第九章臨床常見病原體檢查

1、第九章 臨床常用病原體檢查 第一節(jié) 性傳播疾病病原體檢測(cè) 性傳播疾病(sexually transmitted disease，STD)簡(jiǎn)稱性病，是一類能通過各種性行為或類似性行為而傳播，主要侵犯皮膚、性器官和全身臟器損害的疾病。性傳播疾病病原體的檢測(cè)對(duì)于性傳播疾病監(jiān)測(cè)、診斷或血液篩查，控制性傳播疾病的流行，確保優(yōu)生優(yōu)育等尤為重要。 常見臨床類型： 一、獲得性免疫缺陷癥(AIDS) 是由人類免疫缺陷病毒(HIV)通過結(jié)合細(xì)胞表面的CD4蛋白受體進(jìn)入易感細(xì)胞引起部分免疫系統(tǒng)被破壞，進(jìn)而導(dǎo)致嚴(yán)重的機(jī)會(huì)感染和繼發(fā)性癌變。HIV感染傳播的模式主要有三種：性傳播(包括同性和異性之間)；經(jīng)血傳播；母嬰傳播

2、。當(dāng)機(jī)體感染HIV數(shù)周到半年后，絕大多數(shù)患者體內(nèi)科出現(xiàn)抗HIV抗體?？笻IV抗體檢測(cè)是艾滋病病原檢測(cè)中最常用的方法。 參考值：篩查試驗(yàn)和確證試驗(yàn)均陰性，RT-PCR檢查HIV-RNA為陰性。 臨床意義：HIV抗體篩查試驗(yàn)敏感性高，但特異性低，必須做確診試驗(yàn)才能確定為HIV感染。HIV核酸定性檢測(cè)可用于HIV感染的輔助診斷。 蛋白印跡法：通常作為檢測(cè)抗HIV-1和抗HIV-2的確診實(shí)驗(yàn) 二、梅毒螺旋體抗體 診斷梅毒常要依靠血清學(xué)檢查，潛伏期梅毒血清學(xué)診斷尤為重要。人體感染梅毒螺旋體后，可產(chǎn)生抗梅毒螺旋體抗體IgM及IgG，也可產(chǎn)生反應(yīng)素，用不同的抗原來檢測(cè)體內(nèi)是否存在抗梅毒螺旋體抗體或反應(yīng)素以診

3、斷梅毒。在血清中可出現(xiàn)特異性抗體和非特異性抗體。 參考值：陰性 臨床意義：非特異性抗體的定性試驗(yàn)敏感性高但特異性低，定性試驗(yàn)陽性時(shí)，必須進(jìn)行確診試驗(yàn)。若確診試驗(yàn)陽性，結(jié)合臨床科診斷梅毒。定性試驗(yàn)一般用于梅毒的篩選和治療效果監(jiān)測(cè)。 三、淋病病原體 運(yùn)用淋病奈瑟菌的特異性抗血清或單克隆抗體可直接檢測(cè)標(biāo)本中的淋病奈瑟菌抗原進(jìn)行確診。 參考值：淋病奈瑟菌抗原和抗體檢查均為陰性；PCR檢查DNA陰性。 臨床意義：淋球菌血清學(xué)測(cè)定科直接檢測(cè)標(biāo)本中的淋球菌抗原，但陽性率較低，診斷價(jià)值不大。PCR法可早期快速確診但應(yīng)注意污染。細(xì)菌培養(yǎng)是診斷淋病的金標(biāo)準(zhǔn)。 四、非淋球菌性尿道炎病原體 非淋球菌性尿道炎是沙眼支原

4、體或衣原體等引起的尿道炎癥，常與淋病同時(shí)發(fā)生。主要特點(diǎn)為尿道刺激癥狀及尿道出現(xiàn)少量黏液性分泌物。實(shí)驗(yàn)室檢查方法包括顯微鏡檢測(cè)、培養(yǎng)及血清學(xué)檢查。血清學(xué)檢查中ELISA法有較高的特異性和靈敏度，是目前臨床上常用的檢測(cè)手段。 五、生殖器皰疹與尖銳濕疣病原體 生殖器皰疹與尖銳濕疣分別由單純皰疹病毒和人類乳頭瘤病毒所致。實(shí)驗(yàn)室檢查主要有培養(yǎng)法、細(xì)胞學(xué)法等。第二節(jié) 病毒性肝炎血清標(biāo)志物檢查 病毒性肝炎主要有7型，即甲型(HA)、乙型(HB)、丙型(HC)、丁型(HD)、戊型(HE)、庚型(HG)、輸血傳播病毒肝炎，它們分別由肝炎病毒甲型(HAV)、乙型(HBV)、丙型(HCV)、丁型(HDV)和戊型(H

5、EV)、庚型(HGV)、輸血傳播病毒(TTV)所引起。 一、甲型肝炎病毒標(biāo)志物檢查 肝炎病毒甲型（HAV）屬微小RNA病毒科，機(jī)體感染HAV后可產(chǎn)生IgM、IgA和IgG抗體。HAV-IgM是病毒衣殼蛋白抗體，HAV-IgA是腸道黏膜分泌的局部抗體，HAV-IgG在病愈后可長(zhǎng)期存在。甲型肝炎病毒常規(guī)檢查項(xiàng)目為HAV抗體檢查。 【參考值】 ELISA法：抗HAV-IgM和抗HAV-IgA均為陰性。抗HAV-IgG陽性可見于甲肝感染后的人群。 【臨床意義】抗HAVIgM陽性：據(jù)觀察，甲肝患者抗HAV- IgM的陽性率，在發(fā)病后2周為100，1個(gè)月為76.5，3個(gè)月為23.5，6個(gè)月為5.9，12個(gè)

6、月時(shí)可為陰性。所以，抗HAV-IgM陽性說明機(jī)體正在感染HAV，它是早期診斷甲肝的特異性指標(biāo)?？笻AV-IgG陽性：出現(xiàn)于恢復(fù)期且持久存在，是獲得免疫力的標(biāo)志，提示既往感染，可作為流行病學(xué)調(diào)查的指標(biāo)。 二、乙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè) (一)乙肝六項(xiàng)測(cè)定 傳統(tǒng)乙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)常為五項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)，俗稱“乙肝二對(duì)半檢測(cè)”，包括HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc。隨著方法學(xué)發(fā)展，HBcAg也被加入檢測(cè)范圍。乙型肝炎病毒標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)情況與臨床意義見書281頁表4-9-1。 （二）乙型肝炎病毒DNA測(cè)定 乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)呈雙股環(huán)形，是HBV的基因物質(zhì)，也是乙型

7、肝炎的直接診斷證據(jù)。 【參考值】陰性。 【臨床意義】 HBV-DNA陽性是診斷乙型肝炎的佐證，表明HBV復(fù)制及有傳染性。也用于監(jiān)測(cè)應(yīng)用HBsAg疫苗后垂直傳播的阻斷效果，若HBV-DNA陽性表明疫苗阻斷效果不佳。 三、丙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè) (一)丙型肝炎病毒RNA測(cè)定 【參考值】斑點(diǎn)雜交試驗(yàn)為陰性；RT-PCR法為陰性。 【臨床意義】 有助于HCV感染的早期診斷：丙型肝炎病毒RNA(HCV-RNA)陽性提示HCV復(fù)制活躍，傳染性強(qiáng)；HCV-RNA轉(zhuǎn)陰提示HCV復(fù)制受抑，預(yù)后較好。連續(xù)觀察HCV-RNA，結(jié)合抗一HCV的動(dòng)態(tài)變化，可作為丙肝的預(yù)后判斷和干擾素等藥物療效的評(píng)價(jià)指標(biāo)。檢測(cè)HCV-R

8、NA，對(duì)研究丙型肝炎發(fā)病機(jī)理和傳播途徑有重要價(jià)值。 (二)丙型肝炎病毒抗體IgM測(cè)定 【參考值】 陰性。 【臨床意義】主要用于早期診斷，急性期IgM抗體陽性率略高于IgG抗體。抗-HCV IgM抗體一般在發(fā)病的24天出現(xiàn)，最早于發(fā)病的第1天即可檢測(cè)到，715天達(dá)高峰。其持續(xù)時(shí)間一般為13個(gè)月。持續(xù)陽性?？勺鳛檗D(zhuǎn)為慢性肝炎的指標(biāo)，或提示病毒持續(xù)存在并有復(fù)制?？笻CV-IgG陽性提示既往感染HCV。 四、丁型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè) (一)丁型肝炎病毒抗原測(cè)定 【參考值】 IFA、RIA法和ELISA法均為陰性。 【臨床意義】 丁型肝炎病毒抗原(HDVAg)出現(xiàn)較早，但僅持續(xù)l2周，由于檢測(cè)不及時(shí)，往往

9、呈陰性反應(yīng)。HDVAg與HBsAg同時(shí)陽性，表示丁型和乙型肝炎病毒同時(shí)感染，患者可迅速發(fā)展為慢性或急性重癥肝炎。慢性HDV感染，由于有持續(xù)而高滴度的抗-HDV，HDVAg多以免疫復(fù)合物形式存在，ELISA法很難檢出。 (二)丁型肝炎病毒抗體測(cè)定 丁型肝炎病毒抗體分為抗-HDV IgG和抗-HDV IgM兩型。 【參考值】 IFA、RIA和ELISA法均為陰性。 【臨床意義】 抗-HDV IgM出現(xiàn)較早，一般持續(xù)220周，可用于丁型肝炎早期診斷。HDV和HBV聯(lián)合感染時(shí)，抗-HDV IgM一過性升高；重疊感染時(shí)，抗-HDV IgM持續(xù)升高。是唯一可以檢測(cè)出的標(biāo)記物?？?HDV IgG陽性：只能在HBsAg陽性的血清中測(cè)得，是診斷丁型肝炎的可靠指標(biāo)，即使HDV感染終止后仍可保持多年。 (三)丁型肝炎病毒RNA測(cè)定 【參考值】RT-PCR法為陰性。 【臨床意義】 丁型肝炎病毒RNA(HDV-RNA)陽性可明確診斷為丁型肝炎。HDV與HBV重疊感染的患者易迅速發(fā)展成肝硬化或肝癌。 五、戊型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè) (一)戊型肝炎病毒抗體測(cè)定 【參考值】 RIA和ELISA法均為陰性。 【臨床意義】抗HEV- IgM陽性：95的急性期病人呈陽性反應(yīng)抗HEV- IgM的持續(xù)時(shí)間