒酵母發(fā)酵液添加入納塔爾鏈霉菌N5菌株發(fā)酵液中，研究這3種真菌培養(yǎng)時(shí)間、發(fā)酵液添加時(shí)間及添加量對(duì)N5菌株納他霉素產(chǎn)量的影響，以促進(jìn)菌株納他霉素的合成。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明這三種真菌的發(fā)酵液均對(duì)納塔爾鏈霉菌N5菌株的納他霉素產(chǎn)量有明顯促進(jìn)作用。產(chǎn)黃青霉和黑曲霉培養(yǎng)1d時(shí)，其發(fā)酵液對(duì)N5菌株納他霉素的合成促進(jìn)效果最佳，而釀酒酵母在3d時(shí)促進(jìn)效果最好。三種真菌最佳發(fā)酵液添加時(shí)間及添加量均為12h和5。具體這些真菌發(fā)酵液中何種因素對(duì)N5菌株納他霉素生產(chǎn)起到促進(jìn)作用還不清楚，有待于進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)研究。參考文獻(xiàn)1 Mar

22、ta V Mendes ，sedef Tunca ，Nuria Anton et al The two-component phoR-phoP system of streptomyces natalensis ;inactivation or deletion of phoP reduces the negative phosphate regulation of pimaricin biosynthesis metabolic engineering 2007 ,9 (2)：217227；2 PEDERSEN J C Natamycin as a fungicide imager medi

23、a JApplied and environment 。microbiobogy 1992 ，58（3）.10641066；3 陳曉麗、呂振岳、黃東東等。新型天然食品防腐劑納他霉素的研究進(jìn)展J食品研究與開發(fā).2002.23（4）：23；4 盧國(guó)營(yíng)、張朝輝、洪偉杰，新型防腐劑納他霉素的研究進(jìn)展J中國(guó)食品添加劑 2005（3）：3032；5 魏寶東、孟寬軍、天然生物性食品防腐劑納他霉素的特性及應(yīng)用J，遼寧農(nóng)業(yè)科學(xué) 2004 （2）：2426；6 賀家亮、張敏、趙勝娟，納他霉素的研究現(xiàn)狀J中國(guó)食品添加劑2005（3）：3032；7 Martin J F DEMAIN AL control of an

24、tibiotic biosynthesis 1980（02）；8 葉輝、王兆慧、陳佩林等 微生物誘導(dǎo)子對(duì)卡諾氏菌屬N05205 菌株的影響J，生物技術(shù)，2004 14（6）：5758；9 邊猛、田黎、張久明等，誘導(dǎo)子對(duì)海洋真菌penicillium crustosum 204215菌株生物堿代謝的調(diào)節(jié)作用J海洋學(xué)報(bào)，2008.30（2）：117123；10 邊猛 海洋真菌產(chǎn)生生物堿代謝調(diào)節(jié)的研究D：碩士學(xué)位論文青島科技大學(xué) 生物化工系 。11 史強(qiáng) 真菌代謝產(chǎn)物中促進(jìn)納他霉素合成的誘導(dǎo)子的研究D：碩士學(xué)位論文江南大學(xué)。致謝感謝曹老師對(duì)于本試驗(yàn)的悉心指導(dǎo)，她對(duì)生物學(xué)科領(lǐng)域中的基本問題和發(fā)展前景的

25、敏銳洞察力，對(duì)學(xué)術(shù)思想的重視，對(duì)選題和研究?jī)?nèi)容的嚴(yán)格要求，以及對(duì)論文工作中遇到的關(guān)鍵問題和疑難問題的指導(dǎo)使我受益匪淺。她對(duì)試驗(yàn)的研究態(tài)度和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)給予我今后的學(xué)習(xí)和工作很深的啟示。同時(shí)我還要感謝一起做實(shí)驗(yàn)的同學(xué)，他們?cè)谖业膶?shí)驗(yàn)過(guò)程中給了我很大的幫助。The effect of fungusfermentedliquidontheoutputof Streptomyces natalensisnatamycinAuthor: instructor: (2009 College of life science of Anhui agricultural University-level biotechnology class 1, 09121012,)Abstract:Natamycin is a broad-spectrum antifungal agent generated by the fermentation of the streptomyces natalensis,streptomyces gilvosporeus,streptomyces chattanoogensis and other strains.It can be used