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1、第九章 臨床常用病原體檢查 第一節(jié) 性傳播疾病病原體檢測(cè) 性傳播疾病(sexually transmitted disease,STD)簡(jiǎn)稱性病,是一類能通過(guò)各種性行為或類似性行為而傳播,主要侵犯皮膚、性器官和全身臟器損害的疾病。性傳播疾病病原體的檢測(cè)對(duì)于性傳播疾病監(jiān)測(cè)、診斷或血液篩查,控制性傳播疾病的流行,確保優(yōu)生優(yōu)育等尤為重要。 常見(jiàn)臨床類型: 一、獲得性免疫缺陷癥(AIDS) 是由人類免疫缺陷病毒(HIV)通過(guò)結(jié)合細(xì)胞表面的CD4蛋白受體進(jìn)入易感細(xì)胞引起部分免疫系統(tǒng)被破壞,進(jìn)而導(dǎo)致嚴(yán)重的機(jī)會(huì)感染和繼發(fā)性癌變。HIV感染傳播的模式主要有三種:性傳播(包括同性和異性之間);經(jīng)血傳播;母嬰傳播
2、。當(dāng)機(jī)體感染HIV數(shù)周到半年后,絕大多數(shù)患者體內(nèi)科出現(xiàn)抗HIV抗體??笻IV抗體檢測(cè)是艾滋病病原檢測(cè)中最常用的方法。 參考值:篩查試驗(yàn)和確證試驗(yàn)均陰性,RT-PCR檢查HIV-RNA為陰性。 臨床意義:HIV抗體篩查試驗(yàn)敏感性高,但特異性低,必須做確診試驗(yàn)才能確定為HIV感染。HIV核酸定性檢測(cè)可用于HIV感染的輔助診斷。 蛋白印跡法:通常作為檢測(cè)抗HIV-1和抗HIV-2的確診實(shí)驗(yàn) 二、梅毒螺旋體抗體 診斷梅毒常要依靠血清學(xué)檢查,潛伏期梅毒血清學(xué)診斷尤為重要。人體感染梅毒螺旋體后,可產(chǎn)生抗梅毒螺旋體抗體IgM及IgG,也可產(chǎn)生反應(yīng)素,用不同的抗原來(lái)檢測(cè)體內(nèi)是否存在抗梅毒螺旋體抗體或反應(yīng)素以診
3、斷梅毒。在血清中可出現(xiàn)特異性抗體和非特異性抗體。 參考值:陰性 臨床意義:非特異性抗體的定性試驗(yàn)敏感性高但特異性低,定性試驗(yàn)陽(yáng)性時(shí),必須進(jìn)行確診試驗(yàn)。若確診試驗(yàn)陽(yáng)性,結(jié)合臨床科診斷梅毒。定性試驗(yàn)一般用于梅毒的篩選和治療效果監(jiān)測(cè)。 三、淋病病原體 運(yùn)用淋病奈瑟菌的特異性抗血清或單克隆抗體可直接檢測(cè)標(biāo)本中的淋病奈瑟菌抗原進(jìn)行確診。 參考值:淋病奈瑟菌抗原和抗體檢查均為陰性;PCR檢查DNA陰性。 臨床意義:淋球菌血清學(xué)測(cè)定科直接檢測(cè)標(biāo)本中的淋球菌抗原,但陽(yáng)性率較低,診斷價(jià)值不大。PCR法可早期快速確診但應(yīng)注意污染。細(xì)菌培養(yǎng)是診斷淋病的金標(biāo)準(zhǔn)。 四、非淋球菌性尿道炎病原體 非淋球菌性尿道炎是沙眼支原
4、體或衣原體等引起的尿道炎癥,常與淋病同時(shí)發(fā)生。主要特點(diǎn)為尿道刺激癥狀及尿道出現(xiàn)少量黏液性分泌物。實(shí)驗(yàn)室檢查方法包括顯微鏡檢測(cè)、培養(yǎng)及血清學(xué)檢查。血清學(xué)檢查中ELISA法有較高的特異性和靈敏度,是目前臨床上常用的檢測(cè)手段。 五、生殖器皰疹與尖銳濕疣病原體 生殖器皰疹與尖銳濕疣分別由單純皰疹病毒和人類乳頭瘤病毒所致。實(shí)驗(yàn)室檢查主要有培養(yǎng)法、細(xì)胞學(xué)法等。第二節(jié) 病毒性肝炎血清標(biāo)志物檢查 病毒性肝炎主要有7型,即甲型(HA)、乙型(HB)、丙型(HC)、丁型(HD)、戊型(HE)、庚型(HG)、輸血傳播病毒肝炎,它們分別由肝炎病毒甲型(HAV)、乙型(HBV)、丙型(HCV)、丁型(HDV)和戊型(H
5、EV)、庚型(HGV)、輸血傳播病毒(TTV)所引起。 一、甲型肝炎病毒標(biāo)志物檢查 肝炎病毒甲型(HAV)屬微小RNA病毒科,機(jī)體感染HAV后可產(chǎn)生IgM、IgA和IgG抗體。HAV-IgM是病毒衣殼蛋白抗體,HAV-IgA是腸道黏膜分泌的局部抗體,HAV-IgG在病愈后可長(zhǎng)期存在。甲型肝炎病毒常規(guī)檢查項(xiàng)目為HAV抗體檢查。 【參考值】 ELISA法:抗HAV-IgM和抗HAV-IgA均為陰性??笻AV-IgG陽(yáng)性可見(jiàn)于甲肝感染后的人群。 【臨床意義】抗HAVIgM陽(yáng)性:據(jù)觀察,甲肝患者抗HAV- IgM的陽(yáng)性率,在發(fā)病后2周為100,1個(gè)月為76.5,3個(gè)月為23.5,6個(gè)月為5.9,12個(gè)
6、月時(shí)可為陰性。所以,抗HAV-IgM陽(yáng)性說(shuō)明機(jī)體正在感染HAV,它是早期診斷甲肝的特異性指標(biāo)??笻AV-IgG陽(yáng)性:出現(xiàn)于恢復(fù)期且持久存在,是獲得免疫力的標(biāo)志,提示既往感染,可作為流行病學(xué)調(diào)查的指標(biāo)。 二、乙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè) (一)乙肝六項(xiàng)測(cè)定 傳統(tǒng)乙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)常為五項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè),俗稱“乙肝二對(duì)半檢測(cè)”,包括HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc。隨著方法學(xué)發(fā)展,HBcAg也被加入檢測(cè)范圍。乙型肝炎病毒標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)情況與臨床意義見(jiàn)書281頁(yè)表4-9-1。 (二)乙型肝炎病毒DNA測(cè)定 乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)呈雙股環(huán)形,是HBV的基因物質(zhì),也是乙型
7、肝炎的直接診斷證據(jù)。 【參考值】陰性。 【臨床意義】 HBV-DNA陽(yáng)性是診斷乙型肝炎的佐證,表明HBV復(fù)制及有傳染性。也用于監(jiān)測(cè)應(yīng)用HBsAg疫苗后垂直傳播的阻斷效果,若HBV-DNA陽(yáng)性表明疫苗阻斷效果不佳。 三、丙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè) (一)丙型肝炎病毒RNA測(cè)定 【參考值】斑點(diǎn)雜交試驗(yàn)為陰性;RT-PCR法為陰性。 【臨床意義】 有助于HCV感染的早期診斷:丙型肝炎病毒RNA(HCV-RNA)陽(yáng)性提示HCV復(fù)制活躍,傳染性強(qiáng);HCV-RNA轉(zhuǎn)陰提示HCV復(fù)制受抑,預(yù)后較好。連續(xù)觀察HCV-RNA,結(jié)合抗一HCV的動(dòng)態(tài)變化,可作為丙肝的預(yù)后判斷和干擾素等藥物療效的評(píng)價(jià)指標(biāo)。檢測(cè)HCV-R
8、NA,對(duì)研究丙型肝炎發(fā)病機(jī)理和傳播途徑有重要價(jià)值。 (二)丙型肝炎病毒抗體IgM測(cè)定 【參考值】 陰性。 【臨床意義】主要用于早期診斷,急性期IgM抗體陽(yáng)性率略高于IgG抗體???HCV IgM抗體一般在發(fā)病的24天出現(xiàn),最早于發(fā)病的第1天即可檢測(cè)到,715天達(dá)高峰。其持續(xù)時(shí)間一般為13個(gè)月。持續(xù)陽(yáng)性??勺鳛檗D(zhuǎn)為慢性肝炎的指標(biāo),或提示病毒持續(xù)存在并有復(fù)制。抗HCV-IgG陽(yáng)性提示既往感染HCV。 四、丁型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè) (一)丁型肝炎病毒抗原測(cè)定 【參考值】 IFA、RIA法和ELISA法均為陰性。 【臨床意義】 丁型肝炎病毒抗原(HDVAg)出現(xiàn)較早,但僅持續(xù)l2周,由于檢測(cè)不及時(shí),往往
9、呈陰性反應(yīng)。HDVAg與HBsAg同時(shí)陽(yáng)性,表示丁型和乙型肝炎病毒同時(shí)感染,患者可迅速發(fā)展為慢性或急性重癥肝炎。慢性HDV感染,由于有持續(xù)而高滴度的抗-HDV,HDVAg多以免疫復(fù)合物形式存在,ELISA法很難檢出。 (二)丁型肝炎病毒抗體測(cè)定 丁型肝炎病毒抗體分為抗-HDV IgG和抗-HDV IgM兩型。 【參考值】 IFA、RIA和ELISA法均為陰性。 【臨床意義】 抗-HDV IgM出現(xiàn)較早,一般持續(xù)220周,可用于丁型肝炎早期診斷。HDV和HBV聯(lián)合感染時(shí),抗-HDV IgM一過(guò)性升高;重疊感染時(shí),抗-HDV IgM持續(xù)升高。是唯一可以檢測(cè)出的標(biāo)記物???HDV IgG陽(yáng)性:只能在HBsAg陽(yáng)性的血清中測(cè)得,是診斷丁型肝炎的可靠指標(biāo),即使HDV感染終止后仍可保持多年。 (三)丁型肝炎病毒RNA測(cè)定 【參考值】RT-PCR法為陰性。 【臨床意義】 丁型肝炎病毒RNA(HDV-RNA)陽(yáng)性可明確診斷為丁型肝炎。HDV與HBV重疊感染的患者易迅速發(fā)展成肝硬化或肝癌。 五、戊型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè) (一)戊型肝炎病毒抗體測(cè)定 【參考值】 RIA和ELISA法均為陰性。 【臨床意義】抗HEV- IgM陽(yáng)性:95的急性期病人呈陽(yáng)性反應(yīng)抗HEV- IgM的持續(xù)時(shí)間
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