高效液相常見問題和解決方法總匯

1、壓 力 異 常操作壓力的變化往往是故障的征兆。從下表中找出所觀察到的現(xiàn)象，并在右側(cè)的列表中參考相應(yīng)的解決方法。A、        沒有壓力顯示，沒有流動相流動原 因解決方法1、電源問題 1、接通電源，開機2、保險絲被燒壞2、更換保險絲3、控制器設(shè)定不正確或設(shè)定失敗3、a、采取恰當(dāng)?shù)脑O(shè)定 b、修理或更換控制器4、柱塞桿折斷4、更換柱塞桿5、泵頭內(nèi)有空氣5、溶劑脫氣、啟動泵抽出空氣6、流動相不足6、a、補充流動相 b、更換入口濾頭7、單向閥損壞7、更換單向閥8、漏液8、擰緊或更換手緊接頭B、   &

2、#160;     流動相流動正常，但沒有壓力顯示原 因解決方法1、儀表損壞1、更換儀表2、壓力傳感器損壞2、更換壓力傳感器C、        壓力持續(xù)偏高原 因解決方法1、流速設(shè)定過高1、調(diào)整流速設(shè)定2、柱前篩板堵塞2、a、在允許情況下反沖色譜柱 b、更換篩板 c、更換色譜柱3、流動相使用不當(dāng)或緩沖鹽的結(jié)晶沉淀3、a、使用恰當(dāng)?shù)牧鲃酉?b、沖洗色譜柱4、色譜柱選擇不當(dāng)4、選擇恰當(dāng)?shù)纳V柱5、進樣閥損壞5、清洗或更換進樣閥6、柱溫過低6、提高溫度7、控制器失常7、修理或更換控制器8、保

3、護柱阻塞8、清洗或更換保護柱9、在線過濾器阻塞9、清洗或更換在線過濾器D、        壓力持續(xù)偏低原 因解決方法1、流速設(shè)定過低1、調(diào)整流速2、系統(tǒng)漏液2、確定漏液位置并維修3、色譜柱選擇不當(dāng)3、選擇恰當(dāng)?shù)纳V柱4、柱溫過高4、降低溫度5、控制器失常5、維修或更換控制器E、         壓力不斷上升原 因解決方法1、見列表C1、見列表CF、         壓

4、力降為零原 因解決方法1、見列表A、B1、見列表A、BG、        壓力不斷下降，但不回零原 因解決方法1、見列表D1、見列表DH、        壓力波動原 因解決方法1、泵中有氣體1、a、溶劑脫氣 b、從泵中除去氣體2、單向閥損壞2、更換單向閥3、泵密封損壞3、更換泵密封4、脫氣不充分4、a、溶劑脫氣 b、改變脫氣方法（使用在線脫氣法等）5、系統(tǒng)漏液5、確定漏液位置并維修6、使用梯度洗脫6、由于流動相粘度的變化引起的壓力波動漏 液通常可以通過擰緊

5、或更換管路接頭來解決漏液的問題。但值得注意的是過份擰緊會導(dǎo)致金屬接頭的漏液和塑料接頭的磨損。如果通過稍微擰緊接頭不能解決漏液的問題，就必須將接頭取下，檢查是否損壞（例如，卡套損壞、密封表面有雜質(zhì)）；損壞的接頭應(yīng)該更換掉。A、        接頭處漏液原 因解決方法1、接頭松動1、擰緊2、接頭磨損2、更換3、接頭過緊3、a、擰松，再重新擰緊 b、更換4、接頭被污染4、a、拆下清洗 b、更換5、部件不匹配5、使用同一品牌的配件B、         泵

6、漏液原 因解決方法1、單向閥松動1、a、擰緊單向閥（不必擰的過緊） b、更換單向閥2、接頭松動2、擰緊接頭（不必擰的過緊）3、混合器密封損壞3、a、更換混合器密封 b、更換混合器4、泵密封損壞4、維修或更換泵密封件5、壓力傳感器損壞5、維修或更換壓力傳感器6、脈沖阻尼器損壞6、更換脈沖阻尼器7、比例閥損壞7、a、檢查隔膜，如果漏液立即更換 b、檢查手緊接頭，損壞的立即更換8、放空閥的損壞8、a、擰緊放空閥 b、更換放空閥C、        進樣閥漏液原 因解決方法1、轉(zhuǎn)子密封損壞1、重新安裝或更換進樣閥2、定量環(huán)阻塞2、更換

7、定量環(huán)3、進樣口密封松動3、調(diào)整4、進樣針頭尺寸不合適4、使用恰當(dāng)?shù)倪M樣針5、廢液管中產(chǎn)生虹吸5、保持廢液管高于廢液液面6、廢液管阻塞6、更換或疏通廢液管D、        色譜柱漏液原 因解決方法1、尾端接頭松動1、擰緊接頭2、卡套內(nèi)有填料2、拆下、清洗卡套、重新安裝3、篩板厚度不合適3、使用合適的篩板（參考下表）篩板選擇指導(dǎo)物質(zhì)粒徑篩板孔徑3-4u0.5u5-20u2uE、         檢測器漏液原 因解決方法1、流通池墊片損壞1、a、避

8、免過大的背景壓力（壓力降） b、更換墊片2、流通池窗破碎2、更換窗口3、手緊接頭漏液3、擰緊或更換4、廢液管阻塞4、更換廢液管5、流通池阻塞5、重新安裝或更換液相色譜系統(tǒng)的許多問題都能在譜圖上反映出來。其中有一些問題可以通過改變設(shè)備參數(shù)得到解決；而其他的問題必須通過修改操作程序來解決。對于色譜柱和流動相的正確選擇是得到好的色譜圖的關(guān)鍵。A、        峰拖尾原 因解決方法1、篩板阻塞1、a、反沖色譜柱 b、更換進口篩板 c、更換色譜柱2、色譜柱塌陷2、填充色譜柱3、干擾峰3、a、使用更長的色譜柱 b、改變流動相或更換色譜

9、柱4、流動相PH選擇錯誤4、調(diào)整PH值。對于堿性化合物，低PH值更有利于得到對稱峰5、樣品與填料表面的溶化點發(fā)生反應(yīng)圖5、a、加入離子對試劑或堿性揮發(fā)性修飾劑 b、更改色譜柱B、         峰前延原 因解決方法1、柱溫低1、升高柱溫2、樣品溶劑選擇不恰當(dāng)2、使用流動相作為樣品溶劑3、樣品過載3、降低樣品含量4、色譜柱損壞4、見A1、A2C、        峰分叉原 因解決方法1、     &

10、#160;    保護柱或分析柱污染圖1、取下保護柱再進行分析。如果必要更換保護柱。如果分析柱阻塞，拆下來清洗。如果問題仍然存在，可能是柱子被強保留物質(zhì)污染，運用適當(dāng)?shù)脑偕胧?。如果問題仍然存在，入口可能被阻塞，更換篩板或更換色譜柱。2、樣品溶劑不溶于流動相2、改變樣品溶劑。如果可能采取流動相作為樣品溶劑。D、        峰變形原 因解決方法1、樣品過載1、減少樣品載量E、         早出的峰變形原 因解決

11、方法1、樣品溶劑選擇不恰當(dāng)1、a、減少進樣體積 b、運用低極性樣品溶劑F、         早出的峰拖尾程度大于晚出的峰原 因解決方法1、柱外效應(yīng)1、a、調(diào)整系統(tǒng)連接（使用更短、內(nèi)徑更小的管路） b、使用小體積的流通池G、        K增加時，脫尾更嚴(yán)重原 因解決方法1、二級保留效應(yīng)，反相模式1、a、加入三乙胺（或堿性樣品） b、加入乙酸（或酸性樣品） c、加入鹽或緩沖劑（或離子化樣品） d、更換一支柱子 2、二級保留效應(yīng)，正相模式2、a、加

12、入三乙胺（或堿性樣品） b、加入乙酸（或酸性樣品） c、加入水（或多官能團化合物） d、試用另一種方法3、二級保留效應(yīng)，離子對3、加入三乙胺（或堿性樣品）H、        酸性或堿性化合物的峰拖尾原 因解決方法1、緩沖不合適1、a、使用濃度50-100mM的緩沖液 b、使用Pka等于流動相PH值的緩沖液I、            額外的峰原 因解決方法1、樣品中有其他組份1、正常2、前一次進樣的洗脫峰2、a、增加運

13、行時間或梯度斜率 b、提高流速3、空位或鬼峰3、a、檢查流動相是否純凈 b、使用流動相作為樣品溶劑 c、減少進樣體積J、           保留時間波動原 因解決方法1、溫控不當(dāng)1、調(diào)好柱溫2、流動相組分變化2、防止變化（蒸發(fā)、反應(yīng)等）3、色譜柱沒有平衡3、在每一次運行之前給予足夠的時間平衡色譜柱K、        保留時間不斷變化原 因解決方法1、流速變化1、重新設(shè)定流速2、泵中有氣泡2、從泵中除去氣泡3、流動相選擇不恰當(dāng)

14、3、a、更換合適的流動相 b、選擇合適的混合流動相L、         基線漂移原 因解決方法1、柱溫波動。（即使是很小的溫度變化都會引起基線的波動。通常影響示差檢測器、電導(dǎo)檢測器、較低靈敏度的紫外檢測器或其它光電類檢測器。）1、控制好柱子和流動相的溫度，在檢測器之前使用熱交換器圖2、流動相不均勻。（流動相條件變化引起的基線漂移大于溫度導(dǎo)致的漂移。）2、使用HPLC級的溶劑，高純度的鹽和添加劑。流動相在使用前進行脫氣，使用中使用氦氣。3、流通池被污染或有氣體3、用甲醇或其他強極性溶劑沖洗流通池。如有需要，可以用1N

15、的硝酸。（不要用鹽酸）4、檢測器出口阻塞。（高壓造成流通池窗口破裂，產(chǎn)生噪音基線）4、取出阻塞物或更換管子。參考檢測器手冊更換流通池窗。5、流動相配比不當(dāng)或流速變化5、更改配比或流速。為避免這個問題可定期檢查流動相組成及流速。6、柱平衡慢，特別是流動相發(fā)生變化時6、用中等強度的溶劑進行沖洗，更改流動相時，在分析前用10-20倍體積的新流動相對柱子進行沖洗。7、流動相污染、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成7、檢查流動相的組成。使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑及HPLC級的溶劑8、樣品中有強保留的物質(zhì)（高K值）以饅頭峰樣被洗脫出，從而表現(xiàn)出一個逐步升高的基線。8、使用保護柱，如有必要，在進樣之間或在分析過程中，定期用強

16、溶劑沖洗柱子。9、使用循環(huán)溶劑，但檢測器未調(diào)整。9、重新設(shè)定基線。當(dāng)檢測器動力學(xué)范圍發(fā)生變化時，使用新的流動相。10、檢測器沒有設(shè)定在最大吸收波長處。10、將波長調(diào)整至最大吸收波長處M、       基線噪音（規(guī)則的）原 因解決方法1、在流動相、檢測器或泵中有空氣1、流動相脫氣。沖洗系統(tǒng)以除去檢測器或泵中的空氣。2、漏液圖2、見第三部分。檢查管路接頭是否松動，泵是否漏液，是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要，更換泵密封。3、流動相混合不完全3、用手搖動使混合均勻或使用低粘度的溶劑4、溫度影響（柱溫過高，檢測器未加熱）4、減少差異或加上

17、熱交換器5、在同一條線上有其他電子設(shè)備5、斷開LC、檢測器和記錄儀，檢查干擾是否來自于外部，加以更正。6、泵振動6、在系統(tǒng)中加入脈沖阻尼器N、        基線噪音（不規(guī)則的）原 因解決方法1、          漏液圖1、見第三部分。檢查接頭是否松動，泵是否漏液，是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要，更換密封。檢查流通池是否漏液。2、流動相污染、變質(zhì)或由低質(zhì)溶劑配成2、檢查流動相的組成。3、流動相各溶劑不相溶3、選擇互溶的流動相4、

18、檢測器/記錄儀電子元件的問題4、斷開檢測器和記錄儀的電源，檢查并更正。5、系統(tǒng)內(nèi)有氣泡5、用強極性溶液清洗系統(tǒng)6、檢測器內(nèi)有氣泡6、清洗檢測器，在檢測器后面安裝背景壓力調(diào)節(jié)器7、流通池污染（即使是極少的污染物也會產(chǎn)生噪音。）7、用1N的硝酸（不能用磷酸）清洗流通池8、檢測器燈能量不足8、更換燈9、色譜柱填料流失或阻塞9、更換色譜柱10、流動相混合不均勻或混合器工作不正常10、維修或更換混合器，在流動相不走梯度時，建議不使用泵的混合裝置O、        寬峰原 因解決方法1、流動相組成變化1、重新制備新的流動相2、流動相流速

19、太低2、調(diào)節(jié)流速3、漏液（特別是在柱子和檢測器之間）3、見section 3。檢查接頭是否松動、泵是否漏液、是否有鹽析出以及不正常的噪音。如果必要更換密封。4、檢測器設(shè)定不正確4、調(diào)整設(shè)定5、柱外效應(yīng)影響a、柱子過載b、檢測器對反應(yīng)時間或池體積響應(yīng)過大c、柱子與檢測器之間的管路太長或管路內(nèi)徑太大d、記錄儀響應(yīng)時間太長圖5、           a、 小體積進樣（例如：10ul而不是100ul）以1：10或1：100的比例稀釋樣品b、減少響應(yīng)時間或使用更小的流通池c、 使用內(nèi)徑為的短管路d、減少響

20、應(yīng)時間6、緩沖液濃度太低6、增加濃度7、保護柱污染或失效7、更換保護柱8、色譜柱污染或失效，塔板數(shù)較低8、更換同樣類型的色譜柱。如果新柱子可以提供對稱的色譜峰，則用強溶劑沖洗舊柱子。9、柱入口塌陷9、打開柱入口，填補塌陷或更換柱子10、呈現(xiàn)兩個或多個未被完全分離的物質(zhì)的峰10、選擇其它類型的色譜柱以改善分離效果11、柱溫過低11、提高柱溫。除非特殊情況，溫度不宜超過7512、檢測器時間常數(shù)太大12、使用較小的時間常數(shù)P、         分離度降低原 因解決方法1、流動相污染或變質(zhì)（引起保留時間變化）1、重新配置流

21、動相2、保護柱或分析柱阻塞圖2、去掉保護柱進行分析。如果必要則更換保護柱。如果分析柱阻塞，可進行反沖。如果問題仍然存在色譜柱可能被強保留的污染物損壞，建議使用恰當(dāng)?shù)脑偕绦?。如果問題仍然存在，進口可能阻塞了，更換入口處的篩板或更換色譜柱。Q、        所有的峰面積都太小原 因解決方法1、檢測器衰減設(shè)定過高1、減少衰減的設(shè)定2、檢測器時間常數(shù)設(shè)定太大2、設(shè)定較小的時間常數(shù)3、進樣量太少3、增大進樣量4、記錄儀連接不當(dāng)4、使用正確的連接R、       

22、 所有的峰面積都太大原 因解決方法1、檢測器衰減設(shè)定過低1、采取較大的衰減2、進樣過多2、減少進樣量3、記錄儀連接不正確3、正確連接記錄儀以下問題在使用進樣閥過程中有可能發(fā)生。A、        手動進樣閥，轉(zhuǎn)動不靈原 因解決方法1、轉(zhuǎn)子密封損壞1、更換或調(diào)整轉(zhuǎn)子密封2、轉(zhuǎn)子太緊2、調(diào)整轉(zhuǎn)子的松緊度B、         手動進樣閥，載樣困難原 因解決方法1、進樣閥安裝不當(dāng)1、重新安裝2、定量環(huán)阻塞2、清洗或更換定量環(huán)3、進樣器污染3、清洗或更換進

23、樣器4、管路阻塞4、清洗或更換管路C、        自動進樣閥，不能轉(zhuǎn)動原 因解決方法1、無壓力（或電源）1、提供恰當(dāng)?shù)膲毫Γ娫矗?、轉(zhuǎn)子太緊2、調(diào)整轉(zhuǎn)子的松緊度3、進樣閥安裝不當(dāng)3、重新安裝D、        自動進樣閥，其它問題原 因解決方法1、阻塞1、清洗或更換阻塞部件2、機械故障2、見隨機維修手冊3、控制器故障3、維修或更換控制器由氣味、景象和聲音可以發(fā)現(xiàn)的問題你需要運用你所有的感官去發(fā)現(xiàn)液相色譜的問題。你最好養(yǎng)成習(xí)慣，每天花上幾分鐘運用你的感

24、官（除了味覺）來“感覺”你的液相色譜是否存在問題，這樣可以幫助你迅速找到問題所在。例如：在你看到漏液之前，你可能首先聞到它的氣味。大部分的問題是可以通過眼睛看到。A、        溶劑的氣味原 因解決方法1、漏液1、見section 32、濺出2、a、檢查廢液瓶是否已滿 b、找到濺出的部位并清洗干凈B、         熱氣味原 因解決方法1、儀器過熱1、a、檢查并調(diào)節(jié)通風(fēng)設(shè)施 b、檢查并調(diào)節(jié)溫度設(shè)定 c、關(guān)掉儀器，查找維修手冊C、 

25、       讀數(shù)不正常原 因解決方法1、壓力不正常1、見section 22、柱溫箱問題2、a、檢查并調(diào)節(jié)設(shè)定b、參照用戶手冊3、檢測器燈失效3、更換燈D、        燈警告原 因解決方法1、壓力超出極限值1、a、檢查是否阻塞b、檢查并調(diào)節(jié)極限值的設(shè)定2、其它警示燈2、見用戶手冊E、         警告音原 因解決方法1、溶劑泄漏/濺出1、找到并解決2、其它警告音2、見用戶手冊F

26、、         刺耳的短音或長音原 因解決方法1、軸承失效1、見用戶手冊2、潤滑不夠2、進行恰當(dāng)?shù)臐櫥?、機械故障3、見用戶手冊由氣味、景象和聲音可以發(fā)現(xiàn)的問題你需要運用你所有的感官去發(fā)現(xiàn)液相色譜的問題。你最好養(yǎng)成習(xí)慣，每天花上幾分鐘運用你的感官（除了味覺）來“感覺”你的液相色譜是否存在問題，這樣可以幫助你迅速找到問題所在。例如：在你看到漏液之前，你可能首先聞到它的氣味。大部分的問題是可以通過眼睛看到。A、        溶劑的氣味原 因解決方法1、漏液1、見section 32、濺出2、a、檢查廢液瓶是否已滿 b、找到濺出的部位并清洗干凈B、         熱氣味原 因解決方法1、儀器過熱1、a、檢查并調(diào)節(jié)通風(fēng)設(shè)施 b、檢查并調(diào)節(jié)溫度設(shè)定 c、關(guān)掉儀器，查找維修手冊