尿酸(UA)-酶比色法

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上項(xiàng) 目尿酸（UA）方 法酶比色法目 錄1. 檢測(cè)原理2. 標(biāo)本采集與處理2.1 受檢者的準(zhǔn)備2.2 靜脈采血2.3 抗凝劑2.4 標(biāo)本處理3. 試劑3.1 試劑3.2 校準(zhǔn)血清3.3 試劑與校準(zhǔn)血清的穩(wěn)定性4. 儀器5. 操作6. 計(jì)算7. 操作性能7.1 精密度7.2 準(zhǔn)確度7.3 靈敏度7.4 可報(bào)告范圍7.5 特異性7.6 干擾8. 參考值9. 臨床意義附錄A: 參數(shù)1. 檢測(cè)原理反應(yīng)生成的醌亞胺在505nm波長(zhǎng)有最大吸收，所產(chǎn)生的顏色強(qiáng)度與血清中尿酸含量成正比，再通過與同樣處理的尿酸標(biāo)準(zhǔn)溶液比較，經(jīng)過計(jì)算可求出血清中尿酸的含量。試劑中的抗壞血酸氧化酶可排除抗壞

2、血酸對(duì)結(jié)果的影響，測(cè)定尿酸所用的酶反應(yīng)如下:尿酸酶尿酸 O2 2H2O - 尿囊素 CO2 2H2O2過氧化物酶H2O24-氨基安替比林 2、4、6-三碘-3-羥基苯甲酸-醌亞胺H2O2標(biāo)本采集與處理2.1 受檢者的準(zhǔn)備：病人空腹12h，不飲酒24h后采集血樣。體檢對(duì)象抽血前應(yīng)有兩周的的正常狀況記錄。注意有無應(yīng)用影響測(cè)試項(xiàng)目的藥物。此外，對(duì)于體檢者，采血的季節(jié)都應(yīng)做相關(guān)記錄，因?yàn)闃颖局懈黜?xiàng)目的含量有季節(jié)性變動(dòng)，為了前后比較應(yīng)在每年同一季節(jié)檢驗(yàn)。應(yīng)囑體檢對(duì)象在抽血前24小時(shí)內(nèi)不做劇烈運(yùn)動(dòng)。2.2 靜脈采血：除非是臥床的病人，一般在采血時(shí)取坐位。體位影響水分在血管內(nèi)外的分布，會(huì)影響測(cè)試項(xiàng)目的濃度。

3、在采血前至少應(yīng)靜坐5分鐘，一般從肘靜脈取血，使用止血帶的時(shí)間不超過1分鐘，穿刺成功后立即松開止血帶。2.3 抗凝劑：血漿使用0.1mg/ml肝素作為抗凝劑。2.4 標(biāo)本處理：血標(biāo)本室溫放置30min45min后離心分離血清或血漿，在兩小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢；如兩小時(shí)內(nèi)不能檢測(cè)完畢，將離心分離血清或血漿置潔凈試管加蓋2-8保存。3試劑3.1 試劑：本科使用湖南永和陽光科技有限責(zé)任公司UA試劑盒，為液體雙試劑，各組分如下：組 成R1:R2=4:1（混合后溶液的濃度）R1：檢測(cè)試劑1Good”S緩沖液0.1mmol/L3，5-DHBS1.2mmol/LR2：檢測(cè)試劑2URO500KU/LPOD5.0KU/L

4、4-AAP1.10mmol/L尿酸標(biāo)準(zhǔn)液： 590umol/L 3.2 尿酸校準(zhǔn)血清：使用湖南永和陽光科技有限責(zé)任公司提供的40項(xiàng)校準(zhǔn)血清。校準(zhǔn)頻次：空白定標(biāo)：每日需做試劑空白定標(biāo)。全點(diǎn)定標(biāo)：試劑換批號(hào)使用時(shí)或質(zhì)控結(jié)果超過規(guī)定的±2SD范圍，需要全點(diǎn)定標(biāo)。3.3 試劑與校準(zhǔn)血清的穩(wěn)定性：原包裝試劑儲(chǔ)存在2-8至標(biāo)簽所示失效日期。試劑開瓶后，在儀器中至少可保存30天。試劑儲(chǔ)存在18-22穩(wěn)定28天，試劑應(yīng)避免污染。試劑R1, R2顏色為無色，當(dāng)試劑變色，按照試劑失效處理。多項(xiàng)校準(zhǔn)血清在2-8儲(chǔ)存至標(biāo)簽所示失效日期，復(fù)溶后-20保存，可穩(wěn)定一個(gè)月，只可凍融一次，避免反復(fù)凍融。參見校準(zhǔn)血清

5、說明書。試劑盒配備的水標(biāo)準(zhǔn)液在2-8儲(chǔ)存至標(biāo)簽所示失效日期，開瓶后2-8儲(chǔ)存避免污染，可穩(wěn)定2個(gè)月。4儀器KONELAB 30型號(hào)儀器。性能：波長(zhǎng)505nm，儀器測(cè)定吸光度的靈敏度應(yīng)達(dá)到0.001ABS以上。5操作樣品為血清或肝素抗凝血漿。本法為終點(diǎn)法。參數(shù)見后附，附錄A。試劑參數(shù)設(shè)置、定標(biāo)操作以及樣本檢測(cè)常規(guī)操作，見儀器操作規(guī)程。6計(jì)算A測(cè)定C = × C oA標(biāo)準(zhǔn)式中： c 測(cè)定尿酸濃度，mol/L； A = A2 - A1A測(cè)定 標(biāo)本管吸光度； A標(biāo)準(zhǔn) 標(biāo)準(zhǔn)管吸光度；CO 校準(zhǔn)血清尿酸濃度，mol/L；7操作性能7.1 精密度：批內(nèi)CV8.3%，批間CV10.0%。7.2 準(zhǔn)確

6、度：檢測(cè)結(jié)果的相對(duì)不準(zhǔn)確度±10%。7.3 靈敏度：尿酸濃度為：330mol /L時(shí)，顯色吸光度為0.1230.134。7.4 可報(bào)告范圍：樣本:R1:R2 =1:40:10時(shí)，測(cè)定上限為1180mol /L。7.5 特異性：測(cè)量值在給定值的95%-105范圍內(nèi)。7.6 干擾：內(nèi)源性干擾物為Hb 1000mg/ml、TG 2000mg/ml、BIL 30mg/ml、VitC 300mg/ml對(duì)測(cè)試結(jié)果無明顯影響。8參考值男：210430mol /L；女：150360mol /L。9臨床意義尿酸是核酸中嘌呤分解代謝的最終產(chǎn)物，由腎臟排泄，隨尿液排出體外。腎臟疾病如急慢性腎炎、腎結(jié)石、痛風(fēng)、以及