美天旎公司磁珠分選產(chǎn)品

1、美天旎公司MACS(磁珠分選)相關(guān)產(chǎn)品一、MACS微珠（MicroBeads）MACS微珠是一種與高度特異性單克隆抗體相偶聯(lián)的超順磁化微粒，用于目的細(xì)胞或者去除細(xì)胞的磁性標(biāo)記。微珠直徑約有50nm，比細(xì)胞小200多倍，體積為細(xì)胞的百萬(wàn)分之一，光學(xué)顯微鏡下不可見(jiàn)。微珠由多聚糖和氧化鐵組成，無(wú)毒性，對(duì)細(xì)胞無(wú)損傷，可以生物降解。MACS微珠與流式細(xì)胞儀兼容，不會(huì)影響細(xì)胞的光散射特性；磁性標(biāo)記只占用2030的結(jié)合位點(diǎn)，不影響細(xì)胞的熒光抗體標(biāo)記。此外，MACS微珠可以最大限度地避免細(xì)胞活化；無(wú)需解離磁珠，可以直接進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)：如流式細(xì)胞儀分析或分選、細(xì)胞培養(yǎng)、分子生物學(xué)研究、回輸給人或者動(dòng)物。MACS微

2、珠主要有三種：直標(biāo)微珠、間標(biāo)微珠、多選微珠。其中間標(biāo)微珠有抗免疫球蛋白微珠、抗生物素微珠或鏈霉親和素微珠、抗熒光素微珠。多選微珠是專門(mén)為分選細(xì)胞亞群而研制的一種微珠。這種微珠通過(guò)特殊的方式與抗體偶聯(lián)，在第一次陽(yáng)性分選完成后，與細(xì)胞結(jié)合的多選微珠可以被解離試劑剪切下來(lái)，陽(yáng)性分選的細(xì)胞可以進(jìn)行再次陽(yáng)性分選或者去除分選。 MACS技術(shù)分選的CD8陽(yáng)性T細(xì)胞（箭頭所示為磁性結(jié)合在細(xì)胞表面的微珠）  二、MACS分選柱（Separation Column）  MACS分選柱是一類填充有不同規(guī)格鐵珠的塑料容器，鐵珠表面有親水包被，因此不會(huì)損傷細(xì)胞。在磁場(chǎng)外MACS分選柱不帶有

3、磁性，但是當(dāng)置于一個(gè)永久性磁場(chǎng)MACS分選器中時(shí)，分選柱內(nèi)的鐵珠可以使分選器的磁場(chǎng)增強(qiáng)1000倍，足以滯留僅標(biāo)記有極少量微珠的目的細(xì)胞；磁性標(biāo)記細(xì)胞從分選柱中通過(guò)時(shí)可以受到均勻的磁力作用，從而提高分選純度和回收率。手動(dòng)操作在30分鐘內(nèi)可完成，自動(dòng)分選僅需2.5-10分鐘，得到的細(xì)胞可立即用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。此外，大多數(shù)MACS分選柱都是無(wú)菌包裝，一次性使用，可以滿足細(xì)胞培養(yǎng)所需的無(wú)菌條件。三、MACS分選器（MACS Separators） MACS分選器由永久性磁鐵和支架構(gòu)成。與分選柱一起組成高強(qiáng)度的梯度磁場(chǎng)。根據(jù)應(yīng)用范圍分為研究用和臨床應(yīng)用的MACS分選器，根據(jù)操作方式分為手動(dòng)和自動(dòng)分

4、選器。1、MiniMACS分選器和OctoMACS分選器MiniMACS分選器是專為手動(dòng)分選動(dòng)、植物細(xì)胞，細(xì)菌、病毒、細(xì)胞器和mRNA等分子而設(shè)計(jì)的。該設(shè)備價(jià)格低廉，快速分選，應(yīng)用廣泛，易于操作，是獲得少量高純度細(xì)胞的理想設(shè)備。OctoMACS分選器把8個(gè)MiniMACS分選器連在一起，可以在一臺(tái)儀器上同時(shí)進(jìn)行8個(gè)標(biāo)本的分選。MiniMACSOctoMACS   2、MidiMACS分選器和QuadroMACS分選器MidiMACS分選器是MiniMACS分選器的擴(kuò)大版本，與LS和LD分選柱配合使用，可陽(yáng)性選擇或者去除大量高純度細(xì)胞。QuadroMACS分選器把4

5、個(gè)MidiMACS分選器連在一起，可以同時(shí)進(jìn)行多個(gè)分選過(guò)程，或者同時(shí)進(jìn)行多個(gè)樣本分選，也可將一個(gè)大的樣本分成數(shù)個(gè)部分同時(shí)分選。MidiMACS       QuadroMACS3、VarioMACS分選器VarioMACS分選器有多種適配器，可以使用MS、LS、LD和CS分選柱?？捎糜陉?yáng)性選擇和去除分選：既可高純度地分選出稀有細(xì)胞（如頻率低至10-8），也可用來(lái)從細(xì)胞懸液中去除多達(dá)2×108非目的細(xì)胞。4、SuperMACS II分選器設(shè)計(jì)的SuperMACS II分選器專門(mén)用于大量細(xì)胞分選，一次分選的總細(xì)胞數(shù)大于

6、1011，同時(shí)該儀器也適用于少量細(xì)胞的分選。uperMACS II分選器備有三個(gè)適配器，除了分選柱和autoMACS分選柱外，其它所有各型MACS分選柱均可用于SuperMACS II分選器。                                  

7、  Super MACS II 5、MACS分選器MACS分選器是為分子生物學(xué)和蛋白生化分選設(shè)計(jì)的分選器。同時(shí)容納4個(gè)分選柱，可以分選出高純度分子，如mRNA、序列特異性核酸或者蛋白。                                  

8、; MACS  6、autoMACS分選儀7、CliniMACS分選種類 分選柱 容量 適配分選器 手動(dòng)陽(yáng)性分選或者強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞去除分選 MS分選柱 2X108總細(xì)胞107個(gè)標(biāo)記細(xì)胞 MiniMACS、VarioMACS、SuperMACS 大細(xì)胞分選柱 2X108總細(xì)胞107個(gè)標(biāo)記細(xì)胞 MiniMACS、VarioMACS、SuperMACS LS分選柱 2X109總細(xì)胞108個(gè)標(biāo)記細(xì)胞 MidiMACS、VarioMACS、SuperMACS XS分選柱 2X1010總細(xì)胞109個(gè)標(biāo)記細(xì)胞 SuperMACS 手動(dòng)去除分選 LD分選柱 5X108總細(xì)胞108個(gè)標(biāo)記細(xì)胞 MidiMA

9、CS、VarioMACS、SuperMACS CS分選柱 2X108個(gè)標(biāo)記細(xì)胞 VarioMACS、SuperMACS D分選柱 109個(gè)標(biāo)記細(xì)胞 SuperMACS 自動(dòng)分選 AutoMACS分選柱 4X109總細(xì)胞2X108個(gè)標(biāo)記細(xì)胞 AutoMACS CliniMACS 6-12X1010總細(xì)胞6-12X108個(gè)標(biāo)記細(xì)胞 CliniMACS 分子生物學(xué)分選 分選柱 10g mRNA MACS M分選柱 50g mRNA MiniMACS Miltenyi磁柱選擇及標(biāo)記問(wèn)題（主要針對(duì)Miltenyi產(chǎn)品）一、標(biāo)記策略用MACS進(jìn)行磁分離，最重要的參數(shù)就是高質(zhì)量的標(biāo)記。對(duì)陽(yáng)性細(xì)胞的標(biāo)記應(yīng)盡可

10、能強(qiáng)，而背景要盡可能低，才能獲得對(duì)磁標(biāo)記的陽(yáng)性細(xì)胞和未標(biāo)記的陰性細(xì)胞的最好分辨。有多種不同的標(biāo)記策略可供參考：1、直接標(biāo)記直接標(biāo)記是最快速和最特異的磁標(biāo)記方法。2、間接標(biāo)記幾乎所有的單克隆抗體或多克隆抗體都可以用于間接標(biāo)記。用無(wú)標(biāo)記的、生物素化的或FITC、PE或APC結(jié)合的一抗標(biāo)記細(xì)胞，再用抗免疫球蛋白、抗生物素、鏈霉菌親和素、抗FITC、抗PE、或抗APC的微珠分別進(jìn)行磁標(biāo)記。間接標(biāo)記可以放大磁標(biāo)記，用于分離表達(dá)比較弱的標(biāo)記很有用。在間接標(biāo)記中，以使用生物素化的或PE表記的一抗結(jié)果特異性最好。二、磁分離柱的選擇下表為德國(guó)Miltenyi公司的分離柱種類，其中MS, LS, XS柱適合于正性

11、細(xì)胞選擇，如果磁標(biāo)記很強(qiáng)，也可用于負(fù)性選擇。Large Cell Columns與MS柱相比，孔徑較大，適合于人和動(dòng)物大細(xì)胞的正性選擇，如巨核細(xì)胞。新的LD柱是為最方便的負(fù)選設(shè)計(jì)，代替了AS 和BS柱。LD 柱和CD及D柱即使在磁標(biāo)記很弱的情況下也能獲得最高的負(fù)選效率。µ 和M柱是為分子生物學(xué)方面的應(yīng)用而設(shè)計(jì)的。三、分選策略分選策略也要根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行選擇1、正性選擇（positive selection）磁珠對(duì)細(xì)胞功能和活力的影響很小，因此一般首先應(yīng)該考慮正選策略。正選具有速度快和單克隆抗體的特異性優(yōu)勢(shì)，大多數(shù)情況下，正選省時(shí)省錢(qián)。2、負(fù)性選擇（negative selection）如果正選策略不適合您的實(shí)驗(yàn)，比如有可能因抗體結(jié)合引起細(xì)胞活化或沒(méi)有針對(duì)靶細(xì)胞的特異性抗體，可以選擇負(fù)選策略。MACS對(duì)許多細(xì)胞類型提供了合適的試劑盒，含有滴定好的針對(duì)非靶細(xì)胞的混合抗體。附：Miltenyi分離柱技術(shù)指標(biāo)及圖片 Miltenyi的柱子回收方法 準(zhǔn)備使用回收的柱子時(shí)，抗體孵育始，即將柱子置于新鮮的75%酒精中，柱的容器內(nèi)盛滿酒精，自動(dòng)流下，既消毒，又de-gas，去除氣泡十分關(guān)鍵。洗抗體時(shí)，即開(kāi)始洗柱子，將回收柱架于消毒過(guò)的長(zhǎng)試管口上。換新的酒精自然滴下，換PBS+0.1%FBS沖