黃芪超微粉增強(qiáng)免疫功能及抗疲勞作用的研究

1、黃芪超微粉增強(qiáng)免疫功能及抗疲勞作用的研究    摘要：目的：研究黃芪超微粉對免疫功能的影響及抗疲勞的作用，并與黃芪飲片進(jìn)行比較。方法：采用免疫器官重量法測定免疫指標(biāo)，采用小鼠負(fù)重游泳試驗(yàn)觀察抗疲勞作用。結(jié)果：黃芪超微粉能夠顯著增加免疫器官的重量；能夠顯著延長小鼠負(fù)重游泳時(shí)間。結(jié)論：黃芪超微粉具有增強(qiáng)免疫、抗疲勞的功能。    關(guān)鍵詞：黃芪；超微粉；增強(qiáng)免疫；抗疲勞            超微粉碎技術(shù)是近年來國際上興起

2、的一種新型物料加工技術(shù)，該技術(shù)是一種純物理過程，中藥的超微粉碎是指以生物細(xì)胞破壁為目的的粉體作業(yè)，它不以粉體的細(xì)度為目的，而是追求細(xì)胞的破壁率。超微粉碎后的藥材細(xì)粉，半徑很小，藥物的表面積相應(yīng)增大，從而提高了有效成分的溶出率。由于細(xì)胞壁在粉碎過程中大量被破壞，有效成分不需要通過細(xì)胞壁和細(xì)胞膜就能釋放出來，這樣就提高了藥物的釋放量和釋放速度。因此小劑量的超微粉碎破壁細(xì)粉即可達(dá)到大劑量普通藥材的藥效【1-2】。  本文觀察了黃芪超微粉對免疫功能的影響及抗疲勞作用，并與黃芪飲片進(jìn)行了比較，為黃芪超微粉的臨床應(yīng)用提供一定的理論依據(jù)。1、材料   1.1 試劑與儀器

3、0;  碳酸鈉：天津富晨化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，批號(hào)20100827；注射用環(huán)磷酰胺，江蘇恒瑞制藥集團(tuán)，批號(hào)10010521；氯化鈉注射液，國藥集團(tuán)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)08060010；墨汁，北京一得閣墨業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn)；JA1203N型電子天平，；Thermo酶標(biāo)儀。 1.2 藥物黃芪超微粉，由江西中醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部提供。黃芪飲片，由江西中醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院提供，黃芪飲片使用常規(guī)的煎煮法提取，黃芪破超微粉使用前以蒸餾水制成混懸液，4保存。 1.3動(dòng)物KM種小鼠，SPF級(jí)，合格證號(hào)：由江西中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：SCXK（贛）2005-00011.4 統(tǒng)計(jì)方法所用

4、計(jì)量資料用（±s）表示，采用SPSS13.0 for windows統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料組間比較采用One-Way ANOVA。2、方法與結(jié)果2.1 對免疫抑制小鼠免疫器官重量的影響【3】取SPF級(jí)KM種小鼠，隨機(jī)分為正常對照組，模型對照組，黃芪飲片組（2.0g·kg-1），黃芪超微粉分為2.0g·kg-1、1.0g·kg-1、0.5g·kg-1、0.25g·kg-1四個(gè)劑量組。實(shí)驗(yàn)第1天，動(dòng)物按20g/kg體重灌胃給藥，連續(xù)7天，每天1次，正常對照組灌胃蒸餾水。實(shí)驗(yàn)第4天，除正常對照組外，各組分別以50mg/kg體重腹腔注

5、射環(huán)磷酰胺，連續(xù)3天，造成動(dòng)物免疫抑制模型。于末次給藥后1h處死動(dòng)物，稱量體重，并解剖取胸腺和脾臟稱重，計(jì)算臟器指數(shù)。結(jié)果顯示，與正常對照組比較，模型對照組脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)都明顯小于正常對照組（P0.01）。與模型對照組比較，黃芪超微粉2.0、1.0、0.5、0.25g·kg-1均能顯著增加小鼠的脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)（P0.050.01）。見表1。臟器指數(shù)=×100%  2.2 對小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響【3】 取SPF級(jí)KM種小鼠隨機(jī)分為對照組，黃芪飲片組（2.0g·kg-1），黃芪超微粉分為2.0g·kg-1、1.0g·kg-1、0

6、.5g·kg-1、0.25g·kg-1四個(gè)劑量組。實(shí)驗(yàn)第1天，動(dòng)物按20g/kg體重灌胃給藥，連續(xù)7天，每天1次，對照組灌胃等量蒸餾水。于末次給藥30min后，小鼠尾部負(fù)荷10體重的鐵絲，放入水中游泳（水溫25，水深20cm），觀察小鼠游泳至力竭（在水下10秒鐘不能上浮），該時(shí)間為小鼠的游泳時(shí)間。結(jié)果顯示，與對照組比較，黃芪超微粉2.0、1.0、0.5g·kg-1均能顯著延長小鼠的游泳時(shí)間（P0.050.01），具有抗疲勞作用，并具有劑量依賴性。見表2。表1 黃芪超微粉對免疫器官重量的影響（x±s）組別劑量（g·kg-1）N脾臟指數(shù)胸腺指數(shù)正常

7、對照組-103.46±0.834.49±4.50模型對照組-101.45±0.231.37±0.40黃芪飲片組2.0101.77±0.46*1.91±0.52*黃芪超微粉組2.0101.96±0.84*2.00±0.83*黃芪超微粉組1.0101.68±0.27*2.19±0.42*黃芪超微粉組0.5101.58±0.192.06±0.22*黃芪超微粉組0.25101.89±0.30*2.46±0.43* 注:示與正常對照組相比，P<0.0

8、5，示與正常對照組相比，P<0.01；*示與模型對照組相比，P<0.05；*示與模型對照組相比，P<0.01。（下同）表2 黃芪超微粉對小鼠游泳時(shí)間的影響（x±s）組別劑量（g·kg-1）N游泳時(shí)間（sec）對照組10116.44±42.51黃芪飲片組2.010145.30±28.19*黃芪超微粉組2.010185.30±107.07*黃芪超微粉組1.010176.40±78.10*黃芪超微粉組0.510194.70±81.42*黃芪超微粉組0.2510145.50±56.343、討論 

9、    中藥發(fā)揮藥效的主要有效成分一般存在于植物的細(xì)胞壁中，傳統(tǒng)中藥飲片其入藥形狀大都有一個(gè)毫米以上的厚度，細(xì)胞破壁率據(jù)推算不到3%，儲(chǔ)藏在細(xì)胞內(nèi)的中藥有效成分要發(fā)揮作用，必須穿過數(shù)個(gè)甚至幾十個(gè)細(xì)胞壁才能溶解到溶媒中，因此，傳統(tǒng)中藥飲片的有效成分的利用率是很低的。本研究所用的黃芪超微粉系采用超微粉碎技術(shù)將中藥飲片粉碎后，細(xì)胞破壁率將達(dá)到 86.7%，有效成分利用率在90%以上，使細(xì)胞內(nèi)各種有效成分充分溶出，促進(jìn)和提高中藥材多種有效成分的溶解及釋放。藥物在體內(nèi)釋放后，與胃腸粘膜的接觸面積增大，能更好地分散、溶解在胃腸液中，更易被胃腸道吸收，藥效明顯增強(qiáng)【1】【2】【

10、4】。     黃芪為豆科類植物蒙古黃芪或膜莢黃芪的干燥根，黃芪具有補(bǔ)氣生血、益衛(wèi)固表、斂瘡生肌等功效。主要用于脾肺氣虛、中氣下陷、食少便溏及氣血不足所致癰疽不潰等。黃芪中主要含有黃芪多糖、黃酮類化合物、三萜類成分及黃芪大豆皂苷、氨基酸、生物堿和微量元素等【5】。呂氏研究發(fā)現(xiàn)【6】，黃芪多糖腹腔注射，能明顯升高正常小鼠和環(huán)磷酰胺致免疫功能低下小鼠的單核巨噬細(xì)胞的吞噬能力、血清溶血素抗體水平、脾臟指數(shù)等。宋強(qiáng)【7】等報(bào)道黃芪冰凍微粉能夠顯著延長小鼠負(fù)重游泳時(shí)間，具有明顯的耐疲勞作用，佟欣【8】等對黃芪、黨參對小鼠抗應(yīng)激作用進(jìn)行了對比研究發(fā)現(xiàn)，黃芪和黨參水煎劑均能顯著增強(qiáng)小鼠抗應(yīng)激反應(yīng)的能力，黃芪提高小鼠抗應(yīng)激的作用優(yōu)于黨參，其中在抗熱刺激和耐缺氧實(shí)驗(yàn)中黃芪作用明顯優(yōu)于黨參，而在低溫游泳實(shí)驗(yàn)中黃芪和黨參的作用無明顯差別。