重慶大學微生物實驗報告

1、開課學院、試驗室 城環(huán)學院市政與環(huán)境工程試驗爭辯中心 試驗時間 ： 年 月 日課程名稱 試驗項目名 稱 試驗項目類型驗證演示綜合設計其他指導老師成 績 一、試驗目的1. 學習使用血球計數(shù)板進行微生物計數(shù)的方法。2. 生疏活性污泥中常見的微生物，后生動物的形態(tài)及菌膠團的外形色澤3. 生疏水中常見藻類。二、試驗原理顯微鏡直接計數(shù)法就是利用血球計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù)，其原理是：將經過適當稀釋的菌懸液放在血球計數(shù)板載玻片與蓋玻片之間的計數(shù)室中，在顯微鏡下進行計數(shù)由于計數(shù)室的容積是肯定的 （0.1mm2）， 所以可以依據(jù)在顯微鏡下觀看到的微生物數(shù)目來換算 成單位體積內的微生物總數(shù)目。血球計數(shù)板通常是一

2、塊特制的載玻片（如圖3-1)，其上由四條槽構成三個平臺，中間的平臺又被一短橫槽隔成兩半，每一邊的平臺上各刻有一個 方格網 （如圖3-2 ），方格網中間是邊長為 1皿的計數(shù)室，當蓋上蓋玻片后，載玻片與蓋玻片之間的高度為0.1mm，這樣就形成一 圖3-1 a. 正面圖 b. 側面圖0.1mm3 的計數(shù)室個體積為0.1mm3 的計數(shù)室。 。 計數(shù)室的刻度一般有兩種規(guī)格：一種是一個大方格分成25個中方格，而每個中方格又分成 16個小方格 （如圖3-3A），另一種是一個大方格分成16個中方格，而每個中方格 又分成25 個小方格（如圖3-3B)。但無論是哪種規(guī)格的計數(shù)板，每一個大方格中的小方格數(shù)是相同的，

3、即16X25=400小方格。計數(shù)時如接受16中方格X25小方格的計數(shù)板時，就按對角線方位數(shù)取左上、左下、 右上、右下的四個中方格內的菌數(shù)。假如是25中方格X16小方格的計數(shù)板，除數(shù)取上述 四個中方格外，還須數(shù)取其中心的一中方格的菌數(shù)位于中方格線上的菌體，一般只計此中格的上方及右方格線上的菌體。16 中方格 X25 小方格計數(shù)板：菌數(shù) （個毫升） =4 個中方格中總菌數(shù) X16X101OOOX 稀釋倍數(shù)4 25 中方格x16小方格計數(shù)板：菌數(shù) （個毫升） = 5 個中方格內總菌數(shù) X25XlOXlOOOX 稀釋倍數(shù)5圖3-2 圖3-3三、使用儀器、材料四、試驗步驟（一） 微生物計數(shù)1.在加樣前，

4、先對計數(shù)板的計數(shù)室進行鏡檢。若有污物，則需清洗后才能進行計數(shù)。2.本試驗以酵母菌液為樣品。將酵母菌液搖勻，用無菌的細口滴管吸取少許，放一滴在血球計數(shù)室上，輕輕蓋上蓋玻片，不能有氣泡，不能讓多余的菌液頂起，多余的菌液讓其自然溢出。3.將血球計數(shù)板置于顯微鏡載物臺上，先用低倍鏡觀看全貌，找到計數(shù)室所在位置，然后換成高倍鏡進行計數(shù)。假如酵母出芽，芽體太小達到母細胞的一半時，即作兩個菌體計數(shù)。4.計數(shù)時若發(fā)覺菌液太濃或太稀 ，需重新調整稀釋度后再計數(shù)，一般樣品釋釋度要求每個中方格內有 20 個左右菌體為好，登記稀釋倍數(shù)，以供計算。5.參考前面的計數(shù)公式，計數(shù)菌數(shù)。6.計數(shù)完畢，血球計數(shù)板要馬上清洗潔凈

5、，并用吸水紙吸干，最終用擦鏡紙擦潔凈并放回盒內。（二）活性污泥的觀看在生物法處理廢水中，對曝氣池活性污泥的觀看是廢水處理過程中最常用的檢驗手段 之一。通過對活性污泥中微形動物（原生動物、后生動物）及菌膠團的觀看，能準時了解處理請況，以利于準時實行補救措施。1. 取活性污泥法曝氣池混合液一小滴，放在潔凈的載玻片中心。2. 當心地用潔凈的蓋玻片掩蓋，掩蓋后片內不能有氣泡形成。3. 將制備好的標本片放在載物臺上，先用低倍鏡觀看污泥中菌膠團的外形、色澤等，然后用高倍鏡觀看污泥中的微形動物，并畫出形態(tài)草圖。（三） 藻類的觀看藻類常消滅在廢水處理的氧化塘中，在給水水源中也經常大量消滅。1. 用吸管吸少許含有藻類的水樣，放一滴在載玻片中心，蓋上蓋玻片（片內不能有氣泡形成） 即成。2. 將制備好的標本片放