尿中ALA測(cè)定實(shí)驗(yàn)報(bào)告

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上08 檢疫 HapyWu尿中氨基酮戊酸(ALA)的測(cè)定1、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)會(huì)用乙酸乙酯萃取對(duì)二氨基苯甲醛比色法測(cè)定尿中氨基酮戊酸(ALA)的含量，從而了解鉛吸收和鉛中毒的診斷。2、 實(shí)驗(yàn)原理在PH為4.6及溫度為100的條件下，ALA與乙酰乙酸乙酶縮合生成吡咯化合物。此化合物用乙酸乙酯提取，并與顯示劑（對(duì)二甲氨基苯甲醛）作用生成紅色化合物，根據(jù)顏色深淺進(jìn)行比色定量。3、 實(shí)驗(yàn)步驟1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 取具賽比色管10ml6支，按下表配置標(biāo)準(zhǔn)色列：試劑 0 1 2 3 4 5 ALA標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液（ml）0.0 0.1 0.3 0.5 0.7 1.0水（ml）2.0 1.9 1

2、.7 1.5 1.3 1.0ALA含量（ug)0 1 3 5 7 10A. 各管中加入2ml乙酸緩沖液，0.4ml乙酰乙酸乙酯，混勻，于沸水中加熱10分鐘，取出冷至室溫。B. 各管加入4ml 乙酸乙酯，加塞振搖1分鐘，離心5分鐘、取出靜置分層。C. 各取乙酸乙酯提取液2ml于另外6支管中，各管加入2ml顯色劑，加塞振搖，靜置10分鐘。D. 用分光光度計(jì)（波長(zhǎng)554），以零管作參比，測(cè)其吸光度。根據(jù)ALA濃度與吸光度的關(guān)系繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。2. 尿樣測(cè)定A.預(yù)先測(cè)定尿液比重，測(cè)得尿樣比重為1.010。B.分別取1ml尿樣于兩支上述一樣的管內(nèi)，各加入水1ml，乙酸緩沖液2ml,混勻。其一為樣品管，另一

3、為空白管。向樣品管中家兔0.4ml乙酰乙酸乙酯，空白管中加入0.4乙酸緩沖液，充分混勻，同時(shí)置沸水浴中加熱10分鐘，取出冷至室溫。C.按標(biāo)曲繪制的BD進(jìn)行，以乙酸乙酯作參比，進(jìn)行比色定量。四實(shí)驗(yàn)結(jié)果與計(jì)算1.標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制管號(hào)012345ALA含量（ug)0135710吸光度A00.0540.1520.2420.2880.4792. 尿樣結(jié)果 空白管為0.022，樣品管為0.110。 帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線查得樣品管中ALA含量為1.83ug。 根據(jù)尿樣比重為1.010，在正常范圍內(nèi)，故尿中ALA（mg/L)=樣品管中ALA含量（ug) =1.83mg/L5 實(shí)驗(yàn)結(jié)論 根據(jù)鉛實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)指標(biāo)值，尿中氨基酮戊

4、酸(ALA)的診斷值為8mg/L，因此本實(shí)驗(yàn)所用的尿樣樣品未超標(biāo)。六實(shí)驗(yàn)討論1.進(jìn)行比色定量時(shí)，為什么樣品測(cè)定時(shí)用乙酸乙酯作參比？原因是標(biāo)準(zhǔn)曲線用的是應(yīng)用液，可以用零管參比，而測(cè)定管中的最大容積為乙酸乙酯，為了最大限度的消除背景吸收等帶來(lái)的誤差，因此選擇乙酸乙酯作為參比。2. 若鳥(niǎo)樣比重不在正常的范圍內(nèi)，測(cè)的結(jié)果應(yīng)如何計(jì)算 此時(shí)應(yīng)先進(jìn)行校正，采用公式：尿中ALA（mmol/L）=樣品管含量（ug） * 1.030-1.000 * 0.0076 1（尿樣） 尿比重-1.000 3. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)注意哪些 在處理數(shù)據(jù)時(shí)，應(yīng)返回檢測(cè)一下數(shù)據(jù)結(jié)果是否在此方法的線性范圍內(nèi)，否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確度；同時(shí)因?yàn)樗玫脑噭橛袡C(jī)溶劑，易分解，