人前列腺癌細(xì)胞對(duì)化療藥物敏感性的對(duì)比

1、    人前列腺癌細(xì)胞對(duì)化療藥物敏感性的對(duì)比         摘要：目的：研究人雄激素非依賴性前列腺癌細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性。方法：采用噻唑藍(lán)(MTT)法測(cè)定人雄激素非依賴性高轉(zhuǎn)移前列腺癌細(xì)胞(PC-3M)對(duì)6種化療藥物的敏感性。結(jié)果：PC-3M對(duì)6種化療藥物的敏感性依次為喜樹(shù)堿依托泊甙卡鉑、阿霉素、氮芥5-氟尿嘧啶(P均0.05)。結(jié)論：PC-3M對(duì)喜樹(shù)堿、依托泊甙較敏感?？勺鳛榕R床用藥參考。關(guān)鍵詞：前列腺腫瘤癌藥物篩選試驗(yàn)，抗腫瘤Comparative study on

2、chemosensitivity in prostate cancer cellZOU Yong-ping(Department of Urology,Shanghai Yangpu Centre Hospital,Shanghai,200090)LU Gong-chengXIAO Ya-jun(Department of Urology,Union Hospital,Tongji Medical University)Abstract：Purpose：To study the chemosensitivity in human androgen independent prostate ca

3、ncer cell. Methods：Using the MTT method to study the chemosensitivities to six chemical drugs in human androgen independent prostate cancer cell (PC-3M).Results：The chemosensitivities to six chemical drugs in PC-3M are camptothecinetoposidumcarboplatin,doxorubincin,nitrogen mastrad5-fluorouracil (P0

4、.05).Conclusions：PC-3M is more sensitive to camptothecin,etoposidum, this may give reference to clinical treatment.Key words：Prostatic neoplasmasCancinomaDrug screening assays,antitumor至今化療藥物對(duì)前列腺癌療效的比較研究尚少，為此我們采用噻唑藍(lán)(MTT)法測(cè)定體外培養(yǎng)的人雄激素非依賴性高轉(zhuǎn)移前列腺癌細(xì)胞(PC-3M)對(duì)臨床應(yīng)用較多的6種化療藥物的敏感性，旨在篩選出比較有效的抗癌藥物供臨床用藥參考。1材料和方法1

5、.1主要材料2)用含15%小牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)基培養(yǎng)(RPMI 1640、小牛血清均為GIBCO公司產(chǎn))，每3 d換液1次，0.25%胰蛋白酶消化傳代。實(shí)驗(yàn)前1 d取外觀良好、貼壁生長(zhǎng)、接近匯合的細(xì)胞更換培養(yǎng)液。1.2主要步驟712。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：按兩因素方差分析資料，計(jì)算機(jī)統(tǒng)計(jì)結(jié)果。2結(jié)果6種化療藥物對(duì)PC-3M的抑制率見(jiàn)表1。表1不同濃度的6種化療藥物對(duì)PC-3M的抑制率%藥物濃度/(mg.L-1)00.801.603.106.2512.5025.0050.00100.00200.00400.00<"z1 (102 bytes)" src="/

6、med/cano/201003/20100315181432945" 13 20>±sCAP05061636871747784879466.3±24.0VP1604650535657667380869360.0±24.0CAR03047505356596063738152.0±20.6DOX02639425255616265687149.2±20.2NM01340434750535762738047.5±22.65-FU01317233848515258657239.7±22.5  

7、60;  用兩因素方差分析法統(tǒng)計(jì)所測(cè)結(jié)果，CAR、DOX、NM抑制率之間無(wú)顯著性差異(P0.05)，作為一組。抑制率由高到低為CAPVP16CAR、DOX、NM5-FU，6種化療藥物按抑制率高低分為4組，組間差異均有顯著性意義(P0.05)。 3討論MTT法常用于檢測(cè)藥物對(duì)癌細(xì)胞的殺傷或抑制率，原理為活細(xì)胞中的線粒體脫氫酶可還原MTT為藍(lán)色產(chǎn)物(formazan)，藥物作用后在酶標(biāo)儀上測(cè)570 nm光的吸光度，即可計(jì)算出細(xì)胞抑制率。MTT法、同位素?fù)饺敕?、集落法、染料排斥試?yàn)等都可檢測(cè)細(xì)胞抑制率，但MTT法具有客觀、簡(jiǎn)便、快速及不使用同位素等優(yōu)點(diǎn)1，因此，受到廣泛應(yīng)用。前列腺癌去勢(shì)治

8、療后大部分復(fù)發(fā)，臨床及體外實(shí)驗(yàn)顯示腫瘤復(fù)發(fā)是由于前列腺癌從雄激素依賴性向雄激素非依賴性轉(zhuǎn)變，前者依賴雄激素生長(zhǎng)，而后者不依賴雄激素生長(zhǎng)，對(duì)于后者去勢(shì)治療效果不好3。近些年前列腺癌的化學(xué)治療逐漸引起人們的重視。本組PC-3M為雄激素非依賴性高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)PC-3M對(duì)6種化療藥物敏感性由高到低依次為CAP、VP16、CAR、DOX、NM、5-FU。CAP可與拓樸異構(gòu)酶形成復(fù)合物，通過(guò)抑制該酶的作用阻止DNA復(fù)制；VP16通過(guò)抑制拓樸異構(gòu)酶阻止DNA復(fù)制；CAR進(jìn)入細(xì)胞后與DNA鏈上的堿基作用，改變其正常復(fù)制模板的功能，引起DNA復(fù)制障礙；DOX與DNA結(jié)合使其作為核酸模板的功能受到損害，同

9、時(shí)與細(xì)胞膜結(jié)合損害存在膜上的酶；NM可使DNA、RNA或蛋白質(zhì)的多核基因烷化而影響DNA復(fù)制；5-FU代謝后產(chǎn)生的活性物質(zhì)可結(jié)合到DNA上，干擾其功能，并抑制胸苷酸合成酶而阻止DNA合成。臨床應(yīng)用與體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果往往有一定差異，CAP、VP16臨床應(yīng)用效果如何有待于進(jìn)一步觀察。國(guó)外學(xué)者報(bào)道CAP可明顯誘導(dǎo)前列腺癌細(xì)胞PC-3(一種雄激素非依賴性前列腺癌細(xì)胞)凋亡。一種新的植物提取劑-lapachone為拓樸異構(gòu)酶的抑制劑，亦可明顯誘導(dǎo)PC-3細(xì)胞凋亡4。還未見(jiàn)這兩種藥治療前列腺癌的臨床報(bào)道。VP16廣泛用于白血病的治療，在前列腺癌的治療方面亦取得一定療效5。CAR、DOX、NM、5-FU在前列腺癌治療中應(yīng)用較多，效果并不滿意。環(huán)磷酰胺通過(guò)肝臟代謝后才對(duì)癌細(xì)胞產(chǎn)生殺傷作用，故本實(shí)驗(yàn)未選用。臨床