重慶大學(xué)微生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告

1、開課學(xué)院、試驗(yàn)室 城環(huán)學(xué)院市政與環(huán)境工程試驗(yàn)爭(zhēng)辯中心 試驗(yàn)時(shí)間 ： 年 月 日課程名稱 試驗(yàn)項(xiàng)目名 稱 試驗(yàn)項(xiàng)目類型驗(yàn)證演示綜合設(shè)計(jì)其他指導(dǎo)老師成 績(jī) 一、試驗(yàn)?zāi)康?. 學(xué)習(xí)使用血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)的方法。2. 生疏活性污泥中常見的微生物，后生動(dòng)物的形態(tài)及菌膠團(tuán)的外形色澤3. 生疏水中常見藻類。二、試驗(yàn)原理顯微鏡直接計(jì)數(shù)法就是利用血球計(jì)數(shù)板在顯微鏡下直接計(jì)數(shù)，其原理是：將經(jīng)過(guò)適當(dāng)稀釋的菌懸液放在血球計(jì)數(shù)板載玻片與蓋玻片之間的計(jì)數(shù)室中，在顯微鏡下進(jìn)行計(jì)數(shù)由于計(jì)數(shù)室的容積是肯定的 （0.1mm2）， 所以可以依據(jù)在顯微鏡下觀看到的微生物數(shù)目來(lái)?yè)Q算 成單位體積內(nèi)的微生物總數(shù)目。血球計(jì)數(shù)板通常是一

2、塊特制的載玻片（如圖3-1)，其上由四條槽構(gòu)成三個(gè)平臺(tái)，中間的平臺(tái)又被一短橫槽隔成兩半，每一邊的平臺(tái)上各刻有一個(gè) 方格網(wǎng) （如圖3-2 ），方格網(wǎng)中間是邊長(zhǎng)為 1皿的計(jì)數(shù)室，當(dāng)蓋上蓋玻片后，載玻片與蓋玻片之間的高度為0.1mm，這樣就形成一 圖3-1 a. 正面圖 b. 側(cè)面圖0.1mm3 的計(jì)數(shù)室個(gè)體積為0.1mm3 的計(jì)數(shù)室。 。 計(jì)數(shù)室的刻度一般有兩種規(guī)格：一種是一個(gè)大方格分成25個(gè)中方格，而每個(gè)中方格又分成 16個(gè)小方格 （如圖3-3A），另一種是一個(gè)大方格分成16個(gè)中方格，而每個(gè)中方格 又分成25 個(gè)小方格（如圖3-3B)。但無(wú)論是哪種規(guī)格的計(jì)數(shù)板，每一個(gè)大方格中的小方格數(shù)是相同的，

3、即16X25=400小方格。計(jì)數(shù)時(shí)如接受16中方格X25小方格的計(jì)數(shù)板時(shí)，就按對(duì)角線方位數(shù)取左上、左下、 右上、右下的四個(gè)中方格內(nèi)的菌數(shù)。假如是25中方格X16小方格的計(jì)數(shù)板，除數(shù)取上述 四個(gè)中方格外，還須數(shù)取其中心的一中方格的菌數(shù)位于中方格線上的菌體，一般只計(jì)此中格的上方及右方格線上的菌體。16 中方格 X25 小方格計(jì)數(shù)板：菌數(shù) （個(gè)毫升） =4 個(gè)中方格中總菌數(shù) X16X101OOOX 稀釋倍數(shù)4 25 中方格x16小方格計(jì)數(shù)板：菌數(shù) （個(gè)毫升） = 5 個(gè)中方格內(nèi)總菌數(shù) X25XlOXlOOOX 稀釋倍數(shù)5圖3-2 圖3-3三、使用儀器、材料四、試驗(yàn)步驟（一） 微生物計(jì)數(shù)1.在加樣前，

4、先對(duì)計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室進(jìn)行鏡檢。若有污物，則需清洗后才能進(jìn)行計(jì)數(shù)。2.本試驗(yàn)以酵母菌液為樣品。將酵母菌液搖勻，用無(wú)菌的細(xì)口滴管吸取少許，放一滴在血球計(jì)數(shù)室上，輕輕蓋上蓋玻片，不能有氣泡，不能讓多余的菌液頂起，多余的菌液讓其自然溢出。3.將血球計(jì)數(shù)板置于顯微鏡載物臺(tái)上，先用低倍鏡觀看全貌，找到計(jì)數(shù)室所在位置，然后換成高倍鏡進(jìn)行計(jì)數(shù)。假如酵母出芽，芽體太小達(dá)到母細(xì)胞的一半時(shí)，即作兩個(gè)菌體計(jì)數(shù)。4.計(jì)數(shù)時(shí)若發(fā)覺菌液太濃或太稀 ，需重新調(diào)整稀釋度后再計(jì)數(shù)，一般樣品釋釋度要求每個(gè)中方格內(nèi)有 20 個(gè)左右菌體為好，登記稀釋倍數(shù)，以供計(jì)算。5.參考前面的計(jì)數(shù)公式，計(jì)數(shù)菌數(shù)。6.計(jì)數(shù)完畢，血球計(jì)數(shù)板要馬上清洗潔凈

5、，并用吸水紙吸干，最終用擦鏡紙擦潔凈并放回盒內(nèi)。（二）活性污泥的觀看在生物法處理廢水中，對(duì)曝氣池活性污泥的觀看是廢水處理過(guò)程中最常用的檢驗(yàn)手段 之一。通過(guò)對(duì)活性污泥中微形動(dòng)物（原生動(dòng)物、后生動(dòng)物）及菌膠團(tuán)的觀看，能準(zhǔn)時(shí)了解處理請(qǐng)況，以利于準(zhǔn)時(shí)實(shí)行補(bǔ)救措施。1. 取活性污泥法曝氣池混合液一小滴，放在潔凈的載玻片中心。2. 當(dāng)心地用潔凈的蓋玻片掩蓋，掩蓋后片內(nèi)不能有氣泡形成。3. 將制備好的標(biāo)本片放在載物臺(tái)上，先用低倍鏡觀看污泥中菌膠團(tuán)的外形、色澤等，然后用高倍鏡觀看污泥中的微形動(dòng)物，并畫出形態(tài)草圖。（三） 藻類的觀看藻類常消滅在廢水處理的氧化塘中，在給水水源中也經(jīng)常大量消滅。1. 用吸管吸少許含有藻類的水樣，放一滴在載玻片中心，蓋上蓋玻片（片內(nèi)不能有氣泡形成） 即成。2. 將制備好的標(biāo)本片放