遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)課考題及答案

1、1.什么是減數(shù)分裂？主要有哪些特征？減數(shù)分裂是一種特殊方式的細(xì)胞分裂，僅在配子形成過程中發(fā)生。這一過程的特點(diǎn)是：連續(xù)進(jìn)行兩次核分裂，而染色體只復(fù)制一次，結(jié)果形成四個(gè)核，每個(gè)核只含單倍數(shù)的染色體，即染色體數(shù)削減一半，所以稱作減數(shù)分裂。另一個(gè)特點(diǎn)是前期特殊長(zhǎng)，而且變化簡(jiǎn)單，包括同源染色體的配對(duì)、交換與分別等。2.在哪些器官中可以觀看到減數(shù)分裂？其中哪些是抱負(fù)的試驗(yàn)材料？在適當(dāng)?shù)臅r(shí)期采集植物的花蕾或動(dòng)物的精巢。蠶豆花蕾，短腳斑腿蝗精巢。3.在減數(shù)分裂制片時(shí)，選擇合適的時(shí)期尤為重要，以蠶豆花蕾為例說明選擇過程。      1）取已固定好的花序

2、，按其花蕾大小，排列在小培育皿中2）撥開花蕾，先取中等大小的花蕾，取出花藥，放在載玻片上3）加一滴醋酸洋紅在花藥上，用鑷子夾碎花藥壁，散出花粉母細(xì)胞4）加蓋玻片，吸干四周染色液，用拇指適力下壓5）鏡檢4.在植物體的哪些部分可以觀看到有絲分裂？其中哪些是制片比較抱負(fù)的試驗(yàn)材料？高等植物體細(xì)胞的有絲分裂，主要發(fā)生在莖尖、根尖、形成層等分生組織。洋蔥根尖，蠶豆根尖。5.什么是固定？我們所做的試驗(yàn)中，最常用的固定劑成分是什么？固定是利用化學(xué)或物理的方法，使固定劑快速透入組織和細(xì)胞，將其殺死，使蛋白質(zhì)等物質(zhì)變性，但在形態(tài)結(jié)構(gòu)上盡量保持原來活著時(shí)的完整和真實(shí)狀態(tài)，如細(xì)胞內(nèi)染色體的分裂形態(tài)。同時(shí)固定更易于染

3、色，可以較清楚的顯現(xiàn)細(xì)胞在生活時(shí)不易看清的結(jié)構(gòu)?？ㄖZ固定液：3份無水乙醇，1份冰醋酸（現(xiàn)配現(xiàn)用）。6.植物根尖染色體制片中，預(yù)處理的方法有哪些？作用是什么？ 冰凍預(yù)處理，藥物預(yù)處理。對(duì)標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理，固定染色體，使其停留在某一時(shí)期便于觀看。藥劑處理：可以用作染色體預(yù)處理的化學(xué)藥品，主要有生物堿、甙類、酸類及其他物質(zhì)；最常用的 化學(xué)藥品有秋水仙素、8羥基喹啉及對(duì)二氯苯。 其作用是： 阻擋或破壞紡垂體微管的形成， 由于沒有紡垂體的作用， 細(xì)胞有絲分裂過程， 被阻抑在細(xì)胞分裂中期階段， 從而累計(jì)比較多的處于細(xì)胞分裂中期的染 色體圖象。 促進(jìn)染色體濃縮變短， 削減染色體之間相互纏繞

4、重疊， 有利染色體的高度分散。 轉(zhuǎn)變胞質(zhì)粘度，促進(jìn)染色體清楚，促進(jìn)細(xì)胞質(zhì)清潔。7.植物根尖的解離主要有哪兩種方法？簡(jiǎn)述其主要程序。酸水解：一般接受鹽酸解離。用鹽酸解離因材料不用而不同。洋蔥根尖用0.1mol/L鹽酸在60°C下處理8min，蠶豆根尖用上述濃度溫度時(shí)間延長(zhǎng)15min。之后用70%酒精清洗幾次，把殘留的酸洗掉以免影響染色體著色。酶處理：將固定的洋蔥根尖用0.1mol/L的醋酸鈉洗2次，然后放入酶液中（2%果膠酶和1%纖維素酶等量混合），在25°C恒溫箱中處理1.5-2.5h，此時(shí)根尖較松軟，將根尖取出，用0.1mol/L醋酸鈉洗2次，再放入60°C0.

5、1mol/L鹽酸溶液中水解2min。最終用45%醋酸鈉清洗根尖。8.植物根尖壓片過程要留意哪些方面？取一染色的根尖置于載玻片中心，用吸水紙洗去多余的溶液，加1滴新穎的染液，蓋上蓋玻片后，在蓋玻片上蓋上一些吸水紙，應(yīng)以左手的拇指和中指固定蓋片的位置，用鉛筆或橡皮輕小扣打，使細(xì)胞核染色體均勻分散。9.植物根尖的解離有何目的？酸解離有何優(yōu)點(diǎn)？目的是使分生組織細(xì)胞之間的果膠質(zhì)層水解掉，并使細(xì)胞壁軟化，便于壓片.酸解離優(yōu)點(diǎn)是較酶水解速度快，強(qiáng)度大，但用酸處理后，必需要用70%酒精清洗，把殘留的酸洗掉，以免影響染色體著色。10.低滲處理的作用是什么？試說明這種處理的關(guān)鍵步驟。使紅細(xì)胞解體，白細(xì)胞膨脹，染色

6、體分散。取5ML 37°C低溫的0.075M KCl溶液加入離心管中，用滴管輕輕沖打成細(xì)胞懸液，放入37°C溫箱中靜置20min。 11.果蠅唾腺染色體有哪些形態(tài)特征？果蠅唾腺染色體比果蠅的其他體細(xì)胞染色體要長(zhǎng)100-200倍，體積大上千倍，故有稱巨大染色體。全部染色體的著絲點(diǎn)聚集在一起形成染色中心，因此唾腺染色體不但能進(jìn)行配對(duì)，且全部染色體的著絲點(diǎn)聚集在一起形成染色中心，因此唾腺細(xì)胞染色體形態(tài)不是8條個(gè)別染色體，而是由染色中心向空間伸展的5條長(zhǎng)臂和1條短臂構(gòu)成。還表現(xiàn)出有明顯的橫紋，數(shù)目和空間排列是恒定的，代表著一些基因的位置，具有種的特異性。12.果蠅雜交試驗(yàn)中，親本為

7、何要用處女蠅？如何收集？只有親本是處女蠅才能保證雌蠅的生殖器里無精子，若非處女蠅則可能使果蠅后代不是所用雄蠅交配得來的。一般來說，剛羽化出來的果蠅在12小時(shí)之內(nèi)是不進(jìn)行交配的，所以這段時(shí)間內(nèi)選出的雌蠅即為處女蠅。為保險(xiǎn)起見，可在羽化后10h內(nèi)選擇。13.秋水仙素處理為何可以誘發(fā)多倍體的形成？秋水仙素的誘導(dǎo)作用在于阻擋有絲分裂細(xì)胞紡錘絲的形成，但對(duì)染色體的結(jié)構(gòu)和復(fù)制無顯著影響。若濃度適合，藥劑在細(xì)胞中集中后，不致發(fā)生嚴(yán)峻的毒害，這樣縱裂為二的染色體不能向兩極分開，因而便產(chǎn)生了染色體加倍的核。當(dāng)藥劑作用消退后，由于多倍體細(xì)胞連續(xù)分裂，便得到多倍體組織，以后則產(chǎn)生新的多倍體植株。14.扼要敘述空氣干

8、燥法制片的步驟。滴片后，不加熱或任何處理，使載片在室溫下自然干燥的方法。收集細(xì)胞細(xì)胞經(jīng)秋水仙素處理低滲處理離心充分固定滴片。（用吸管吸取細(xì)胞懸液自1m高處滴在冰凍的載玻片上，一片1-3滴，晾干，收存）15.可用于常規(guī)核型分析的中期分裂相要具備哪些因素？染色體清楚，數(shù)目為46條，大小合適，分散度合適，背景潔凈16.人體外周血淋巴細(xì)胞培育中，植物血球凝集素（PHA）、秋水仙素、肝素鈉和雙抗分別有何作用？外周血淋巴細(xì)胞是不能增殖的分化細(xì)胞群，在體外無菌培育條件下，若于培育基中植物凝集素(PHA)則可刺激處G。期的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞，重新有絲分裂的力量，經(jīng)一段時(shí)間的培育即可獲得大量分裂期細(xì)胞以供

9、染色體分析。秋水仙素(或秋水酰胺)可通過干擾微管組裝而抑制紡錘絲形成，使細(xì)胞分裂順當(dāng)進(jìn)入后期而停滯于中期，從而可在短期內(nèi)積累大量最適于進(jìn)行染色體分裂中期分裂相。此外，秋水仙素還能使染色單體縮短、分開，使染色體呈現(xiàn)明顯形而利于辨認(rèn)。肝素，主要起抗凝血作用雙抗，為防止培育時(shí)期細(xì)菌的污染17果蠅雌雄（成蟲期）鑒別最主要或最精確的方法是什么？最精確的是看性梳，性梳是雄果蠅的其次性征，雄果蠅的第一對(duì)前足的第一個(gè)跗節(jié)上，因外形與梳頭的梳子格外相像，又與性別有關(guān)而得名。雌果蠅沒有這個(gè)結(jié)構(gòu)。但是性梳這一性狀需要借助顯微鏡觀看。除了性梳之外，還有一些其它性狀都可以用肉眼直接觀看。具體如下： 雄蠅，個(gè)體較小，腹部

10、條紋3（腹片4片），腹部末端圓鈍，顏色深。雌蠅，個(gè)體較大，腹部條紋5（腹片6片），腹部末端尖，顏色淺。18.本學(xué)期我們做了哪些遺傳學(xué)試驗(yàn)？通過這些試驗(yàn)?zāi)懔私夂桶盐樟四男┥飳W(xué)基本試驗(yàn)技能？本學(xué)期一共做了六次遺傳學(xué)試驗(yàn)分別是：1.植物細(xì)胞有絲分裂及染色體行為觀看：通過本次試驗(yàn)把握制作植物根尖有絲分裂裝片的技術(shù)。2.減數(shù)分裂制片及染色體行為觀看：把握減數(shù)分裂制片方法。3.果蠅生活史及性狀觀看：把握試驗(yàn)果蠅的飼養(yǎng)管理技術(shù)。4.果蠅的唾液腺染色體制片及觀看：把握解剖果蠅幼蟲、分別唾腺的方法，把握唾腺染色體的制片技術(shù)。5.植物多倍體激發(fā)、制片及觀看：把握了植物多倍體人工誘發(fā)技術(shù)及多倍體鑒定方法。6.人體

11、外周血淋巴細(xì)胞培育及制片：把握了人體外周血淋巴細(xì)胞的懸浮培育法與人體細(xì)胞染色體標(biāo)本的制備和核型分析的方法，學(xué)會(huì)了人體細(xì)胞遺傳學(xué)試驗(yàn)的基本操作技術(shù)。19.植物染色體制片時(shí)，我們使用的是什么染色液？人類染色體染色時(shí)我們使用的是何種染色液，如何配制？植物染色體制片時(shí)使用的是改良苯酚品紅染色液人類染色體染色時(shí)我們使用的是吉姆薩染液（Giemsa），配置：稱Giemsa粉劑1g置研缽中，加少量甘油研磨至無顆粒為止，再加入甘油共50ml，放在5660的溫箱或水浴內(nèi)12h，促使溶化。冷卻后加入甲醇50ml，室溫放置23d后，過濾使用。同時(shí)將Giemsa原液1份加片pH7.4的磷酸緩沖液9份稀釋，或在10ml

12、磷酸緩沖液（pH7.4）中加入1015滴Giemsa原液，應(yīng)隨用隨配。20.核型分析有何作用？是細(xì)胞遺傳學(xué)分析的基本方法：爭(zhēng)辯染色體形態(tài)、結(jié)構(gòu)、功能的相互關(guān)系，可依據(jù)染色體數(shù)目變異推斷病因。核型分析對(duì)于人類醫(yī)學(xué)遺傳爭(zhēng)辯及臨床應(yīng)用都有重大意義。如腫瘤細(xì)胞的核型分析已被應(yīng)用于腫瘤的臨床診斷、愈后極藥物療效的觀看；通過培育后的淋巴細(xì)胞或皮膚成纖維細(xì)胞的核型分析，可以對(duì)人的染色體疾病進(jìn)行診斷，而對(duì)培育后的羊水中胎兒脫屑細(xì)胞或胎盤絨毛膜細(xì)胞的核型分析則可用于胎兒性別及是否患有染色體病的產(chǎn)前診斷。21.微核檢測(cè)有何作用？微核試驗(yàn)在對(duì)外來化合物(如藥品、食品添加劑、農(nóng)藥、化妝品、環(huán)境污染物等)遺傳毒性和職業(yè)

13、暴露人群遺傳損害監(jiān)測(cè)和現(xiàn)場(chǎng)生態(tài)環(huán)境檢測(cè)方面，在診斷和預(yù)防肝癌、食管癌、肺癌等惡性腫瘤方面得到了大量的應(yīng)用。微核試驗(yàn)最大的優(yōu)點(diǎn)是經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)潔、快速，而國(guó)內(nèi)外大量的對(duì)試驗(yàn)爭(zhēng)辯，比較全都的看法是該方法在敏感性、特異性和精確性方面，與經(jīng)典的染色體畸變分析方法基本相當(dāng)川。因而，特殊適合作為大量化合物和現(xiàn)場(chǎng)人群初篩的試驗(yàn)方法。22.當(dāng)你進(jìn)行果蠅性別鑒定時(shí)，果蠅糊涂了，你如何處理？應(yīng)快速將果蠅放入麻醉瓶中連續(xù)麻醉23.如何獲得果蠅唾腺？過程中應(yīng)留意哪些細(xì)節(jié)？把載玻片放在雙筒解剖鏡下，其上滴上一滴生理鹽水。取幼蟲置于生理鹽水中，兩手各握一枚解剖針，以左手的針壓在幼蟲末端1/3處，固定幼蟲，右手的針尖壓住幼蟲頭部，用適當(dāng)?shù)牧ο蚯袄?/p>