第五章微生物營養(yǎng)與培養(yǎng)基習(xí)題及答案

1、第五章微生物營養(yǎng)習(xí)題及參考答案一、名詞解釋1. 生長因子：2. 選擇培養(yǎng)基(SeC I ected med i a):3. 基礎(chǔ)培養(yǎng)基4. 合成培養(yǎng)基5. 化能異養(yǎng)微生物6. 化能自養(yǎng)微生物7. 光能自養(yǎng)微生物8. 光能異養(yǎng)微生物9. 單純擴(kuò)散10. 促進(jìn)擴(kuò)散".主動(dòng)運(yùn)輸12.基團(tuán)移位的內(nèi)源調(diào)節(jié)14. 滲透壓15. 水活度二、填空題1微生物生長繁殖所需六大營養(yǎng)要素是、 、 、和等。2.碳源物質(zhì)為微生物提供和,碳源物質(zhì)主要有、 、 、等。3.生長因子主要包括、和,其主要作用是、。4. 根據(jù)，微生物可分為自養(yǎng)型和異養(yǎng)型。5. 根據(jù)，微生物可分為光能營養(yǎng)型和化能營養(yǎng)型。6. 根據(jù)，微生物可

2、分為無機(jī)營養(yǎng)型和有機(jī)營養(yǎng)型。7根據(jù)碳源、能源和電子供體性質(zhì)的不同，微生物的營養(yǎng)類型可分為8. 按用途劃分，培養(yǎng)基可分為等4種類型。9. 常用的培養(yǎng)基凝固劑有、和10. 營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的方式有、三、選擇題（4個(gè)答案選1）1.下列物質(zhì)可用作生長因子的是（)oA.葡萄糖 B.纖維素D.葉酸2.大腸桿菌屬于（）型的微生物。A.光能無機(jī)自養(yǎng) 機(jī)異養(yǎng)B.光能有機(jī)異養(yǎng) C.化能無機(jī)自養(yǎng)D.化能有3.硝化細(xì)菌屬于（）型的微生物。A.光能無機(jī)自養(yǎng) 有機(jī)異養(yǎng)B.光能有機(jī)異養(yǎng) C.化能無機(jī)自養(yǎng)D.化能4. 某種細(xì)菌可利用無機(jī)物為電子供體而有賈稀為碳源，屬于（） 型的微生物。A.兼養(yǎng)型 B.異養(yǎng)型 C.自養(yǎng)型 D.

3、原養(yǎng)型5、化能無機(jī)自養(yǎng)微生物可利用（）為電子供體。6. 用來分離產(chǎn)胞外蛋白酶菌株的酪素培養(yǎng)基是一種（ ）oA.基礎(chǔ)培養(yǎng)基 B.加富培養(yǎng)基 C.選擇培養(yǎng)基D.鑒別培養(yǎng)基7. 固體培養(yǎng)基中瓊脂含量一般為（ ）o%8. 用來分離固氮菌的培養(yǎng)基中缺乏氮源，這種培養(yǎng)基是一種（ ）。A.基礎(chǔ)培養(yǎng)基B.加富培養(yǎng)基C.選擇培養(yǎng)基D.鑒別培養(yǎng)基9. 水分子可通過（）進(jìn)入細(xì)胞。A.主動(dòng)運(yùn)輸 B.擴(kuò)散C.促進(jìn)擴(kuò)散D.基團(tuán)轉(zhuǎn)位10. 被運(yùn)輸物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞前后物質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化的是（）。A.主動(dòng)運(yùn)輸 B.擴(kuò)散C.促進(jìn)擴(kuò)散D.基團(tuán)轉(zhuǎn)位四、是非題1. 某些假單胞菌可以利用多達(dá)90多種以上的碳源物質(zhì)。2. 碳源對(duì)配制任何微生物的

4、培養(yǎng)基都是必不可少的。3. 氨基酸在碳源缺乏時(shí)可被微生物用作碳源物質(zhì)，但不能提供能 源。4. 培養(yǎng)營養(yǎng)缺陷型微生物的培養(yǎng)基必須同時(shí)加入維生素、氨基酸、 瞟吟及喀啜。5. 為使微生物生長旺盛，培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度越高越好。6. 對(duì)含葡萄糖的培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌時(shí)可以°C加熱20min即可。7. 半固體培養(yǎng)基常用來觀察微生物的運(yùn)動(dòng)特征。8. 基礎(chǔ)培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)所有類型的微生物。9. 伊紅美藍(lán)（EMB）培養(yǎng)基中，伊紅美藍(lán)的作用是促進(jìn)大腸桿菌 的生長。10. 在促進(jìn)擴(kuò)散過程中，載體蛋白對(duì)被運(yùn)輸物質(zhì)具有較高的專一 性，一種載體蛋白只能運(yùn)輸一種物質(zhì)。五、簡答題1. 能否精確地確定微生物對(duì)微

5、量元素的需求，為什么2. 為什么生長因子通常是維生素、氨基酸、嗥吟和口密啜，而葡萄 糖通常不是生長因子3. 以伊紅美藍(lán)（EMB）培養(yǎng)基為例，分析鑒別培養(yǎng)基的作用原理。4. 與促進(jìn)擴(kuò)散相比，微生物通過主動(dòng)運(yùn)輸吸收營養(yǎng)物質(zhì)的優(yōu)點(diǎn)是 什么5. 舉例說明微生物在生長過程中培養(yǎng)基PH值可能發(fā)生的變化， 并提出解決方法。6. 有一培養(yǎng)基如下：甘露醇,MgSo4, K2HPO4, H2PO4, CuSO4, NaCI,CaCO3,蒸徭水。試述該培養(yǎng)基的A.碳素來源；B.氮素來源；C.礦質(zhì)來源，該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng)哪類微生物7. 列表比較微生物的四大營養(yǎng)類型。8. 分析下述培養(yǎng)基各組分的作用，依據(jù)其功能推測其所

6、屬培養(yǎng) 基的類型：A. 麥康開培養(yǎng)液：蛋白腺20g,乳糖10g,牛膽酸鹽5g, NaCl 5g, 水IOOOmI,加1%中性紅5ml分裝與有發(fā)酵管的試管km?滅菌15min, 用于腸道桿菌培養(yǎng)。B. 檸檬酸鹽培養(yǎng)基：NH4H2PO4 1g, K2HPO4 1g, NaCl 5g, MgSO4 , 檸檬酸鈉2g,瓊脂18g,水10OOnlI, 加1%渙麝香草酚蘭IOnlI, cm2 滅菌20分鐘，制成斜面，用于細(xì)菌利用檸檬酸鹽試驗(yàn)。9. 簡述什么是主動(dòng)運(yùn)輸和基團(tuán)轉(zhuǎn)位二者有什么區(qū)別和聯(lián)系六、論述題1以紫色非硫細(xì)菌為例，解釋微生物的營養(yǎng)類型可變性及對(duì)環(huán)境 條件變化適應(yīng)能力的靈活性。2. 如果要從環(huán)境

7、中分離得到能利用苯作為碳源和能源的微生物純 培養(yǎng)物，你該如何設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)3. 某些微生物對(duì)生長因子的需求是具有較高的專一性，可利用它 們通過"微生物分析” (microbiologicaI assay)對(duì)樣品中維生素或 氨基酸進(jìn)行定量。試設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)利用微生物對(duì)某一樣品維生素B2的含 量進(jìn)行分析。4. 某學(xué)生利用酪素培養(yǎng)基平板篩選產(chǎn)胞外蛋白酶細(xì)菌，在酪素培 養(yǎng)基平板上發(fā)現(xiàn)有幾株菌的菌落周圍有蛋白水解圈，是否能僅憑蛋白 水解圈與菌落直徑比大，就斷定該菌株產(chǎn)胞外蛋白酶的能力就大，而 將其選擇為高產(chǎn)蛋白酶的菌種，為什么5. 以大腸桿菌磷酸烯醇式丙酮酸-糖磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)（PTS）為例 解釋基團(tuán)轉(zhuǎn)位。

8、6. 試分析在主動(dòng)運(yùn)輸中，ATP結(jié)合盒式轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白） 系統(tǒng)和膜結(jié)合載體蛋白（透過酶）系統(tǒng)的運(yùn)行機(jī) 機(jī)及相互區(qū)別。7. 試設(shè)計(jì)一種分離纖維素分解菌的培養(yǎng)基，并說明各營養(yǎng)物質(zhì)的 主要功能（只寫明成分，不要求定量）。8. 試從能源、碳源的角度來比較Anabaena、RhOdOSPirillUmyNitrObaCter、四種微生物的營養(yǎng)類型。微生物營養(yǎng)習(xí)題參考答案一、名詞解釋1. 生長因子：微生物生長不可缺少的微量有機(jī)物，包括維生素， 氨基酸及堿基等2. 選擇培養(yǎng)基：是用來將某種或某類微生物從混雜的微生物群 體中分離出來的培養(yǎng)基。3. 基礎(chǔ)培養(yǎng)基：是含有一般微生物生長繁殖所需的基本營養(yǎng)物

9、 質(zhì)的培養(yǎng)基。4. 合成培養(yǎng)基：是由化學(xué)成分完全了解的物質(zhì)配制而成的培養(yǎng) 基，也稱化學(xué)限定培養(yǎng)基。5. 化能異養(yǎng)微生物：以有機(jī)碳化合物為能源，碳源和供氫體也 是有機(jī)碳化合物的微生物。6. 化能自養(yǎng)微生物：利用無機(jī)化合物氧化過程中釋放的能量和 以CO?為碳源生長的微生物。7. 光能自養(yǎng)微生物：利用光作為能源，以CO?為基本碳源，供氫體是還原在無機(jī)化合物的微生物。8. 光能異養(yǎng)微生物：以光為能源，以有機(jī)碳化合物作為碳源和 供氫體營光合生長的微生物。9單純擴(kuò)散又稱被動(dòng)運(yùn)輸，只疏水型雙分子層細(xì)胞膜（包括孔 蛋白在內(nèi)）在無載體蛋白的參與下，單純依靠物理擴(kuò)散的方式讓許多 小分子，非電離分子尤其是親水性小分

10、子被動(dòng)通過的一種物質(zhì)運(yùn)送方 式。通過這種方式運(yùn)送的物質(zhì)主要是O2, CO2,乙醇和某些氨基酸分子。10. 促進(jìn)擴(kuò)散 指溶質(zhì)在運(yùn)送過程中，必須借助存在于細(xì)胞膜上的 底物特異載體蛋白的協(xié)助，但步消耗能量的一類擴(kuò)散性運(yùn)送方式。載 體蛋白有時(shí)稱作滲透酶，移位酶或移位蛋白，一般通過誘導(dǎo)產(chǎn)生，它 借助自身構(gòu)象的變化，在不耗能的條件下可加速把膜外高濃度的溶質(zhì) 擴(kuò)散到膜內(nèi)，直至膜內(nèi)外該溶質(zhì)的濃度相等為止。行主動(dòng)運(yùn)輸指一類須提供能量（包括ATP,質(zhì)子動(dòng)勢或離子泵 等）并通過細(xì)胞膜上特異性載體蛋白構(gòu)想的變化，而使膜外環(huán)境中低 濃度的溶質(zhì)運(yùn)入膜內(nèi)的一種運(yùn)送方式。12.基團(tuán)移位 指一類既需要特異性載體蛋白的參與，又需

11、耗能的 一種物質(zhì)運(yùn)送方式。其特點(diǎn)是溶質(zhì)在運(yùn)送前后還會(huì)發(fā)生分子結(jié)構(gòu)的變 化。主要用于運(yùn)送各種糖類，核昔酸，丁酸和腺嚟吟等物質(zhì)?？苛姿?轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)即磷酸烯醇式丙酮酸-己糖磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)進(jìn)行。的內(nèi)源調(diào)節(jié) 由于微生物的生長，代謝過程中會(huì)產(chǎn)生引起培養(yǎng)基 的PH改變的代謝產(chǎn)物，如步及時(shí)調(diào)節(jié)，就會(huì)抑制甚至殺死自身，因 而在設(shè)計(jì)此類培養(yǎng)基時(shí)，就要考慮培養(yǎng)基成分對(duì)PH的調(diào)節(jié)能力，這 種通過培養(yǎng)基內(nèi)內(nèi)在成分所起的調(diào)節(jié)作用，稱PH的內(nèi)源調(diào)節(jié)。14. 滲透壓 是某水溶液中一個(gè)可用壓力來量度的物化指標(biāo)。它表 示兩種不同濃度的溶液間若被一個(gè)半透性薄膜隔開時(shí)，稀溶液中的水 分子會(huì)因水勢的推動(dòng)而透過薄膜流向濃溶液，直至濃溶液

12、所產(chǎn)生的機(jī) 械壓力足以使兩邊水分子的進(jìn)出達(dá)到平衡為止，這時(shí)由濃溶液中的溶 質(zhì)所產(chǎn)生的機(jī)械壓力，既為它的滲透壓值。15. 水活度 表示在天然或人為環(huán)境中，微生物可實(shí)際利用的自由 水或游離水的含量。其定量含義為：在同溫同壓下，某溶液的蒸汽壓 與純水蒸汽壓之比。二、填空題1. 碳源，氮源，無機(jī)鹽，生長因子，水，能源2. 碳素來源，能源，糖，有機(jī)酸，醇，脂，怪3. 維生素，氨基酸，嚟吟和口密啜，作為酶的輔基或輔酶，合成細(xì) 胞結(jié)構(gòu)及組分的前體4. 碳源性質(zhì)5. 能源6. 電子供體7. 光能無機(jī)自養(yǎng) 光能有機(jī)異養(yǎng) 化能無機(jī)自養(yǎng) 化能有機(jī)異養(yǎng)8. 基礎(chǔ)，加富，鑒別，選擇9. 瓊脂，明膠，硅膠10. 擴(kuò)散，促

13、進(jìn)擴(kuò)散，主動(dòng)運(yùn)輸，膜泡運(yùn)輸三、選擇題1. D； 2. D； 3. C; 4. A； 5 B; 6. D； 7. B; 8. C; 9. B; 10. D四、是非題1. + 2. 3. 4. 5. 6. 7. + 8. 9. 10.五、簡答題1. 能否精確地確定微生物對(duì)微量元素的需求，為什么答：不能。微生物對(duì)微量元素需要量極低；微量元素常混雜在天然 有機(jī)化合物、無機(jī)化學(xué)試劑、自來水、蒸徭水、普通玻璃器皿中；細(xì) 胞中微量元素含量因培養(yǎng)基組分含量不恒定、藥品生產(chǎn)廠家及批次、 水質(zhì)、容器等條件不同而變化，難以定量分析檢測。2. 為什么生長因子通常是維生素、氨基酸、嗥吟和喀噴，而葡萄 糖通常不是生長因子

14、答：維生素、氨基酸或瞟吟（喀啜）通常作為酶的輔基或輔酶，以 及用于合成蛋白質(zhì)、核酸，是微生物生長所必需且需要量很小，而微 生物（如營養(yǎng)缺陷型菌株）自身不能合成或合成量不足以滿足機(jī)體生 長需要的有機(jī)化合物。而葡萄糖通常作為碳源和能源物質(zhì)被微生物利 用，需要量較大，而且其他一些糖類等碳源物質(zhì)也可以代替葡萄糖滿 足微生物生長所需。3. 以伊紅美藍(lán)（EMB）培養(yǎng)基為例，分析鑒別培養(yǎng)基的作用原理。答：EMB培養(yǎng)基含有伊紅和美藍(lán)兩種染料作為指示劑，大腸桿菌 可發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸造成酸性環(huán)境時(shí)，這兩種染料結(jié)合形成復(fù)合物，使大 腸桿菌菌落帶金屬光澤的深紫色，而與其他不能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸的微生 物區(qū)分開。4. 與促進(jìn)擴(kuò)散

15、相比，微生物通過主動(dòng)運(yùn)輸吸收營養(yǎng)物質(zhì)的優(yōu)點(diǎn)是 什么答：主動(dòng)運(yùn)輸與促進(jìn)擴(kuò)散相比的優(yōu)點(diǎn)在于可以逆濃度運(yùn)輸營養(yǎng)物 質(zhì)。通過促進(jìn)擴(kuò)散將營養(yǎng)物質(zhì)運(yùn)輸進(jìn)入細(xì)胞，需要環(huán)境中營養(yǎng)物質(zhì)濃 度高于胞內(nèi)，而在自然界中生長的微生物所處環(huán)境中的營養(yǎng)物質(zhì)含量 往往很低，在這種情況下促進(jìn)擴(kuò)散難以發(fā)揮作用。主動(dòng)運(yùn)輸則可以逆 濃度運(yùn)輸，將環(huán)境中較低濃度什養(yǎng)物質(zhì)運(yùn)輸進(jìn)入胞內(nèi)，保證微生物正 常生長繁殖。5. 舉例說明微生物在生長過程中培養(yǎng)基PH值可能發(fā)生的變化， 并提出解決方法。答：微生物在生長繁殖和積累代謝產(chǎn)物的過程中，培養(yǎng)基的PH會(huì) 發(fā)生如下變化：(1) 如微生物在含糖基質(zhì)上生長，會(huì)產(chǎn)酸而使PH下降。(2) 微生物在分解蛋白質(zhì)

16、和氨基酸時(shí)，會(huì)產(chǎn)NHs而使PH上升。(3) 以(NHQ 2SO4作N源，會(huì)過剩So產(chǎn)，而使PH下降。(4) 分解利用陽離子化合物如：NaNO3,會(huì)過剩Na*而使PH上升。為了維持培養(yǎng)基PH值的相對(duì)恒定，常常在培養(yǎng)基中加入緩沖物質(zhì) 如磷酸鹽，碳酸鹽等，以緩和PH的劇烈變化。6. 有一培養(yǎng)基如下：甘露醇，MgSO4, K2HPO4, H2PO4, CuSO4, NaCI, CaCO3,蒸鐳水。試述該培養(yǎng)基的A.碳素來源；B.氮素來源；C.礦質(zhì) 來源，該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng)哪類微生物答：(1)該培養(yǎng)基的碳素來源和能量來源均來自甘露醇。(2) 該培養(yǎng)基未提供氮素來源，根據(jù)所學(xué)知識(shí)，只有能固氮的微 生物才能

17、在無氮培養(yǎng)基上生長。(3) 該培養(yǎng)基的礦質(zhì)營養(yǎng)物質(zhì)包括：Mg", K： Cu2+, Na： PO43',S(4) HPO42', PO, CaCO3主要用來作緩沖物質(zhì)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的PH值,以保持PH不變。據(jù)此我們可推知該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng)自生固氮菌等微生物。7. 列表比較微生物的四大營養(yǎng)類型營養(yǎng)類型能源氫供體基本碳源實(shí)例光能無機(jī)營養(yǎng)型（光能自養(yǎng)型）光無機(jī)物C02藍(lán)細(xì)菌、紫硫細(xì)菌、綠硫細(xì)菌、藻類光能有機(jī)營養(yǎng)型（光能異養(yǎng)型）光有機(jī)物C02及簡單有機(jī)物紅螺菌科的細(xì)菌（即紫色無硫細(xì)菌）化能無機(jī)營無硝化細(xì)菌、硫化細(xì)菌、鐵養(yǎng)型機(jī)無機(jī)物C02細(xì)菌、（化能自養(yǎng)物氫細(xì)菌、硫磺細(xì)菌等型）化能

18、有機(jī)營養(yǎng)型（化能異養(yǎng)型）無機(jī)物有機(jī)物有機(jī)物絕大多數(shù)細(xì)菌和全部真核生物8. 分析下述培養(yǎng)基各組分的作用，依據(jù)其功能推測其所屬培養(yǎng)基 的類型：A. 麥康開培養(yǎng)液：蛋白 20g,乳糖10g,牛膽酸鹽5g,NaCI 5g, 水IOOOmI,加1%中性紅5ml分裝與有發(fā)酵管的試管k滅菌15min, 用于腸道桿菌培養(yǎng)。B. 檸檬酸鹽培養(yǎng)基：NH4H2PO4 1g, K2HPO4 1g, NaCl 5g, MgSO4 , 檸檬酸鈉2g,瓊脂18g,水10OOnlI, 加1%渙麝杳草酚蘭IOnlI, cm2 滅菌20分鐘，制成斜面，用于細(xì)菌利用檸檬酸鹽試驗(yàn)。答：A 功能B功能蛋白牒氮院NH4H2PO4氮源乳糖

19、碳源K2HPO4生長因子NaCl無機(jī)物NaCl 、 MgSO4 、K2HPO4無機(jī)物牛膽酸鹽生長因子檸檬酸鈉碳源PH值適宜菌生長瓊脂凝固劑1%中性紅指示劑1%渙麝香草酚蘭指示劑，判斷能否利用檸檬酸鈉發(fā)酵管判斷是否產(chǎn)氣PH值適宜菌生長屬于半組合培養(yǎng)基屬于合成培養(yǎng)基9. 簡述什么是主動(dòng)運(yùn)輸和基團(tuán)轉(zhuǎn)位二者有什么區(qū)別和聯(lián)系答：主動(dòng)運(yùn)輸是物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的一種方式，即細(xì)胞會(huì)針對(duì)某些特定物質(zhì)通過消耗能量，借助載體進(jìn)行逆濃度的輸送?；鶊F(tuán)轉(zhuǎn)位是一 種特殊的主動(dòng)運(yùn)輸，其基本特征與后者一樣，區(qū)別在于被轉(zhuǎn)運(yùn)的物質(zhì) 一旦進(jìn)入細(xì)胞后，分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，通常是接上某種基團(tuán)（通常為 磷酸基團(tuán)），使之不能穿過細(xì)胞膜重新回到細(xì)胞外

20、。六、論述題1. 以紫色非硫細(xì)菌為例，解釋微生物的營養(yǎng)類型可變性及對(duì)環(huán)境 條件變化適應(yīng)能力的靈活性。答：紫色非硫細(xì)菌在沒有有機(jī)物時(shí)可同化C02進(jìn)行自養(yǎng)生活，有有 機(jī)物時(shí)利用有機(jī)物進(jìn)行異養(yǎng)生活，在光照及厭氧條件下利用光能進(jìn)行 光能營養(yǎng)生活，在黑暗及好氧條件下利用有機(jī)物氧化產(chǎn)生的化學(xué)能進(jìn) 行化能營養(yǎng)生活。2. 如果要從環(huán)境中分離得到能利用苯作為碳源和能源的微生物純 培養(yǎng)物，你該如何設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)答：（1）從苯含量較高環(huán)境中采集土樣或水樣；（2）配制培養(yǎng)基，制備平板，一種僅以苯作為唯一碳源（A）,另一種不含任何碳源作為 對(duì)照（B）； （3）將樣品適當(dāng)適稀釋（十倍稀釋法），涂布A平飯；將 平板置于適當(dāng)溫度條

21、件下培養(yǎng)，觀察是否有菌落產(chǎn)生；（5）將A平板 上的菌落編號(hào)并分別轉(zhuǎn)接至B平板，置于相同溫度條件下培養(yǎng)（在B 平板上生長的菌落是可利用空氣Co的自養(yǎng)型微生物）；（6）挑取在A 平板上生長而不在B平板上生長的菌落，在一個(gè)新的A平板上劃線、 培養(yǎng)，獲得單菌落，初步確定為可利用苯作為碳源和能源的微生物純 培養(yǎng)物；（刀將初步確定的目標(biāo)菌株轉(zhuǎn)接至以苯作為惟一碳源的液體 培養(yǎng)基中進(jìn)行搖瓶發(fā)酵實(shí)驗(yàn)，利用相應(yīng)化學(xué)分析方法定量分析該菌株 分解利用苯的情況。3. 某些微生物對(duì)生長因子的需求是具有較高的專一性，可利用它 們通過“微生物分析” CmicrobiologicaI assay）對(duì)樣品中維生素或 氨基酸進(jìn)行定

22、量。試設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)利用微生物對(duì)某一樣品維生素B2的含 量進(jìn)行分析。答：（1）將缺乏維生素B2但含有過量其他營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基分裝 于一系列試管，分別定量接人用于測定的微生物；（2）在這些試管中 分別補(bǔ)加不同量的維生素Bm標(biāo)準(zhǔn)樣品及待測樣品，在適宜條件下培 養(yǎng)；（3）以微生物生長量（如測定0D600nm）值對(duì)標(biāo)準(zhǔn)樣品的量作圖， 獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線；（4）測定含待測樣品試管中微生物生長量，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn) 曲線，計(jì)算待測樣品中維生素氐的含量。4. 某學(xué)生利用酪素培養(yǎng)基平板篩選產(chǎn)胞外蛋白酶細(xì)菌，在酪素培 養(yǎng)基平板上發(fā)現(xiàn)有幾株菌的菌落周圍有蛋白水解圈，是否能僅憑蛋白 水解圈與菌落直徑比大，就斷定該菌株產(chǎn)胞外蛋白酶的能力就

23、大，而 將其選擇為高產(chǎn)蛋白酶的菌種，為什么答：不能。因?yàn)?，?）不同微生物的營養(yǎng)需求、最適生長溫度等生 長條件有差別，在同一平板上相同條件下的生長及生理狀況不同；（2） 不同微生物所產(chǎn)蛋白酶的性質(zhì)（如最適催化反應(yīng)溫度、PH、對(duì)底物酪 素的降解能力等）不同；（3）該學(xué)生所采用的是一種定性及初步定量的 方法，應(yīng)進(jìn)一步針對(duì)獲得的幾株菌分別進(jìn)行培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件優(yōu)化， 并在分析這些菌株所產(chǎn)蛋白酶性質(zhì)的基礎(chǔ)上利用搖瓶發(fā)酵實(shí)驗(yàn)確定 蛋白酶高產(chǎn)菌株。5. 以大腸桿菌磷酸烯醇式丙酮酸-糖磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)（PTS）為例 解釋基團(tuán)轉(zhuǎn)位。答：大腸桿菌PTS由5種蛋白質(zhì)（酶I、酶Il a、酶lib、酶IIC 及熱穩(wěn)定蛋白

24、質(zhì)HPr）組成，酶Il a、酶lib、酶Ilc 3個(gè)亞基構(gòu)成酶 Il o酶丨和HPr為非特異性細(xì)胞質(zhì)蛋白，酶IIa也是細(xì)胞質(zhì)蛋白，親 水性酶Ilb與位于細(xì)胞膜上的疏水性酶IIC相結(jié)合。酶Il將一個(gè)葡萄 糖運(yùn)輸進(jìn)入胞內(nèi)，磷酸烯醇式丙酮酸上的磷酸基團(tuán)逐步通過酶I和 HPr的磷酸化和去磷酸化作用，最終在酶Il的作用下轉(zhuǎn)移到葡萄糖， 這樣葡萄糖在通過PTS進(jìn)入細(xì)胞后加上了個(gè)個(gè)磷酸基團(tuán)。6. 試分析在主動(dòng)運(yùn)輸中，ATP結(jié)合盒式轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白） 系統(tǒng)和膜結(jié)合載體蛋白（透過酶）系統(tǒng)的運(yùn)行機(jī) 機(jī)及相互區(qū)別。答：（1） ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白常由兩個(gè)疏水性跨膜結(jié)構(gòu)域與胞內(nèi)的兩個(gè) 核苗酸結(jié)合結(jié)構(gòu)域形成復(fù)合物，跨膜結(jié)構(gòu)域在膜上形成一個(gè)孔，核昔 酸結(jié)合結(jié)構(gòu)則可結(jié)合ATPO ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白發(fā)揮功能還需要存在于周質(zhì) 空間（G +菌）或附著在質(zhì)膜外表面O的底物結(jié)合蛋白的幫助。底 物結(jié)合蛋白與被動(dòng)運(yùn)輸物質(zhì)結(jié)合后再與ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白結(jié)合，借助于 ATP水解釋放的能量，ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白將被運(yùn)輸物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入胞內(nèi)。(2) 膜結(jié)合載體蛋白也是跨膜蛋白，被運(yùn)輸物質(zhì)在膜外表面與透過酶結(jié) 合，而膜內(nèi)外質(zhì)子濃度差在消失過程中，被運(yùn)輸物