異煙肼含量測(cè)定方法

1、異煙肺含量測(cè)定方法通黃4亭悅本科生畢業(yè)論文異煙肌含量測(cè)定方法比較姓 名： XXX指導(dǎo)教師：XXX院系：化學(xué)化工學(xué)院專業(yè)：制藥工程學(xué) 號(hào)：提交日期：2012-03-30黃山學(xué)院本科畢業(yè)論文目錄中文摘要 3外文摘要 4引言 51 .異煙肌簡(jiǎn)介51.1 物理化學(xué)性質(zhì) 51.2 藥理作用 61.2.1 作用原理 61.2.2 臨床應(yīng)用 61.2.3 不良反應(yīng) 61.3 異煙肥制劑研究發(fā)展71.4 異煙肌含量測(cè)定方法簡(jiǎn)介72 .實(shí)驗(yàn)部分 72.1 實(shí)驗(yàn)儀器和試劑 72.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器72.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑 82.2 實(shí)驗(yàn)應(yīng)用公式 82.3 澳酸鉀滴定法 82.3.1 實(shí)驗(yàn)原理 82.3.2 試劑溶液配

2、制 92.3.3 異煙肌含量測(cè)定 92.3.4 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 92.3.5 回收率實(shí)驗(yàn) 102.3.6 精密度實(shí)驗(yàn) 102.3.7 結(jié)果分析與討論 102.4 紫外分光光度法 112.4.1 實(shí)驗(yàn)原理 112.4.2 試劑溶液配制 112.4.3 測(cè)定波長(zhǎng)選擇 112.4.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 112.4.5 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 122.4.6 回收率實(shí)驗(yàn) 132.4.7 精密度實(shí)驗(yàn) 132.4.8 結(jié)果分析與討論 132.5 鋁磷酸雜多藍(lán)分光光光度法142.5.1 實(shí)驗(yàn)原理 142.5.2 試劑溶液配制 142.5.3 實(shí)驗(yàn)方法 142.5.4 測(cè)定波長(zhǎng)選擇 142.5.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 152.5.6

3、穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 162.5.7 回收率實(shí)驗(yàn) 162.5.8 精密度實(shí)驗(yàn) 162.5.9 結(jié)果分析與討論 173 .實(shí)驗(yàn)結(jié)論 17參考文獻(xiàn) 18致謝 201黃山學(xué)院本科畢業(yè)論文異煙肼含量測(cè)定方法比較XXX指導(dǎo)老師： XXX（黃山學(xué)院化學(xué)化工學(xué)院，黃山，安徽， 245041 ）摘要 ： 隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展， 無(wú)論是對(duì)異煙肼還是其他藥物的研究都更進(jìn)一步， 并且更加精確。 因此， 對(duì)含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)方法的精確度也規(guī)定了更高的要求。 本文主要比較了傳統(tǒng)的溴酸鉀滴定法、 紫外分光光度法以及鉬磷酸雜多藍(lán)分光光度法這三種實(shí)驗(yàn)方法在異煙肼原料藥含量測(cè)定方面各自的優(yōu)缺點(diǎn)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 三種方法的平均回收率和 RSD

4、分別為 102.5%和 0.32% ；101.88%和 0.22； 104.25%和 0.15%。結(jié)論：三種方法都可以用以異煙肼原料藥的含量測(cè)定，并且鉬磷酸雜多藍(lán)分光光度法的精密度都較高，而紫外分光光度法測(cè)定的準(zhǔn)確度和穩(wěn)定性較好。關(guān)鍵詞 ： 異煙肼； 溴酸鉀滴定； 紫外分光光度法；鉬磷酸雜多藍(lán)5The Comparison of Content Determination Methods of IsoniazideXXXDirector: XXX( Chemistry and Chemical Engineering College, Huangshan University,Huangsha

5、n, Anhui, 245041 )Abstract: Along with the development of science and technology, both for isoniazid or other drugs are further studied. And the methods are more precise than before. Therefore, we set a highier requirement to make sure the content determination methods more accuracy. This paper main

6、ly compares the content determination methods of isoniazid. They are Potassium bromate titration, Ultraviolet spectrophotometry and molybdenum blue spectrophotometry. They have respectively merits and demerits. The result : Three methods of average recovery rate and RSD are 102.5% and 0.32% ; 101.88

7、% and 0.22%; 104.25% and 0.15%. The conclusion is that the isoniazid crude drug can use these three methods to make the content determinantion. But the most precise method is molybdenum blue spectrophotometry, and the best stable and the most accurate method is Ultraviolet spectrophotometry.Key word

8、s: isoniazide; potassium bromate titration; ultraviolet spectrophotometry; molybdenum heteropolyblue黃山學(xué)院本科畢業(yè)論文引言人類幾千年的歷史以來(lái)一直在同各種疾病作斗爭(zhēng)。踏入二十一世紀(jì)以后，同樣也有很多的疾病突然襲來(lái)，但是隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展更新，人類同時(shí)也在用智慧創(chuàng)造出更加有效的藥物來(lái)與疾病作斗爭(zhēng)。并且隨著各種自動(dòng)化機(jī)械和精密儀器的出現(xiàn)，藥物的各種檢測(cè)和含量測(cè)定更加準(zhǔn)確精密。結(jié)核病是一種由結(jié)核桿菌感染而引起的慢性傳染性疾病。據(jù)世界衛(wèi)生組織( WHO ) 報(bào)道，目前全世界近三分之一的人已感染了結(jié)

9、核桿菌，每年約三百萬(wàn)人死于結(jié)核病。結(jié)核病是目前全球傳染病中威脅人類健康的第一號(hào)殺手。我國(guó)是全球二十二個(gè)結(jié)核病高負(fù)擔(dān)的國(guó)家之一，結(jié)核患者數(shù)目位居世界第二，僅次 于印度1。1952年由美國(guó)和西德的研究人員分別獨(dú)立發(fā)現(xiàn)異煙肌具有強(qiáng)的抗結(jié) 核桿菌活性。從發(fā)現(xiàn)至今，為了達(dá)到最好的療效，并且把副作用減輕到最小程 度，異煙肌與其他藥物一樣經(jīng)歷著各種劑型的研究。雖然從發(fā)現(xiàn)至今已過(guò)去了 將近六十年的歷史，目前異煙肌仍作為抗結(jié)核病的一線藥物而被廣泛使用，因 為異煙肌是抗結(jié)核有效藥物中復(fù)合藥片里四種成分之一2,復(fù)合型藥處方由于考慮了各種因素對(duì)療效的影響，因此其抗耐藥性能力較普通藥物強(qiáng)。在含量測(cè)定中，不同的劑型有著不

10、一樣的實(shí)驗(yàn)方法，因此在測(cè)定含量小而 精密度要求較高時(shí)應(yīng)選擇適當(dāng)?shù)姆椒?。本文通過(guò)穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)、回收率實(shí)驗(yàn)以及 精密度實(shí)驗(yàn)來(lái)比較異煙肌含量測(cè)定中三種不同方法的優(yōu)劣，從而方便異煙肌在 不同情況下含量測(cè)定方法的選擇。1異煙冊(cè)簡(jiǎn)介1.1 物理化學(xué)性質(zhì)異煙肥根據(jù)其結(jié)構(gòu)等方法有很多種命名，其中文又名異煙酰肌、雷米封3、丫叱噬甲酰肌、4比噬乙酰肌、4比噬竣酸肌、叱噬-4-甲酰肌。異煙肌是一種白 色針狀結(jié)晶，無(wú)氣味，味微甜而后苦，不是很穩(wěn)定，遇光漸變質(zhì)因此需要避光 保存3。溶解度在不同溫度不同溶劑中有差別， 比如在25c水中約14% ,在40c 水中約26%（水溶液呈中性），在25c乙醇中約2%,在沸乙醇中約10

11、%,在氯 仿中約0.1%;幾乎不溶于苯和乙醴分子量為：137.15ONHNH2分子結(jié)構(gòu)如右下圖所示1.2 異煙肥藥理介紹最早出現(xiàn)的有效抗結(jié)核病的藥物是鏈霉素，但是由于結(jié)核桿菌的耐藥性以 及鏈霉素本身的副作用，使得在研制出新藥后鏈霉素退居抗結(jié)核病二線。隨著O藥物的不斷更新研發(fā)，和異煙肌一起被用于治療結(jié)核病的藥物有利福平 久除此 O之外，利福霉素類藥物如：利福噴丁、利福布丁等；以及其他化學(xué)治療藥物。OH+ 3N1952年異煙眥的發(fā)明使治療結(jié)核%了課程+她rO在世C十年的使用 歷史中，雖然有的病夫所感染的結(jié)核菌已經(jīng)產(chǎn)生了耐藥性，,但3色大多數(shù)醫(yī)型N認(rèn)為它是治療結(jié)核病的一個(gè)不可缺少的主藥。1.2.1

12、作用原理異煙肼選擇性作用于結(jié)核分枝桿菌，對(duì)靜止期結(jié)核桿菌有抑制作用，對(duì)繁殖期結(jié)核桿菌有殺滅作用。因其穿透性強(qiáng)，故對(duì)細(xì)胞內(nèi)外的結(jié)核桿菌都有作用。其具體的作用機(jī)制尚未完全闡明，可能是抑制分枝菌酸的合成，從而使細(xì)胞喪失耐酸性、疏水性和增殖力而死亡。分枝菌酸是結(jié)核分枝桿菌所特有的重要成分，因此異煙肼對(duì)其他細(xì)菌無(wú)明顯作用。異煙肼單用易產(chǎn)生耐藥性，聯(lián)合用藥可延緩耐藥性產(chǎn)生，并增強(qiáng)療效，并且與其他抗結(jié)核藥無(wú)交叉耐藥性。1.2.2 臨床應(yīng)用（ 1）異煙肼為治療結(jié)核病的首選藥物，適用于各種類型的結(jié)核病，如肺、淋巴、骨、腎、腸等結(jié)核，結(jié)核性腦膜炎、胸膜炎及腹膜炎等。為了預(yù)防和延緩耐藥性的產(chǎn)生，一般應(yīng)與其他一線抗結(jié)

13、核藥聯(lián)合應(yīng)用。對(duì)急性粟粒性結(jié)核和結(jié)核性腦膜炎應(yīng)增大劑量，必要時(shí)，采用靜脈滴注。（ 2）高濃度異煙肼可用于治療低度耐多藥肺結(jié)核的治療5 。周潔等通過(guò)對(duì)61 例患者隨機(jī)分成兩部分做對(duì)照試驗(yàn)，得出結(jié)論：進(jìn)行高濃度異煙肼經(jīng)脈輸入和局部灌注強(qiáng)化兩個(gè)月的患者比常規(guī)量治療的患者療效更好，并且未見(jiàn)嚴(yán)重的肝功能損壞和其他不良反應(yīng)。（3） 異煙肼和利福平聯(lián)合灌腸可用于治療細(xì)菌性痢疾6 。 高陽(yáng)通過(guò)對(duì)50 例痢疾患兒隨機(jī)分成兩組做對(duì)照試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)組在常規(guī)治療下輔助異煙肼、利福平聯(lián)合灌腸，對(duì)照組僅進(jìn)行常規(guī)治療。結(jié)論：輔助異煙肼、利福平聯(lián)合灌腸的治療效果明顯優(yōu)于常規(guī)治療。1.2.3 不良反應(yīng)異煙肼的不良反應(yīng)癥狀相對(duì)較輕，

14、其發(fā)生率主要與使用劑量有關(guān)系。不過(guò)也有一些發(fā)病率很低，但是其癥狀相對(duì)而言卻比較嚴(yán)重，如由于病菌具有耐藥性因而在免疫方面會(huì)引起胸腔積液復(fù)發(fā)等7 。 異煙肼的主要不良反應(yīng)有如下幾方面。（ 1）神經(jīng)系統(tǒng)：異煙肼引起的常見(jiàn)神經(jīng)系統(tǒng)不良反應(yīng)表現(xiàn)為：周圍神經(jīng)病變、交感神經(jīng)病變、視神經(jīng)炎等神經(jīng)障礙病癥8 。同時(shí)也會(huì)引起精神障礙，表現(xiàn)為：憂郁、強(qiáng)迫、興奮等癥狀。（ 2）肝臟毒性：異煙肼服用后經(jīng)肝臟中的酶代謝轉(zhuǎn)化為肼、乙酰肼等代謝物 9 。肼和乙酰肼在肝臟中經(jīng)細(xì)胞色素 P450 酶系氧化而影響肝臟的抗氧化物耗9NHNH2黃山學(xué)院本科畢業(yè)論文竭，其作用超過(guò)肝細(xì)胞的解毒作用，因此易引起肝細(xì)胞功能紊亂，最終引起氧化型

15、肝損傷。（ 3）其他：可引起共濟(jì)失調(diào)10 ；引起過(guò)敏反應(yīng)如：藥熱、皮疹等；偶爾可引起粒細(xì)胞缺乏、血小板減少、再生障礙性貧血等。1.3 異煙肼制劑研究發(fā)展異煙肼水溶性較好，因此口服生物利用度較高，殺菌能力強(qiáng)。但是因?yàn)榭诜盟庍^(guò)程中，其藥物分布于全身體液和組織中，容易產(chǎn)生各種副反應(yīng)，不僅使用藥劑量增加，而且危害身體健康。隨著制藥技術(shù)的不斷更新改革，以及藥劑理念的不斷創(chuàng)新，目前異煙肼也有不同的劑型來(lái)滿足不同的臨床需求。異煙肼制劑從最初的片劑膠囊劑到目前已經(jīng)研發(fā)出來(lái)的或者正在研究的緩控釋制劑、靶向制劑和復(fù)方制劑。如載異煙肼聚己內(nèi)酯微球11、異煙肼藥質(zhì)體12等等。1.4 異煙肼含量測(cè)定方法簡(jiǎn)介由于異煙肼

16、的理化性質(zhì)以及異煙肼不斷出現(xiàn)的新劑型要求，因此異煙肼的含量測(cè)定同樣也有非常多的方法。比如， 2005 年版的藥典中對(duì)異煙肼的含量測(cè)定用的是溴酸鉀滴定法；靈敏度非常高的衍生極普法13 ，目前該方法用于血清中異煙肼含量測(cè)定；再如，異煙肼的電化學(xué)測(cè)定方法14 、縮合比色法15 ；以及可以靈敏度和精密度更高的色譜分析法，目前紫外風(fēng)光光度法是最為簡(jiǎn)便的含量測(cè)定方法，而高效液相色譜是靈敏度最高的測(cè)定方法16。2 實(shí)驗(yàn)部分2.1 實(shí)驗(yàn)儀器和試劑2.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器HH-8J 數(shù)顯恒溫水浴鍋（金壇市杰瑞爾電器有限公司） 、 T6 新世紀(jì)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（北京譜析通用儀器有限責(zé)任公司） 、 C30 孔氣流烘干

17、機(jī)（河南一恒儀器有限公司） 、 錐形瓶若干、 100mL 量筒、 50mL 量筒、 25mL 移液管、 20mL移液管、燒杯若干、酸式滴定管、洗耳球；2.1.2 試劑異煙肼原料藥、甲基橙（天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所） 、磷鉬酸（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司） 、溴酸鉀（汕頭市西隴化工廠有限公司） 、鹽酸（宿州化學(xué)試劑有限公司） 、純化水（黃山學(xué)院化學(xué)化工學(xué)院自制） 。2.2 實(shí)驗(yàn)應(yīng)用公式標(biāo)準(zhǔn)偏差:n2（XnX）1n（公式2-1）相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差：RSD=（公式2-2）原料藥回收率:測(cè)得量加入量100%（公式 2-3） 17平均回收率:nRn1n（公式2-4）滴定法含量換算計(jì)算式:m 25mL Vi 3.

18、4290.016630.01667紫外分光光度法含量換算公式：（公式2-5）朗伯比爾定律:A bc（公式 2-6） 18C（g . mL）Ai- 1%/ cc /E1cm 100 1cmCl H（公式2-7）C（mol/ L）A3115.26 10 L mol cm 1cm（公式2-8）2.3澳酸鉀滴定法2.3.1 實(shí)驗(yàn)原理13異煙肌具有很強(qiáng)的還原性，在酸性溶液中可以用澳酸鉀滴定，用甲基橙指示劑指示終點(diǎn)。終點(diǎn)時(shí)，微過(guò)量的澳酸鉀氧化甲基橙使其在酸性溶液中粉紅色消失，以指示終點(diǎn)的到達(dá)17 0其化學(xué)反應(yīng)式如下所示:OH2.3.2試劑溶液配制+ 3N2 + 2KBr澳酸鉀滴定液：精密稱取澳酸鉀固體 2

19、.7776g于1000mL容量瓶中，加入純 化水進(jìn)行溶解，制得濃度為 0.01663mol L1的澳酸鉀滴定液。置于 25c恒溫水 浴鍋中進(jìn)行恒溫，待用。甲基橙指示劑：稱取0.0718g甲基橙固體溶于70mL的純化水中，制得濃度 為1.03mg mL 1的甲基橙指示劑。異煙肌溶液：精密稱取1.006g異煙肌原料藥于500mL容量瓶中，加入純化 水進(jìn)行溶解，制得濃度為2.012mg mL1的異煙肌溶液。置于25。叵溫水浴鍋中 進(jìn)行恒溫，待用。2.3.3 異煙肌含量測(cè)定取25mL異煙肌溶液于錐形瓶中加入 50mL的純化水和20mL的鹽酸溶液16' 18,再加入三滴甲基橙指示劑，混勻后放置

20、25c水浴鍋中恒溫約5分鐘。然后 用澳酸鉀滴定液進(jìn)行滴定，滴定至水紅色消失。每1mL澳酸鉀滴定液(0.01667mol L1)相當(dāng)于 3.429mg 的異煙肌19。2.3.4 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)在同一異煙肌溶液中¥品中，分別在 0、1、2、4、8、12小時(shí)內(nèi)用移液管精 密量取25mL異煙肌溶液用滴定法進(jìn)行測(cè)定。根據(jù)公式2-1、2-2以及公式2-5求出異煙肌的含量以及其含量平均值、RSD值，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表2-1 o (注：表格2-1、2-2、2-3中的含量均為每25mL異煙肌溶液中的含量值。)表2-1澳酸鉀滴定法穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及計(jì)算結(jié) 果時(shí) 澳酸鉀加 異煙月并實(shí) 平均實(shí)際 RSD/%間 入量/

21、mL 際含量/mg 含量/mg/h015.1051.6551.250.79115.1051.65215.0551.48414.9551.14814.8550.801214.8050.632.3.5 回收率實(shí)驗(yàn)用25mL移液管精密量取6份25mL異煙肌溶液分別置于6個(gè)錐形瓶中，同法用澳酸鉀滴定液進(jìn)行滴定。根據(jù)公式2-3、2-4以及公式2-5計(jì)算其回收率并計(jì)算出平均值和RSD值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表2-2。表2-2澳酸鉀滴定法回收率實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及計(jì)算結(jié)果澳酸異煙異煙序鉀加腫實(shí)腫理回收平均回RSD/%號(hào)入量際含論含率/%收率/一 I且且/mL里里/mg /mg115.00 51.30102.00.322 15

22、.10 51.65102.73 15.15 51.82 50.30 103.0 102.5%4 15.05 51.48102.3黃山學(xué)院本科畢業(yè)論文5 15.05 51.48102.36 15.10 51.65102.72.3.6 精密度實(shí)驗(yàn)精密量取同一樣品異煙肌，照上面方法連續(xù)測(cè)定5次16,根據(jù)公式2-1、2-2和公式2-5計(jì)算其每25mL溶液中異煙肌含量和RSD值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表2-3。表2-3澳酸鉀滴定法精密度實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及計(jì)算結(jié) 果序 澳酸鉀加 異煙腫實(shí) 異煙朋含量RSD/%/mg115.1051.65215.1551.8215.1051.6551.6840.21415.1551.8251

23、5.0551.482.3.7 結(jié)果討論與分析從表2-1中可以看出異煙肌溶液在12小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定，而從表2-2中回收率實(shí) 驗(yàn)中平均回收率和RSD分別為102.5%和0.32% ,可見(jiàn)準(zhǔn)確度比較好。從表 2-3 中的精密度實(shí)驗(yàn)可見(jiàn)滴定法的精密度良好。澳酸鉀滴定法是2005年藥典規(guī)定用于測(cè)定異煙肌含量的方法，其可操作性 毋庸置疑。并且在穩(wěn)定性方面良好18,操作費(fèi)用在三種測(cè)定方法中是最小的。 但滴定法在本實(shí)驗(yàn)中的誤差與文獻(xiàn)16相比都偏大。原因分析：首先由于條件限 制，滴定過(guò)程中不能一直進(jìn)行恒溫，溫度有些許變化使得滴定時(shí)異煙肌的溶解度發(fā)生變化，因此穩(wěn)定性誤差較大。再則用 25mL滴定管滴定時(shí)，一滴液體的 誤

24、差為0.05mL ,因此無(wú)論在精密度上還是在穩(wěn)定性等方面的測(cè)定偏差都會(huì)較大。 由于上面的原因，滴定法一般使用于常量分析，不適用于微量或者痕量分析。2.4紫外分光光度法2.4.1 實(shí)驗(yàn)原理許多有機(jī)物在紫外區(qū)有特征吸光值，因此可用紫外分光光度計(jì)進(jìn)行定性和 定量分析。異煙肌在波長(zhǎng)為264nm下有最大吸收值16,故可在該波長(zhǎng)下對(duì)其進(jìn) 行定量分析，在264nm波長(zhǎng)下異煙肌的百分吸收系數(shù)為 307( 100mL g 1 cm1)2.4.2 試劑溶液配制異煙肌溶液：精密稱取0.1054g異煙肥原料于100mL容量瓶中加純化水至 刻度，搖勻后得到濃度為1.054mg mL1的異煙肌溶液。供試液：用1mL的移液

25、管精密量取出1mL該溶液于50mL容量瓶中加純 化水至刻度，搖勻后即得21.08 g mL1的異煙肌溶液。放置于25。叵溫水浴鍋 中進(jìn)行恒溫，待用?？瞻滓海阂约兓疄榭瞻住?.4.3 測(cè)定波長(zhǎng)選擇取同一異煙肥樣品溶液分別在不同的波長(zhǎng)下測(cè)定其吸收度。結(jié)果如下表2-4所示。表2-4紫外分光光度法波長(zhǎng)選擇測(cè)定結(jié)果波長(zhǎng)/nm255260264265270吸光度/Abs0.5910.5970.6630.6610.595結(jié)果：從結(jié)果中可以看出在波長(zhǎng)為 264nm下有最大吸收2.4.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制精密量取1mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL、3mL異煙肥溶液分別置于 5個(gè)100mL 容量瓶中加入純化

26、水至刻度，即得濃度為10.54 g mL1、15.81 g mL 1、21.08g mL1、26.35 g mL1、31.62 g mL1的異煙肌溶液。在波長(zhǎng)為 264nm下測(cè) 定其吸光值。并通過(guò)Excel表格做出其標(biāo)準(zhǔn)曲線。數(shù)據(jù)結(jié)果如下表2-5。表2-5紫外分光光度法標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制測(cè)定結(jié)果濃度/ g mL 110.5415.8121.0826.3531.62/Abs0.3050.4610.6520.7780.93519圖2-1紫外分光光度法標(biāo)準(zhǔn)曲線結(jié)果：在264nm波長(zhǎng)下，以吸光值為縱坐標(biāo)，以溶液濃度為橫坐標(biāo)進(jìn)行線 性分析，由上圖表可得到線性方程為 y 0.0299x 0.0046 , r=0

27、.9983。從r值上 看，其相關(guān)性良好。結(jié)果表明異煙冊(cè)在大約10-30 g mL1范圍內(nèi)吸光度呈良好的線性關(guān)系。2.4.5穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取該異煙肌溶液樣品，分別在 0、1、2、4、8、12小時(shí)內(nèi)，在波長(zhǎng)為264nm 下進(jìn)行紫外分光光度法測(cè)定其吸光值，并根據(jù)公式 2-1、2-2、2-3、2-4以及公式 2-7計(jì)算其濃度和RSD值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表2-6。表2-6紫外分光光度法穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及計(jì)算 結(jié)果異煙股實(shí)平均實(shí)時(shí)間吸光值/h /Abs際濃度 際濃度 RSD/%/ g mL1/ g mL10.0.66021.500.66121.530.66221.5621.540.1440.66121.5380.6

28、6321.60120.66121.532.4.6回收率實(shí)驗(yàn)精密量取1mL的異煙肌溶液6份，分別置于6個(gè)50mL的容量瓶中，搖勻 后分別在波長(zhǎng)為264nm下測(cè)定其吸光值。根據(jù)公式2-1、2-2、2-3、2-4以及公 式2-7計(jì)算回收率，并計(jì)算出RSD值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表2-7。表2-7紫外分光光度法回收率實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及計(jì)算結(jié)果實(shí)際理論序吸光值濃度濃度回收平均回 R號(hào) /Abs / 率/%收率/% Sg mL 1 g mL 1D/12340.661 21.530.660 21.500.658 21.43 21.08102.13101.99101.60.657 21.40101.5101.88 0.221

29、50.659 21.47101.8560.661 21.53102.132.4.7精密度實(shí)驗(yàn)取同一批樣品，用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)在波長(zhǎng)為 264nm下連續(xù)6次測(cè)定其 吸光度11,根據(jù)公式2-1、2-2以及公式2-5換算成濃度，并計(jì)算其RSD值。實(shí) 驗(yàn)結(jié)果如下表2-8。表2-8紫外分光光度法精密度實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及計(jì)算結(jié)果異煙朋實(shí)際平均實(shí)序吸光濃度/gmL1際濃度RSD/%號(hào)值/ g mL 1/Abs10.66121.5320.65721.400.66121.5321.480.2740.65721.4050.66021.5060.66121.53黃山學(xué)院本科畢業(yè)論文2.4.8 結(jié)果討論與分析從上表 2-4

30、 中可得出異煙肼在波長(zhǎng)為 264nm 下有最大吸收；而從表2-5 得出該法中的異煙肼溶液在12 小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定；表2-6 回收率實(shí)驗(yàn)中其平均回收率和RSD 分別為： 101.88%和 0.22% ，可見(jiàn)該法的準(zhǔn)確度良好。表2-7精密度實(shí)驗(yàn)中的 RSD 為 0.27% ，符合一般標(biāo)準(zhǔn)的要求。紫外分光光度法操作方法同樣很簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、快速，結(jié)果也比較準(zhǔn)確，并且分析成本不高20 。由于異煙肼是水溶性藥物易溶于水，因此異煙肼的含量測(cè)定幾乎不用其他化學(xué)試劑。但是由于紫外分光光度法測(cè)定值的加和性，故其選擇性較差，在測(cè)定時(shí)無(wú)論是溶液受到污染還是比色皿上的擦拭痕跡和污點(diǎn)對(duì)測(cè)定結(jié)果影響都很大。目前紫外分光光度法一般用

31、于微量分析并且由于能較快分析出結(jié)果，也用于易被氧化或者易被還原的藥物的分析。2.5 鉬磷酸雜多藍(lán)分光度法2.5.1 實(shí)驗(yàn)原理異煙肼具有還原性，與磷鉬酸發(fā)生氧化還原反應(yīng)后生成雜多藍(lán)，磷鉬酸中的部分鉬離子價(jià)態(tài)從正五價(jià)跳到正六價(jià)21 。異煙肼在可見(jiàn)光區(qū)中沒(méi)有吸收，而磷鋁酸的最大吸收波長(zhǎng)為400nm,鋁磷酸雜多藍(lán)的最大吸收波長(zhǎng)為700nm。因此光譜測(cè)定選用 700nm 波長(zhǎng)來(lái)測(cè)定該雜多藍(lán)的含量，鉬磷酸雜多藍(lán)的摩爾吸收系數(shù) 21為 5.26 103L mol 1 cm 1 。2.5.2 試劑溶液配制鉬磷酸溶液：稱取2.2981g 鉬磷酸于 500mL 容量瓶中，加純化水至刻度，搖勻即得濃度為2.52x1

32、0-3 mol L 1 的鉬磷酸溶液。0.1mol L 1鹽酸：精密量取36.5%鹽酸 2.5mL 于 250mL 容量瓶中，加入純化水至刻度，搖勻即得。異煙肼溶液：精密稱取0.2195g 于 100mL 容量瓶中，加入純化水至刻度，搖勻即得濃度為 2.195mg mL 1 。2.5.3 實(shí)驗(yàn)方法精密量取 1.2mL 異煙肼溶液、 16.0mL 0.1mol L 1鹽酸以及 40.0mL 鉬磷酸 溶液于 100mL 容量瓶中加入純化水至刻度，搖勻。反應(yīng)生成深藍(lán)色絡(luò)合物，放置于90的恒溫水浴鍋中恒溫30 分鐘后，取出冷卻至室溫，待用。2.5.4 測(cè)定波長(zhǎng)選擇#黃山學(xué)院本科畢業(yè)論文取用上述方法制備

33、好的鋁磷酸雜多藍(lán)分光光度法，分別在不同波長(zhǎng)內(nèi)進(jìn)行 測(cè)定，結(jié)果如下表2-9所示。表2-9鋁磷酸雜多藍(lán)分光光度法波長(zhǎng)選擇 測(cè)定結(jié)果波長(zhǎng)/nm690295700705710/Abs1.0371.0431.0541.0501.043結(jié)果：由以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果可得出，鋁磷酸雜多藍(lán)在700nm波長(zhǎng)下有最大的吸收。2.5.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制精密量取 0.25mL、0.50mL、0.75mL、1.00mL、1.25mL、1.50mL 的異煙肌 溶液分別放置于6個(gè)100mL的容量瓶中，加如純化水至刻度，搖勻即得濃度分 別為 5.49 g mL1、10.97 g mL1、16.46 g mL 1 >21.96 g

34、mL1、24.71 g mL 1、 32.94 g mL1。分別與相應(yīng)比例的鹽酸量和鋁磷酸溶液量進(jìn)行反應(yīng)，照實(shí)驗(yàn)方 法處理，在波長(zhǎng)為700nm下分別測(cè)定其吸光值。結(jié)果如下表 2-10表2-10鋁磷酸雜多藍(lán)分光光度法標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定結(jié)果濃 度 5.4910.97 16.46 21.96 24.71 32.94/ g mL 1吸光值 0.192 0.381 0.572 0.763 0.895 1.143 /Abs濃度(ug/mL)俏光吸黃山學(xué)院本科畢業(yè)論文23圖2-2鋁磷酸雜多藍(lán)分光光度法標(biāo)準(zhǔn)曲線結(jié)果：由上面圖表可得到以異煙肌濃度為橫坐標(biāo)，以吸光值為縱坐標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。經(jīng)過(guò)擬合后得到的線性方程為 y 0

35、.0351x 0.0009 , r=0.9992。r值表 明該曲線與擬合直線的相關(guān)性比較好，同時(shí)也表明了用鋁磷酸雜多藍(lán)分光光度 法測(cè)定的異煙肌溶液在大約為 5.5-33 g mL1濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。2.5.6 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取同一批鋁磷酸雜多藍(lán)溶液，分別在 0、1、2、4、8、12小時(shí)內(nèi)測(cè)定其在 700nm波長(zhǎng)下的吸光度。根據(jù)公式 2-1、2-2以及公式2-8計(jì)算其RSD值。實(shí)驗(yàn) 結(jié)果如下表2-11。表2-11車目磷酸雜多藍(lán)分光光度穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù) 及計(jì)算結(jié)果異煙股實(shí)平均實(shí)際濃度 RSD/%/10-4mol l12.0080.21時(shí)吸光值 際濃度間 /Abs/10-4mol l1/h01.

36、0522.00011.0562.00821.0562.00841.0562.00881.0582.011121.0592.0132.5.7 回收率實(shí)驗(yàn)照上述實(shí)驗(yàn)方法配制6份鋁磷酸雜多藍(lán)溶液，分別在波長(zhǎng)為 700nm下進(jìn)行 分光光度法測(cè)定吸光值，根據(jù)公式 2-1、2-2以及公式2-3、2-4計(jì)算其回收率和 RSD值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表2-12。（注：異煙肥的含量為每100mL中的含量數(shù)值。）表2-12鋁磷酸雜多藍(lán)分光光度法回收率實(shí)驗(yàn) 數(shù)據(jù)及計(jì)算結(jié)果序吸光 號(hào)值/Abs異煙異煙平均回收 RSD/%率/%朋實(shí)朋理回收 際含論含率/% 且且里 里/mg /mg11.056 2.754104.62 1.05

37、4 2.748104.33 1.053 2.746 2.634 103.9 104.250.1541.0562.754104.651.0542.748104.361.0522.743103.82.5.8 精密度實(shí)驗(yàn)量取同一樣品溶液，在波長(zhǎng)為 700nm15下，連續(xù)測(cè)定6次。根據(jù)公式2-1、 2-2以及公式2-8計(jì)算其平均值以及RSD值，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表2-13。表2-13鋁磷酸雜多藍(lán)分光光度法精密度實(shí)驗(yàn) 數(shù)據(jù)及計(jì)算結(jié)果異煙肺實(shí)異煙股平序吸光值際濃度均濃度 RSD/%號(hào) /Abs/10-4mol l1 /10-4mol l111.0522.0002.00450.1021.0542.00331.05

38、52.00641.0552.00651.0552.00661.0552.0062.5.9 結(jié)果討論與分析從表2-11中可看出鋁磷酸雜多藍(lán)在 700nm下游最大吸收；表2-12說(shuō)明了 鋁磷酸雜多藍(lán)溶液在12小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定；表2-13中該法的平均回收率和 RSD分別 為：104.25%和0.15%,可見(jiàn)其準(zhǔn)確度良好；從表 2-13中RSDfi為0.10%,可 見(jiàn)該法的精密度非常好。鋁磷酸雜多藍(lán)分光光度法雖然在測(cè)定時(shí)用的方法和紫外分光光度法一樣， 其精密度都差不多。但由于測(cè)定時(shí)用的波長(zhǎng)不同以及測(cè)定前的反應(yīng)過(guò)程，使得 用鋁磷酸雜多藍(lán)分光光度法精密度和準(zhǔn)確度比起前兩種方法更高。但相比前兩 種方法，該法的操作

39、過(guò)程較為復(fù)雜，需要較高的溫度以及藥品與試劑間的反應(yīng) 需要控制一定的量比。因此對(duì)其結(jié)果的影響因素較多，較容易出現(xiàn)誤差。本論 文實(shí)驗(yàn)中，由于量的控制不夠精確使得在回收率實(shí)驗(yàn)中其收率偏大。3實(shí)驗(yàn)結(jié)論從實(shí)驗(yàn)過(guò)程與結(jié)果上看出：鋁磷酸雜多藍(lán)分光光度法的精密度最好，紫外 分光光度法在這三種方法中的穩(wěn)定性最好，并且準(zhǔn)確度也是最好的。而滴定法 測(cè)定異煙肌含量方法的實(shí)驗(yàn)費(fèi)用是最經(jīng)濟(jì)的。澳酸鉀滴定法由于操作簡(jiǎn)單，實(shí)驗(yàn)費(fèi)用投資較少，一般用于常量分析中的 含量測(cè)定；而紫外分光官渡法由于操作快速簡(jiǎn)便，并且精密度和準(zhǔn)確度較高，黃山學(xué)院本科畢業(yè)論文一般適用于微量分析以及一些性質(zhì)不穩(wěn)定藥物的分析；鉬磷酸雜多藍(lán)的的準(zhǔn)確度和精密度也非常的好，但是由于本身操作的復(fù)雜性，故一般適用于對(duì)精確度要求較高的實(shí)驗(yàn)。不同的方法適用于不同的要求和環(huán)境中，因此在異煙肼含量測(cè)定中應(yīng)根據(jù) 具體情況與標(biāo)準(zhǔn)要求選擇適當(dāng)?shù)臏y(cè)定方法方法。參考文獻(xiàn)1 陳涵 . 異煙肼新劑型的研究進(jìn)展 J . 臨床薈 萃， 2011， 26（ 3） ： 267-268.2 M. Lisa Manier, Michelle L. Reyzer, Anne Goh, etc. Reagent Precoated Targets for Rapid In-Tissue Derivatization of the Anti-Tuberculosi