網(wǎng)織紅細胞計數(shù)

1、網(wǎng)織紅細胞計數(shù)1.項目名稱網(wǎng)織紅細胞計數(shù)2.檢驗?zāi)康?.1觀察貧血療效2.2骨髓移植后監(jiān)測骨髓造血恢復(fù)2.3其他疾病協(xié)診等臨床實驗室3.檢驗原理:網(wǎng)織紅細胞是尚未完全成熟的紅細胞,其胞漿內(nèi)尚存在有嗜堿性的RNA物質(zhì),甲藍活體染色后,其胞漿內(nèi)尚存在有嗜堿性的RNA物質(zhì),經(jīng)煌焦油藍或新亞呈淺藍或深藍色的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。4.性能參數(shù)4.1重復(fù)性4.2分析和計算參數(shù):百分比(%4.3樣本量:染液量=1:14.4精密度5.原始樣品系統(tǒng):全血6.容器和添加劑類型容器采用真空負壓專用抗凝管,添加劑類型為0.109M乙二胺四乙酸鉀7.試及顯微鏡7.1 10G/L新亞甲藍(或煌焦油藍生理鹽水溶液:新亞甲藍 1.0G枸

2、櫞酸鈉0.4G氯化鈉0.85G溶于雙蒸餾水100ML中,混勻,過濾后備用。7.2 顯微鏡7.2.1 商標8.校準程序:顯微鏡的驗證,光路系統(tǒng)校正燈泡大約半年更換一次9.程序步驟:9.1標本采集與要求9.1.1標本采集:抽取靜脈血1.8ml,加入到含有乙二胺四乙酸鉀溶液的抗凝真空試管中,并輕輕顛倒10次使之充分混勻,不得有凝塊、不得形成泡沫,總量不得超過2.0±0.2ml,并在試管上做好標識。采血應(yīng)避免溶血,采血后2小時內(nèi)送到檢驗科,需要運輸時應(yīng)在低溫條件下運輸。采集標本時宜“一針見血”,以防止組織損傷。9.1.2不合格標本的處理對凝固、有凝塊、采血量不符合要求、無條碼或無標識等不合格

3、的標本,距采集時間超過2小時并且沒有按要求儲存的標本,按程序文件樣品核收、登記和保存程序處理9.1.3標本保存檢測應(yīng)在標本采集后2小時內(nèi)完成,28保存不超過4小時,分析后的標本保存三天。9.2檢驗前準備9.2.1把接收到的標本按順序編寫序號。9.2.2準備清潔、干燥、無塵、無油脂的載玻片、蓋玻片、毛細管,玻璃筆。9.3病人標本的檢驗9.3.1取小試管1支加10G/L新亞甲藍鹽水溶液2滴。9.3.2加入末梢血(或EDTA鉀抗凝靜脈血2滴于上述試管中,混勻。9.3.3室溫下放置1015MIN后,取1滴制成薄片。9.3.4油鏡下至少計數(shù)1000個紅細胞中網(wǎng)織紅細胞數(shù)。9.3.5計算網(wǎng)織紅細胞百分數(shù)=

4、計數(shù)1000個紅細胞中的網(wǎng)織紅細胞數(shù)/1000網(wǎng)織紅細胞絕對數(shù)(個/L=網(wǎng)織紅細胞百分比數(shù)*紅細胞數(shù)/L 【注意】1.活體染色時間不能過短。室溫低時,放37攝氏度恒溫箱。2.最好制兩張片,每張計數(shù)1000個紅細胞,避免分布不均引起的誤差。涂片要薄而均勻,不使紅細胞重疊。3.為計數(shù)方便,可于目鏡中放一中間有孔硬紙,縮小視野便于計數(shù)。4.試劑應(yīng)定期重配,以免變質(zhì)沉淀。5.染液與血液比例約為1:1,嚴重貧血時可適量增加血液的比例。10.質(zhì)量控制10.1顯微鏡法網(wǎng)織紅細胞目視激計數(shù)誤差較大,影響因素主要有:操作人對網(wǎng)織紅細胞認識不同;血涂片的好壞;計數(shù)紅細胞數(shù)量的多少和計數(shù)方法等。10.2儀器法歲可計

5、數(shù)紅細胞1000050000個,但如存在Howell-Jolly小體、有核紅細胞、巨血小板,則可見假陽性。11.干擾12.參考區(qū)間網(wǎng)織紅細胞百分數(shù)成人:0.0050.015新生兒:0.030.06兒童:0.0050.015網(wǎng)織紅細胞絕對數(shù):成人:(2484*10*9/L13.實驗室解釋:13.1判斷骨髓紅細胞造血情況13.1.1網(wǎng)織紅細胞增多:表示骨髓紅細胞生成旺盛。常見于:1.溶血性貧血,溶血時由于大量網(wǎng)織紅細胞進入血液循環(huán),RET可增至6%8%或以上,急性溶血時,可達到20%左右,嚴重者可在50%以上,絕對值常超過100*10*9/L。急性失血后510D網(wǎng)織紅細胞達到高峰,2周后恢復(fù)正常。

6、2.放射治療和化學(xué)治療后,造血恢復(fù)時,可見RET短暫和迅速增高,是表明檢測幼稚RET的變化骨髓恢復(fù)較敏感的指標。3.紅系無效造血時,骨髓檢查表明紅系增生活躍,而外周網(wǎng)織紅細胞計數(shù)正?；騼H輕度高。13.1.2網(wǎng)織紅細胞減少:見于再生障礙性貧血、溶血性貧血再障危象時。典型的再生障礙性貧血網(wǎng)織紅細胞計數(shù)低于0.005,網(wǎng)織紅細胞絕對值低于15*10*9/L,為診斷其標準之一。13.2觀察貧血療效缺鐵性貧血、巨幼細胞性貧血治療過程中,如RET增高,表明治療有效,說明骨髓增生功能良好;如RET不增高,則表明治療無效,并提示有骨髓造血功能障礙,需進一步檢驗。RET是貧血患者隨訪檢查的項目之一。13.3骨髓

7、移植后監(jiān)測骨髓造血恢復(fù)骨髓移植后第21天,如RET大于15*10*9/L,常表明無移植并發(fā)癥;RET小于15*10*9/L,伴中性粒細胞和血小板增高,可能為骨髓移植失敗。14.安全性防護措施14.1在操作顯微鏡時應(yīng)按照儀器作業(yè)指導(dǎo)書進行操作,防止受傷、觸電等14.2請帶上橡膠手套進行染色、沖片,在工作完成后,用消毒液清洗雙手,以免發(fā)生感染14.3在涂片時應(yīng)小心謹慎,應(yīng)始終戴上橡膠手套,以避免發(fā)生細菌感染,若樣本濺入眼睛或者傷口,須用大量清水沖洗,并立即就診14.4在配制染液時:如果試劑不慎落入眼睛,立即用大量清水沖洗,并接受治療;如果不慎吞入試劑,立即向醫(yī)生求助,喝入大量清水,并盡量嘔出吞入試劑;如果試劑沾上皮膚或者手,用大量清水沖洗;在丟棄廢液和消耗品時,請按照處理醫(yī)療、傳染性、工業(yè)性廢水的步驟進行處理,如果其中含有血樣,可能導(dǎo)致細菌感染.15.變異的潛在來源15.1